MODALITES DE VALIDATION ET DE CONTROLE DES

AUTOCLAVES DANS LE CADRE DE LINACTIVATION DES

DECHETS RESULTANTS DUTILISATIONS CONFINEES
DORGANISMES GENETIQUEMENT MODIFIES
ET/OU PATHOGENES

DO Expertise, Prestations de service et Relations clients

Service de Bioscurit et Biotechnologie
Rue Juliette Wytsman 14
1050 Bruxelles | Belgique
www.wiv-isp.be

Service de Bioscurit et Biotechnologie| Septembre 2011 | Bruxelles, Belgique

Editeur responsable : Dr Johan Peeters, Directeur gnral | Rue J. Wytsman 14 | 1050 Bruxelles
N de rfrence interne : ISP/41/AL/11-0912
N de dpt: D/2011/2505/39

Dr Amaya Leunda
Mme Chuong Dai Do Thi
M Bart Brosius
Dr Nicolas Willemarck
Dr Cline Verheust
Mme Bernadette Van Vaerenbergh
Service de Bioscurit et Biotechnologie
Chef de service : Dr Philippe Herman

Le projet est financirement soutenu par

La Rgion de Bruxelles-Capitale - Bruxelles-Environnement - Institut bruxellois pour la Gestion de
l'environnement (IBGE)
La Rgion flamande - Gouvernement flamand - Dpartement Leefmilieu, Natuur en Energie (LNE)
La Rgion wallonne - Service Public de Wallonie - Direction Gnrale Oprationnelle de l'Agriculture,
des Ressources Naturelles et de l'Environnement (DGARNE)

D/2011/2505/39

Remerciements
Les auteurs remercient le Dr Philippe Herman et le Dr Ir Katia Pauwels pour leur contribution
importante la ralisation de ce document.

Dit document bestaat ook in het Nederlands

Institut Scientifique de Sant Publique | Wetenschappelijk Instituut Volksgezondheid, Bruxelles 2011.

Ce rapport ne peut tre reproduit, publi ou distribu sans laccord du WIV-ISP.
D/2011/2505/39

Table des matires :

1.

Objectifs .......................................................................................................................................... 5

2.

Introduction ..................................................................................................................................... 5

3.

La strilisation la vapeur deau .................................................................................................... 6

4.

Principe de strilisation par la vapeur deau................................................................................... 7

5.

Validation de lautoclave ................................................................................................................. 9

5.1.

Mise en service de lautoclave ............................................................................................. 10

5.2.

Qualification oprationnelle.................................................................................................. 10

5.3.

Qualification de performance ............................................................................................... 10

5.4.

La maintenance.................................................................................................................... 11

6.

Le contrle en routine ................................................................................................................... 11

6.1.

Les contrles permanents.................................................................................................... 11

6.2.

Les contrles priodiques .................................................................................................... 13

7.

Inactivation des dchets contamins issus des utilisations confines dorganismes GM et/ou

pathognes............................................................................................................................................ 14
8.

Conclusion .................................................................................................................................... 20

9.

Annexes ........................................................................................................................................ 21
Annexe 1 : Gestion des dchets et/ou matires biologiques issus des activits dutilisations
confines dorganismes GM et/ou pathognes................................................................................. 21
Annexe 2 : Pour en savoir plus sur la strilisation la vapeur deau. .............................................. 24
Annexe 3 : Gestion des Dchets biologiquement contamins et lignes directrices et filires
dlimination en Rgion de Bruxelles-Capitale ................................................................................ 26

10.

Rfrences ............................................................................................................................... 29

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1. Objectifs
Le sujet abord dans ce document entre dans le cadre gnral de la gestion des dchets rsultants
des activits dutilisations confines de (micro-)organismes gntiquement modifis (OGM) et/ou
pathognes telle quelle est prvue par la lgislation belge. La validation et le contrle de linactivation
de ces dchets par la vapeur deau en utilisant un strilisateur, aussi appel autoclave, sans tape de
broyage sont spcifiquement dvelopps ici.

Le document dcrit dabord lappareil de strilisation la vapeur deau et son principe de

fonctionnement. Il discute ensuite les questions relatives la validation et au contrle de linactivation
des dchets contamins biologiquement. Dune part, il fournit des informations aux autorits
comptentes sur les procds qui sont appliqus, dans quelles situations et comment ils peuvent
tre appliqus. Dautre part, il donne aux utilisateurs quelques recommandations pour mettre en
place une validation de lautoclave et une procdure de contrle de linactivation des dchets
adaptes leurs activits.

2. Introduction
Les dchets issus des activits dutilisations confines dOGM et/ou pathognes font partie des
dchets dangereux tels que dfinis dans la Directive europenne 78/319/CEE (1). Celle-ci impose aux
1
Etats membres une gestion rigoureuse et stricte des dchets dangereux . Cette gestion comprend

lidentification et lenregistrement des dchets, la sparation des diffrents types de dchets,

lvacuation, le conditionnement, le stockage et le transport de ces dchets.

En Belgique, la gestion des dchets est une matire rgionalise. Les arrts rgionaux relatifs aux
utilisations confines dOGM et/ou pathognes prvoient que les dchets biologiques (milieux de
culture, etc.), les rsidus biologiques (cadavres et excrments danimaux infects, litire, plantes
contamines, substrats contamins, etc.), ainsi que le matriel contamin (verrerie, cages, etc.),
provenant de laboratoires, danimaleries, de serres, de chambres de culture, de chambres
hospitalires et dinstallations de procds grande chelle doivent subir une procdure
dinactivation approprie et valide avant leur limination (2, annexe 1). Linactivation, dfinie
comme tant la suppression de lactivit biologique des (micro-)organismes, est obligatoire
indpendamment de la classe de risque de lorganisme et indpendamment de la classe de risque
de lutilisation confine (2). Le choix d'une mthode approprie d'inactivation dpend de plusieurs
facteurs: le type et la nature du dchet, le danger reprsent par les (micro-)organismes prsents
dans les dchets, lefficacit des mthodes utilises. Les mthodes dinactivation des dchets les plus
souvent utilises sont la strilisation par la vapeur deau, linactivation chimique et lincinration. Dans
1

La Directive 78/319/CEE relative aux dchets dangereux a t remplace par la Directive 91/689/CEE et a t
modifie par la Directive 94/31/CE.
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ce dernier cas, les conteneurs de dchets ferms hermtiquement sont gnralement pris en charge
par une socit agre de traitement des dchets pour tre incinrs.
Ce document est consacr linactivation des dchets issus dutilisations confines dOGM et/ou
pathognes par la vapeur deau. Les normes existantes sur le procd de strilisation la vapeur
deau se rfrent gnralement la strilisation de dispositifs mdicaux. Ces normes peuvent faire
office de rfrences pour la validation et le contrle en routine du procd dinactivation des dchets
biologiques. Nanmoins, il y a lieu de les adapter cette utilisation spcifique.

