Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
Laboratoire de Biophotonique et
Pharmacologie (LBP) - UMR 7213
présentée par
Une pensée spéciale pour mon père qui, m’ayant toujours encouragé dans ma quête du savoir, n’aura pas
le bonheur et la joie de vivre cette soutenance à laquelle il tenait tant.
Je tiens à exprimer ma reconnaissance aux membres du jury qui m’ont fait l’honneur d’accepter d’évaluer
ce travail de recherche. Leurs analyses et commentaires seront précieux.
A travers ce travail, je tiens à exprimer en quelques lignes ma reconnaissance et mon profond respect au
Docteur Claire Lugnier.
Son professionnalisme, sa rigueur, ses connaissances approfondies, la pertinence de ses analyses et son
rayonnement scientifique ont été déterminants pour ma formation scientifique.
3
4
Sommaire
Abréviation 6
1. Curriculum Vitae 8
1.1. Etat civil 9
1.2. Diplômes et titres universitaires 9
2. Activités de recherche 10
Avant-propos 11
2.1. Résumé des travaux de thèse 12
2.2. Travaux de recherche effectués depuis la thèse 16
2.2.1. Relations structure/fonction de la PDE3 et régulation
intracellulaire des seconds messagers 23
2.2.2. Epidémiologie et biologie des hépatites virales 28
3. Projet de recherche : Influence du virus de l’immunodéficience
humaine (VIH) sur l’évolution chronique du virus de l’hépatite (VHE) 29
3.1. Etat des connaissances 30
3.2. Objectifs 35
3.2.1. Objectif général 35
3.2.2. Objectifs spécifiques 35
3.3. Schéma expérimental 35
3.4 Population 36
3.4.1. Population d’étude 36
3.4.2. Echantillon d’étude 36
3.4.3. Critères d’éligibilité 36
3.5. Données collectées 36
3.5.1. Mode de collecte 36
3.5.2. Variables collectées 36
3.6. Déroulement de l’étude 37
3.6.1. Personnel de l’étude 37
3.6.2. Organisation de l’étude 38
3.7. Analyses statistiques 39
3.8. Valorisation et dissémination des résultats 39
3.9. Considérations éthiques et protection des données 39
3.10. Calendrier prévisionnel 39
3.11. Retombées attendues 39
3.11.1. Amélioration des connaissances fondamentales 39
3.11.2. Retombées au niveau individuel 39
3.11.3. Retombées au niveau collectif 40
3.12. Autres perspectives à envisager 40
4 - Références bibliographiques 41
5 - Liste de publications 47
5.1. Publications principales dans des journaux à comité de lecture 48
5.2. Rapports d'Experts 49
5.3. Manuscrits en préparation 49
5.4. Conférences sur invitation 50
5.5. Publication des abstracts de communications 50
5.6. Autres communications à des reunions nationales et internationales 52
5
6 - Etat de participation au montage de projets financés 54
7 – Activités d’enseignement et d’encadrement 57
7.1. Synthèse des activités d’enseignement 58
7.2. Encadrement de Mémoires, de Thèses en Médecine
et de Thèses en Sciences 60
7.2.1 Travaux de Mémoire de Maîtrise et de Master dirigés 60
7.2.2. Thèses de Médecine à la Faculté des Sciences
de la Santé, Université de Bangui 60
7.2.3. Thèse Unique en Sciences, Université de Bangui 61
8 - Autres activités 62
8.1. Sociétés Savantes 63
8.2. Autres Sociétés et Organisations 63
8.3. Referee pour des revues Internationales 63
8.4. Participation aux activités de groupes d’experts 63
8.5. Organisation de réunions scientifiques 64
9. Sélection de 5 articles originaux 65
6
Abréviation
7
PEV : Programme élargi de vaccination
PDE : Phosphodiestérase
PNDS : Plan National de Développement de la Santé
RCA : République Centrafricaine
RcGIP : Rat cyclic guanosine 3’, 5’ monophosphate inhibited phosphodiesterase
RFAT : Rat fat
Sida : Syndrome de l’immunodéficience acquise
SURE: Supporting the Use of Research Evidence for Policy in African Health Systems
SURVAC : Surveillance des Maladies évitables par la vaccination
VHA : Virus de l’hépatite A
VHB : Virus de l’hépatite B
VHC : Virus de l’hépatite C
VHD : Virus de l’hépatite D
VHE : Virus de l’hépatite E
VIH : Virus de l’immunodéficience humaine
8
1 – Curriculum Vitae
9
1.1. ETAT CIVIL
10
2 – Activités de recherche
11
AVANT-PROPOS
Après mes études de pharmacie à la Faculté Mixte de Médecine, Pharmacie et
Odontostomatologie de l'Université Cheik Anta Diop de Dakar (Sénégal), je me suis inscrit au DEA de
Pharmacologie/Pharmacochimie à l'Université Louis Pasteur de Strasbourg. Mes travaux de recherche se
sont déroulés dans le Laboratoire de Pharmacologie Cellulaire et Moléculaire, sous la direction du Dr
Claire Lugnier et du Pr Jean-Claude Stoclet.
L'obtention du DEA m’a permis de m’inscrire en thèse de doctorat en pharmacologie. Mon stage
post-doctoral au "National Institutes of Health (NIH), Bethesda, Etats-Unis" après avoir soutenu mon
doctorat d'université (option: pharmacologie moléculaire et cellulaire), m’a permis d'aborder mon thème de
recherche, à savoir « relation structure/fonction de la phosphodiestérase de type 3 et régulation
intracellulaire des seconds messagers», sous l'aspect biologie moléculaire. J’ai été ensuite recruté comme
chercheur à "l'Institut de Recherche en Biotechnologie à Montréal (Canada)" où j’ai travaillé sur les
récepteurs activés par les protéases (PAR) et dans le même temps, je dispensais des cours de
pharmacologie à la Faculté de Médecine de Montréal (Canada) comme Professeur associé de 1995 à
1999. Par la suite, je suis reparti aux Etats-Unis, au "Brookhaven National Laboratory, New York, Etats-
Unis" où j’ai été employé comme chef du laboratoire de biologie moléculaire du "Center for Synchrotron
Biosciences" avec un poste d'enseignant associé à "Albert Einstein College of Medicine, Bronx, Etats-
Unis" de 2000 à 2003. Depuis 2004, j’ai la responsabilité de chef du laboratoire des hépatites virales au
sein de l’Institut Pasteur de Bangui et d’enseignant associé au sein de l’Université de Bangui où je
dispense des cours à la Faculté des Sciences ainsi qu’à la Faculté des Sciences de la Santé.
Dans ce mémoire, je présenterai brièvement les principales conclusions de mes travaux regroupés
sous trois périodes : i) Travaux effectués au cours de la thèse concernant principalement les propriétés
biochimiques et pharmacologiques des phosphodiestérases des nucléotides cycliques ; ii) Travaux menés
depuis la soutenance de la thèse jusqu’en 2003 concernant la structure/fonction des phoshodiestérases
des nucléotides cycliques et la régulation intracellulaire des seconds messagers et iii) Travaux effectués
depuis 2004 à ce jour qui abordent principalement l’épidémiologie et la biologie des hépatites virales dans
un pays à ressources limitées, la République Centrafricaine.
Enfin, avant d’aborder la présentation de mon projet de recherche proprement dit, un état de l’art
sur la coinfection du virus de l’hépatite E et VIH sera présenté.
12
2.1. Résumé des travaux de thèse
Le rôle des nucléotides cycliques 3',5' monophosphate comme médiateurs des effets des
hormones et des neurotransmetteurs a été démontré dans la signalisation intracellulaire et particulièrement
dans le système cardiovasculaire (Figure 1).
Figure 1 : Représentation schématique des voies métaboliques et des effets biologiques des nucléotides
cycliques. (Muller et coll., 1993)
Le lien entre l’effet inotrope positif des catécholamines et l'augmentation du taux cardiaque de
l’adénosine 3’, 5’ monophosphate cyclique (AMPc) a été clairement établi (Sutherland & Robison, 1966).
Le rôle de l'AMPc dans la vasodilatation a été aussi mis en évidence (Bär, 1974 ; Kukovetz et coll., 1981).
D'autres travaux avaient également pu établir un lien entre l'augmentation du taux de l'AMPc dans les
cellules du pacemaker de nœud sinusal et l'effet chronotrope positif (Taniguchi et coll., 1977). Dans le cas
de la guanosine 3’, 5’ monophosphate cyclique (GMPc), son augmentation intracellulaire au niveau du
cœur s’oppose aux effets inotrope et chronotrope positifs, alors qu’au niveau des vaisseaux le GMPc est
13
impliqué dans l’effet relaxant. Cependant dans le système cardiovasculaire, si l'effet inotrope positif et
vasodilatateur est recherché pour les substances actives, l'effet chronotrope positif apparaît néfaste pour
un patient présentant une insuffisance cardiaque.
La régulation du taux des nucléotides cycliques dans les systèmes biologiques est principalement
liée à leur vitesse de synthèse (par les cyclases) et de dégradation (par les phosphodiestérases, PDEs)
(Pang, 1988). Plusieurs formes de PDE ont été isolées et caractérisées dans de nombreux tissus. Ces
enzymes ont suscité un intérêt considérable et controversé (Beavo and Brunton, 2002 ; Thompson, 1991).
Ainsi, nous avons purifié par chromatographie quatre PDEs au niveau du ventricule de cœur de chien
(Komas et coll., 1989). En effet selon les méthodes de préparation et de séparation utilisées, le nombre de
PDE obtenues variait. Depuis 1994, la nomenclature de ces enzymes est basée sur les propriétés
physicochimiques, pharmacologiques, les données de la biologie moléculaire et de la génétique (Beavo et
coll., 1990 et 1994 ; Conti et coll., 1991 ; Manganiello et coll., 1995).
Onze (11) familles de phosphodiestérases (PDE1 à PDE11) sont identifiées ayant des
caractéristiques spécifiques définies (Figure 2). Les PDEs des mammifères ont une organisation
structurale commune, avec un domaine catalytique conservé qui se situe près de l’extrémité C-terminale,
et des domaines régulateurs généralement situés vers l’extrémité N-terminale de la protéine (Lugnier,
2006 ; Omori & Kotera, 2007). Le domaine catalytique constitue l’élément essentiel de la protéine.
Domaine conservé
Chacune de ces familles couvre un à quatre gènes distincts pour un total de plus de 20 gènes
répertoriés chez les mammifères. De plus, ces gènes codent pour plusieurs protéines générées par des
14
épissages alternatifs de l’ARN et/ou l’implication de plusieurs promoteurs générant plus de 50 protéines de
PDE différentes produites dans les cellules de mammifères (Lugnier, 2006; Conti and Beavo, 2007;
Francis et al., 2011). La figure 3 illustre dans le détail la structure et l’organisation des domaines des
différentes familles des PDEs de mammifère (Maurice et al., 2014).
Figure 3 : Structure et organisation des domaines des 11 familles des PDEs de mamifères (Maurice et al.,
2014)
Les PDEs sont localisées au niveau de tous les tissus des mammifères où elles sont différemment
exprimées (Bender et al., 2006). Elles peuvent être caractérisées par leurs propriétés physiques, la
spécificité aux substrats (AMPc et GMPc), leur régulation par des modulateurs (calmoduline, GMPc et
AMPc) ainsi que par leur séquence primaire ce qui a permis leur classification en 11 familles (voir livre
édité par Beavo, 2005). La caractérisation d'une inhibition spécifique d'une forme de PDE associée à un
tissu cible du système cardiovasculaire peut permettre d'envisager une réponse spécifique de ce tissu
responsable d'un effet physiologique (Omori & Kotera, 2007).
