Noms :

Prénoms :
Groupe et paillasses :

TP : Principe de chimie analytique : Chromatographie et

spectrophotométrie

Partie 1 : Dosage du complexe coloré « cuprizon + Cu2+ » par spectrophotométrie

1.1 Calculer le coefficient d’absorption molaire du complexe (graphique n°1) :

1.2 Concentration en Cu2+ de la solution initiale :

A. Graphique :

B. Formule mathématique :

1.3 Discussion des résultats :

1.4 Questions de réflexion
Expliquer pourquoi la précision et la sensibilité sont meilleures lorsqu’on effectue les
mesures d’absorbance à la longueur d’onde λMax ?

Avec l’aide des annexes I et II, identifier les éventuels déchets toxiques produits, le
pictogramme qui doit leur être associé et la manière de s’en débarrasser.

Voici trois cellules remplies avec la même solution de Cu2+ à 1 mol/l. Commentez les
différences d’intensité de couleur observée sur la photographie de droite.
Partie 2 : Séparation de deux colorants par chromatographie sur colonne d’alumine

2.1 Relevé du spectre d’absorbance du colorant de référence (graphique n°2 et 3) :

Couleur de référence : Bleu de méthylène

Λ (nm) A Λ (nm) A
450 580
460 590
470 600
480 610
490 620
500 630
510 640
520 650
530 660
540 670
550 680
560 690
570 700

Déterminer λMax : Rouge de crésol

Couleur de référence :

Λ (nm) A Λ (nm) A
450 580
460 590
470 600
480 610
490 620
500 630
510 640
520 650
530 660
540 670
550 680
560 690
570 700

Déterminer λMax :
2.2 Relevé des absorbances des solutions d’expérience à λMax :
Bleu de méthylène :

Rouge de crésol :

2.3 Calcul de rendement :

Bleu de méthylène :

Rouge de crésol :

2.4 Discussion des résultats

2.5 Questions de réflexion

Déterminer la concentration dans le sirop de menthe de chaque colorant E102 et E131

sachant que λ640(E131) = 93232 l/mol.cm et λ430(E102) = 21925 l/mol.cm

L’absorbance mesurée pour le mélange A + B à deux longueurs d’onde 520 et 580 nm

vaut respectivement 0,34 et 0,72 (chemin optique de 1 cm). Déterminer la concentration
molaire de chaque colorant dans le mélange, en utilisant les données suivantes :
Colorant A : λ520 nm = 1000 l/mol.cm et λ580 nm = 0 l/mol.cm
Colorant B : λ520 nm = 100 l/mol.cm et λ580 nm = 500 l/mol.cm
Voici le spectre d’absorbance (zone UV) d’une solution étalon de caféine en milieu acide
(formule brute : C8H10N4O2) à 1,00 10-4 mol/L.

On mesure l’absorbance à 271 nm (chemin optique de 1 cm) des solutions préparées

avec 5 ml de boisson pour 100 ml de solution de travail notée ST. On obtient les résultats
suivants : ST (coca cola) = 0,192 ; ST (pepsi) = 0,217 ; ST (redbull) = 0,442 et ST (café) =
0,584.

a) Déterminer le coefficient d’absorption molaire de la caféine à 271 nm.

b) En utilisant ces données ci-dessus, déterminer la quantité de caféine
(exprimée en mg/100 ml) de chacune des boissons.
Avec l’aide des annexes I et II, identifier les éventuels déchets toxiques produits, le
pictogramme qui doit leur être associé et la manière de s’en débarrasser.
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