3. La strilisation la vapeur deau

Gnralement, les mthodes dinactivation thermiques sont les plus simples valider et contrler
comparativement aux autres mthodes dinactivation, notamment linactivation chimique (3). Elles sont
aussi moins nocives pour lenvironnement. La strilisation la vapeur deau est considre comme un
moyen de strilisation fiable. Elle est la procdure de choix pour linactivation des dchets dangereux
provenant dutilisations confines dOGM et/ou pathognes de classe de risque 2 et suprieures (3,
4).

La strilisation est un procd de dcontamination qui permet la destruction complte de tout type de
micro-organismes, y compris les spores. Dans la pratique, il nest pas possible de garantir une
strilisation absolue. La plupart des installations pratiquant la strilisation utilise le Sterility
Assurance Level (SAL) dont la valeur reprsente la probabilit de persistance ou survie dun microorganisme aprs le procd de strilisation (5). Ce degr de strilisation atteindre est
gnralement fix 10-3 ou 10-6 ce qui veut dire que la probabilit de survie est infrieure 1 microorganisme sur 1000 ou sur 1 million aprs strilisation. La dcontamination par strilisation peut ds
lors tre dfinie comme tant un procd qui rduit la contamination biologique un niveau ne
prsentant plus de risque (2). Linactivation, elle, est dfinie comme tant la suppression de lactivit
biologique des (micro-)organismes.

Lappareil utilis pour la strilisation la vapeur deau assure linactivation de matires par injection
directe ou indirecte de vapeur deau une pression suprieure la pression atmosphrique. Il
existe plusieurs types dautoclaves (6, 7, 8). Lautoclave consiste en une chambre mtallique ferme
hermtiquement et rsistant de hautes pressions, dans laquelle leau chauffe et la pression de la
vapeur deau atteint une valeur suprieure la pression atmosphrique.

Lvacuation de lair hors de la chambre est essentielle pour le bon droulement du processus car l'air
restant peut faire diminuer la temprature et galement empcher la vapeur d'eau datteindre
l'entiret du volume de la chambre.

Il y a deux faons d'vacuer l'air hors de la chambre de lautoclave ;

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- par "dplacement de la gravit" : la vapeur d'eau est amene sous pression dans la chambre.
Comme l'air est plus lourd que la vapeur d'eau, l'air est pouss dans la partie basse de la chambre
vers la sortie,
- par la mthode de "pr-vide" dans laquelle une pompe vide vacue l'air avant que la vapeur
d'eau n'entre dans la chambre. Ce systme ncessite un temps d'exposition plus court car l'air est
limin de manire efficace.

Un certain nombre d'appareils sont gnralement intgrs l'autoclave :

- un thermomtre mesurant la temprature de lenceinte (ou chambre), il doit tre visible et
lisible ;
- un manomtre mesurant la pression dans lenceinte ;
- un rgulateur de temprature ;
- un manovacuomtre enregistreur : prsent sur certains modles d'autoclave, il enregistre et
restitue sous la forme d'un trac les diffrentes phases d'un cycle de strilisation.

L'autoclave doit tre plac dans un local bien ventil et maintenu une temprature et un taux
dhumidit constants. Le produit autoclaver (dchets, quipements, solutions, etc) doit faire
l'objet d'un tri correct au pralable de manire ce qu'aucun compos dangereux (formaldhyde,
phnols, mercure, radionuclides) ne soit vacu dans l'atmosphre (4).

4. Principe de strilisation par la vapeur deau

A pression atmosphrique normale, leau bout 100C. A une pression de 2 atmosphres, leau bout
121C et une pression suprieure 3 atmosphres, leau bout 134C.

Laction conjugue de la vapeur deau sous pression et de la temprature (suprieure 120C)

provoque la dnaturation des protines des microorganismes et la destruction de ceux-ci.

Un cycle de strilisation est dfini comme tant le temps coul entre le dbut et la fin du processus
de strilisation, depuis lentre de la charge, c'est--dire le produit (dans le cadre de ce document : le
dchet) striliser et son emballage, jusqu sa sortie aprs strilisation. Un cycle de strilisation par
la vapeur deau comporte 3 phases et les caractristiques de chacune de ces phases sont dfinies
par les paramtres suivants : la pression, la temprature, le temps et la concentration des gaz (vapeur
deau sature).

Un cycle de strilisation par la vapeur deau comporte 3 phases :

La 1

re

phase est le prtraitement. Il sagit de substituer entirement lair (purge) contenu dans la

chambre et au cur de la charge par de la vapeur deau et de crer ainsi les conditions dhumidit et
de temprature optimales pour la phase de strilisation. Dans le cas dun autoclave utilisant la

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mthode de pr-vide, cette opration est ralise par une succession de purge et d'injection de
vapeur permettant d'obtenir dans la chambre de la vapeur d'eau de moins en moins mlange l'air
rsiduel jusqu' atteindre 100% de vapeur la fin du prtraitement.
Lair sortant est filtr sur un filtre microbiologique (HEPA, High Efficiency Particulate Air ou PTFE,
Polyttrafluorothylne).
La 2me phase est le plateau de strilisation qui tend vers la destruction des micro-organismes dans
une atmosphre de vapeur sature une temprature dfinie. Le temps de strilisation est le temps
durant lequel la temprature de strilisation est maintenue en tous points de la charge. A la fin du
plateau, l'ouverture d'une vanne permet l'vacuation de la vapeur hors de la chambre : la courbe de
pression chute rapidement. La temprature baisse galement.
La 3me phase est le schage. Au dbut du cycle de strilisation, la vapeur se condense sur la
charge froide et mouille le produit. A la fin du cycle, il est ncessaire de vaporiser nouveau l'eau
condense dans la charge pour arriver la siccit, c'est--dire un tat de scheresse permettant de
conserver l'tat strile. Lorsque la pression dans la chambre est revenue au voisinage de zro, le
dispositif de mise sous vide dmarre afin d'vacuer la vapeur de la charge. Les calories ncessaires
pour scher la charge sont fournies par la chaleur accumule dans la charge elle mme et dans les
parois du strilisateur.
Enfin, lair entre dans la cuve (ou chambre) aprs passage sur un filtre microbiologique HEPA ou
PTFE, ce qui vite la contamination de la charge. La filtration de lair entrant est indispensable dans le
cas de la strilisation de dispositifs mdicaux, il ne lest pas dans le cas de linactivation de dchets
biologiques.

En pratique, plusieurs cycles sont communment utiliss selon la nature de produit striliser: 125C
20 minutes pour la verrerie ou le caoutchouc, 134C 10 minutes pour le textile, 134C 18 minutes pour
les ATNC (Agents Transmissibles Non Conventionnels), 121C 15 minutes pour des liquides ou des
matriaux non-poreux, etc.

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Figure 1 : Exemple dun cycle de strilisation la vapeur deau utilis pour du verre (9)

Prtraitement

Plateau de strilisation

Schage

La strilisation dun mme produit peut se faire diffrentes tempratures (annexe 2). Plus la
temprature est basse, plus long sera le temps ncessaire au cycle de strilisation.

