Un modèle de bactérie invasive:

Listeria monocytogenes

M1 Microbiologie médicale
Physiopathologie des maladies
infectieuses
JM SCHEFTEL
15 avril 2011
 Listeria monocytogenes

 appartient au Genre Listeria

 petit bacille à Gram positif largement répandu dans
l’environnement (sol, eau, végétaux)
 ubiquiste, saprophyte
 résistant, survie importante
◦ psychrotrophe : se multiplie à 2 °C
◦ aérobie-anaérobie facultatif
◦ culture entre 30-37°C au laboratoire sous 10% CO2 en 24 h ,
 Transmission par ingestion d’aliments contaminés
 L..monocytogenes : responsable d’infections opportuniste
graves chez l’homme (13 sérovars: 1/2a, 1/2b,4b les plus
fréquents)
Listeria monocytogenes : coloration de Gram
Epidémiologie des listérioses en France
 La listériose humaine est une maladie à déclaration obligatoire en
France depuis 1998
 Sporadique ou épidémique
 Cas sporadiques
◦ Incidence en France: 0,35 cas /100 000 h
◦ 1,3/ 100 000 chez enfants de moins 1 an
◦ <0,5 / 100 000 chez adulte
◦ 1/ 100 000 au-delà de 54 ans
◦ 200 à 250 cas par an
◦ 2004 : 231 cas 21% formes materno-néonatales
 Cas épidémiques
◦ De qqs cas à plusieurs centaines
◦ 1979: 279 cas après consommation de langues de porc en gelée
 Formes cliniques
 bactérie pathogène opportuniste
 touche les personnes dont le système immunitaire est
altéré ou immature
 groupes à risques:
◦ femmes enceintes
◦ nouveau-nés
◦ personnes âgées, sujets immunodéprimés (cancers, cirrhoses,
hémodialysés, transplantés …)
 formes non invasives:
◦ diarrhées fébriles chez personnes immuno-compétentes
◦
 Formes cliniques invasives
 Formes materno-fœtales
◦ Listériose de la femme enceinte: syndrome pseudo-grippal,
◦ précédent l’accouchement de quelques jours à 14 j
◦ remontée fébrile à l’accouchement souvent prématuré avec
bactériémie
◦ Listériose néonatale précoce: n-né infecté in utero
 mortalité > 50%
Listériose néonatale tardive: contamination dans la période péri-
natale
8 à 60 j après la naissance : méningite
Listériose invasive de l’adulte
méningite (20 à 30 % mortalité)
 Modèle de bactérie invasive
 Invasion et multiplication de cellules non
phagocytaires de l’hôte et cellules phagocytaires
 Échappement aux systèmes de défense de l’hôte
 Facteurs de virulence présents uniquement dans les
souches invasives
 Traversée de trois barrières:
 Intestinale
 Méningée
 Placentaire
 Modèle de bactérie invasive

Mode de contamination alimentaire

 site principal d’entrée dans l’organisme:
◦ Intestin
◦ traversée de la barrière intestinale:
entérocytes
◦ plaques de Peyer, cellules M (phagocytaires)
◦ Après traversée de la barrière intestinale:
◦ Lm dans cellules phagocytaires de la lamina propria
 Par lymphe et sang circulant , Lm atteint le foie et la rate
 foie : Lm phagocytés par cellules de Kupfer : 90% détruites
◦ bactéries survivantes: infectent hépatocytes
 Modèle de bactérie invasive

 Lyse des hépatocytes: libération des Lm phagocytées par

neutrophiles et macrophages
Macrophages: listéricides ou multiplication intracellulaire

 Si l’état immunitaire de l’hôte est déficient:

 toutes les Lm ne seront pas détruites et peuvent atteindre par voie
sanguine,
 le cerveau ou le placenta
Pathogénie (1)
 Pathogénie (2)

Microscopie électronique

1/internalisation
2/ lyse de la vacuole
3/multiplication
intracytoplasmique
4/ déplacement
intracytoplasmique
5-6/protrusion endocytée
7/ vacuole double membrane
8/ lyse de la vacuole secondaire

M.E.: Dussurget et al, 2004

 Homme

In vivo A : interaction InlA – E-cadhérine spécifique d’espèce

Souris : Lm non entéropathogène / homme, cobaye, souris transgénique: Lm entéropathogène
B: coupes intestin grêle: souris transgénique (gauche) et non transgénique (droite) + Ac
monoclonaux (rouge) reconnaissant E-cadhérine humaine
C :multiplication de Lm dans lamina propria 48h après inoculation intragastrique de L.
Lecuit, 2005
Différents modèles d’adhésion et invasion
 Facteurs d’adhésion et d’invasion (1):
internalisation
 Internaline (InlA):

