Questions

Questions
Nucléole
Nucléole
Noyau
Noyau Interphasique
Interphasique
 Comment
Comment se se fait
fait la
la division
division
cellulaire
cellulaire chez
chez les
les cellules
cellules anuclées?
anuclées?

A
A partir
partir de
de cellules
cellules souches
souches multipotentes
multipotentes
se
se trouvant
trouvant auau niveau
niveau de
de la
la moelle
moelle
osseuse
osseuse
CYCLE
CYCLE CELLULAIRE
CELLULAIRE (Interphase
(Interphase et
et mitose)
mitose)
 Plan
Plan de
de présentation
présentation

--Interphase
Interphase((Phase
PhaseG1,
G1,Phase
PhaseS,
S,Phase G2))
PhaseG2

-Réplication
-Réplicationde
del’ADN
l’ADN

-Transcription
-Transcriptionde
del'ADN
l'ADN
 Structure
Structuredes
desacides
acidesribonucléiques
ribonucléiques

 Mécanisme
Mécanismede
delalatranscription
transcription

 Les
Lesproduits
produitsde
delalatranscription
transcriptionde
del'ADN
l'ADN

 Régulation
Régulationdu
ducontrôle
contrôlede
delalatranscription
transcription
 OBJECTIFS
OBJECTIFS DU
DU COURS
COURS

 décrire
décrire les
les différentes
différentes étapes
étapes du
du cycle
cycle cellulaire
cellulaire

 décrire
décrire la
la réplication
réplication de
de l’ADN
l’ADN dans
dans les
les cellules
cellules
procaryotes
procaryotes et et eucaryotes
eucaryotes

 décrire
décrire le
le mécanisme
mécanisme de
de la
la transcription
transcription de
de l’ADN
l’ADN
L’INTERPHASE
L’INTERPHASE
 PHASE
PHASE G1
G1

Succède
Succède àà une
une mitose.
mitose. Durée
Durée variable
variable selon
selon la
la nature
nature des
des
cellules
cellules étudiées
étudiées (en
(en général
général 55 àà 10h
10h chez
chez les
les mammifères).
mammifères).

 Pas
Pasde
desynthèse
synthèsed'ADN
d'ADNauau cours
coursdedecette
cettephase
phase période
périodede
de
présynthèse
présynthèseou
oude
depré
pré duplication
duplication(2n
(2nchromosomes).
chromosomes).

 La
Laphase
phaseG1
G1est
est la
laphase
phasede
decroissance
croissancecytoplasmique.
cytoplasmique.Elle
Elleest
est
caractérisée
caractériséepar
parla
lasynthèse
synthèsedes
desprotéines
protéines
 PHASE
PHASE SS

Durée
Durée relativement
relativement constante
constante (6
(6 àà 8h).
8h). Elle
Elle est
est
Caractérisée
Caractérisée par par la
la réplication
réplication de
de la
la totalité
totalité de
de l'ADN
l'ADN
nucléaire
nucléaire:: la
la quantité
quantité d'ADN
d'ADN double
double auau cours
cours de
de cette
cette
phase
phase (4n).
(4n).

 Réplication
Réplication de
de l'ADN
l'ADN dans
dans les
les cellules
cellules procaryotes
procaryotes

 Réplication
Réplication de
de l'ADN
l'ADN dans
dans les
les cellules
cellules eucaryotes
eucaryotes
PHASE
PHASE SS
RÉPLICATION
RÉPLICATION DE
DE L'ADN
L'ADN DANS
DANS LES
LES CELLULES
CELLULES
PROCARYOTES
PROCARYOTES

 La
La réplication
réplication est
est semi-conservative
semi-conservative ((Meselson
Meselsonet
et Stall)
Stall)

 La
La réplication
réplication est
est également
également orientée
orientée (Cavin)
(Cavin)

 La
La réplication
réplication est
est bidirectionnelle,
bidirectionnelle,

Les
Lesenzymes
enzymesintervenant
intervenantdans
danslalaréplication
réplication ::ADN
ADNpolymérases
polymérases
intervenant
intervenantdans
danslalaséparation
séparationdes
desdeux
deuxbrins
brinsl'un
l'unde
del'autre
l'autreetetdans
danslala
réplication.
réplication.
RÉPLICATION
RÉPLICATION DE
DE L'ADN
L'ADN DANS
DANS LES
LES CELLULES
CELLULES
EUCARYOTES
EUCARYOTES

-- La
La réplication
réplication dans
dans les
les cellules
cellules eucaryotes
eucaryotes est
est également
également semi-
semi-
conservative,
conservative, orientée
orientée et
et bidirectionnelle.
bidirectionnelle.

-- se
se fait
fait en
en plusieurs
plusieurs sites:
sites: unités
unités de
de réplications
réplications ou
ou réplicons.
réplicons.