5. Validation de lautoclave
La validation de lautoclave doit tre distingue du suivi en routine du processus dinactivation des
dchets et des matires biologiques rsiduelles par autoclavage. La validation de lautoclave est un
ensemble doprations ncessaires pour prouver que la mthode utilise fournit des rsultats
fiables et exacts, comme spcifis par le constructeur, afin de garantir le pouvoir strilisant de
lautoclave. Le suivi en routine de la strilisation par autoclave consiste en une srie de tests ou
contrles effectuer chaque utilisation ou de faon rgulire. La validation et le suivi en routine se
font grce des tests utilisant des indicateurs mcaniques, physico-chimiques et biologiques. Tous
les rsultats sont enregistrs et conservs dans un logbook de faon garantir la traabilit des
procdures de validation et de contrle.

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Trois tapes dans la validation de lautoclave sont recommandes avant lutilisation de lappareil en
routine : la mise en service de lautoclave la rception, la qualification oprationnelle et la
qualification de performance. La validation de la strilisation par la vapeur deau est dcrite dans la
norme ISO 17665 1 : 2006 (10), nous en reprenons ci-dessous les lignes principales.
5.1. Mise en service de lautoclave
La validation de lautoclave lors de sa mise en service sert sassurer que lappareil fourni est install
et fonctionne vide selon les spcifications du constructeur et du cahier des charges de lappareil.
Cette tape est ralise par le technicien du fournisseur.
Les spcifications du cahier des charges concernent lquipement utilis et les limites de son
utilisation, la procdure dutilisation, les programmes prtablis, la calibration des instruments,
lentretien, etc. Tous les instruments de mesure, dindication et denregistrement des paramtres sont
calibrs de faon assurer leur prcision et leur reproductibilit. Les spcifications incluent galement
lespace et lenvironnement ncessaires lhbergement de lautoclave. Ces conditions doivent
assurer que la strilisation est performante, reproductible et uniforme en tous points de la chambre de
strilisation.
5.2. Qualification oprationnelle
Cette opration se fait aprs linstallation de lappareil par le technicien du fournisseur et/ou par le
technicien responsable au laboratoire. Elle a pour but de vrifier que lautoclave utilis conformment
aux spcifications fournit la strilisation attendue du produit. La qualification oprationnelle seffectue
3 fois de manire conscutive (3 cycles) pour sassurer de la reproductibilit des rsultats fournis.
5.3. Qualification de performance
La qualification de performance doit dmontrer que la charge (c.--d. le produit, son emballage et son
emplacement) striliser en routine a t effectivement expose aux conditions de strilisation
spcifies lors de la qualification oprationnelle. Si des conteneurs sont utiliss en routine
(emballages, sacs) il faut sassurer de leur permabilit la vapeur deau.
Lefficacit de la strilisation au moyen de la vapeur deau dpend du facteur de charge qui influence
la temprature et le temps de contact. Il est ncessaire de vrifier et valider la strilisation par
autoclave dune charge reprsentative des charges qui seront strilises en routine. Le profil de
temprature dans la chambre peut se faire grce des sondes de temprature distribues dans toute
la chambre et dans la charge. La pntration de la chaleur doit tre vrifie par la mesure des
tempratures dans des charges ou paquets de rfrence placs dans les endroits les plus froids
de la chambre tels que dtermins par le fabricant et par les tapes prcdentes de la validation.
La qualification de performance doit comprendre au moins trois cycles conscutifs dmontrant
chaque fois que la procdure rpond aux spcifications de strilisation de la charge.

Il est prconis de raliser une qualification de performance galement quand :

- une dviation est constate en routine dans les valeurs dfinies ;
- aprs un temps de non-utilisation ;

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10

- aprs un dplacement de lappareil ;

- au moins 1 2 fois par an et par type de charge ;
- il faut striliser de nouveaux produits ou emballages, une forme de charge diffrente.
5.4. La maintenance
La maintenance de lappareil doit tre planifie, documente et enregistre. L'autoclave doit tre
entretenu de manire priodique selon les prescriptions du fabricant (fonctionnement des clapets de
scurit, la mesure de la temprature et les sondes de pression) afin de pouvoir garantir sa fiabilit
tout moment. La lgislation fdrale belge prvoit que lautoclave, appareil fonctionnant sous
pression, doit tre contrl priodiquement par un Service Externe de Contrle Technique, (SECT)
pour sassurer que tous les lments de lappareil disposent de la rsistance indispensable, que les
dispositifs de scurit et les autres accessoires offrent toutes les garanties de bon fonctionnement
(11). Dautre part, tout talonnage ou ajustement des appareils de mesure de lautoclave devrait tre
effectu exclusivement par des spcialistes, au moins avant toute requalification (10). Il est ds lors
recommand de conclure des contrats dentretien annuel des autoclaves avec une firme spcialise
(12).

6. Le contrle en routine
Le contrle en routine se fait chaque cycle de strilisation et a pour but de contrler, de
faon plus ou moins prcise, le fonctionnement de lappareil et le cycle de strilisation (ou
traitement) de la charge. Il permet de vrifier que les paramtres dfinis lors de la validation sont
rencontrs, dans des limites spcifies, lors des processus de strilisation en routine. Le contrle en
routine devrait vrifier, grce des tests spcifiques, tous ou certains des paramtres suivants :
- ltanchit de la chambre de strilisation ;
- la qualit de la vapeur et de la chaleur ;
- la pntration de la vapeur dans la charge ;
- le rsultat de la strilisation.
Le suivi en routine utilise les moniteurs physiques, des indicateurs physico-chimiques et des
indicateurs biologiques. Les tests sont soit appliqus chaque cycle de strilisation (contrles
permanents), soit de manire priodique.
6.1. Les contrles permanents
Les moniteurs physiques et les indicateurs physico-chimiques peuvent tre utiliss comme contrles
permanents. Ils sont simples mettre en place et fournissent un rsultat immdiatement aprs le
cycle de strilisation. Ce type de contrle dmontre que la valeur (dans certaines limites) du ou des
paramtres contrls a bien t atteinte pendant le cycle mais ne dmontre pas que le contenu de la
charge soit strile. Lutilisation des indicateurs chimiques pour le contrle du cycle de strilisation
permet, lorsque le cycle choue, de dterminer le ou les paramtre(s) du cycle qui na (nont) pas
atteint la valeur dfinie.

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11

Les moniteurs physiques tels que le thermomtre, le manomtre et la minuterie permettent de

contrler que la temprature impose, le vide et le temps requis ont t atteints et que la temprature
et la pression sont restes constantes durant le cycle. Lenregistrement des paramtres de
strilisation peut se faire sous forme graphique laide dun diagramme et/ou sous forme numrique.
Si le cycle choue, cet enregistrement donne une indication sur le paramtre qui a fait dfaut. Tous
les autoclaves ne disposent pas de ce type denregistrement.

Les indicateurs physico-chimiques changent de couleur quand les valeurs des paramtres
ncessaires au cycle de strilisation ont bien t atteintes. Il existe plusieurs classes dindicateurs
physico-chimiques qui sont dfinies par la norme ISO 11140 (13, 14) et sont reprises dans le
tableau 1 ci-dessous. Les indicateurs de procd ou de passage utiliss lextrieur de chaque
emballage permettent de diffrencier le matriel qui a subi un cycle de strilisation de celui qui ne la
pas encore subi. Les indicateurs multiparamtriques, les intgrateurs et les indicateurs dmulation
sont conus pour tre utiliss lintrieur des emballages. Ces indicateurs changent de couleur en
fonction de la temprature, du temps dexposition et de la saturation de vapeur. Ils ont des conditions
de virage tablies et sont choisis en fonction des paramtres du cycle appliquer.