Au cours de ma thèse mes travaux ont été centrés sur l’identification des PDEs pouvant être
impliquées dans les fonctions cardiovasculaires à savoir les activités inotropes, chronotropes et
vasodilatatrices. L’objectif de nos travaux était de développer, en collaboration avec le département de
15
cardiologie de SANOFI, des inhibiteurs de PDE à effets inotrope et vasodilatateur dépourvus d’effet
chronotrope.
Au début de nos travaux de thèse, seulement trois isoformes de PDE étaient isolées dans les
tissus cardiaques (ventricule et nœud sinusal) (PDE1, PDE2 et PDE3) et vasculaires (PDE1, PDE3 et
PDE5). Nous avons mis en évidence par des approches biochimiques et pharmacologiques l'existence de
quatre familles de PDE dans des tissus cardiaques de chien (ventricule gauche et nœud sinusal) et
vasculaires de rat (aorte et artères mésentériques) en montrant qu’en réalité, en plus de la PDE1 et de la
PDE2 la PDE3 initiale qui hydrolysait de manière sélective l’AMPc était constituée de deux isoformes de
PDE, à savoir la PDE3 (cible privilégiée des inhibiteurs dotés de propriétés cardiotoniques et dont l’activité
hydrolytique vis-à-vis de l’AMPc était également inhibée par de faibles concentrations (5 µM) de GMPc) et
la PDE4 (hydrolysant de manière spécifique l’AMPc et insensible au GMPc) (Komas et coll., 1991a et
1991b) (Tableau 1).
Tableau 1: Les isoformes de PDE isolées dans les tissus de cœur de chien (ventricule gauche et
noeud sinusal) et des muscles lisses vasculaires (aorte et artères mésentériques) de rat.
16
approche pour la détermination des critères de développement de substances inotropes positives et
vasodilatatrices ayant peu d'effet chronotrope positif. Elle présupposait une bonne connaissance de la
cible visée ce qui a été prouvé depuis ces 20 dernières années (Keravis et Lugnier, 2012 ; Maurice et al.,
2014). Dans le cas de la relaxation du muscle lisse vasculaire, nos travaux ont montré l’échange croisé
(cross-talk) entre l’AMPc et le GMPc dans la régulation de la contraction du muscle lisse vasculaire
(Komas et coll., 1991a ; Lugnier and Komas, 1993). En effet, les différentes localisations de la PDE3 et de
la PDE4 dans les tissus vasculaires, leurs différentes sensibilités au GMPc ainsi que leurs différentes
propriétés cinétiques devraient être prises en compte lors de leur régulation par le GMPc. Ainsi, l’inhibition
de la PDE3 entraîne une relaxation du muscle lisse vasculaire indépendante de l’endothélium
probablement par action directe du GMPc sur la PDE3. Par contre, l’inhibition de la PDE4 entraîne une
relaxation dépendante de l’endothélium en faisant intervenir dans ce cas la production de l’Oxide Nitrique
(NO) suite à une augmentation du GMPc qui va ensuite exercer un effet potentialisateur sur la relaxation
due à l’augmentation de l’AMPc par inhibition de son hydrolyse.
La relation structure/fonction ainsi que le mécanisme intracellulaire des isoformes de la PDE3 ont
constitué les principaux thèmes de recherche abordés au cours de mon stage post doctoral au NHLBI/NIH
(Bethesda, Etats-Unis).
17
Domaine Régulateur Domaine catalytique
Domaine conservé
H2N COOH
Figure 4 : Représentation schématique de la structure de la PDE3 qui diffère des autres PDEs par la
présence de 44 acides aminés additionnels dans le domaine conservé.
En tenant compte des résultats obtenus à la suite des études de pharmacologie moléculaire sur
les PDE3 des différentes régions cardiovasculaires, nous avons cherché au cours des études ultérieures,
menées au LCM/NHLBI/NIH, à déterminer la relation structure/activité des PDE3 qui constituent la cible
privilégiée des inhibiteurs de PDE présentant un effet cardiotonique (Figure 4). Cette étude a été rendue
possible suite au clonage de la PDE3 à partir de différents tissus de diverses espèces animales (Meacci
et coll., 1992).
Figure 4 : Organisation des domaines et identification des acides aminés de 4 isoenzymes de PDE3:
PDE3 clonée à partir des tissus adipeux de rat (RcGIP1 ou RFAT) et humains (HcGIP1 ou HFAT); PDE3
clonée à partir du tissu cardiaque humain (HcGIP2 ou HCAR) et de rat (RcGIP2) (Komas et coll., 1996)
18
La stratégie que nous avions développée à cet effet était la construction de mutants de PDE3
autour du domaine catalytique (Figure 5) en délétant les acides aminés situés en amont et en aval du
domaine catalytique afin de pouvoir déterminer le élément essentiel catalytique (He et coll., 1998). Pour
étudier l’importance des 44 résidus d’acides aminés inserrés, un mutant dont les 44 résidus d’acides
aminés du domaine catalytique ont été supprimés a également été construit. Les différents mutants ont
été exprimés dans un système d’expression bactérien afin de produire des protéines recombinantes qui
ont été purifiées par chromatographie d’affinité avant que des tests biochimiques et pharmacologiques
aient été réalisés sur les fractions recueillies.
Figure 6 : Activité PDE3 dans les fractions microsomales de muscles cardiaque (chien et lapin) et
squelettique (chien et lapin). (Rabbit soleus = muscle soléaire ; Canine flexor digitorum superficialis
(f.d.s.) = muscle fléchisseur superficiel ; Rabbit lumbodorsalis = muscle dorsolombaire ; Canine
latissimus dorsis (l.d.) = muscle grand dorsal) (Movsesian et coll., 1995)
Bien que nos travaux étaient surtout basés sur les isoformes de PDE3, nous avons voulu savoir
quelle était la contribution probable des autres PDEs (PDE2 et PDE4), en plus de la PDE3, qui
hydrolysent l’AMPc dans la régulation intracellulaire du taux de l’AMPc dans les différents mécanismes
intracellulaires. C’est ainsi que nous avons choisi d’étudier cette contribution dans le développement de
20
l’obésité où le génotype a été mis en évidence. La recherche au niveau moléculaire de l'expression des
trois familles de PDE (PDE2, PDE3 et PDE4) dans le tissu adipeux brun a été entreprise et nous a
également permis de déterminer si l'hydrolyse des nucléotides cycliques pouvait être affectée par le
génotype de l’obésité (Fa et fa). Il avait été montré que dans les adipocytes « blancs », la PDE3 jouait un
rôle régulateur dans l’action antilipolitique de l’insuline avec plus de 80% d’activité PDE3 isolées dans les
membranes des adipocytes (Eriksson et coll., 1995 ; Schmitz-Peiffer et coll., 1992). Cependant, la PDE2
et la PDE4 ont été plutôt caractérisées dans la fraction soluble de ces adipocytes (Schmitz-Peiffer et coll.,
1992). Il serait possible que la PDE3 soit également dans les adipocytes « bruns » et que la régulation
hormonale de cette isoforme serait similaire à celle des adipocytes « blancs » (Omatsu-Kanbe et coll.,
1995).
Selon le génotype, notre étude a montré que les PDE2, PDE3 et PDE4 contribuent à l'activité
phosphodiestérasique totale avec l'activité de la PDE3 représentant la moitié de cette activité totale.
Ainsi, chez les rats Zucker de génotype fa/fa comparés aux rats Zucker de génotype Fa/fa, l'activité
PDE2 était significativement élevée et le Western blot de la PDE2 avait révélé deux bandes,
correspondant à cette protéine dont les variations étaient en accord avec les variations d'activité (Figure
7). La détermination de la concentration de GMPc avait également montré au cours de cette étude une
diminution de 25% de son taux de GMPc dans les tissus adipeux bruns de rats pré-obèses (fa/fa)
comparés à ceux des rats maigres (Fa/fa) (Coudray et coll., 1995).
Figure 7 : Analyse quantitative de la protéine exprimée par la PDE2 dans le tissu adipeux brun des rats
Zucker âgés de 14 jours. L'intensité des bandes de Western blot était mesurée par densitométrie. L= lean
(maigre) (Fa/fa) et Ob= obèse (fa/fa). (Coudray et coll., 1995)
21
La régulation des nucléotides cycliques qui était rapportée dans plusieurs autres tissus avait
également fait l'objet d'une autre de nos études au cours de laquelle nous avons montré la variation
d'expression des PDEs dans les différentes souches de cellules endothéliales. En effet, l'inhibition de la
croissance des cellules endothéliales est associée à une élévation du taux d'AMPc intracellulaire alors
que la diminution et l'élévation du taux intracellulaire de GMPc ont été montrées inhiber cette croissance
(Leitman et coll., 1986 ; Moodie et coll., 1991 ; Ito et coll., 1992). Les cellules endothéliales en culture
présentent souvent deux phénotypes qui sont représentés soit sous forme d'une monocouche
caractérisée par un contact cellule-cellule à confluence (phénotype "cobblestone"), soit sous forme
allongée ayant perdu les contacts cellule-cellule (phénotype "Spindle"), ce qui représente respectivement
les phénotypes "quiescent" et "angiogénique" in vivo (Canfield et coll., 1992; Cotta-Pereira et coll., 1980 ;
Schwartz, 1978). Le passage du phénotype « cobblestone » au phénotype « spindle » a été montré
comme étant réversible dans certains cas et dépendrait de différentes conditions de cultures (Arciniegas
et coll., 1992 ; Montesano et coll., 1986 ; Schor et coll., 1983; Sutton et coll., 1991; Tontsch and Bauer,
1989). Les facteurs connus comme activateurs de la production d’AMPc maintiennent les cellules
endothéliales sous le phénotype « cobblestone » lorsqu’ils sont rajoutés dans le milieu de culture alors
que leur suppression dans le milieu de culture résulte dans la progression du phénotype « cobblestone »
vers le phénotype « spindle » (Bensch et coll., 1983 ; Davison and Karasek, 1981 ; Makarski, 1982 ;
Lipton et coll.,1991 ; Tuder et coll., 1990 ).
La régulation de l'AMPc dans ces deux phénotypes de cellules endothéliales pourrait faire
intervenir les PDEs comme dans le cas des autres tissus (Lugnier and Schini, 1990; Eckly and Lugnier,
1994 ; Souness et coll., 1990). Ainsi, le profil chromatographique à partir de DEAE-Sephacel de la
fraction cytosolique a mis en évidence dans les phénotypes « Cobblestone » deux isoformes de PDE
(PDE2 et PDE4) et 5 isoformes (PDE1, PDE2, PDE3, PDE4 et PDE5) dans les phénotypes «Spindle ».
Dans le phénotype « Spindle », les activités spécifiques des fractions cytosolique et membranaire de
PDE2, cytosolique de PDE3 et membranaire de PDE4 étaient élevées. Ces changements étaient
associés avec une forte élévation des ARNm de PDE3A et PDE4D. De plus, l’hydrolyse d’AMPc dans les
deux phénotypes était régulée de manière variable par 5 µM de GMPc : 60% d’augmentation de l’activité
totale de la PDE hydrolysant l’AMPc due à la stimulation de la PDE2 dans l’homogénat du phénotype
« Cobblestone » et 30% de diminution d’activité dans l’homogénat de phénotype « Spindle » liée à
l’inhibition de la PDE3 (Keravis et coll., 2000).