 Protéine bactérienne (800 aa)

 permet l’invasion de cellules non phagocytaires polarisées
 détourne la machinerie des jonctions adhérentes
 InlA impliquée dans l’invasion
 des entérocytes (passage de la barrière intestinale)
 des syncytiotrophoblastes (passage de la barrière placentaire)
 passage barrière méningée probable par ce mécanisme
Interaction de l’internaline A avec l’E-cadhérine
cadhérines: rôle dans l’adhésion cellulaire
glycoprotéines transmembranaires, dépendantes du Ca2+
 InlA interagit avec l’E-cadhérine
glycoprotéine transmembranaire retrouvée à la surface des
entérocytes
Permet le recrutement des caténines (α et β)
Interaction avec InlA dépend d’un aa en position 16 :
proline pour espèces permissives (homme, cobaye, bovins, ovins)
et
acide glutamique pour espèces non permissives (souris, rats)
La myosine VIIa génère l’énergie contractile nécessaire pour l’internalisation
A: schéma des villosités placentaires B et C: section d’une villosité placentaire
colorée à l’hématoxyline-éosine (B) et schéma histologique correspondant (C) .
La chambre intervilleuse est remplie de sang maternel. Le syncytiophoblaste
multinucléé recouvre les villosités.

Anatomie de la barrière maternofoetale

Lecuit, 2005
 Rôle de l’interaction internaline-E-cadhérine
dans le passage de la barrière placentaire
 Adhésion et invasion de Lm dans le
 syncytiotrophoblaste (STPB) humain en culture
 A : coupe d’une villosité placentaire centrée sur le
 STPB avec un Ac anti E-cadhérine. (vert)
 B : adhérence et entrée des bactéries exprimant
 l’internaline dans le STPB (en rouge)
noyaux en bleu
 Recrutement de E-cadhérine au site d’entrée
 des bactéries dans le STPB
 C: coupe d’une villosité infectée in vivo par Lm
 Les bactéries ont envahi le STPB , franchit
 la barrière placentaire
 Micro-abcès semblables à ceux observés dans
 la listériose maternofoetale

 Lecuit, 2005
 Internaline InlB
 (630 aa)
 gène localisé sur le même opéron que InlA

Induit remaniement du cytosquelette d’actine de la

cellule hôte
Aboutit à l’internalisation de Lm dans des cellules non
phagocytaires
 en détournant la voie de signalisation de l’HGF
 (hepatocyte growth factor)
 Récepteur: Met (récepteur de HGF)
 Internaline InlB

 Interagit avec le récepteur Met qui recrute les différentes molécules

adaptatrices.
 Le récepteur Met est endocyté par un mécanisme dépendant de la
clathrine
 Polymérisation–dépolymérisation de l’actine contrôlé par la
régulation de Lim kinase et la cofiline
 Autres facteurs de virulence
impliqués dans l’invasion par Lm
 Entrée dans les cellules cibles par les voies de InlA et
InlB nécessitent également des protéines de surface
 telles que Ami et Auto, des autolysines, remodelant la
paroi bactérienne
 Autres facteurs de virulence
impliqués dans l’invasion par Lm
Sortie des vacuoles d’internalisation (1):
 Lystériolysine O (LLO)
◦ protéine 60 kDa :cytolysine formant des pores,
cholestérol-dépendante
 LLO se lie aux membranes contenant du
 cholestérol, dans lesquelles elle forme des
 pores
 pH optimum acide (pH du phagosome 5,5 à 6,0)
 Autres facteurs de virulence
impliqués dans l’invasion par Lm
Sortie des vacuoles d’internalisation (2):
phospholipases : action synergique avec
LLO pour lyser les vacuoles primaires et
secondaires
PI-PLC: hydrolyse spécifiquement
phosphatidylinositol (PI)
PC-PLC: (phosphatidylcholine) hydrolyse une
vaste gamme de phospholipides
facilitent l’accès et la lyse par LLO
 Autres facteurs de virulence
impliqués dans l’invasion par Lm
motilité intracellulaire
 polymérisation de l’actine cellulaire
 induite par la protéine ActA (protéine de
 surface 639 aa)
 comète, queue filaments d’actine branchés
 taille de la queue d’actine reliée de façon linéaire à
 la vitesse de déplacement intracytoplasmique
 (0,005 à 0,25 μm / sec)
 formation de protrusions endocytées par cellules
 Autres facteurs de virulence
impliqués dans l’invasion par Lm
multiplication intracytoplasmique
 utilisation de nutriments du cytosol
 L.m. utilise glucose-1-phosphate
 dépend de perméase Hpt : (hexose
phosphate transporter)
Représentation schématique de Lm: gènes de virulence et localisation
des facteurs de virulence dans les différents compartiments
(cytosol,membrane, paroi, milieu extracellulaire) Dussurget et al 2004
 conclusions
Pathogène intracellulaire facultatif:
◦ macrophages et cellules épithéliales
 Traversée de trois barrières:
◦ intestinale, méningée, placentaire
 Internalisation:
InlA, InlB, LLO, PC-PLC, PI- PLC, ActA
 bibliographie
 Cossart P., Toledo-Arana A. Listeria monocytogenes, a
unique model in infection biology. Microbes Infect.
2008.

 Dussurget O., J. Pizarro-Cerda, P. Cossart. Molecular

 determinants of Listeria monocytogenes virulence.
Annu. Rev.Microbiol. 2004. 58:587-610.

 Lecuit M. Understanding how Listeria monocytogenes

targets and crosses host barriers. Clin. Microbiol. Inf.
2005. 11:430-436.