Tableau 1 : Types dindicateurs physico-chimiques dfinis par la norme ISO 11140-1 et

leur utilit

Type dindicateur

Classe

Utilit

Indicateurs de procd ou de

Diffrencier le matriel autoclav de celui

passage

non-autoclav, placs en surface sur

lemballage de chaque produit

Indicateurs pour essais spcifiques

Exemple : Bowie & Dick

Indicateurs de paramtre individuel

vapeur deau dans une charge poreuse

3

ou paramtre unique
Indicateurs multiparamtriques

Dmontrer la bonne pntration de

Contrler la valeur dun des paramtres

critiques (temps, temprature, humidit)

Contrler au moins deux paramtres

critiques du cycle de strilisation. A
placer lintrieur de la charge

Indicateurs intgrateurs et
dmulation

5 et 6

Contrler tous les paramtres critiques

sur une gamme spcifie de cycles de
strilisation. A placer lintrieur de la
charge

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12

6.2. Les contrles priodiques

Les contrles sont dit priodiques parce quils ne sont pas appliqus chaque utilisation de
lautoclave. La priodicit de leur application va dpendre du degr dexigence requis pour la
strilisation des produits provenant dune installation spcifique.
Gnralement, les tests suivants sont appliqus rgulirement :

Le test du vide permet dvaluer ltanchit de lautoclave. Le test est effectu grce un cycle
gnralement prprogramm ou de manire manuelle.

Le test de Bowie-Dick, (BD de classe 2, ISO 11140) consiste en un indicateur colorimtrique

papier plac au centre dune pile de serviettes en coton dans lautoclave vide et subissant un
cycle de strilisation. Ce test dmontre labsence dair et permet de vrifier la pntration rapide et
complte de la vapeur dans une charge poreuse et llimination de lair (donc indirectement le
fonctionnement du circuit de vide). Le virage de lencre aprs exposition doit tre homogne sur
toute la surface pour que le test soit conforme . Ce test ne constitue pas un test de strilit.

Le test Helix (de classe 6, ISO 11140) consiste en un long et fin tube creux au bout duquel se
trouve un indicateur colorimtrique. Ce test, sil est conforme aprs le cycle de strilisation,
dmontre la capacit de lautoclave striliser des corps creux ou des objets cavits profondes
et troites.

Les indicateurs biologiques (ISO 11138-1, 15, 16) sont le meilleur moyen de contrle de
lefficacit de strilisation dune charge. Il consiste vrifier quune certaine quantit de microorganismes, les plus rsistants la strilisation par la chaleur, qui ont t introduits lendroit de
lappareil le plus difficile striliser (en tenant compte des spcificits de lappareil), ont t
dtruits suite au cycle de strilisation. Les deux principales caractristiques dun indicateur
biologique sont la population nominale des micro-organismes et la rsistance spcifique de
lindicateur biologique au procd de strilisation (exprime par sa valeur de DT, voir annexe 2).
Traditionnellement, ce sont des spores bactriennes drives des espces Bacillus atrophaeus et
Geobacillus stearothermophilus qui constituent lindicateur biologique.
Le test conventionnel est une petite bande de papier filtre sur lequel sont places et sches des
spores de G. stearothermophilus (ltalon-or), le tout contenu dans une enveloppe (16, 17). Aprs
le cycle de strilisation, la bande de papier est transfre sur un milieu de culture et mise
incuber. La deuxime gnration dindicateurs biologiques dits autonomes ( self-contained ) est
constitue dun support couvert de spores contenu dans un tube en plastique ct dune
ampoule en verre contenant le milieu de culture. Aprs le cycle de strilisation, lampoule est
brise pour que les spores ayant ventuellement persistes soient en contact avec le milieu de
culture et puissent sy dvelopper. Linconvnient de lutilisation de ces indicateurs biologiques est
le dlai long pour obtenir les rsultats (48h 7 jours). Aujourdhui, la troisime gnration
dindicateurs biologiques ( Rapid Readout Biological Indicators ) rvle lefficacit du cycle de
strilisation en une heure. Le principe du test repose sur la dtection dun produit fluorescent issu
de lactivit dune enzyme de G. stearothermophilus.

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7. Inactivation des dchets contamins issus des utilisations confines dorganismes GM

et/ou pathognes
Dans les hpitaux ou les laboratoires pharmaceutiques o une strilisation rigoureuse des dispositifs
mdicaux, des mdicaments ou autres prparations est requise pour la scurit des patients et pour
lesquels des systmes de qualit spcifiques sont en place, les exigences de strilisation dcrites
dans les normes propres leur activit sont strictement suivies. En ce qui concerne linactivation des
dchets infectieux issus de ces activits, des activits de laboratoires de microbiologie, biomdicaux,
de production ou de recherche manipulant des OGM et/ou pathognes, il nexiste pas de normes ni de
standards reconnus pour la validation de linactivation de ces dchets. Nanmoins, des propositions
ont t mises, bases essentiellement sur les normes existantes pour la strilisation de dispositifs
mdicaux et sur le bon sens , ce dernier reposant sur une connaissance approfondie de la
bioscurit (18, 19).

Pour laborer les recommandations dcrites dans ce document, nous nous sommes inspirs
essentiellement des normes de strilisation existantes ainsi que de ces propositions dont celle de
lAssociation de Bioscurit Asie-Pacifique qui propose une procdure de validation et de suivi en
routine des procds de dcontamination par lautoclave des dchets issus de laboratoires
biomdicaux et microbiologiques (18). Les propositions formules dans le projet Global Healthcare
Waste Project de lUNDP (United Nations Development Program, Global Environment Facility) sur la
gestion des dchets mdicaux reposent sur un systme de classification des niveaux dinactivation
2
microbienne spcifiquement pour le traitement de dchets biomdicaux (STAATT , 19). Le niveau de

performance exig pour les technologies de traitement des dchets (lautoclavage) a t fix un
niveau correspondant une rduction dau moins 6 logarithmes des bactries vgtatives, des
champignons, des virus lipophiles et hydrophiles, des parasites et des mycobactries et une
rduction de 4 logarithmes ou plus des indicateurs biologiques (spores de G. stearothermophilus et de
B. atrophaeus). La norme AFNOR concernant les appareils de prtraitements par dsinfection des
dchets risques infectieux tablit, elle, un niveau de rduction ncessaire de la charge microbienne
de 5 logarithmes pour des souches bactriennes et fongiques types et de 4 logarithmes pour des virus
types (20).