22
Cette étude a montré le rôle joué par les PDE2, PDE3 et PDE5 dans le « cross-talk » impliquant
l’AMPc et le GMPc. Les variations dans l’expression des isoenzymes de PDE et le « cross-talk »
AMPc/GMPc pourraient moduler la production du monoxyde d’azote (NO) et par conséquent participer à
l’angiogénèse, identifiant par cette occasion les PDEs comme des cibles potentielles intervenant dans la
régulation de l’angiogénèse.
En conclusion sur cette thématique, il ressort que les nucléotides cycliques interviennent dans la
régulation de la contraction des muscles du système cardiovasculaire. Ce mécanisme met à profit les
différentes voies de signalisation intracellulaire de manière coordonnée. Ainsi, une augmentation des
nucléotides cycliques (AMPc ou GMPc) intracellulaire joue sur la régulation du taux intracellulaire de l'un
ou l'autre second messager intracellulaire pour un effet physiologique adéquat.
L’ensemble de nos travaux sur les PDEs a ouvert une nouvelle voie sur la compréhension du
mécanisme d’action de la régulation des phosphodiestérases des nucléotides cycliques. Nous avons été
les premiers à montrer que quatre isoformes de PDE existaient dans les tissus cardiovasculaires
(ventricule gauche, nœud sinusal) (PDE1, PDE2, PDE3 et PDE4) et les muscles lisses vasculaires (aorte
et artères mésentériques) (PDE1, PDE3, PDE4 et PDE5). Nos résultats ont conclu de manière générale
que les PDE2 et PDE3 participeraient de manière croisée à la régulation de l’AMPc dans la
physiopathologie de certains troubles cardiovasculaires et métaboliques. L’implication de la PDE2 et de
la PDE3 dans le « cross-talk » AMPc/GMPc a été démontrée dans la régulation de l’AMPc dans les
adipocytes et dans les cellules endothéliales. Cependant sur le plan pharmacologique, il existe à l’heure
actuelle des substances ayant des effets inotropes positif et vasodilatateurs qui n’inhibent que
sélectivement la PDE3 et pas la PDE2 des tissus cardiovasculaires. C’est ainsi que nous avons pu
démontrer que les PDE3 du ventricule gauche (siège de l’effet inotrope positif) et des muscles lisses
vasculaires (siège de la vasodilatation) étaient sélectivement inhibées par les substances ayant des
effets cardiotoniques et vasorelaxants alors que la PDE3 du nœud sinusal (siège de l’effet chronotrope
positif) était peu sensible à l’effet inhibiteur de ces substances.
En définitive, l’inhibition sélective des PDE en général et particulièrement de la PDE3 (par
exemple dans le cas de l’insuffisance cardiaque congestive) est un mécanisme qui serait bénéfique et
exploitable en thérapeutique (Kéravis et Lugnier, 2012 ; Maurice et coll., 2014). Il est à noter que les
sous-types (PDE3A1 et PDE3A2) de la sous-famille de PDE3A sont sélectivement phosphorylées sur
des sites alternatifs en réponse à l’activation de la protéine kinase A et protéine kinase C, résultat de la
régulation différentielle de leur activité catalytique et des interactions protéiques. Les inhibiteurs de PDE3
cibleraient ainsi au moins l’un de ces deux sous-types de PDE3A cardiaque avec probablement des rôles
23
fonctionnellement différents dans la signalisation intracellulaire (Vandeputa et coll., 2013). Ces
observations suggèrent que l’inhibition sélective d’une de ces deux cibles pourrait augmenter la
contractilité cardiaque sans augmenter la mortalité due à l’augmentation de la tachycardie et relancerait
de fait l'intérêt des inhibiteurs de PDE3 dans le traitement de l'insuffisance cardiaque congestive.
24
laboratoire se résument à : i) conduire des études d’épidémiologie moléculaire des virus hépatotropes
(VHB, VHC, VHD et VHE) afin de mieux connaître la distribution géographique des différents types et
sous-types de ces virus en Centrafrique, en d’autres termes à mieux situer cette maladie et montrer
l’importance de son étude en Centrafrique (court et moyen terme) et ii) étudier les mécanismes
d’interaction hôte-pathogène donnant par la suite la possibilité d’explorer les molécules à partir des
substances naturelles et des plantes locales susceptibles d’être des candidats médicaments à moindre
coût pour le traitement de ces hépatites virales (long terme). Afin d’éviter les risques de biais liés aux
problèmes de rupture de la chaîne du froid, j’ai initié et rendu opérationnelle la technique de prélèvement
du sang sur papiers buvards sur lequel nous réalisons pratiquement toutes nos expériences que ce soit
en sérologie ou en biologie moléculaire. Nous avons également mis en place un algorithme pour le
diagnostic et le dépistage de l'hépatite B à moindre coût.
Les travaux que nous avons conduits se sont tout d'abord focalisés sur la prévalence des
hépatites B, C, D et E à Bangui, capitale de la République Centrafricaine.
Tableau 2 : Prévalence et génotypes des virus des hépatites isolés à Bangui (Capitale de la
République Centrafricaine)
Ayant constaté que presque 95% de la population centrafricaine était déjà en contact avec le
virus de l'hépatite A et que ce virus n'était pas responsable d'une mortalité conséquente (< 0,1% de
décès dû à l'infection par le virus de l'hépatite A sur le plan mondial), nous avons jugé inutile d'intégrer ce
virus dans notre programme de recherche surtout que la République Centrafricaine fait face à des
épidémies d'agents infectieux beaucoup plus virulents (VIH, les hépatites B, C et D, le paludisme, la
tuberculose ainsi que les parasitoses).
Enfin, sur le plan national, les prévalences des hépatites B, C et D étaient similaires à celles
rapportées dans les différentes préfectures de la République Centrafricaine.
25
Prévalence AgHBs et/ou Anti-HBc Prévalence AgHBs et/ou Anti-HBc chez les VIH+
L’incidence de l’infection par le VHE a été déterminée sur l’ensemble du territoire centrafricain de
2008 à 2012.
26
Nous avons également mené une étude de séroprévalence de VHB en milieu pédiatrique qui a
montré que l'infection par ce virus était très élevée chez les enfants de 10 à 15 ans faisant craindre que
cette infection puisse également être d'origine intrafamiliale et sexuelle chez les personnes âgées de
moins de 15 ans.
Tableau 3 : Répartition selon l’âge des marqueurs de VHB dans une population pédiatrique
Plusieurs études ont été menées pour déterminer les facteurs de risque d'infection par le VHB et
le VHE dans différentes catégories sociodémographiques (sociales, âge, sexe) de la population adulte
centrafricaine (Komas et coll., 2010 et 2013 ; Goumba et coll., 2011). Ces études prospectives ont toutes
été réalisées à Bangui.
Les conditions socio-économiques et l’âge constituent les facteurs de risque de transmission significatifs
pour ces deux virus en plus de la promiscuité sexuelle et du contage chronique de l’hépatite B dans le
cas de la contamination par ce virus. L'infection par le virus de l'hépatite E est responsable mondialement
de 20% de décès de femmes enceintes au cours de leur troisième trimestre de grossesse (Hussaini et
27
al., 1997 ; Kumar et al., 2004 ; Oncu et al., 2006 ; Jilani et al., 2007 ; Navaneethan et al., 2008). Elle a
causé en République Centrafricaine lors d’une épidémie sporadique en 2002, plusieurs cas
d’avortements et d’accouchements avant terme avec un cas de décès de la mère et de l’enfant après
l’accouchement (Goumba et coll., 2010). Ce virus se transmet généralement dans les conditions
d'insalubrité et de consommation d'eau contaminée. La propagation du virus de l’hépatite E qui fait partie
des virus émergents, est également liée à la mobilité des travailleurs surtout dans les pays en
développement a ressources limitées où le système de santé demeure précaire (Bouscaillou et coll.,
2011).
Les résultats des travaux sur les virus des hépatites ont permis aux autorités de la République
Centrafricaine avec l’appui de l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS) et de l’Alliance Mondiale pour
les Vaccins et la Vaccination (GAVI) d'introduire dans le programme élargi de vaccination (PEV), la
vaccination obligatoire contre l'hépatite B pour tous les nouveau-nés. Cette mesure a été mise en place à
partir du mois de novembre 2008. Pour la prévention d’autres hépatites virales pour lesquelles il n’existe
pas de vaccin, les principales mesures que nous avons recommandées consistent surtout en des
séances de sensibilisation sur l’hygiène, l’utilisation de matériel stérile à usage unique et d’éviter le
partage d’objets de toilette.
Cette thématique de santé publique, est importante pour un pays comme la République
Centrafricaine où les maladies infectieuses constituent un problème majeur de santé. En dehors de la
prise en charge thérapeutique du Sida, de la tuberculose et du paludisme, les hépatites virales (VHB,
VHC, VHD et VHE), ne bénéficient d’aucun programme de prise en charge en République Centrafricaine.
Les différentes enquêtes épidémiologiques que nous avions menés ont montré que ces virus sont
responsables d’une prévalence très élevée. En effet, le manque d'hygiène, le débordement des
canalisations pendant les saisons de pluie, l'utilisation par la majorité de la population de l'eau de puits
souvent contaminée constituent les principaux facteurs de risques permanents d'infection par l’hépatite
E. Par contre, l’introduction de la vaccination obligatoire contre l’hépatite B et la possibilité de l’étendre
sur tout le territoire centrafricain après les crises que traversent le pays constitue un gage de prévention
efficace contre ce virus et le virus de l’hépatite delta. Enfin, bien que nous ayons mis en place des
programmes de sensibilisation pour un meilleur comportement vis-à-vis des virus d’hépatite, la
prévention contre l’infection par le virus de l’hépatite C demeure pour le moment le maillon faible de cette
stratégie.
28
3 - Projet de recherche
29
Influence du virus de l’immunodéficience humaine (VIH) sur l’évolution chronique
du virus de l’hépatite (VHE)
VIH VHE
Famille Retroviridae Hepeviridae
Genre Lentivirus Hepevirus
Découverte Barré-Sinoussi et coll., 1982 Balayan et coll., 1983
Génome viral ARN bicaténaire ARN simple brin
Enveloppe Souple, gp120, gp40 Non
Diamètre 90-120 nm 32-34 nm
Incubation Primo-infection (10-15 jours, extrêmes: 14 - 56 jours
5-30 jrs)
Degré de stabilité du virus Fragile Résistant
Enzyme (s) de réplication ADN Polymérase ARN-dépendante, RNA hélicase? Méthyltransférase?
Transcriptase Inverse; Intégrase
Intégration du génome viral Oui, constante Non
dans le génome cellulaire
Variation génétique +++ (quasi-espèce) +++ (génotypes et sous types)
Cellules Cibles Cellules dendritiques Macrophages Hépatocytes (principalement)
Lymphocytes TCD4+
Mode de transmission Parentéral (sang, seringue), sexe, et Féco-orale principalement ; parfois transfusion
transmission mère-enfant sanguine
Risque de transmission par 0,3% Pas d'information
accident d’exposition au sang
Principaux marqueurs viraux Anti-VIH; Agp24; ARN, ADN proviral Anti-VHE (IgM et IgG); ARN
Evolution spontanée sans - Syndrome de primo-infection dans - Hépatite aiguë avec risque d’hépatite fulminante;
traitement 1 cas sur 2 ; - Guérison spontanée
- Phase asymptomatique ; - Femmes enceintes 3ème trimestre (20% de
- SIDA et mort 100% décès)
- Décès dans 1 à 2% de cas
Antiviraux actuellement - Inhibiteurs de RT, de Protéase, de fusion. - Pas de traitement antiviral spécifique ; néanmoins
disponibles et résultat espéré - Stabilisation sans éradication (l'ADNc la Ribavirine meilleur traitement pour le VHE
sur l’infection reste intégré à vie) chronique
- Traitement symptomatique non antiviral
Prévention par la vaccination Non ; recherche en cours En cours mais pas encore disponible
Le virus de l’hépatite E (VHE) est un petit virus non enveloppé à ARN simple brin dont la
structure moléculaire n’a pu être clonée qu’au début des années 1990 (Reyes et coll., 1990 ; Tam et coll.,
1991). A ce jour, quatre génotypes, à l’origine de profils épidémiologiques distincts, ont été identifiés.
