← - Prépar… Mikroscopia

Coloration bactériennes

esquimous
08 janv. 2017

Bonjour j'ai besoin de conseils pour colorer mes

bacteries , j'ai besoin de savoir s'il m'est
possible d'utiliser certaines techniques de
coloration en tant que particulier et sans risque ,
je m'apprête à commander mes colorants sur le
site de Marcel Lecomte...

Pour la coloration de Vago : j'aurais besoin de

vert de méthyle a 2% sur le site ils ont du vert
de methyle acetique sans la concentration je
peux l'utiliser quand meme ?

Pour la coloration de rhodes : pas de risque ?

Et enfin pour la coloration de koster me semble

irréalisable vous me confirmez ? Merci =)

Existe t'il d'autre coloration spécifique hors de

gram ?

Jean-Luc Bethmont (Picroformol)

08 janv. 2017

Bonsoir Julien,

Pour débuter facilement dans la coloration des

bactéries je te conseille le bleu de méthylène
car on peut se le procurer facilement, il est sans
danger en solution aqueuse (attention toutefois
si tu utilises une solution phéniquée: le phénol
est toxique).
Une fois que tu auras maîtrisé la confection d'
un frottis et ce type de coloration simple tu
pourras te lançer dans des colorations un peu
plus élaborées (Gram, Zhiehl, Fontana
Tribondeau et autres) .
Pour la coloration de Vago (que je connaissais
pas) il est indiqué sol aqueuse de vert de
methyl sur le site suivant:
http://www.bioltrop....ION_DE_VAGO.doc

Cordialement,
JL

Tryphon T
08 janv. 2017

Citation

Cette coloration est utilisée pour les colorations

de Treponema, Leptospira et Borrelia

Matériel :
Lames étalées, colorants.
Mode opératoire :
Réaliser un frottis du prélèvement
pathologique. Ne pas le fixer.
Recouvrir la lame d'une solution filtrée de
mercurochrome à 2% pendant 3 à 5
minutes
Laver à l'eau distillée
Colorer pendant 5 minutes avec une
solution filtrée de vert de méthyle à 2%.
Laver à l'eau distillée, laisser sécher
Examiner à l'objectif 100
L eptospira
Les bactéries apparaissent en violet clair sur un
fond presque incolore. Il est nécessaire de
disposer d'un bon microscope et d'un
observateur averti.

Préparation des réactifs :

Solution de mercurochrome à 2 % :
Ajouter 1 gramme de mercurochrome
broyé très finement (ou de rhodochrome
RP) à 50 ml d'eau distillée tiède. Agiter,
laisser reposer puis filtrer. Conserver en
flacon brun en filtrant de temps à autre.
Solution de vert de méthyle à 2 % :
Broyer très finement (important) 1
gramme de vert de méthyle dans un
mortier, ajouter 50 ml d'eau distillée
frémissante. Agiter, laisser reposer puis
filtrer. Conserver en flacon brun en filtrant
de temps à autre.
Ces réactifs se conservent environ un mois
(voir les résultats sur les lames). D'autres
colorations sont possibles pour colorer ces
bactéries (coloration de Fontana-Tribondeau
entre autre). Cependant, elles requièrent plus
de réactifs, ils sont plus chers et se conservent
moins bien.

Bonjour,

Quel intérêt de vouloir colorer des bactéries :

(llesquelles ? ) avec des méthodes aussi
exotiques ?
Vago
Rhodes
Koster

Cela n'a pas beaucoup d'intérêt, mais pourquoi

pas.

Je vois mercurochrome 2% ,:
Mercurochrome était un désinfectant pour les
petites écorchures de notre enfance.
De mémoire c'était de la "fluoresceine oxy
mercurique di bromée" cette indication sur le
flacon m'a assez fait rêver pour ne pas l'oublier..
Seulement le mercure est devenu "toxique" et le
mercurochrome a disparu donnant son nom au
laboratoire qui le fabriquait (Comme le Leica
pour Leitz).