Dans certaines installations, les autoclaves sont aussi utiliss pour striliser le matriel rutilisable.
Dans ce cas, la frquence et le nombre des tests pour le contrle de la strilisation devraient tre
levs car le bon droulement des activits utilisant ce matriel en dpend. Les recommandations
dcrites dans ce document ne sont pas appliquer ce type dutilisation de lautoclave, elles ne
visent quune utilisation de lautoclave pour linactivation des dchets issus des utilisations confines
dOGM et/ou pathognes. De mme, elles ne sont pas applicables aux systmes dinactivation
thermique utiliss souvent par les installations de production grande chelle pour inactiver leurs
dchets liquides (effluents).
2

State and Territorial Association on Alternate Treatment Technologies

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14

Lautoclavage des dchets est une tape de la procdure dlimination qui vise la rduction du risque
pour la sant des travailleurs, des patients, de la communaut et pour la protection de
lenvironnement. Nous proposons ci-dessous quelques critres qui devraient permettre de mettre en
place une validation de lautoclave adapte son usage spcifique. Nous tendons ici la validation de
lautoclave aux contrles permanents et priodiques des procdures dinactivation.

Recommandations en vue de llaboration dun plan de validation et de contrle de linactivation des

dchets par autoclavage

Typiquement, les dchets produits par les utilisations confines dOGM et/ou pathognes et
inactiver par lautoclave sont constitus de:

Solides contamins : milieux de culture solides, litires provenant des animaleries, etc. ;

Liquides contamins : milieux de cultures liquides, cultures cellulaires, fluides corporels, etc. ;

Matriel contamin : verreries, cages, etc. ;

Matriel contamin usage unique : vtements en plastique, botes, tubes, sacs, etc.

Lannexe 3 reprend titre dexemple les procdures dlimination des dchets issus des utilisations
confines dOGM et/ou pathognes en Rgion de Bruxelles-Capitale (21). Ces procdures sont, dans
les grandes lignes, celles appliques dans les deux autres Rgions de Belgique.

Dans la plupart des cas, la strilisation par autoclavage ralise une diminution de la charge
-6
microbienne de 6 sur une chelle logarithmique (SAL fix 10 ). Pour la strilisation des dispositifs

mdicaux ou de milieux de culture ensemencer dont la charge microbienne de dpart nest pas trs
leve, une valeur du SAL de 10-6 reprsente une exigence de dcontamination par strilisation trs
leve qui garantit que le produit strilis sera exempt de tout organisme viable. Dans le cas des
dchets contamins issus dactivits de cultures microbiologiques par exemple, la charge initiale
microbienne (OGM et/ou pathogne) est souvent nettement plus leve et un SAL de 10-6 ne garantit
pas que les dchets soient striles aprs un cycle dautoclave. Cette procdure de traitement des
dchets contamins assure dans ce cas, une rduction significative du nombre dorganismes viables
et une rduction du risque pour la sant publique et pour lenvironnement.

Suite lautoclavage, plusieurs filires dlimination finale des dchets peuvent tre empruntes :
- les dchets sont transports vers lincinrateur dans des poubelles spciales scelles pour dchets
infectieux.
- les dchets sont transports vers lincinrateur en tant que dchets non-dangereux. Les dchets
liquides inactivs lautoclave, quant eux, peuvent tre limins dans le rseau public des eaux
uses (gouts).

En pratique en Belgique, la filire des dchets infectieux est utilise pour les dchets biologiques
inactivs provenant des activits dinstallations de niveaux de confinement 3. Ces dchets

D/2011/2505/39

15

 autoclavs ont en effet une probabilit non nulle dtre encore contamins par des microorganismes pouvant prsenter un risque pour la sant publique et/ou lenvironnement. Les dchets
inactivs provenant des installations de niveau 1 et 2 peuvent galement utiliser cette filire, mais
aussi celle des dchets non-dangereux.

En attendant le transport vers lincinrateur, les poubelles sont stockes dans un local adapt cette
fonction. Le risque que reprsentent les dchets inactivs par strilisation la vapeur deau est
trs fortement diminu, tant par le procd de strilisation et que par le confinement des
poubelles (poubelles scelles et local de stockage dont laccs est rserv au personnel autoris).

Validation de lautoclave :
Une validation de lautoclave lors de linstallation (mise en service et qualification
oprationnelle) et une validation de charge (qualification de performance) devraient tre
effectues dans toute installation o linactivation des dchets par la vapeur deau fait partie
de la procdure dlimination des dchets et ce indpendamment du niveau de confinement. La
validation de lautoclave linstallation assure que lautoclave fonctionne selon les spcifications du
fabricant et que les programmes sont fiables et reproductibles. Une validation de charge (dchets
danimalerie, dchets de laboratoire, matire sche et humide, etc.) assure la validation des
programmes pour linactivation des dchets spcifiques lactivit.

Les validations vide et avec charge devraient tre effectues une deux fois par an, voire tous les
deux ans. Une des faons de procder par exemple, consiste rpartir dans le volume de la charge
des sondes de temprature calibres et certifies et contrler le profil temps-temprature (18).
Diffrents types de charges standards (2 4 types) peuvent tre utiliss dont un reprsentant une
charge difficile dcontaminer. Lors de ces validations, des indicateurs biologiques seront aussi
employs en parallle. La validation est russie si les valeurs attendues et linactivation de lindicateur
biologique se reproduisent lors de trois cycles conscutifs. Lutilisation uniquement de lindicateur
biologique (spores de G. stearothermophilus) en tant qutalon-or constitue une autre faon de
procder pour la validation du procd dinactivation des dchets hospitaliers : les spores doivent tre
inactives lors de trois cycles conscutifs (19).

Contrle en routine :
La procdure de contrle en routine mettre en place pour linactivation des dchets par
lautoclave devrait prendre en compte la frquence dutilisation de lautoclave, le niveau de
confinement de linstallation et la filire dlimination finale.

Plus la frquence dutilisation de lautoclave est leve, plus le contrle du cycle de strilisation
devrait tre rgulier. Il en est de mme pour les niveaux de confinement des installations : la
frquence et le nombre de tests appliquer pour le contrle du processus dinactivation des dchets
devraient tre leves pour les dchets provenant dactivits de classe de risque 3.

D/2011/2505/39

16

Il y a lieu galement de tenir compte du type de test effectu car lutilisation de certains indicateurs
plus prcis ou de contrles plus rigoureux (par exemple les indicateurs biologiques) entrane que
lutilisation dautres tests soit inutile.

De manire gnrale, le suivi minimal en routine de lautoclave dans tous les types dinstallations
et chaque cycle de strilisation devrait comprendre si possible la vrification du profil temps temprature du cycle (enregistr sur le diagramme ou le ticket si disponible). Certains autoclaves ont
pour cela des thermocouples intgrs. Lutilisation des indicateurs colorimtriques de classe 1
(indicateurs de passage, voir tableau 1) est particulirement utile si la frquence dutilisation de
lautoclave est leve. Ces enregistrements et toute information sur le cycle devraient tre conservs
dans un logbook.

Dans le cas de dchets provenant des activits dune installation de niveau de confinement 2 et qui
seront limins par incinration en tant que dchets dangereux, le contrle minimal du procd
(vrification du profil temprature-temps si possible et utilisation dindicateurs de classe 1) devrait
suffire. Il en est de mme pour les dchets provenant des activits dune installation de niveau de
confinement 1. Il est nanmoins conseill de contrler lefficacit du procd par des tests rguliers
supplmentaires tels que ceux dcrits ci-dessous.