30
Figure 10 : Distribution mondiale du virus de l’hépatite E (Kamar et coll., 2012)
Les génotypes 1 et 2 circulent dans les régions à faible niveau sanitaire et sont responsables de
grandes épidémies touchant majoritairement les personnes jeunes (Kamar et coll., 2012). Dans ce
contexte, la voie féco-orale est le mode de transmission principal et les études antérieures ont incriminé
de façon systématique l’eau de boisson comme source de contamination (Schlauder et coll., 2001).
Quelques cas de transmission verticale et parentérale ont été décrits, tandis que les possibilités d’une
transmission de personne à personne ou de l’animal à l’homme sont des questions en suspens (Price,
2014). Le plus souvent l’hépatite E est spontanément résolutive. Néanmoins, dans de rares cas,
l’infection évolue vers une hépatite fulminante.
La présence des marqueurs biologiques hépatiques pour la détection du VHE indique une
infection par ce virus. Les IgM apparaissent les premières, et leur pic se situe aux alentours de la 6ème
semaine après la contamination. Elles décroissent ensuite régulièrement pour arriver à un seuil très bas
à partir de la 10ème semaine. Les IgG quant à elles sont au maximum aux alentours de la 9ème semaine,
mais elles persistent beaucoup plus longtemps que les IgM : de 18 mois à plus de 10 ans. La virémie est
passagère : elle débute quelques jours avant la phase clinique et persiste 2 à 3 semaines (Kamar et coll.,
2012). La charge virale est variable selon les personnes. L’excrétion dans les selles se fait environ une
31
semaine avant l’apparition des symptômes et dure au maximum 50 jours (Nicand et coll., 2001).
Cependant, dans certains cas particuliers, comme une immunodépression, l’excrétion fécale du virus
peut se prolonger bien au delà (Dalton et al., 2008 ; Kamar et al., 2012).
La charge virale dans les selles est moindre que celle retrouvée dans le sang, avec des valeurs
plus groupées : environ 5,7x104 copies de génomes par millilitre. Les ALAT, dont l’élévation débute dès
la 2 ou 3ème semaine après la contamination, montrent la souffrance hépatique. Le taux de létalité de
l’hépatite E symptomatique est relativement modéré dans la population générale (entre 0,5 et 4% selon
les études (WHO, 2009), mais elle peut être responsable d’un nombre non négligeable de décès en cas
d’épidémie (Naik et coll., 1992). L’absence de données de mortalité spécifique ne permet pas d’en
mesurer l’importance dans la plupart des pays endémiques. En outre, il semblerait que le taux de létalité
puisse être beaucoup plus élevé chez la femme enceinte, pouvant atteindre jusqu’à 20% au cours du 3e
trimestre de la grossesse. La diminution de l’immunité à médiation cellulaire pendant la grossesse est
une des principales hypothèses soulevées (Navaneethan et coll., 2008 ; Pal et coll., 2005). Néanmoins, il
32
existe des disparités géographiques associées à cette observation (Kumar et coll., 2004 ; Patra et coll.,
2007 ; Stoszek et coll., 2006).
Le plus souvent l’infection par le VHE est asymptomatique, d’évolution aiguë et spontanément
résolutive. Cependant, quelques rares cas d’hépatite E chronique ont été décrits chez des sujets
immunodéprimés (Alric et coll., 2010 ; Colson et coll., 2009 ; Curry et coll., 2009 ; Dalton et coll., 2009 ;
Gérolami et coll., 2008 ; Haagsma et coll., 2008 ; Kamar et coll., 2008a et 2008b ; Ollier et coll., 2009).
Immunocompétent Immunosuppression
Souvent symptomatique (ictère
Présentation Rarement symptomatique
conjonctivale, génotypes 1 et 2)
ALAT ≈1000–3000 IU/L ≈300 IU/L
Seul le génotype de l’infection par le VHE3 a été
Génotype VHE Tous les génotypes (1, 2, 3 ou 4)
reporté dans cette population
Le test sérologique est indéfini en général, et la
Taux d’IgG et d’IgM élevés
Diagnostics VHE séroconversion peut ne pas avoir lieu
75% des patients ont une PCR positive
Le diagnostic doit être établi par PCR
Infection chronique se produit chez 60% des
Evolution Hépatite évolue vers la guérison
patients et 10% développeraient une cirrhose
Interféron-alpha et la ribavirine sont des
Ribavirine a été utilisée chez très peu
traitements efficaces pour le traitement de VHE
Traitement de patients ayant une hépatite aiguë
chronique dans cette population; un traitement de
sévère
3 mois par la ribavirine a été recommandé
33
Figure 12 : Estimation au niveau mondial du nombre de personnes infectées par le VIH
(OMS / ONUSIDA, Rapport Mondial 2012)
35
L’Institut Pasteur de Bangui, grâce à ses compétences et son plateau technique, occupe une
place de choix dans la surveillance des maladies émergentes et la recherche biomédicale en RCA et plus
généralement en Afrique Centrale. Ce projet, qui bénéficiera des compétences locales, du réseau des
centres de soins en RCA et du réseau international des Instituts Pasteur, sera réalisé par le laboratoire
des hépatites virales que je dirige. Il sera soumis aux appels d'offre de l'Agence Nationale pour la
Recherche sur le Sida et les hépatites B et C (ANRS), de l'Action concertée inter-pasteurienne (ACIP), et
de la fondation Fio-Cruz pour l'année 2015.
3.2. Objectifs
3.2.1. Objectif général
Améliorer nos connaissances sur l’influence réciproque du VIH et de l’hépatite E chronique chez les
personnes vivant avec le VIH en République Centrafricaine.
3.2.2. Objectifs spécifiques
- Estimer la prévalence de l’hépatite E chronique chez les adultes vivant avec le VIH en
Centrafrique
- Estimer la proportion de patients ayant une excrétion de virus dans les selles parmi ceux ayant
une hépatite E chronique
- Etudier l’association potentielle entre le risque d’hépatite E chronique et le degré
d’immunodépression (taux de CD4)
- Identifier les autres facteurs de risque d’hépatite E chronique, liés à l’environnement, au virus et
à l’hôte
3.3. Schéma expérimental
Il s’agit d’une étude observationnelle transversale réalisée auprès des patients infectés par le
VIH et faisant partie du programme national de lutte contre le VIH.
Au cours d’une durée de 48 mois :
- Un dosage des ALAT et des CD4 sera réalisé chez tous les participants
- En cas de cytolyse hépatique (ALAT >1N), les hépatites virales E, B et C seront recherchées en
PCR.
- Les patients ayant une hépatite E confirmée seront recontactés pour rechercher une excrétion
fécale du virus. De plus, au prochain dosage de CD4 (6 mois après l’inclusion), des PCR ARN du
VHE dans le sang et les selles seront réalisées afin de confirmer ou infirmer une hépatite E
chronique.
36
3.4 Population
3.4.1. Population d’étude
Adultes (≥ 18 ans) vivant avec le VIH résidant sur le territoire centrafricain.
3.4.2. Echantillon d’étude
Adultes (≥ 18 ans) inclus dans le programme national de lutte contre le SIDA et se présentant à
l’Institut Pasteur de Bangui ou dans une formation sanitaire soit pour un bilan biologique initial suite à la
découverte de l’infection par le VIH, soit pour un bilan de suivi.
3.4.3. Critères d’éligibilité
Inclusion
- Homme ou femme ≥ 18 ans
- Résidant en Centrafrique
- Inclus dans le programme national de lutte contre le SIDA (code national)
- Se présentant au laboratoire d’analyses médicales de l’Institut Pasteur de Bangui ou dans une
formation sanitaire pour un bilan biologique
Non inclusion
- Age <18 ans
- Patient actuellement hospitalisé
Tous les patients inclus devront avoir accepté de participer et signé un consentement éclairé.
3.5. Données collectées
3.5.1. Mode de collecte
Les données sociodémographiques ainsi que celles sur les habitudes de vie seront recueillies
par questionnaires en face-à-face avant le prélèvement par des enquêteurs.
Afin d’en assurer l’acceptabilité et pour éviter les biais de mesure, le questionnaire a été testé
avec 20 patients et adapté en conséquence.
Des questions sur les antécédents médicaux, le traitement antirétroviral, l’histoire de l’infection
par le VIH, les traitements à base de plantes ou de médecine traditionnelle seront également posées
dans le questionnaire patient.
3.5.2. Variables collectées
a) Données liées aux critères d’inclusion
Données générales: Numéro de dossier IPB; Date d’inclusion; Nom du médecin; Numéro de téléphone
du médecin; Numéro(s) de téléphone auquel joindre le patient; Type de consultation.
37
Données sociodémographiques: Sexe; Statut marital; Niveau d’étude; Revenus du foyer; Activité
professionnelle; Francophonie.
b) Données cliniques
Générales: Taille en centimètres; Poids en kilogrammes.
Infection par le VIH: Date de diagnostic VIH; Stade CDC actuel; Pathologie(s) classant stade C; Date du
dernier dosage de CD4; Résultat du dernier dosage de CD4; Antirétroviraux prescrits à la dernière
consultation; Dernier traitement antirétroviral prescrit
Autres antécédents: Traitement antituberculeux à la dernière consultation; Hépatite B chronique;
Traitement contre l'hépatite B; Vaccination contre l'hépatite B; Hépatite C chronique; Traitement contre
l'hépatite C; Autre(s) maladie(s) hépatique(s) connue(s); Cirrhose; Ictère; Date de début de l'ictère;
Autre(s) antécédent(s) de maladie(s) chronique(s) ou grave(s) ; Traitement par les plantes médicinales
traditionnelles.
