UE2 BIOCELL – FICHE SYNTHESE – FECONDATION

Fécondation
• Fécondation = fusion de deux gamètes haploïdes → formation d’un zygote diploïde
• Résulte de processus préalables et de la fusion :
o Conditionnement des gamètes dans les voies génitales masculines et féminines
o Interaction gamétique
▪ Lieu : appareil génital féminin, dans l’ampoule des trompes de Fallope = ampoule tubaire

Trajet et préparation des SPERMATOZOÏDES dans les VOIES MASCULINES

• Acquisition de la mobilité progressive dans l’épididyme
• Mise en place de facteurs DÉcapacitants :
o Protéines ou glycoprotéines, cholestérol, zinc… qui sont :
▪ Adsorbés sur la membrane plasmique du spermatozoïde
▪ Et présents dans le liquide séminal
o Origine dans le plasma séminal (produits par vésicules séminales, prostate et épididyme)
o Rôle : stabiliser la membrane et éviter une capacitation prématurée
• → Sortie des testicules sous forme immature = rendus inaptes à la fécondation
o Sperme = spermatozoïdes + liquide séminal (= sécrétion de vésicules séminales et prostate)
▪ Ejaculation : 15 millions de spermatozoïdes par mL (pas tous fonctionnels)
Trajet et préparation des SPERMATOZOÏDES dans les VOIES FEMININES
• Les débarrasser du liquide séminal et les capaciter = restaurer leur capacité de fécondance
• Les sélectionner
• Réguler leur nombre

Etapes du trajet des spermatozoïdes

• Première barrière physiologique régulatrice
• Sécrétée par les glandes du col utérin
• Mucus glycoprotéique formant un système/trame fibrillaire (avec ponts S-S)
• Qualité définie selon :
o La filance, l’élasticité, la viscosité, le pH
o La cristallisation au contact de la chaleur en feuille de fougère
• Variations au cours du cycle → caractéristiques physico-chimiques optimales vers l’ovulation
o En début et en fin de cycle : trame plus dense
▪ Fait barrière au passage des spermatozoïdes
1ère étape : o En période péri-ovulatoire :
Traversée de ▪ Trame abondante, filante, élastique et fluide
la GLAIRE ▪ pH devient plus neutre (≠ pH acide du vagin)
CERVICALE → Facilite le passage des spermatozoïdes
du col utérin
• Rôles :
o Filtration : 2% des spermatozoïdes traversent
o Régulation des flux :
▪ Certains spz pris au piège des cryptes glandulaires (48h max ) →libération secondaire
o Protection / défense de la cavité utérine : présence de globules blancs
o Participation à la capacitation : élimination du plasma séminal
o Milieu favorable aux spermatozoïdes : pH moins acide et richesse en glucose
• Test de Huhner : élément diagnostic des troubles de la fertilité
o Permet de définir le score d’Insler en fonction des caractéristiques de la glaire cervicale et
de la présence ou non de spermatozoïdes
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• Remontée de l’utérus en 30 minutes à 1 heure

• Comment ?
2ème étape :
o Battements flagellaires
Transit
o Battements des cils de l’épithélium de l’endomètre
utéro-tubaire
o Contractions utérines (sous l’effet des prostaglandines du liquide séminal)
o Expression de protéines régulatrices à la surface des spermatozoïdes
• Sphincter utéro-tubaire : 2ème barrière physico-chimique, avec libération par vagues
• Isthme tubaire : 2ème lieu de stockage (ralentissement et immobilisation)
• Comment ?
3ème étape :
o Cellules ciliées de l’épithélium tubaire (→ flux à sens unique)
Trompes utérines
o Flux péritonéo-tubo-utérin (sécrétion de liquide par l’épithélium tubaire)
• Destination : jonction isthmo-ampullaire
• De nombreuses pertes de spermatozoïdes pendant le transit → reste quelques millions

La CAPACITATION des spermatozoïdes durant leur trajet dans le tractus FEMININ

• Capacitation = ensemble des modifications essentielles membranaires et cytoplasmiques permettant aux

spermatozoïdes d’acquérir leur pouvoir fécondant
o Suppression des facteurs stabilisants / décapacitants :
▪ Elimination du plasma séminal par le mucus/glaire cervical (phénomène réversible)
o Modulation positive / capacitante par des agents du tractus féminin
• Détail des modifications membranaires et cytoplasmiques :
▪ Enlèvement des protéines de revêtement (par GAGs, albumine, pH ≤6,5)
▪ Enlèvement du cholestérol (par albumine, HDL, LDL)
▪ Modification des chaines prosthétiques des protéines membranaires (glycosylations)
▪ Démasquage de sites de fixation avec le complexe cumulo-ovocytaire
▪ Modifications métaboliques : élimination du
cholestérol → influx de 𝐶𝑎2+ → activation flagellaire
• Conséquences de la capacitation :
o Augmentation de la fluidité membranaire (par enlèvement
du cholestérol)
o État d’hyperactivation = amplification des mouvements
flagellaires
o Démasquage de sites d’interaction avec l’ovule.