Lutilisation de sondes de temprature rparties dans les charges ou des indicateurs

multiparamtriques est utile pour contrler que les dchets, aux points contrls, subissent
effectivement le traitement de temprature et/ou de temps et/ou de vapeur deau (18). Elle peut
complter le contrle minimal de lautoclavage de faon rgulire dans le cas des dchets
biologiques provenant des activits de classe de risque 2 et 3. Nanmoins, il faut tenir compte du
fait que leur bonne utilisation peut entraner une augmentation du risque du fait que les sondes et les
indicateurs de ce type doivent tre placs lintrieur des charges inactiver.

Si les dchets inactivs sont limins par la filire des dchets non dangereux et incinrs, lefficacit
de lautoclavage devrait tre vrifie rgulirement en procdant lutilisation de tests
supplmentaires comme ceux dcrits ci-dessous.

Le contrle priodique par des tests de Bowie-Dick (indicateur de classe 2) est important pour les
charges poreuses (constitues dquipements, matriaux permables qui absorbent la vapeur deau
et/ou lair). Ceci sapplique tous les jours, une fois par jour, dans le cadre de la strilisation de
dispositifs mdicaux et dans une utilisation quotidienne de lautoclave. Ce contrle est facile mettre
en place et donne une indication importante sur la pntration efficace de la vapeur deau dans une
charge. Pour certains utilisateurs, lexigence de dcontamination par la strilisation dans le cadre de
linactivation des dchets est trop faible pour mettre en place des tests de Bowie-Dick (18).
Nanmoins, dans le cas dune installation de niveau de confinement 2 dont les dchets sont limins

D/2011/2505/39

17

par la filire des dchets non-dangereux, ce test (ou un indicateur biologique, voir ci-dessous) pourrait
tre appliqu de manire rgulire, la frquence dpendant largement de la frquence dutilisation de
lautoclave.

Les indicateurs de classe 5 et 6 (intgrateurs et mulateurs) sont utiles pour le contrle du profil
du cycle de strilisation spcifique choisi. Si les contrles dcrits prcdemment et des indicateurs
biologiques sont appliqus rgulirement, ce type dindicateurs peut devenir moins utile.

Les

indicateurs

biologiques,

et

particulirement

ceux

constitus

de

spores

de

G.

stearothermophilus, constituent le meilleur moyen de contrle de lefficacit du cycle dinactivation des

micro-organismes prsents dans les dchets. Lutilisation des indicateurs physico-chimiques en plus
des indicateurs biologiques permettra de mieux cibler la nature de la dfaillance du cycle
dautoclave dans le cas dun chec de linactivation de lindicateur biologique : la temprature, la
dure ou la vapeur deau. Pour les installations de niveau de confinement 3 ou si la charge
autoclaver est trs diffrente de celle de la routine, les indicateurs biologiques devraient tre
utiliss gnralement une fois par mois dans le cas dune utilisation frquente de lautoclave, voire
chaque cycle de strilisation. Ces indicateurs devraient galement tre utiliss rgulirement dans les
installations de niveau de confinement 2 dont les dchets autoclavs suivront la filire des dchets
non-dangereux.

Enfin, certains utilisateurs prconisent un contrle du procd trs rgulier au dbut de lutilisation de
lautoclave (et aprs la validation), par exemple une fois par semaine, en utilisant des indicateurs
biologiques. Si aprs plusieurs contrles, les rsultats sont ceux attendus (pas de croissance de
spores), les contrles peuvent sespacer dans le temps et se faire une fois par mois par exemple.

Le tableau 2 ci-dessous reprend des indications en vue de mettre en place une validation et les
contrles utiles en fonction de la classe de risque de lactivit dont proviennent les dchets inactiver,
en se limitant lexemple des laboratoires.

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18

Tableau 2 : Propositions de modalit de validation et contrles en routine de lautoclave

Niveau de confinement de linstallation

L1

Type de test

L2

L3

Filire dchets

Filire dchets

Filire dchets

Filire dchets

non-dangereux

dangereux

non-dangereux

dangereux

ou dangereux
Validation de

Oui, une fois par

Oui, une fois

Oui, une fois par

Oui, une fois par

lautoclave +

an ou tous les 2

par an ou tous

an

an

ans

les 2 ans

Oui, pour chaque

Oui, pour

Oui, pour chaque

Oui, pour chaque

utilisation

chaque

utilisation

utilisation

maintenance

Contrle de routine

Logbook (traabilit)

utilisation
Vrification du ticket /
diagramme si

Oui, chaque

Oui, chaque

Oui, chaque

Oui, chaque

cycle

cycle

cycle

cycle

Oui, chaque

Oui, chaque

Oui, chaque

Oui, chaque

cycle

cycle

cycle

cycle

Non mais

Non mais

Oui,

Oui, de 1 fois par

recommand

recommand

De 1 fois par

semaine 1 fois

mois 1 fois tous

par mois*

disponible
Indicateur classe 1

Indicateur classe 2
(Bowie et Dick)

les 6 mois*
Indicateur classe 4

Non

Non

(multiparamtrique)

Non mais

Oui, de 1 fois par

recommand

mois 1 fois
tous les 6 mois*

Indicateur classe 5 et 6

Indicateur biologique

Non

Non

Non

Non**

Non mais

Non mais

Oui, de 1 fois par

Oui, chaque

recommand

recommand

mois 1 fois tous

cycle ou 1 fois

les 6 mois

par semaine ou 1
fois par mois

* en tenant compte de la frquence de contrle laide des indicateurs biologiques.

** en tenant compte du type de charge.

La procdure est brivement dcrite dans ce document au chapitre 5. Les dtails se trouvent dans la norme ISO
17665 1 : 2006 (10),

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19

8. Conclusion
La validation de lautoclave et le contrle de linactivation des dchets biologiques ne sont pas des
procds standardiss et plusieurs critres devraient entrer en ligne de compte pour mettre en place
une validation et un contrle spcifiques du procd dinactivation. Cette procdure sera donc
concevoir au cas-par-cas. Ce document se base sur des normes qui concernent la validation et le
contrle de la strilisation de dispositifs mdicaux par la vapeur deau. Les tests proposs sont donc
adapter la procdure dinactivation des dchets biologiques issus des activits dutilisation confine
dOGM et/ou pathognes. Pour tablir une procdure adapte, ce document prend en compte les
critres suivants:
-

La filire dlimination des dchets autoclavs : dchets dangereux ou non. Ceci concerne
gnralement les installations de niveau de confinement 2;

Le niveau de confinement de linstallation concerne ;

La frquence dutilisation de lautoclave.

Les critres pris en considration ici ne sont pas exclusifs et dautres critres pourraient intervenir et
influencer le choix de la procdure de validation de linactivation de dchets par lautoclave. Par
exemple, dans une gestion centralise de dchets issus de diverses activits de diffrentes classes
de risque, la procdure de validation et de contrle de linactivation par lautoclave sera gnralement
la mme pour tous ces dchets. Les critres de rationalisation et dconomie seront dans ce cas
prioritaires et la procdure dinactivation de tous les dchets par lautoclave sera celle qui
correspondra aux dchets prsentant le plus de risques.