-- Le
Le réplicon
réplicon possède
possède un un système
système de de régulation
régulation autonome
autonome formé
formé
par
par lele gène
gène initiateur
initiateur de
de lala réplication
réplication et
et lele point
point d'initiation
d'initiation de
de lala
réplication.
réplication.
 RÉPLICATION DE L'ADN

 L'ADN
L'ADNpolymérase
polyméraseIIIIIIassure
assurelalaréplication
réplicationen
ense
sedéplaçant
déplaçantde
de
l'extrémité
l'extrémité3'3'vers
versl'extrémité
l'extrémité5'5'c’c’est
estààdire
diredans
dans un
unseul
seulsens
sens((polarité
polarité
de
deréplication
réplication).).

 LaLasynthèse
synthèsese sefait
faitséparément
séparémentsur surchaque
chaquebrin:
brin:d'abord
d'abordsur
surlelebrin
brin11
(brin
(brinavancé
avancé))dans
danslelesens
sens3'-
3'-5'5'sur
surune
unecourte
courtedistance,
distance,puis
puissur
surlele
brin
brin22(brin
(brinretardé)
retardé)dans
danslelesens
sens3'-3'-5'5'(puisque
(puisquebrins
brinsanti
antiparallèles),
parallèles),
 lelebrin
brinretardé
retardéformant
formantuneuneboucle.
boucle.

 La
Lamolécule
moléculed'ADNd'ADNpolymérase
polyméraselitlitles
lesmolécules
moléculesd'ADN
d'ADNdans
danslelesens
sens
3'-
3'-5'5'etetsynthétise
synthétiseune
unemolécule
molécule5'-
5'-3'3'anti
antiparallèle
parallèleau
aubrin
brinprécédent.
précédent.
Polymérisation
Polymérisation réaction
réactionentre
entre3'OH
3'OHd'und'unbrin
brinen
encroissance
croissanceetetun
un
nucléoside
nucléoside5'Triphosphate
5'Triphosphate(dNTP
(dNTP4) 4)
 APPLICATION
APPLICATION PCR
PCR

 Une
Uneprimase
primase(ARN
(ARNpolymérase)
polymérase)se
sefixe
fixesur
surlelebrin
brinparental
parentaletetélabore
élabore
un
unfragment
fragmentd'ARN
d'ARN(100(100bases
basespaires)
paires)qui
quiamorce
amorcelaladuplication
duplicationde
de
l'ADN
l'ADNen
enjouant
jouantlelerôle
rôlede
dematrice.
matrice.

 Une
Uneligase:
ligase:lalamolécule
moléculeinitiale
initialed'ARN
d'ARNl'amorce
l'amorceest
estdétruite
détruitepar
parune
une
endonucléase.
endonucléase.Les Lesyeux
yeuxde
deréplication
réplicationconfluent
confluentetetlalamolécule
moléculed'ADN
d'ADN
est
estrépliquée
répliquéedans
danssa
satotalité.
totalité.
 EN
EN RESUME
RESUME

Interviennent
Interviennent lors
lors de
de la
la réplication:
réplication:

 Hélicase
Hélicase et
et une
une protéine
protéine Single
Single Standard
Standard DNADNA
Binding
Binding SSB:
SSB: protéine
protéine déstabilisant
déstabilisant l’l’ Hélicase
Hélicase :: qui
qui
permettent
permettent lele déroulement
déroulement de de la
la double
double hélice.
hélice.

 Gyrase
Gyrase qui
qui introduit
introduit des
des super
super tours
tours négatifs.
négatifs.

 Primase
Primase qui
qui permet
permet la
la synthèse
synthèse d'amorces
d'amorces d'ARN.
d'ARN.

 DNA
DNA polymérase
polymérase III
III qui
qui poursuit
poursuit la
la synthèse
synthèse de
de
l'ADN
l'ADN sur
sur l'amorce.
l'amorce.
 EN
EN RESUME
RESUME

Interviennent
Interviennent lors
lors de
de la
la réplication:
réplication:

 DNA
DNA polymérase
polymérase II qui
qui hydrolyse
hydrolyse les
les amorces
amorces et
et les
les
remplace
remplace par
par de
de l'ADN.
l'ADN.

 ligase
ligase qui
qui relie
relie les
les fragments
fragments d'ADN
d'ADN (fragments
(fragments 5'
5'
d'Okasaki):
d'Okasaki): liaison
liaison 5'P5'P -- 3'OH.
3'OH.

 désoxynucléosides
désoxynucléosides Triphosphates
Triphosphates (4)
(4) ++ Mg2+.
Mg2+.
 PHASE
PHASE G2
G2

*Plus
*Plus courte
courte d'une
d'une durée
durée de
de 44 àà 55 heures,
heures, elle
elle débute
débute dès
dès que
que
lala Réplication
Réplication du
du DNA
DNA est
est achevée.
achevée.