Préparation de L’OVOCYTE
• Correspond à la maturation ovocytaire terminale
• Se produit après la décharge ovulante de gonadotrophines (FSH et LH), dans les 36h qui précèdent
l’ovulation.
• 2 grandes étapes :
o Maturation nucléaire : reprise de la méiose
o Maturation cytoplasmique :
▪ → Acquisition de la capacité à être fécondé
▪ → Soutien au démarrage de la segmentation (réserves énergétiques pour l’embryon)

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• Avant le pic de LH :
o Les OMI (Ovocyte Meosis Inhibitor) inhibent le pré-MPF → pas de
MPF → Ovocyte bloqué en prophase I = stade de la vésicule
Maturation
germinative
nucléaire
• Après le pic de LH :
o Dissociation des cellules de la corona radiata → Levée de l’inhibition
→ différenciation en MPF → Reprise de la méiose → métaphase 2
• Migration des granules corticaux sous la membrane plasmique en couche régulière
• Migration des organites (Golgi, mitochondries) en position périnucléaire
Maturation • Modifications de la membrane plasmique de l’ovocyte :
cytoplasmique o Disparition des microvillosités
o Accumulation des filaments d’actine (en regard du fuseau de division)
• Synthèse de MPGF (Male Pronucleus Growth Factor) : pour décondenser le noyau du spz
• Mécanismes :
o Tension du follicule et de la paroi ovarienne (car augmentation du liquide folliculaire)
Ovulation o Actions enzymatiques : métalloprotéases
o Contraction de myofibroblastes autour du follicule
➔ Rupture du follicule en un point précis appelé le stigma

Transit de L’OVOCYTE dans les trompes

• Ovulation → Interception du Complexe Cumulo-Ovocytaire (CCO) par le pavillon de la trompe
o Complexe Cumulo-Ovocytaire (CCO) = ovocyte + cellules de la corona radiata + liquide folliculaire
▪ Présence de la zone pellucide + espace périvitellin autour de l’ovocyte II
- Epaisseur de la zone pellucide : 13 µm
- Composition de la zone pellucide : 4 glycoprotéines ZP1, ZP2, ZP3 et ZP4 + acide hyaluronique

• Les cils de l’épithélium des trompes

changent de sens pour faire migrer le CCO
vers les spz

• Délai de fécondabilité :
o Durée de vie d’un ovocyte : 24h après
l’ovulation
o Durée de vie d’un spermatozoïde : 72h environ
→ un rapport sexuel peut être fécondant environ 48h (voire 72h) avant l’ovulation et 24h après l’ovulation

Résumé des conditions préalables à la fécondation

• Éjaculation de bonne qualité : viscosité normale, aseptique, pH entre 7 et 8,5
Chez o Nombre de spermatozoïdes : 40 millions par éjaculat (➔ 15 millions au fond du vagin).
monsieur o Mobilité des spermatozoïdes (≥ 40% des spermatozoïdes)
o Morphologie normale des spermatozoïdes (≥4% de formes typiques).
Chez • Glaire cervicale : bonne viscosité, bonne constitution, pH alcalin
madame • Perméabilité des trompes et structures du tractus féminin indemnes.
Délai • Entre le rapport et l’ovulation : < à 3 – 4 jours.

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Les étapes de l’interaction gamétique

Attraction • Par des molécules chémo-attractives contenues dans le liquide folliculaire

des spz O SPECIFIQUES D’ESPECE
• Seuls les spermatozoïdes capacités peuvent pénétrer (hyperactivation du mouvement)
Traversée du • Réactions acrosomiques de quelques spz (PAS le spz fécondant) → libération de 2
cumulus isoformes de la hyaluronidase
« tous pour un » o Dissociation de l’acide hyaluronique, donc de la MEC, entre les cellules du cumulus →
facilite la traversée du spz fécondant
• Liaison du récepteur spermatique sp95 avec ZP3
o Sp95 = R à activité tyrosine kinase sur la membrane
1ère fixation
plasmique de l’apex du spz
• SPECIFIQUE D’ESPECE
Réaction acrosomique • RTK activé → augmentation du Ca2+ intracellulaire → PLA →
(RA) fusion de la MP avec la membrane acrosomique externe →
Interaction avec du spermatozoïde Libération du contenu de l’acrosome :
la zone pellucide fécondant o Acrosine et hyaluronidase
• Liaison du récepteur spermatique sp17 avec ZP2
o Sp17 à activité hyaluronidase, présent sur la membrane
acrosomique interne du spz (mise à nue grâce à la RA)
2ème fixation
• Puis traversée de la zone pellucide en biais grâce à :
o Battements du flagelle
o Digestion enzymatique de la ZP par l’acrosine
• Liaison puis fusion entre la membrane de la zone équatoriale du spz et les microvillosités
Liaison puis de l’ovocyte
fusion des o Interaction entre protéines ADAM du spz et intégrine α6β1 sur l’ovocyte
gamètes ▪ Possible uniquement si le spz a fait sa RA
o Fusion grâce à la liaison entre IZUMO (sur le spz) et JUNO (sur l’ovocyte)
• Libération et activation d’un facteur spermatique activateur (PLC Zeta) → Elévation rapide
et massive du Ca2+ libre intracellulaire (grâce à activation des canaux calciques (IP3) et de
la calréticuline)
Activation de o → Eveil de l’activité métabolique de l’ovocyte
l’ovocyte ▪ Reprise et achèvement de la 2ème division de la méiose de l’ovocyte
▪ Réaction corticale de l’ovocyte : exocytose des granules corticaux → zone
pellucide imperméable à d’autres spermatozoïdes, donc cela garantit la
monospermie (= empêche la polyspermie)
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Formation et rapprochement des pronucleus