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20

9. Annexes
Annexe 1 : Gestion des dchets et/ou matires biologiques issus des activits dutilisations
confines dorganismes GM et/ou pathognes.
La gestion des dchets et/ou matires biologiques rsiduelles satisfait aux conditions stipules dans
les Arrts rgionaux relatifs aux utilisations confines dorganismes gntiquement modifis et/ou
pathognes. Aucune installation de niveau de confinement 4 nexiste actuellement en Belgique et ce
niveau nest donc pas repris dans les tableaux ci-dessous.
Ces conditions sont les suivantes :

Laboratoires
L1:
o

o
o
o

Les dchets et/ou matires biologiques rsiduelles contamins et le matriel

contamin usage unique sont inactivs par un procd appropri et valid avant
vacuation, par exemple par autoclavage ou incinration. Lincinration est effectue
par une installation agre.
Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la collecte des dchets sont rsistants,
tanches et ferms avant de quitter le laboratoire.
Avant lavage, remploi et/ou destruction le matriel contamin (verrerie, lames, etc.)
est inactiv par un procd appropri et valid.
Autoclave prsent sur le site

L2:
o
o

Les conditions L1
Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la collecte des dchets infectieux sont
marqus du pictogramme "Danger biologique" et ferms avant de quitter le
laboratoire.
Autoclave prsent dans le btiment

L3 :
o
o
o
o

Les conditions L2
Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la collecte des dchets infectieux sont ferms
et dsinfects avant de quitter la zone confine.
Les effluents des viers et des douches sont de prfrence inactivs par un procd
appropri et valid avant l'vacuation finale.
Autoclave dans le laboratoire ou annexes avec des procdures valides permettant
de transfrer sans danger le matriel vers un autoclave situ dehors du laboratoire et
offrant un niveau de protection quivalent.

Animaleries
A1 :
o

o
o

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Les dchets et/ou matires biologiques rsiduelles contamins (cadavres,

excrments, litires contamines, etc.) et le matriel contamin usage unique sont
inactivs par un procd appropri et valid avant vacuation, par exemple par
autoclavage ou incinration. L'incinration est effectue par une installation agre.
Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la collecte des dchets contamins sont
rsistants, tanches, et ferms avant de quitter la zone confine.
Avant lavage, remploi et/ou destruction, le matriel contamin (verrerie, cages, etc.)
est inactiv par un procd appropri et valid.
Autoclave prsent sur le site

21

A2 :
o
o

Les conditions A1
Autoclave prsent dans le btiment

o
o

Les conditions A2
Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la collecte des dchets infectieux sont ferms
et dsinfects avant de quitter la zone confine.
Les effluents des viers et des douches sont inactivs par un procd appropri et
valid avant l'vacuation finale.
Autoclave prsent dans le laboratoire ou annexes avec des procdures valides
permettant de transfrer sans danger le matriel vers un autoclave situ dehors du
laboratoire et offrant un niveau de protection quivalent.

A3 :

o
o

Serres ( Greenhouse )
G1

Les dchets et/ou matires biologiques rsiduelles contamins (plantes, substrats, ...)
et le matriel contamin usage unique sont inactivs par un procd appropri et
valid avant vacuation, par exemple par autoclavage ou incinration. L'incinration
est effectue par une installation agre. Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la
collecte des dchets sont rsistants, tanches et ferms avant de quitter le
laboratoire.
Avant lavage, remploi et/ou destruction le matriel contamin (verrerie, lames, etc.)
est inactiv par un procd appropri et valid.
Autoclave prsent sur le site.

o
o

Les conditions G1
Autoclave prsent dans le btiment.

o
o

Les conditions G2
un autoclave est disponible dans la serre ou le local de culture. A dfaut, des
procdures valides permettent de transfrer sans danger le matriel vers un
autoclave situ en dehors de la serre ou du local de culture.
Si la transmission se fait par le sol, il faut empcher l'coulement des eaux
contamines. Dans ce cas, les eaux d'coulement sont collectes et inactives.
Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la collecte des dchets infectieux sont ferms
hermtiquement et dsinfects avant de quitter la zone confine.

G2

G2Q

o
o

Procds grande chelle ( Large-scale )

LS1
o

o
o

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Les dchets et/ou matires biologiques rsiduelles contamins et le matriel

contamin usage unique sont inactivs par un procd appropri et valid avant
vacuation, par exemple par autoclavage ou incinration. L'incinration est effectue
par une installation agre. Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la collecte des
dchets contamins sont rsistants, tanches et ferms avant de quitter l'installation.
Avant lavage, remploi et/ou destruction, le matriel contamin (verrerie, lames, etc.)
est inactiv par un procd appropri et valid
Autoclave prsent sur le site.

22

LS2
o
o
o

Les conditions LS1

Les sacs ou les conteneurs utiliss pour la collecte des dchets infectieux sont
marqus du pictogramme "Danger biologique" et ferms avant de quitter l'installation.
Les quipements de production sont dots de ou raccords directement un systme
d'inactivation du matriel biologique (par exemple raccords une station de
dcontamination).
Autoclave prsent dans le btiment.

LS3
o
o
o

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Les conditions LS2

Les effluents des viers et des douches sont de prfrence inactivs par un procd
appropri et valid avant l'vacuation finale.
Un autoclave double entre est accessible dans l'installation. Les portes de
l'autoclave doivent tre asservies pour empcher leur ouverture simultane.

23

Annexe 2 : Pour en savoir plus sur la strilisation la vapeur deau.

1. Voici quelques notions importantes dans le cadre de linactivation de micro-organismes par la
chaleur :
-

La valeur D ou temps de rduction dcimal (figure 1, table 1) est une caractristique de

rsistance thermique du micro-organisme. Il reprsente le temps ncessaire, une temprature
donne, la rduction de 90% de la population bactrienne (ou la rduction d1 logarithme). Pour
G. stearothermophilus, le temps de rduction D 121 C est de 1,5 minutes.

La valeur Z ou valeur dinactivation thermique est le changement de temprature ncessaire

pour la rduction dun logarithme de la valeur D. Pour G. stearothermophilus la valeur
dinactivation thermique Z est de 10C.

La valeur F0 ou valeur strilisatrice est le nombre de minutes ncessaire pour tuer un nombre
dtermin de micro-organismes dont la valeur Z est 10C une temprature de 121,1C.

La valeur F est le nombre de minutes ncessaire pour tuer un nombre dtermin de microorganismes avec une certaine valeur Z une certaine temprature.
Figure 1 : Courbe de survie dun micro-organisme temprature constante

Table 1 : Temps de rduction dcimal pour quelques bactries :

Temp, T /0C

D-value, DT

Campylobacter jejuni

55

1 min

Salmonella spp

60

0.98 min

Listeria monocytogenes

71.7

3.3 sec

Escherichia coli

71.7

1 sec

Staphylococcus aureus

71.7

4.1 sec

Clostridium perfringens

90

145 min

Clostridium botulinum

121.1

12 sec

Bacillus stearothermophillus

121.1

5.0 min

Organism

D/2011/2505/39

24

2. Pour dterminer le cycle de strilisation idal, trois paramtres sont pris en compte :
-

Le nombre et le type de micro-organismes contaminant un objet (bioburden);

La valeur D, caractristique de rsistance thermique du micro-organisme contaminant ;
Le SAL requis, gnralement = 10-6 ou 10-3.