Habitudes de vie: Source d’eau de boisson; Traitement de l’eau de boisson; Nombre de lavages des
mains dans une journée; Nettoyage des crudités avant consommation; Repas dans un plat commun;
Contact avec des cochons; Contact avec d’autres animaux; Latrines partagées avec les voisins; Type de
latrines; Distance entre les latrines et la source en eau la plus proche (en mètres); Evacuation des
ordures ménagères; Enterrement des morts; Fréquence de la consommation d’alcool; Nombre de verres
d’alcool consommés; Fréquence de la consommation de plus de 6 verres d’alcool.
c) Données biologiques
Nombre de CD4 par mm3; ALAT; PCR VHE sang; PCR VHE selles; Antigénémie HBs;
Sérologie Ac anti HBc; Sérologie Ac anti HBs; Sérologie Ac anti VHC; Sérologie Ac anti VHD; Sérologie
anti VHE (IgM et IgG); PCR VHB; PCR VHC; PCR VHD; Beta-HCG
3.6. Déroulement de l’étude
3.6.1. Personnel de l’étude
L’équipe projet à l'Institut Pasteur de Bangui sera constituée comme suit :
- Chef de projet : Dr Narcisse Patrice Komas, Chef du Laboratoire des Hépatites virales, IPB
- Dr Claudine Bekondi, Laboratoire des virus oncogènes, IPB
- Dr Alexandre Manirakiza, Service d'épidémiologie, IPB
- Mme Sandrine Moussa, Laboratoire des Rétrovirus, IPB
- Médecins des formations sanitaires répertoriées comme site d'étude
- Techniciens du laboratoire des hépatites virales, IPB
- Techniciens des formations sanitaires répertoriées comme site d'étude
38
- Enquêteurs formés spécifiquement pour l’étude (internes en médecine)
- 2 agents de saisie
- 1 data manager
- 1 biostatisticien
Collaborations
- Unité des virus émergents, Institut Pasteur de Paris
3.6.2. Organisation de l’étude
a) Prélèvement du patient
Avant le prélèvement, l’enquêteur vérifie les critères d’éligibilité, propose au patient de participer
à l’étude, l’informe et recueille le consentement écrit en cas d’acceptation de participer. Tous les patients
éligibles doivent se voir proposer la participation à l’étude.
b) Circuit des prélèvements biologiques
Un tube sec et un tube avec EDTA de cinq millilitres de sang seront prélevés par patient. Chaque
tube sera étiqueté. Les tubes prélevés directement à l’Institut Pasteur de Bangui n'auront pas besoin de
conditions particulières de transport. Par contre, les prélèvements au niveau d'autres sites d'études
doivent respecter le Guide de bonne Exécution d'Analyses Médicales. Les tubes seront stockés dans un
ou deux congélateurs à -80°C dans des boîtes dédiées, numérotées, datées et étiquetées.
c) Saisie
Le masque de saisie sera développé en utilisant EpiData®. Une double saisie sera effectuée.
d) Contrôle/validation des données
En plus du contrôle par la double saisie, les valeurs manquantes et incohérentes seront
recherchées et corrigées dans la mesure du possible.
e) Accès – stockage – conservation – sécurité informatique
Les bases de données de l’étude seront stockées sur un ordinateur unique protégé par un mot
de passe, et un disque de sauvegarde dans une pièce fermant à clef, à l’intérieur de l’Institut Pasteur de
Bangui. Les analyses seront effectuées sur une copie des bases originales (sur le même ordinateur) afin
d’éviter toute erreur de manipulation.
f) Information et communication
Deux semaines avant le démarrage de l’étude, un courrier sera envoyé à l’ensemble des
médecins des sites répertoriés, les informant que leurs patients se verront peut être proposés de
participer à une étude sur l’hépatite E et que l’Institut Pasteur sera peut être amené à les contacter pour
avoir des informations sur leurs patients.
39
3.7. Analyses statistiques
- Description de l’échantillon
- Estimation de la prévalence de l’hépatite E chronique chez les sujets VIH
- Comparaison de la proportion de sujets ayant une hépatite E chronique en fonction du degré
d’immunodépression (critère de jugement principal)
- Comparaison de la proportion de sujets ayant une hépatite E chronique en fonction d’autres
facteurs
3.8. Valorisation et dissémination des résultats
Plusieurs articles scientifiques seront soumis à publication. Ces résultats seront également
présentés lors de congrès sur les maladies infectieuses ou émergentes.
3.9. Considérations éthiques et protection des données
Cet essai sera réalisé conformément au protocole et dans le respect des personnes.
L’autorisation du Comité scientifique de validation des protocoles et résultats de recherche en santé a été
obtenue. Toute modification substantielle du protocole fera l’objet d’un amendement auprès de ce
Comité.
3.10. Calendrier prévisionnel
Début des inclusions : Dès obtention du financement
Fin des inclusions : 3 ans après avoir débuté les inclusions
Gestion des données/analyse : tout au long des inclusions
Rapport d’étude : dès la fin de l'analyse des données
3.11. Retombées attendues
3.11.1. Amélioration des connaissances fondamentales
- Mieux comprendre comment les sujets infectés par le VIH pourraient développer dans certains
cas une forme chronique d’hépatite E (étude des facteurs de risque)
- Déterminer la part de la médecine traditionnelle dans l’évolution chronique des atteintes
hépatiques chez les sujets infectés par le VIH
- Mieux comprendre l’influence du VIH sur l’évolution de VHE et vice versa
3.11.2. Retombées au niveau individuel
- Savoir si les formes chroniques sont plus fréquentes chez les sujets VIH les plus
immunodéprimés, justifiant peut être dans le futur une vaccination voire un traitement curatif pour
éviter le développement d’une hépatite chronique (intérêt thérapeutique potentiel)
40
- Savoir dans quelle mesure les hépatites inexpliquées chez le sujet VIH pourraient être dues au
VHE (intérêt diagnostique)
- Aider à évaluer l’intérêt du diagnostic de l’hépatite E chronique pour adapter le traitement
antirétroviral afin d’éviter les molécules hépatotoxiques
3.11.3. Retombées au niveau collectif
- Savoir si les sujets infectés par le VIH peuvent constituer un réservoir pour le VHE
- Mieux connaître l’épidémiologie de l’hépatite E, notamment pour aider à évaluer l’intérêt d'un
traitement ou d’une vaccination potentielle dans le futur
3.12. Autres perspectives à envisager
Les problématiques concernant :
a) les conséquences physiopathologiques et le rôle du système immunitaire au niveau du taux
élevé de mortalité chez la femme enceinte infectée par ce virus dans son troisième trimestre de
grossesse demeurent posées. La compréhension des mécanismes impliqués dans ces
phénomènes nécessitera la mise en place de nouveaux protocoles adaptés aux recherches
cliniques;
b) les effets hépato-toxiques des plantes médicinales ;
c) les différentes co-infections VIH/virus des hépatites.
41
4 - Références bibliographiques
42
Alric L, Bonnet D, Laurent G, Kamar N, Izopet J: Chronic hepatitis E virus infection: successful virologic
response to pegylated interferon-alpha therapy. Ann Intern Med 2010; 153(2):135-6
Andernach I, Leiss L, Tarnagda Z, Tahita M, Otegbayo J, Forbi J et al: Characterization of Hepatitis Delta Virus
in Sub-Saharan Africa. J Clin Microbiol 2014; 52(5):1629-1636
Andrade ZA, Lesbordes JL, Ravisse P, Parana R, Prata A, Barberino JS et al.: Fulminant hepatitis with
microvesicular steatosis (a histologic comparison of cases occurring in Brazil--Labrea hepatitis--and in central
Africa--Bangui hepatitis). Rev Soc Bras Med Trop 1992; 25(3):155-60
Arciniegas E, Sutton AB, Allen TD, Schor AM: Transforming growth factor beta 1 promotes the differentiation of
endothelial cells into smooth muscle-like cells in vitro. J Cell Sci 1992;103:521–529
Balayan MS, Andjaparidze AG, Savinskaya SS et al.: Evidence for a virus in non-A, non-B hepatitis transmitted
via the fecal-oral route. Intervirology 1983; 20:23-31
Barre-Sinoussi F, Chermann JC, Rey F et al.: Isolation of a T-lymphotropic retrovirus from a patient at risk for
acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). Science 1983; 220: 868-871
Bär HP: Cyclic nucleotides and smooth muscle. In Adv Cyclic Nucleotide Res, Vol 4. ed Greengard P & Robinson
GA. 1974, pp. 195-237. New York: Raven Press
Beavo JA, Conti M and Heaslip RJ: Multiple cyclic nucleotide phosphodiesterases. Mol Pharmacol 1994; 46:399-
405
Beavo JA and Reifsnyder DH: Primary sequences of phosphodiesterase isoenzymes and design of selective
inhibitors. Trends Pharmacol 1990; 11:150-155
Bekondi C, Olinger CM, Boua N, Talarmin A, Muller CP, Le Faou A et al: Central African Republic is part of the
West-African hepatitis B virus genotype E crescent. J Clin Virol 2007; 40:31-37
Bélec L, Grésenguet G, Georges-Courbot MC, Villon A, Martin MH, Georges AJ: Sero-epidemiological study
of several sexually transmitted diseases (including HIV infection) in rural zone of Central African Republic. Bull Soc
Pathol Exot 1988; 81:692-698
Bender AT and Beavo JA: Cyclic nucleotide phosphodiesterases: molecular regulation to clinical use. Pharmacol
Rev 2006; 58:488-520
Bensch KG, Davison PM, Karasek MA: Factors controlling the in vitro growth pattern of human microvascular
endothelial cells. J Ultrastruct Res 1983; 82:76-89
Bouscaillou J, Komas N, Tricou V, Nakouné E, Sélékon B, Fontanet A et al: Imported hepatitis E virus, Central
African Republic, 2011. Emerging Infectious Diseases 2013; 19(2):335-337
Burgin AB, et al.: Design of phosphodiesterase 4D (PDE4D) allosteric modulators for enhancing cognition with
improved safety. Nature Biotech. 2010; 28:63-70
Burki T: New resolve to tackle viral hepatitis. Lancet Infect Dis 2010; 10(7):450-451
Cancré N, Bois F, Grésenguet G, Fretz C, Fournel JJ, Bélec L: Screening blood donations for hepatitis C in
Central Africa: analysis of a risk- and cost-based decision tree. Med Decis Making 1999; 19(3):296-306
Canfield AE, Sutton AB, Schor SL, Grant ME, Schor AM: Aortic endothelial cells in culture: Factors which
modulate their morphological and biosynthetic phenotypes; in Steiner R, Weisz PB, Langer R (eds): Angiogenesis:
Key Principles, Science-Technology-Medicine. Basel, Birkhäuser, 1992, pp 158–166
Colson P, Dhiver C, Poizot Martin I, Tamalet C, Gérolami R: Acute and chronic hepatitis E in patients infected
with human immunodeficiency virus. J Viral Hepat 2010; 18(3):227–228
Colson P, Kaba M, Moreau J, Brouqui P: Hepatitis E in an HIV-infected patient. J Clin Virol 2009; 45(4):269-271
Conti M, Jin SC, Monaco L, Repaske DR and Swinnen JV: Hormonal regulation of cyclic nucleotide
phosphodiesterases. Endocrin Rev 1991; 12:218-234
Conti M and Beavo J: Biochemistry and physiology of cyclic nucleotide phosphodiesterases: essential
components in cyclic nucleotide signaling. Annu Rev Biochem 2007; 76:481–511
Cotta-Pereira G, Sage H, Bornstein P, Ross R, Schwartz S: Studies of morphologically atypical (‘sprouting’)
cultures of bovine aortic endothelial cell: Growth characteristics and connective tissue protein synthesis. J Cell
Physiol 1980; 102:183–191
Coudray C, Charon C, Komas N, Mory G, Diot-Dupuy F, Manganiello V et al: Expression of Type-2 Cyclic
Nucleotide Phosphodiesterase in Brown Adipose Tissue of Zucker Rat: Modulation by the FA gene. FEBS Letter
1999; 456:207 – 210
Crovari P, Santolini M, Bandettini R, Bonanni P, Branca P, Coppola RC: Epidemiology of HBV and HDV
43
infections in a rural area of Central African Republic. Prog Clin Biol Res 1991; 364:69–73
Curry JA, Adams N, Crum-Cianflone NF: Acute Hepatitis E Virus (HEV) Infection in an HIV-Infected Person in
the U.S. Ann Intern Med 2009; 150(3):226-227
Dalton HR, Bendall R, Ijaz S, Banks M: Hepatitis E: an emerging infection in developed countries. Lancet Infect
Dis 2008; 8:698–709
Dalton HR, Bendall RP, Keane FE, Tedder RS, Ijaz S: Persistent carriage of hepatitis E virus in patients with HIV
infection. New Engl J Med. 2009; 361(10):1025-1027
Davison PM and Karasek MA: Human dermal microvascular endothelial cells in vitro: Effect of cyclic AMP on
cellular morphology and proliferation rate. J Cell Physiol 1981; 106:253–258.