Formation du • Achèvement de la méiose → expulsion du 2ème globule polaire dans l’espace
pronucleus femelle périvitellin
• Seul le noyau et le centriole proximal pénètrent dans le cytoplasme
• Les mitochondries du spz sont détruites → Transmission exclusive des mitochondries
d’origine maternelle au futur embryon.
Formation du • Au niveau du noyau du spz :
pronucleus mâle o Elimination de l’enveloppe nucléaire
o Décondensation des n chromosomes
▪ Remplacement des protamines par des histones ovocytaires
o Reconstitution d’une enveloppe nucléaire
• Rapprochement des 2 pronucléus 12h après entrée du spermatozoïde
• Regroupement des mitochondries autour des pronucléus permettant la mobilité et
Rapprochement
l’apport énergétique nécessaire à la réplication de l’ADN
• Phénomène de regroupement des lots chromosomiques parentaux = AMPHIMIXIE

Conséquences de la fécondation
Rétablissement de
• Désintégration de la membrane de chaque pro-noyau dont les chromosomes se
la diploïdie
disposent en métaphase sur le fuseau mitotique achromatique → SYNGAMIE
(46 chromosomes)
• Sexe ratio = 1 (une chance sur 2). Le sexe est déterminé par le spermatozoïde.
• Serait-il possible de choisir le sexe de son enfant ?
o Méthodes artisanales
Détermination du
o Les spz porteurs d’un X seraient plus résistants que ceux porteurs d’un Y → Si le
sexe de l’individu
rapport fécondant est avant l’ovulation, ça sera plutôt une fille.
o Diagnostic préimplantatoire (DPI) autorisé en France uniquement si risque de
pathologies liées à l’X (mais autorisé dans d’autres pays)

• 1 individu = recombinaison génétique à partir de 2 demi-génomes

o Complémentarité fonctionnelle des génomes paternels et maternels (en raison de
l’empreinte parentale)
Différence des ▪ Si 2 noyaux femelles sont recombinés → embryon gynogénote, létal (pas de
apports parentaux trophoblaste)
▪ Si 2 noyaux mâles sont recombinés → embryon androgénote, létal (pas
d’embryon, trophoblaste uniquement)
o Apport mitochondrial : uniquement maternel

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Anomalies de la fécondation
• Chez l’homme :
o Azoospermie (sécrétoire ou excrétoire)
o Altération des paramètres spermatiques (concentration, mobilité, forme..)
Anomalies de la • Chez la femme :
rencontre des o Anomalies de la glaire cervicale (absente, hostile, ACAS…)
gamètes o Anomalies de l’épithélium utérin
o Anomalies des trompes (absence, obstruction, lésions post-infectieuses…)
o Anomalies de l’ovulation (SOPK, hypogonadisme…)
o Cas particulier : endométriose
• Capacitation des spz
• Réaction acrosomique
Anomalies de • Maturation ovocytaire
l’interaction • Récepteurs spermatiques / ZP
gamétique • Activation ovocytaire
• Mise en place du fuseau
• Réaction corticale (polyzoospermie possible)
• Anomalies du nombre de chromosome :
o Aneuploïdie
▪ Monosomie → une seule est viable : le syndrome de Turner (45,X)
▪ Trisomie autosomique (ex : trisomie 21)
Anomalies du
▪ Trisomie gonosomique
conceptus
o Polyploïdie (tri ou tétraploïde non viable)
• Anomalies de la structure des chromosomes (délétions, inversion, duplication,
translocations…)
→ Fausses couches spontanées précoces ou tardives

Moyens de contraception
• L’outil doit être réversible → A distinguer des moyens de stérilisation
• Obstacle à la gamétogenèse (empêchent la fécondation) : contraception orale
• Obstacles à l’émission des gamètes (empêchent la fécondation) : contraception orale ou vasectomie
• Obstacles à la rencontre des gamètes (empêchent la fécondation) : contraception orale/abstinence/ligature
des trompes
• Obstacles à la nidation : contraception orale et DIU (Empêchent la nidation)
• Obstacles à la poursuite de la nidation = RU 468

• Pilule oestroprogestative :
o Bloque l’ovulation
o Atrophie la muqueuse de l’endomètre
o Modifie la glaire cervicale
• DIU ou stérilet
o Toxicité sur les spermatozoïdes (cuivre)
o Modifie la glaire (hormonal)
o Atrophie la muqueuse de l’endomètre (hormonal)
o Mais ne bloque pas l’ovulation