Amicalement.

esquimous
08 janv. 2017

Merci pour les informations c'est juste que

j'aurais aimé avoir le plus possible de colorant
sous la main pour ne pas multiplier les
commandes =) je sais que c'est exotique et ça
semble compliqué mais c'est mon seul moyen
d'analyse des bactéries avec un matériel de
particulier ! Oui c'est prévu je commencerai par
le bleu de méthylène ensuite de Gram et enfin
les colorations un peu plus spécifiques . Bon du
coup sa devrait le faire pour le vert de methyle
se sera dans de l'acetone quoi pas de l'eau ...

Et vous en pensez quoi du microscope leica

biomed gmb.... ? Vous pensez que je pourrai
installer du CP dessus ?

patrice duros
10 janv. 2017

Bonsoir,
Comme l'a dit très justement Tryphon dans un
précédent message on ne comprend
absolument pas ce que vous voulez faire avec
vos colorations ?
Quel est l'intérêt d'avoir des colorants pour
réaliser une coloration de Köster utilisée, si ma
mémoire est bonne, dans la coloration de
certaines Brucella, voire d'hypothétiques
Bortella, ou Rhodococcus...
Bref, pour vous aucun intérêt ...
Je ne parle pas de la coloration de Rhodes
réservée à la mise en évidence des flagelles ?
En résumé, et pour tout dire je ne comprends
pas votre démarche.
Le bleu de méthylène, me semble un bon
colorant

esquimous
11 janv. 2017

Bonjour c'est juste pour observer differentes

choses de differentes maniére et j'aime bien
etre original

savant Cosinus
11 janv. 2017

Citation

Comme l'a dit très justement Tryphon dans un

précédent message on ne comprend
absolument pas ce que vous voulez faire avec
vos colorations ?

... la réponse est pourtant claire...

Citation

Bonjour c'est juste pour observer differentes

choses de differentes manière ...

esquimous
11 janv. 2017

Lool cosinus, je sais pas comment être plus

claire , coloré pour observer des bactéries de
manière un peu plus spécifique Mais c'est
surtout pour commencer quelque part mon truc
à moi c'est les bactéries

Tryphon T
11 janv. 2017

Bonjour Julien,

Citation

Bonjour à tous , je cherche à avoir un

Microscope d'occasion pas trop chère pour
pouvoir explorer les bactéries, j'attend la bonne
occasion on va dire , suite à cela pourquoi pas
explorer les différentes flores commensales
dont la pulmonaire qui m'intéresse tout
particulièrement.
Je crois qu'il me faudrait un objectif à contraste
de phase ( et sa coute chère !) et vu que j'ai un
budget d'environ 300 euros je vais commencé
par le Microscope et j'achèterai la caméra ,
l'objectif à contraste de phase et les colorants
un peu plus tard . Merci pour ce forum pleins
d'informations. Julien .

Je crois qu'on tourne en rond ! (ou que tu nous

fait tourner en rond?)
On a bien compris ce que tu veux faire, c'est ton
droit.
Si j'ai bien compris tu n'as pas de microscope,
tu n'y connais pas grand chose en microscopie,
et tu ne sait donc pas t'en servir.
Commence donc par acheter un microscope,
ensuite tu nous posera des questions de
fonctionnement si tu as des difficultés.
Et en dernier, quand tu seras au point, tu
pourras nous parler de colorations.

On ne te répondra sur la manière de labourer

quand tu auras le tracteur ! (Version moderne
de l'expression "il ne faut pas mettre la charrue
devant les bœufs")
A plus tard ...

Amicalement.

esquimous
11 janv. 2017

Okay alors à bientôt , cordialement .

patrice duros
11 janv. 2017

Comme l'a dit très justement Tryphon : "Je crois

qu'on tourne en rond ! (ou que tu nous fait
tourner en rond?)"
Je n'ai rien à ajouter,
Cordialement

esquimous
11 janv. 2017

http://dirlabosn.org...cteriologie.pdf
Je vais m'aider de ce PDF fort intéressant

patrice duros
11 janv. 2017

C'est le document dont vous êtes servi pour

poser vos questions, il y a deux jours...
Je n'ai d'ailleurs plus de commentaire à
formuler sur ce sujet.
Qui est clos, pour ma part.
Cordialement.

Modifié par patrice duros, 11 janvier 2017 -

05:40 .

esquimous
11 janv. 2017

Tous à fait Patrice

Partager Partager

Version complète Français (France)