Eckly AE and Lugnier C: Role of phosphodiesterases III and IV in the modulation of vascular cyclic AMP content
by the NO/cyclic GMP pathway. Br J Pharmacol 1994; 113:445–450
Eriksson H, Ridderstrale M, Degerman E, Ekholm D, Smith CJ, Manganiello VC et al: Evidence for the key
role of the adipocyte cGMP-inhibited cAMP phosphodiesterase in the antilipolytic action of insulin. Biochim Biophys
Acta 1995; 1266:101-107
Francis S, Blount M, Corbin J: Mammalian cyclic nucleotide phosphodiesterases: Molecular mechanisms and
physiological functions. Physiol Rev 2011; 91:651–690.
Fretz C, Jeannel D, Stuyver L, Herve V, Lunel F, Boudifa A et al.: HCV infection in a rural population of the
Central African Republic (CAR): Evidence for three additional subtypes of genotype 4. J Med Virol 1995; 47:435–
437.
Gérolami R, Moal V, Colson P: Chronic hepatitis E with cirrhosis in a kidney-transplant recipient. New Engl J Med
2008; 358(8):859–860
Goumba AI, Konamna X, Komas NP: Clinical and epidemiological aspects of a hepatitis E outbreak in Bangui,
Central African Republic. BMC Infectious Diseases 2011; 11:93
Goumba CM, Yandoko-Nakouné ER and Komas NP: A fatal case of acute hepatitis E among pregnant women,
Central African Republic. BMC Research Notes 2010; 3:103
Haagsma EB, van den Berg AP, Porte RJ, Benne CA, Vennema H, Reimerink JHJ, et al.: Chronic hepatitis E
virus infection in liver transplant recipients. Liver Transpl 2008; 14(4):547–553
He R, Komas N, Ekholm D, Murata T, Taira M, Hockman S et al: Expression and Characterization of Deletion
Recombinants of Two cGMP-Inhibited Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases (PDE-3). Cell Biochemistry and
Biophysics 1998; 29:89-111
Hoofnagle JH, Nelson KE, Purcell RH: Hepatitis E. New Engl J Med 2012; 367:1237-44
Hussaini SH, Skidmore SJ, Richardson P, Sherratt LM, Cooper BT, O'Grady JG: Severe hepatitis E infection
during pregnancy. J Viral Hepat. 1997; 4(1):51-4
Itoh H, Pratt RE, Ohno M, Dzau VJ: Atrial natriuretic polypeptide as a novel antigrowth factor of endothelial cells.
Hypertension 1992; 19:758–761
Jilani N, Das BC, Husain SA, Baweja UK, Chattopadhya D, Gupta RK, Sardana S, Kar P: Hepatitis E virus
infection and fulminant hepatic failure during pregnancy. J Gastroenterol Hepatol 2007; 22(5):676-682
Kamar N, Abravanel F, Selves J, Garrouste C, Esposito L, Lavayssière L, et al.: Influence of
immunosuppressive therapy on the natural history of genotype 3 hepatitis-E virus infection after organ
transplantation. Transplantation 2010; 89(3):353–360
Kamar N, Bendall R, Legrand-Abravanel F, Xia NS, Ijaz S, Izopet J, Dalton HR. Hepatitis E. Lancet 2012;
379(9835):2477-2488
Kamar N, Mansuy J-M, Cointault O, Selves J, Abravanel F, Danjoux M, et al.: Hepatitis E Virus-Related
Cirrhosis in Kidney-and Kidney–Pancreas-Transplant Recipients. Amer J Transplantation 2008a; 8(8):1744–1748
Kamar N, Selves J, Mansuy JM, Ouezzani L, Péron JM, Guitard J, et al.: Hepatitis E virus and chronic hepatitis
in organ-transplant recipients. New Engl J Med 2008b; 358(8):811–817
Ke H, Wang H, Ye M: Structural insight into the substrate specificity of phosphodiesterases. Handb Exp
Pharmacol 2011; 204:121–132
Keravis T, Komas N & Lugnier C: Cyclic Nucleotide Hydrolysis in Bovine Aortic Endothelial Cells in Culture:
Differential Regulation in Cobblestone and Spindle Phenotypes. J Vasc Res 2000; 37:235-249
44
Keravis T and Lugnier C: Cyclic nucleotide phosphodiesterase (PDE) isozymes as targets of the intracellular
signalling network: benefits of PDE inhibitors in various diseases and perspectives for future therapeutic
developments. Br J Pharmacol 2012; 165:1288–1305
Komas NP, Baï-Sepou S, Manirakiza A, Léal J, Béré A & Le Faou A.
The prevalence of hepatitis B virus markers in a cohort of students in Bangui, Central African Republic. BMC
Infectious Diseases 2010; 10:226
Komas N, Lugnier C, Andriantsitohaina R & Stoclet JC: Characterization of Cyclic Nucleotide
Phosphodiesterases from Rat Mesenteric Artery. Eur. J. Pharmacol. - Mol. Pharmacol. Sect.- 1991a; 208:85-87
Komas N, Lugnier C, Le Bec A, Serradeil-Le Gal C, Barthelemy G & Stoclet JC : Differential Sensitivity to
Cardiotonic Drugs of Cyclic AMP Phosphodiesterases Isolated from Canine Ventricular and Sinoatrial Enriched
Tissues. J Cardiovasc Pharmacol 1989; 14:213-220
Komas N, Lugnier C & Stoclet JC : Endothelium-dependent and Independent Relaxation of the Rat Aorta by
Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase Inhibitors. Brit J Pharmacol 1991b; 104:495-503
Komas N, Movsesian MA, Kedev S, Degerman E, Belfrage P & Manganiello VC: Cyclic GMP-Inhibited
Phosphodiesterase (cGI-PDE) Inhibitors as Therapeutic agents. In: The Handbook of Immunopharmacology.
Phosphodiesterase Inhibitors; Schudt C., Dent G. and Rabe K.F. ed., 1996, pp 89-109, Academic Press, San
Diego
Komas NP, Vickos U, Hübschen JM, Béré A, Manirakiza A, Muller CP & Le Faou A.
Cross-sectional study of hepatitis B virus infection in rural communities, Central African Republic. BMC Infectious
Diseases 2013; 13:286.
Kukovetz WR, Pöch G, Holzmann S: Cyclic nucleotides and relaxation of vascular smooth muscle. In
Vasodilatation. ed. Vanhoute PM & Leusen I. 1981, pp. 339-351. New York: Raven Press
Kumar A, Beniwal M, Kar P, Sharma JB, Murthy NS: Hepatitis E in pregnancy. International Journal of
Gynecology & Obstetrics 2004; 85(3):240–244
Kuniholm MH, Labrique AB, Nelson KE: Should HIV-infected patients with unexplained chronic liver enzyme
elevations be tested for hepatitis E virus? Clin Infect Dis 2010; 50(11):1545–1546
Lagon T, Fillon S, Pichoud C, Hantz O, Trépo C, Kay A: Analysis of a hepatitis delta virus isolate from the
Central African Republic. Res Virol 1998; 149(3):171-185
Legrand-Abravanel F, Kamar N, Sandres-Saune K, Lhomme S, Mansuy JM, Muscari F et al : Hepatitis E virus
infection without reactivation in solid-organ transplant recipients, France. Emerg Infect Dis 2011; 17(1):30-37
Leitman DC, Fiscus RR, Murad F: Forskolin, phosphodiesterase inhibitors, and cyclic AMP analogs inhibit
proliferation of cultured bovine aortic endothelial cells. J Cell Physiol 1986; 127:237–243
Lesbordes JL, Georges AJ, Ravisse P, Beuzit Y, Enamira D, Meunier D et al.: Virus de l’hépatite delta (VHD)
et hépatites fulminantes en République Centrafricaine (à propos de 92 observations). Médecine et Armées 1986;
14:545-551
Lesbordes JL, Ravisse P, Georges AJ, Beuzit Y, Ave P, Enamra D et al.: Le rôle du virus delta dans les
hépatites fulminantes en Afrique Centrale. Ann Med Interne 1987a; 138:199-201
Lesbordes JL, Ravisse P, Georges AJ, Chevallier P, Pichoud C, Vitvitski L et al.: Studies on the role of HDV
in an outbreak of fulminant hepatitis in Bangui (Central African Republic). In The Hepatitis Delta Virus and Its
Infection, Rizzetto M, Gerin JL, Purcell RH eds., A Liss Inc., New York 1987b; 451-459
Lipton BH, Bensch KG, Karasek MA: Microvessel endothelial cell transdifferentiation: Phenotypic
characterization. Differentiation 1991; 66:361–367
Lugnier C: Cyclic nucleotide phosphodiesterase (PDE) superfamily: a new target for the development of specific
therapeutic agents. Pharmacol Ther. 2006; 109(3):366-98
Lugnier C & Komas N: Modulation of Vascular Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases by cyclic GMP: Role in
Vasodilatation. Eur Heart J 1993; 14:141-148
Lugnier C, Schini VB: Characterization of cyclic nucleotide phosphodiesterases from cultured bovine aortic
endothelial cells. Biochem Pharmacol 1990; 39:75–84.
Makarski JS Jr: Evidence for reversible morphologic phenotypes (sprouts) of cultured endothelial cells. Cell Biol
Int Rep 1982; 6:225– 233.
Meacci E, Taïra M, Moos M Jr, Smith CJ, Movsesian MA, Degerman E et al: Molecular cloning and expression
of human myocardial cGMP-inhibited cAMP phosphodiesterase. Proc Natl Acad Sci USA, 1992; 89(9):3721-5
45
Meunier DM, Vohito MD, Couroucce AM, Lesbordes JL, Georges-Courbot MC, Georges AJ: Prevalence of
hepatitis B surface antigen and determination of its subtypes in the Central African Republic. Bull Soc Pathol Exot
Filiales 1984; 77(3):249-54
Mihigo R, Nshimirimana D, Hall A, Kew M, Wiersma S, Clements CJ: Control of viral hepatitis infection in
Africa : are we dreaming ? Vaccine 2013; 31(2):341-346
Montesano R, Vassalli JD, Baird A, Guillemin R, Orci L: Human endothelial cell cultures: Phenotypic
modulation by leukocyte interleukins. Proc Natl Acad Sci USA 1986; 83:297– 301.
Moodie SA and Martin W: Effects of cyclic nucleotides and phorbol myristate acetate on proliferation of pig aortic
endothelial cells. Br J Pharmacol 1991; 102:101–106
Movsesian MA, Komas N, Krall J & Manganiello VC. Expression and Activity of Low Km, cGMP-inhibited cAMP
Phosphodiesterase in Cardiac and Skeletal Muscle. Biochem Biophys Res Commun 1996; 225:1058-1062
Muller B, Komas N, Keravis T & Lugnier C : Les Phosphodiesterases des Nucleotides Cycliques.
Medecine/Sciences 1993; 9:1335-1341
Naik SR, Aggarwal R, Salunke PN, Mehrotra NN : A large waterborne viral hepatitis E epidemic in Kanpur, India.