*Les
*Les synthèses
synthèses dede RNA
RNA persistent
persistent tandis
tandis que
que lala Quantité
Quantité de
de
DNA
DNA est
est doublée
doublée de
de celle
celle observée
observée au au cours
cours de
de lala phase
phase G1
G1
 TRANSCRIPTION
TRANSCRIPTION DE
DE L’ADN
L’ADN

Elle
Elle s'effectue
s'effectue pendant
pendant toutes
toutes les
les phases
phases de
de l'interphase.
l'interphase. La
La
transcription
transcription dudu DNA
DNA correspond
correspond àà lala synthèse
synthèse d'une
d'une
molécule
molécule d'ARN
d'ARN àà partir
partir d'un
d'un seul
seul brin
brin d'ADN.
d'ADN.
 STRUCTURE
STRUCTURE DES
DES ACIDES
ACIDES RIBONUCLÉIQUES:
RIBONUCLÉIQUES:

L'ARN
L'ARN est
est un
un polynucléotide
polynucléotide toujours
toujours monocaténaire.
monocaténaire. Les Les
constituants
constituants dede base
base desdes nucléotides
nucléotides sont
sont lesles mêmes
mêmes que que
ceux
ceux du
du DNA,
DNA, àà l'exception
l'exception du du pentose
pentose qui
qui estest lele ribose,
ribose, d'une
d'une
base
base pyrimidique,
pyrimidique, l'uracile,
l'uracile, qui
qui remplace
remplace lala thymine
thymine toujours
toujours
absente
absente de
de l'ARN.
l'ARN.
 STRUCTURE
STRUCTURE PRIMAIRE
PRIMAIRE DE
DE L’ARN
L’ARN

lala disposition
disposition desdes nucléotides
nucléotides de de lala chaine
chaine de de l'ARN
l'ARN est
est lala
même
même que que celle
celle de
de l'ADN.
l'ADN.
-- Unité
Unité dede transcription
transcription :: Le Le brin
brin d'ADN
d'ADN transcrit
transcrit déterminé
déterminé
par
par lele sens
sens dede déplacement
déplacement de de l'ARN
l'ARN polymérase.
polymérase. La La
synthèse
synthèse ayant
ayant lieu
lieu dans
dans lele sens
sens 5'- 5'- 3‘3‘
-- Si
Si l'ARN
l'ARN polymérase
polymérase se se déplace
déplace de de gauche
gauche àà droite
droite
synthétisant
synthétisant 5'5' -- 3'3' c'est
c'est lele brin
brin 3'-5'
3'-5' qui
qui sera
sera copié
copié c.à.d
c.à.d lele brin
brin
supérieur.
supérieur.
-- Par
Par contre
contre sisi elle
elle sese déplace
déplace de de droite
droite àà gauche
gauche synthétisant
synthétisant
3'-5',c´est
3'-5',c´est lele brin
brin inférieur
inférieur quiqui sera
sera copié.
copié.
 MECANISME
MECANISME DE
DE LA
LA TRANSCRIPTION
TRANSCRIPTION

C'est
C'est une
une enzyme,
enzyme, l'ARN
l'ARN polymérase-dépendante,
polymérase-dépendante, qui qui assure
assure
lala formation
formation d'une
d'une molécule
molécule d'ARN
d'ARN parpar association
association des des
nucléotides
nucléotides dans dans un
un ordre
ordre prédéterminé
prédéterminé par par lala molécule
molécule
d’ADN
d’ADN
 La
La transcription
transcription s'effectue
s'effectue en
en quatre
quatre étapes
étapes
-La
-La reconnaissance
reconnaissance du du promoteur,
promoteur,
-Le
-Le début
début dede synthèse
synthèse àà partir
partir du
du site
site d'initiation,
d'initiation,
-La
-La copie
copie du
du gène,
gène,
-La
-La fin
fin de
de synthèse.
synthèse.
MECANISME DE LA TRANSCRIPTION
(Suite)

 Reconnaissance
Reconnaissance du
du promoteur
promoteur..
Le
Lepromoteur
promoteurest
estune
uneséquence
séquencespéciale
spécialede
denucléotides
nucléotideslocalisés
localiséssur
sur
l'ADN
l'ADNau
audébut
débutdu
dugène.
gène.L'ARN
L'ARNpolymérase
polymérasesesefixe
fixesur
surlelepromoteur
promoteur
grâce
grâceau
aupolypeptide
polypeptidesigma.
sigma.

