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Agar Hektoen pour entérobactéries

Agar Hektoen pour entérobactéries Art. N°. 1.11681.0500

(500 g)

Agar sélectif recommandé par KING et METZGER (1968) pour la caractérisation et l'isolement des entéro-
bactéries pathogènes à partir des prélèvements les plus divers tels que les fèces, les aliments, etc. Il permet
en particulier la détection des Shigella.
Vis-à-vis des autres milieux nutritifs sélectifs et lors d'une inhibition suffisante de la flore d'accompagne-
ment, l'agar HEKTOEN est moins inhibiteur pour les salmonelles et les shigelles (KING et METZGER
1968, TAYLOR et SCHELHART 1971, BISCIELLO et SCHRADE 1974).

Voir aussi les indications générales d’utilisation

Dangers et précautions voir www.merck-chemicals.com

Principes
Méthode microbiologique

Mode d'action
Les colonies lactose-positives présentent grâce aux deux indicateurs bleu de bromothymol et fuchsine
acide une différence de coloration importante vis-à-vis des colonies lactose-négatives. Ceci est vrai aussi
pour les colonies fermentant lentement le lactose par l'intermédiaire de substances plus facilement fermen-
tescibles (saccharose et salicine), ce qui évite des résultats pathogènes faussement positifs. La combinai-
son de thiosulfate et d'un sel ferrique communique aux colonies produisant de l'H2S une coloration noire.
Le mélange de sels biliaires supprime la croissance des germes indésirables.
HOBEN et Coll (1973) recommandent l'addition de 10 à 20 µI/ml de novobiocine au milieu pour l'améliora-
tion ultérieure de la sélectivité, c'est-à-dire pour l'inhibition de la croissance des Citrobacter et des Proteus
dont les colonies ressemblent à celles des salmonelles (centre noir).

Composition type g/litre

Peptones 15,0; saccharose 14,0; lactose 14,0; salicine 2,0; chlorure de sodium 5,0; thiosulfate de sodium
5,0; citrate ferrique ammoniacal (III) 1,5; sels biliaires 2,0; bleu de bromothymol 0,05; fuchsine acide 0,08;
agar-agar 13,5.

Préparation et conservation
Art. N°. 1.11681.0500 Agar HEKTOEN pour entérobactéries (500 g)
Utilisable jusqu’à la date de péremption, au sec et parfaitement fermé, entre +15 et +25º C. Protéger de la
lumière. Après ouverture, le contenu peut être utilisé jusqu’à la date de péremption, au sec, le récipient bien
refermé, entre +15 et +25ºC.

Dissoudre 75 g/litre dans de l’eau déminéralisée et laisser pendant 10 minutes.

Chauffer doucement, puis porter à ébullition pendant quelques secondes pour dissoudre totalement le mi-
lieu.

Ne pas autoclave.

Après refroidissement aux environs de 50°C, 15 mg/litre de novobiocine peuvent être mélangés sous
forme de solution aqueuse filtrée stérilement. Couler en boîtes.
pH: 7,7 ± 0,2 à 25ºC
Les boites de milieu nutritif sont limpides et de couleur bleu vert.

Emploi et interprétation
Inoculer par étalement en surface avec l'échantillon prélevé sur une culture d'enrichissement.
Incuber: 18 à 24 heures à 35°C. en aérobiose

Colonies Microorganismes
Vertes, humides, aplaties transparentes Shigella, Providencia
Bleu vert, avec ou sans centre noir Salmonella, Paracolobacrum,Proteus
Vertes à bleuâtres, aplaties bords irréguliers Pseudomonas
Couleur saumon, avec halo de précipitation Coliformes

Contrôle de qualité du milieu (méthode de ensemencement en spirale)

Souches test Inoculum Couleur Centre noir Précipité
(ufc/ml)
5
Escherichia coli ATCC 25922 < 10 Rouge-saumon - ±
3 5
Salmonella typhimurium ATCC 14028 10 - 10 Bleu-vert + -
3 5
Salmonella enteritidis ATCC 13076 10 - 10 Bleu-vert + -
3 5
Shigella flexneri ATCC 12022 10 - 10 Vert à bleu-vert - -
3 5
Shigella sonnei ATCC 11060 10 - 10 Vert à bleu-vert - -
3 5
Proteus mirabilis ATCC 14273 10 - 10 Vert à bleu-vert ± -
5
Enterococcus faecalis ATCC 11700 > 10 -
5
Staphylococcus aureus ATCC 25923 > 10

Additifs et produits auxiliaires

Merck Art. N°. Produit Contenu
CN Biosciencies Novobiocine monosodium
sel

Shigella flexneri, E.coli

Bibliographie

BISCIELLO, N.B. in a. SCHRADE, J.: Evaluation of Hektoen Enteric Agar for the detection of Salmonella in foods and feeds. -Journ. of
AOAC, 57; 992-996 (1974).
HOBEN, D.A., ASHTON, D.H. a. PETERSON, A C.: Some observations on the incorporation of novobiocin into Hektoen Enteric Agar
for improved Salmonella isolation. - Appl. Microbiol., 26; 126-127 (1973).
KING, S. a. METZGER, W.J.: A new plating medium for the isolation of enteric pathogens. I. Hektoen Enteric Agar. -Appl. Microbiol., 16;
557-578 (1968).
KING, S. a. METZGER, W.J.: A new plating medium for the isolation of enteric pathogens. II. Comparison of Hektoen Enteric Agar with
SS- and EMB-Agar. - Appl. Microbiol., 16;
579-581 (1968).
TAYLOR, W.I. a. SCHLHART, D.: Isolation of Shigella,VIII.Comparison of Xylose Lysine Desoxycholote Agar, Hektoen Enteric Agar,
Salmonella-Shigella Agar and Eosin Methylene Blue Agar with stool specimens. -Appl. Microbiol., 21; 32-37 (1971).

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