Bulletin of the World Health Organization. 1992; 70(5):597
Navaneethan U, Mohajer MA, Shata MT: Hepatitis E and Pregnancy- Understanding the pathogenesis. Liver Int
2008; 28(9):1190–1199
Nicand E, Grandadam M, Teyssou R, Rey JL, Buisson Y: Viraemia and faecal shedding of HEV in symptom-
free carriers. Lancet 2001; 357(9249):68-69
Njouom R, Lavoie M, Foupouapouognigni Y, Frost E, Deslandes S, Mamadou-Yaya F et al: Transmission of
hepatitis C virus among spouses in Cameroon and the Central African Republic. J Med Virol 2011; 83(12):2113-
2118
Ollier L, Tieulie N, Sanderson F, Heudier P, Giordanengo V, Fuzibet J-G, et al.: Chronic hepatitis after hepatitis
E virus infection in a patient with non-Hodgkin lymphoma taking rituximab. Ann Intern Med 2009; 150(6):430–431
Omatsu-Kanbe, M., Cushman, S.W., Manganiello, V.C. and Taira, M: Insulin stimulates hormone-sensitive
cyclic GMP-inhibited cyclic nucleotide phosphodiesterase in rat brown adipose cells. FEBS Letter 1995; 374:187-
191.
Omori K and Kotera J: Overview of PDEs and their regulation. Circ Res 2007; 100:309-327
Oncu S, Oncu S, Okyay P, Ertug S, Sakarya S : Prevalence and risk factors for HEV infection in pregnant
women. Med Sci Monit 2006; 12(1):CR36-39
ONUSIDA: Forte prévalence du VIH en Guinée équatoriale. C:\Users\fashion\Documents\prévalence vih en
guinée.html
ONUSIDA: le point sur l’épidémie de Sida, 2007 ; OMS/VIH N° 360 Aide mémoire.
Pal R, Aggarwal R, Naik SR, Das V, Das S, Naik S: Immunological alterations in pregnant women with acute
hepatitis E. J Gastroenterol Hepatol 2005; 20(7):1094–1101
Pandit J, Forman MD, Fennell KF, Dillman KS, Menniti FS: Mechanism for the allosteric regulation of
phosphodiesterase 2A deduced from the X-ray structure of a near full-length construct. Proc Natl Acad Sci USA
2009; 106:18225–18230.
Paranà R, Gerard F, Lesbordes JL, Pichoud C, Vitvitski L, Lyra LG et al: Serial transmission of spongiocytic
hepatitis to woodchucks (possible association with a specific delta strain). J Hepatol 1995; 22(4):468-73
Patra S, Kumar A, Trivedi SS, Puri M, Sarin SK: Maternal and fetal outcomes in pregnant women with acute
hepatitis E virus infection. Ann Intern Med 2007; 147(1):28–33
Pawlotsky JM, Bélec L, Grésenguet G, Deforges L, Bouvier M, Duval J et al: High prevalence of hepatitis B, C,
and E markers in young sexually active adults from the Central African Republic. J Med Virol 1995; 46:269-273
Price J: An update on hepatitis B, D and E viruses. Top Antivir Med 2014; 21(5):157-163
Rey-Cuille MA, Njouom R, Bekondi C, Seck A, Gody C, Bata P et al: Hepatitis B virus exposure during
childhood in Cameroon, central african republic and senegal after the integration of HBV vaccine in the expanded
program on immunization. Pediatr Infect Dis J 2013; 32(10):1110-1115
Reyes GR, Purdy MA, Kim JP et al: Isolation of a cDNA from the virus responsible for enterically transmitted non-
A, non-B hepatitis. Science 1990; 247(4948):1335-1339
Schlauder GG and Mushahwar IK : Genetic heterogeneity of hepatitis E virus. J Med Virol 2001; 65(2):282-292
Schwartz SM: Selection and characterization of bovine aortic endothelial cells. In Vitro 1978; 14:966–980
46
Schmitz-Pei¡er C, Reeves ML and Denton RM: Characterization of the cyclic nucleotide phosphodiesterase
isoenzymes present in rat epididymal fat cells. Cell. Signal 1992; 4:37-49
Schor AM, Schor SL, Allen TD: Effects of culture conditions on the proliferation, morphology and migration of
bovine aortic endothelial cells. J Cell Sci 1983; 62:267–285
Sutton AB, Canfield AE, Schor SL, Grant ME, Schor AM: The response of endothelial cells to TGFß-1 is
dependent upon cell shape, proliferative state and the nature of the substratum. J Cell Sci 1991; 99:777–787
Sellier P, Mazeron M-C, Tesse S, Badsi E, Evans J, Magnier J-D, et al.: Hepatitis E virus infection in HIV-
infected patients with elevated serum transaminases levels. Virol J 2011; 8:171
Souness JE, Diocee B, Martin W, Moodie SA: Pig aortic endothelial-cell cyclic nucleotide phosphodiesterases.
Biochem J 1990; 266:127– 132
Stoszek SK, Abdel-Hamid M, Saleh DA, El Kafrawy S, Narooz S, Hawash Y, et al.: High prevalence of hepatitis
E antibodies in pregnant Egyptian women. Trans R Soc Trop Med Hyg 2006; 100(2):95–101
Sutherland EW and Robison GA: Role of cyclic 3':5'-AMP in response to catecholamines and other hormones.
Pharmacol Rev 1966; 18:145-161
Tam AW, Smith MM, Guerra ME, Huang CC, Bradley DW, Fry KE et al: Hepatitis E virus (HEV) : molecular
cloning and sequencing of the full-length viral genome. Virology 1991; 185(1):120-131
Tang JR, Hantz O, Vitvitski L, Lamelin JP, Parana R, Cova L, Lesbordes JL et al: Discovery of a novel point
mutation changing the HDAg expression of a hepatitis delta virus isolate from Central African Republic. J Gen Virol
1993; 74:1827-1835
Taniguchi T, Fujiwara M, Ohsumi K: Possible involvement of cyclic adenosine 3':5'-monophosphate in the
genesis of catecholamine-induced tachycardia in isolated rabbit sino-atrial node. J Pharmacol Exp Ther 1977;
201:678-688
Te HS and Jensen DM: Epidemiology of hepatitis B and C : a global overview. Clin Liver Dis 2010; 14(1):1-21
Tontsch U and Bauer HC: Isolation, characterization, and long-term cultivation of porcine and murine cerebral
capillary endothelial cells. Microvasc Res 1989; 37:148–161
Tuder RM, Karasek MA, Bensch KG: Cyclic adenosine monophosphate levels and the function of skin
microvascular endothelial cells. J Cell Physiol 1990; 142:272–283
Vandeputa F, Szabo-Fresnais N, Ahmad F, Kho C, Lee A, Krall J et al: Selective regulation of cyclic nucleotide
phosphodiesterase PDE3A isoforms. Proc Natl Acad Sci USA 2013; 110(49):19778–19783
http://www.indexmundi.com/map/?v=32&l=fr
WHO. Epidemiological fact sheet 2009 [Internet]. 2009. Available from:
http://158.232.15.29/CFS/downloadpdf.htm?country_id=AFRCAF&lng_code=en&pdfoption=epi
http://www.unaids.org/en/media/unaids/contentassets/documents/epidemiology/2012/gr2012/20121120_UNAIDS_
Global_Report_2012_with_annexes_fr.pdf
47
5 - Liste de publications
48
5.1. Publications principales dans des journaux à comité de lecture
1 - Les hépatites virales, menaces pour la santé publique en République Centrafricaine. Journées
scientifiques du Réseau International des Instituts Pasteur - Afrique, Dakar, Sénégal, 20 juin 2014
2 - Les virus une menace pour l’humanité. Promotion de la Culture Scientifique et Technique (PCST),
Bangui, République Centrafricaine, 26 janvier 2008
3 - Evaluation of screening tests for the Hepatitis C virus. 6th Congress of the federation of African
Immunological Societies, March 2006 Dakar, Sénégal
4 - Seroprevalence of Hepatitis B virus in Central African Region. 3ème Sommet Africain de la Science et
des Nouvelles Technologies, 24 – 26 octobre 2005, Brazzaville, République du Congo
5 - Protease activated-receptors (PARs) and Crohn’s Disease; IBD research: 2000 and Beyond; Hockley
Valley Resort & Conference centre. Avril, 1999, Ontario, Canada
6 - Intracellular Calcium and Crohn disease; Groupe de Recherche en Transport Membranaire; Université
de Montréal; Canada, Sept., 1998.
7 - Structure and Role of the Cardiovascular Cyclic AMP-specific Phosphodiesterases (PDE3 and PDE4).
Laboratoires GLAXO, Les Ulis, France, juillet 1993
8 - Pharmacological Characterization of the Canine Cardiac Membrane Phosphodiesterases; 1st
European meeting of the "Société Française de Cardiologie", Paris, France, janvier, 1991
51
Hepatitis B and Delta in Bangui – Central African Republic – 25 years after the first reported hepatitis
delta epidemic. J Hepatol, 2012, 56(Suppl2):S31
3 - NP Komas, LU Ngoumé Vickos, A Bere, A Manirakiza.
Prévalence et facteurs de risque de transmission des hépatites virales B (HBV), delta (HDV) et C (HCV)
dans les zones rurales en Républiques Centrafricaines. Virologie, 2010, 14(1):P105.
4 - N Komas, S. Bai Sépou, A. Manirakiza, A. Béré, A. Le Faou.
Prevalence of HBV and related risk factors in high school and university community of Bangui (Central
African Republic). J Hepatol, 2009, 50(Suppl1):S209
5 - NP Komas, A Goumba, F Komoyo, X Konamna A. Le Faou.
Epidemiological, biological and clinical aspects of hepatitis E virus in Bangui, Central African Republic.
Bull. Soc. Path Exo, 2008, 101(3): 276
6 - NP Komas, J Gody, A Béré, S. NDalla, M. El Rafei, A. Le Faou.
Seroprevalence and age of acquirement of HBV infection during childhood in “Complexe pediatrique de
Bangui” (Central African Republic). J Clin Virol,2006. 36(suppl.2):S199
7 - N. Komas, C. Gosselin, A. Willey, M. Graham, M. O'Connor-McCourt, M. Hollenberg & J.L.
Schwartz.
Human Intestinal Smooth Muscle (Hism) Cells from Crohn's Disease Patients Display Altered Cytosolic
Calcium Mobilization. Mol. Biol. Cell, 1998, 9:1453;
8 - M. Lavalle, N. Komas, C. Collins, L. Bourget, M. O'Connor, M. Hollenberg & J.L. Schwartz.
Functional Analysis of the Proteinase-Activated Receptors (PARs) Expressed by Baculovirus Vector in
Sf9 Insect Cells. Mol. Biol. Cell, 1997,8:156;
9 - N. Komas, L. Potvin, L. Bourget, M. O'Connor, M. Hollenberg & J.L. Schwartz.
Proteinase-activated receptors (PARs) Modulate Ca2+ Signalling and Signal Transduction in Human
Intestinal Smooth Muscle (HISM) Cells. Mol. Biol. Cell, 1997, 8:155;
10 - T. Keravis, N. Komas & C. Lugnier.
cAMP Hydrolysis is Differently Regulated in Cobblestone and Spindle Phenotypes of Bovine Aortic
Endothelial Cells in Culture; J. Vasc. Res. 1997, 34 S1:070.
11 - N. Komas, M.D. Ivorra & C. Lugnier.
Vascular Smooth Muscle and Left Ventricle Membrane-bound cGMP Inhibited Type III
Phosphodiesterases (cGI-PDEs) are Pharmacological Different from Sinoatrial Node Membrane-bound
cGI PDE; FASEB J. 1995, 9:A1261;
12 - N. Komas, M. Taira, T. Murata, & V.C. Manganiello.
Similar Pharmacological Responses of Two Recombinant cGMP-Inhibited Cyclic Nucleotide
Phosphodiesterase (cGI PDE) Isoforms; FASEB J. 1994, 8:475;
13 - M.J. Leroy, M. Taira, N. Komas, E. Degerman, & V.C. Manganiello.