 Début
Début de
de synthèse
synthèse::
Le
Lesite
sited'initiation
d'initiationouousite
sitede
dedépart
départdedelalatranscription.
transcription.Le
Ledébut
débutdedelala
synthèse
synthèsede del'ARN
l'ARNse sefait
faitààpartir
partird'un
d'unsite
sitephysiquement
physiquementdifférent
différentdu
du
promoteur
promoteur::C'est
C'estlelesite
sited'initiation.
d'initiation.Dès
Dèsque quel'ARN
l'ARNpolymérase
polyméraseest
estfixé
fixé
sur
surce
cesite,
site,lelepolypeptide
polypeptidese sedétache
détache;;La Lapolymérase
polyméraseassure
assureseule
seulelala
lecture
lectureetetlalasynthèse.
synthèse.
 MECANISME DE LA TRANSCRIPTION
(Suite)
 Copie
Copiedu
dugène
gène::
L'ARN
L'ARNpolymérase
polymérase"lit"
"lit"un
unbrin
brinde
delalamolécule
moléculed'ARN
d'ARNen ensesedéplaçant
déplaçantdans
danslelesens
sens3'-
3'-
5'.
5'.La
Lamolécule
moléculed'ARN
d'ARNest estpolarisée
polarisée(comme
(commel'ADN).
l'ADN).La Latranscription
transcriptionde
del'ADN
l'ADNen enARN
ARN
nécessite
nécessitelalasélection
sélectiondes
desribonucléotides
ribonucléotidescomplémentaires
complémentairesappropriés
appropriés(les
(les
précurseurs
précurseursATP,ATP,GTP,
GTP,CTP,CTP,UTP)
UTP)etetlalaformation
formationde deliaisons
liaisonsphosphodiester
phosphodiesterentre
entre
les
lesribonucléotides
ribonucléotidesvoisins
voisinsauaufur
furetetààmesure
mesurequequelalamolécule
moléculed'ARN
d'ARNsesedéplace
déplacelele
long
longdudubrin.
brin.

 Fin
Finde
delalasynthèse
synthèse..
La
Lasynthèse
synthèses'achève
s'achèveenencertains
certainssites
sitesde
delalamolécule
moléculed'ARN
d'ARN("signaux"
("signaux"
de
defin
finde
delecture).
lecture).L'arrêt
L'arrêtdedelalasynthèse
synthèsenenepeut
peutse
sefaire
fairequ'en
qu'enprésence
présence
d'une
d'uneprotéine
protéined'und'unPM
PMde de50.000d,
50.000d,lelefacteur
facteurp(rho).
p(rho).AAlalafin
finde
delala
lecture,
lecture,lalamolécule
moléculed'ARN
d'ARNse sedétache
détachededelalamolécule
moléculed'ADN
d'ADNainsi
ainsique
que
l'ARN
l'ARNpolymérase-DNA
polymérase-DNAdépendante.
dépendante.
 LES
LES PRODUITS
PRODUITS DE
DE LA
LA TRANSCRIPTION
TRANSCRIPTION

La
La transcription
transcription de de l'ADN
l'ADN aboutit
aboutit ÀÀ lala formation
formation dede l'ARNm
l'ARNm
qui
qui estest une
une "copie"
"copie" dudu gène,
gène, mais
mais aussi
aussi de de l'ARNr
l'ARNr et et de
de
l'ARNt
l'ARNt et et de
de Sn
Sn ARN
ARN quiqui sont
sont indispensables
indispensables àà lala traduction
traduction
de
de l'ARNm,
l'ARNm, mais
mais quiqui ne
ne peuvent
peuvent eux-mêmes
eux-mêmes être être traduits.
traduits.
L'ARNm
L'ARNm récemment
récemment synthétisé
synthétisé apparait
apparait dansdans lele noyau
noyau soussous
lala forme
forme dede fibrilles
fibrilles périchromatiques.
périchromatiques.
 REGULATION
REGULATION DU
DU CONTRÔLE
CONTRÔLE DE
DE LA
LA
TRANSCRIPTION
TRANSCRIPTION

Les
Les cellules
cellules règlent
règlent leur
leur synthèse
synthèse en en fonction
fonction de
de leurs
leurs
besoins
besoins etet des
des variations
variations du du milieu
milieu ambiant.
ambiant. Cette
Cette adaptation
adaptation
nécessite
nécessite unun contrôle
contrôle de
de l'activité
l'activité des
des gènes,
gènes, qui
qui s'effectue
s'effectue
soit
soit par
par modification
modification de de l'aptitude
l'aptitude dede l'ARN
l'ARN polymérase
polymérase àà
reconnaître
reconnaître lele promoteur,
promoteur, soit soit par
par action
action sur
sur un
un site
site voisin
voisin du
du
promoteur
promoteur dénommé..
dénommé..