Expression and Characterization of the Adipocyte cGMP-inhibited Phosphodiesterase (cGI PDE) in NIH
3T3 Cells: Regulation by Insulin; FASEB J. 1994, 8:476.
14 - L.H. Wang, N. Komas, M. Taira & V.C. Manganiello.
Expression of Human Cardiac cGMP-inhibited (type III) Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase (cGI-PDE)
in Sf9 insect cells; FASEB J. 1993, 7:578;
15 - N. Komas, C. Lugnier & J.C. Stoclet.
Endothelium-dependent Vascular Smooth Muscle Relaxation is Induced by Inhibitors of Rolipram-
sensitive Cyclic AMP Phosphodiesterase; FASEB J. 1991, 5 (PartII):6079;
16 - N. Komas, C. Lugnier & J.C. Stoclet.
Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases are Similar in Rat Aorta and Mesenteric Artery; J. Mol. Cell
Cardiol. 1991, 23 (suppl. IV):S.35;
52
17 - C. Lugnier, N. Komas & J.C. Stoclet.
Endothelium Differentially Influences the Relaxing Effects of Inhibitors of Two Low Km Cyclic AMP
Phosphodiesterases in Rat Aorta. Pflügers Archiv Eur. J. Physiol. 1991, 419 (suppl.1):R 85.
18 - N. Komas, C. Lugnier & J.C. Stoclet.
Drug effects on cGMP-stimulated Phosphodiesterase from Cardiac Tissues; J. Mol. Cell Cardiol. 1990, 22
(suppl.III)S6:PW17;
19 - N. Komas, C. Lugnier & J.C. Stoclet.
Pharmacological Characterization of Membrane-bound Forms of cAMP Phosphodiesterase from Cardiac
Tissues; J. Mol. Cell Cardiol. 1990, 22 (Suppl. IV):S.32
20 - C. Lugnier, N. Komas & J.C. Stoclet.
Cardiotonic Drugs Selectively Inhibit cAMP Phosphodiesterase from Dog Cardiac Ventricle. Fundamental
& Clinical Pharmacol; 1988, 2:140.
21 - C. Lugnier, C. Schott, N. Komas & J.C. Stoclet.
Inhibition sélective des Isoformes de Nucléotides Cycliques Phosphodiestérases par des agents
Cardiotoniques. Arch Mal Coeur Vaisseaux 1987, 80:29.
53
8 - Komas N, Leroy MJ, Taïra M, Manganiello VC:
Expression of the cGMP-Inhibited Phosphodiesterase in NIH 3T3 Cells Over expressing the Insulin
Receptor; Mid-Atlantic Diabetes Research Symposium at NIH; Bethesda, USA, sept., 1993.
Communication orale
9 - Komas N, Taïra M, Manganiello VC:
Structure/function Analysis of Recombinant cGMP-Inhibited Phosphodiesterases; NIH Research Festival'
93, Bethesda, USA, Sept., 1993. Communication orale
10 - Komas N, Leroy MJ, Taïra M, Manganiello VC:
Expression of the cGMP-Inhibited Phosphodiesterase in NIH 3T3 Cells Over expressing the Insulin
Receptor; NIH Research Festival' 93, Bethesda, USA, Sept., 1993. Communication orale
11 - Komas N and Lugnier C:
Role of Rolipram-Sensitive Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase (ROI-PDE or PDE IV) in the Regulation
of Vascular Smooth Muscle Relaxation; 4th R.E.C.A.R.E. meeting, Strasbourg, France, Février, 1991.
Communication orale
12 - Komas N, Le Bec A, Lugnier C:
Drug Sensitivity of Cyclic GMP Activated Phosphodiesterase from Dog Heart; Second R.E.C.A.R.E
Meeting; Bâle, Suisse, Mars, 1989. Communication orale
13 - Komas N and Lugnier C:
Vascular and Cardiac Cyclic AMP-specific Phosphodiesterase: Characterization and Specific Inhibitors
with Cardiotonic effects From Research to Discovery (Pharmacology, drug, Therapeutic); Séminaire
Lyon, France, Nov. 1989. Communication orale
14 - Komas N, Le Bec A, Lugnier C and Stoclet JC:
Differential Sensitivity to Cardiotonic Drugs of Cyclic AMP Phosphodiesterases III Isolated from Canine
Ventricular and Sinoatrial Enriched Tissues; First R.E.C.A.R.E Meeting, Strasbourg, France, Nov., 1988.
Communication orale.
54
6 - Etat de participation au montage de
projets financés
55
Année Titre du Projet Organisme de Equipe(s) impliquée(s) Montant du Evolution Investigateur Principal
financement financement du projet
2005 Etudes épidémiologique et Institut de Médecine et Deux équipes: - Initiateur et Coordonnateur du
virologique de l'hépatite E en d'Epidémiologie - Lab des hépatites virales de projet: Dr Narcisse P KOMAS
République Centrafricaine Africaine/Fondation Léon l'Institut Pasteur de Bangui (IPB)
MBA - Unité des virus émergents de 9 500 euros Finalisé
l'Institut Pasteur Paris, IP (Pr
Arnaud FONTANET)
2006 Evaluation de différents tests de Agence Nationale de Deux équipes: - Initiateur du projet: Dr Narcisse
diagnostic de l'hépatite C en Recherche sur le Sida et les - Lab des hépatites virales de Patrice KOMAS
République Centrafricaine Hépatites B et C (ANRS) l'IPB - Coordonnateur Nord: Dr Frédéric
- Lab de virologie, Faculté de 17 500 euros Finalisé DUBOIS
Médecine et Centre Hospitalier - Coordonnateur Sud: Dr Narcisse
Universitaire de Tours (Dr Patrice KOMAS
Frédéric DUBOIS)
2010 Hépatite B/Delta en Centrafrique ANRS Quatre équipes: - Initiateur du projet: Dr Narcisse
- Lab des hépatites virales de Patrice KOMAS
l'IPB - Coordonnateur Nord: Pr Paul
- Hôpital Communautaire de DENY
Bangui (Pr Abdoulaye SEPOU) et 206 000 euros En - Coordonnateur Sud: Dr Narcisse
Hôpital de l'Amitié de Bangui (Dr finalisation Patrice KOMAS
Omer OUAVENE)
- Laboratoire de Bactériologie,
Virologie – Hygiène, Hôpital
Avicenne (Pr Paul DENY)
- Unité INSERM U871 Lyon (Pr
Fabien ZOULIM)
2011 Caractérisation des nouveaux Action Concertée Inter- Trois équipes: - Initiateur du projet et
marqueurs sériques du cancer Pasteurienne (ACIP) - Lab des Hépatites virales de Coordonnateur principal: Dr Pascal
primitif du foie en Afrique et l'IPB 50 000 euros En cours PINEAU (IP)
Equatoriale Grant Dedonder (2012) en - Centre Pasteur du Cameroun + - Coordonnateur Centrafrique: Dr
complément de - Unité d'Organisation Nucléaire 46 000 US$ Claudine BEKONDI et Dr NP
financement et Oncogenèse, INSERM U993, KOMAS
Institut Pasteur Paris - Coordonnateur Cameroun: Dr
Richard NJOUOM
56
Année Titre du Projet Organisme de Equipe(s) impliquée(s) Montant du Evolution Investigateur Principal
financement financement du projet
2012 Etude moléculaire et répartition Grant Dedonder Lab Hépatites virales de l'IPB 46 000 US$ En cours - Initiateur et Investigateur principal:
géographique des hépatites Dr NP KOMAS
virales chroniques (B, C et D) et
de la co-infection VIH/hépatites
virales chroniques (B, C et D) en
République Centrafricaine
2014 Influence du virus de ANRS Deux équipes: En attente - Initiateur et Investigateur principal:
l’immunodéficience humaine Grant Dedonder - Lab des Hépatites virales de de Dr NP KOMAS
(VIH) sur l’évolution chronique du Fondation Fio-Cruz l'IPB 80 000 euros soumission - Institut Pasteur Paris : Pr Arnaud
- Unité des virus Emergents, IP FONTANET
virus de l’hépatite (VHE)
57
7 – Activités d’enseignement et
d’encadrement
58
7.1. Synthèse des activités d’enseignement
60
IV - Autres enseignements
• Cours théoriques de 6h par an (de 2000 à 2003) sur le thème "Protein folding mechanisms" à
Albert Einstein College of Medecine de Bronx, Yeshiva University, New York, Etats-Unis
• Cours théorique d'une durée de 4h par an (de 1996 à 1999) sur le mécanisme de signalisation
intracellulaire des récepteurs activés par les protéases à la Faculté de Médecine de l'Université
de Montréal, QC, Canada.
62
8 - Autres activités
63
8.1. Sociétés Savantes
- American Society for Cell Biology (ASCB)
- European Association for the Study of Liver (EASL)
- Société de Pharmacologie et de Toxicologie du Burkina Faso (SOPHATOX)
2006 – présent : L’initiative EVIPNet-RCA (Evidence-informing Policy Networks) qui a été mise en place
par l’OMS et qui fait partie du réseau EVIPNet-OMS. C’est un réseau regroupant 6 pays Africains
(Burkina Faso, Cameroun, Centrafrique, Ethiopie, Mozambique et Zambie) pour la promotion de la
politique et de la prise de décision en santé publique fondée sur des bases factuelles. Cette institution qui
est sous l’autorité du Ministère en charge de la Santé Publique s’engage à recenser, coordonner et
mettre en réseau les chercheurs centrafricains dans le domaine de la recherche en santé ainsi que
répertorier les différents travaux scientifiques pour une visibilité dans la conduite de la politique de la
santé. EVIPNET est financé en partie par l'Organisation Mondiale de la Santé (OMS).
2006 – présent :
- Administrateur du Comité National d'Ethique
- Administrateur du Comité Scientifique de Validation des Protocoles et Résultats en Recherche
en Santé (Faculté des Sciences de la Santé, Université de Bangui).
2009 – présent : Expert pour le projet SURVAC (Surveillance des Maladies évitables par la vaccination)
qui regroupe 3 pays d’Afrique Centrale (Cameroun, Centrafrique et République Démocratique du Congo).
2008 : Groupe de travail pour la rédaction des directives relatives au droit du travail sur les Directives
Interministérielles relatives à la loi fixant les droits et obligations des personnes vivant avec le VIH/SIDA.
2009 – 2010 : Groupe de travail pour la rédaction du Plan Stratégique de Recherche en Santé. Le
résultat stratégique attendu est de doter la RCA d’une institution nationale de recherche en santé,
reposant sur un cadre juridique et réglementaire adéquat, disposant des ressources humaines,
financières et matérielles appropriées, et agissant dans un cadre de partenariat dynamique, contribuer à
améliorer les programmes et l’état de santé des populations en RCA conformément aux orientations du
Plan National de Développement de la Santé (PNDS1 et 2) et du Document de Stratégie de Réduction
de la Pauvreté (DSRP1).
65
9 – Sélection de 5 articles originaux
66
Komas NP, Vickos U, Hübschen JM, Béré A, Manirakiza A, Muller CP and Le Faou A. Cross-sectional
study of hepatitis B virus infection in rural communities, Central African Republic. BMC Infectious
Diseases 2013 13:286.
CM Goumba, ER Yandoko-Nakouné and NP Komas. A fatal case of acute hepatitis E among pregnant
women, Central African Republic. BMC Research Notes 2010, 3:103
NP Komas, S Baï-Sepou, A Manirakiza, J Léal, A Béré, A Le Faou. The prevalence of hepatitis B virus
markers in a cohort of students in Bangui, Central African Republic. BMC Infectious Diseases 2010,
10:226
67