Lorsque la charge microbienne inactiver est inconnue ou complexe, l Overkill approach est
utilis. Il sagit de choisir une souche bactrienne (spores) trs rsistante la chaleur, une charge
de 106 et dont la valeur D 121.1C est de 2 minutes. Pour une plus grande scurit, la valeur de D
est monte 2.5 minutes :
Bioburden = 106
SAL = 10-6
La rduction requise quivaut (6+6)log = 12log
=> (12log) (2.5min/log) = 30 minutes
A 121,1C, il faudra donc 30 minutes pour striliser une charge avec 106 micro-organismes avec une
probabilit de persistance dun micro-organisme sur un million aprs le cycle de strilisation.

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25

Annexe 3 : Gestion des Dchets biologiquement contamins, lignes directrices et filires

dlimination en Rgion de Bruxelles-Capitale
Tableau 1 : niveau de confinement L1
Type de
dchet

Mthode
dinactivation la
source

Conditionnement

Voie dlimination

Dchets
liquides

Thermique, par
autoclavage
Aucune (ou
autoclavage
optionnel)

Rcipient/ contenant
quelconque
Poubelles jaunes
rigides biohazard

viers
Collecteur agr
dchets dangereux

Incinration

Thermique, par
autoclavage

Poubelles assimiles
aux dchets nondangereux d'entreprise,
sacs plastiques double
emballage

Collecteur de
dchets mnagers
Collecteur dchets
non inertes non
dangereux

Incinration

Ou Poubelles confines
distinctes des dchets
mnagers, containercompacteur, disposs
dans une aire de dpt
affecte cet usage au
sein de lentreprise
Poubelles jaunes
rigides biohazard

Collecteur agr
dchets dangereux

Incinration

Poubelles jaunes
cartons biohazard

Collecteur agr
dchets dangereux

Incinration

Dchets
solides

Aucune (ou
autoclavage
optionnel)
Aucune ou
autoclavage
optionnel

D/2011/2505/39

Destination finale
ou mthode
dinactivation
finale
gout public

26

Tableau 2 : niveau de confinement L2

Type de
dchet

Mthode
dinactivation la
source

Conditionnement

Voie dlimination

Dchets
liquides

Thermique, par
autoclavage
Aucune (ou
autoclavage
optionnel)

Rcipient/ contenant
quelconque
Poubelles jaunes
rigides biohazard

viers
Collecteur agr
dchets dangereux

Incinration

Thermique, par
autoclavage

Poubelles assimiles
aux dchets nondangereux d'entreprise,
sacs plastique double
emballage

Collecteur de
dchets mnagers
Collecteur dchets
non inertes non
dangereux

Incinration

Ou Poubelles confines
distinctes des dchets
mnagers, containercompacteur, disposs
dans une aire de dpt
affecte cet usage au
sein de lentreprise
Poubelles jaunes
rigides biohazard

Collecteur agr
dchets dangereux

Incinration

Poubelles jaunes
cartons biohazard

Collecteur agr
dchets dangereux

Incinration

Destination finale
ou mthode
dinactivation
finale
Incinration

Dchets
solides

Aucune (ou
autoclavage
optionnel)
Aucune ou
autoclavage
optionnel

Destination finale
ou mthode
dinactivation
finale
gout public

Tableau 3 : niveau de confinement L3

Type de
dchet

Mthode
dinactivation la
source

Conditionnement

Voie dlimination

Dchets
liquides
Dchets
solides

Thermique, par
autoclavage
Thermique, par
autoclavage

Poubelles jaunes
rigides biohazard
Poubelles jaunes
rigides biohazard

Collecteur agr
dchets dangereux
Collecteur agr
dchets dangereux

D/2011/2505/39

Incinration

27

Tableau 4 : niveau de confinement A1

Type de
dchet

Mthode
dinactivation
la source

Conditionnement

voie dlimination

Litires
souilles
et
excrments

Thermique, par
autoclavage

Poubelles assimiles aux

dchets non-dangereux
d'entreprise, sacs plastiques
double emballage

Collecteur enregistr en
tant que collecteur de
sous-produits animaux de
catgorie 2
(Collecteur de dchets
mnagers
Collecteur dchets non
inertes non dangereux)

Ou Poubelles confines
distinctes des dchets
mnagers, containercompacteur, disposs dans
une aire de dpt affecte
cet usage au sein de
lentreprise

Destination
finale ou
mthode
dinactivati
on finale
Incinration

Tableau 5 : niveau de confinement A2

Type de
dchet

Mthode
dinactivation
la source

Conditionnement

voie dlimination

Litires
souilles
et
excrments

Thermique, par
autoclavage

Poubelles assimiles aux

dchets non-dangereux
d'entreprise, sacs plastiques
double emballage

Collecteur enregistr en
tant que collecteur de
sous-produits animaux de
catgorie 2
(Collecteur de dchets
mnagers
Collecteur dchets non
inertes non dangereux)

Ou Poubelles confines
distinctes des dchets
mnagers, containercompacteur, disposs dans
une aire de dpt affecte
cet usage au sein de
lentreprise

Destination
finale ou
mthode
dinactivati
on finale
Incinration

Tableau 6 : niveau de confinement A3

Type de dchet

Mthode
dinactivation
la source

Conditionnement

voie dlimination

Litires souilles
et excrments

Thermique, par
autoclavage

Poubelles jaunes
rigides biohazard,
containers, fts
hermtiques et
identifis

Alternative
lautoclavage
(inactivation
chimique et
thermique en
container
spcialis,)

Poubelles jaunes
rigides biohazard,
containers, fts
hermtiques et
identifis

Collecteur agr
dchets dangereux
+ enregistr en tant
que collecteur de
sous-produits
animaux de
catgorie 2
Collecteur agr
dchets dangereux
+ enregistr en tant
que collecteur de
sous-produits
animaux de
catgorie 2

D/2011/2505/39

Destination
finale ou
mthode
dinactivatio
n finale
Incinration

Incinration

28

10. Rfrences
1 : Directive 91/689/CEE du Conseil du 12 dcembre 1991 relative aux dchets dangereux, modifie
en dernier lieu par la Directive 94/31/CE et remplaant la Directive 78/319/CEE du Conseil relative
aux dchets toxiques et dangereux.
2 : Arrts des gouvernements rgionaux
-

Arrt du Gouvernement wallon du 4 juillet 2002 dterminant les conditions sectorielles

relatives aux utilisations confines d'organismes gntiquement modifis ou pathognes,
modifi par l'Arrt du Gouvernement wallon du 5 juin 2008 modifiant larrt du
Gouvernement wallon du 4 juillet 2002 dterminant les conditions sectorielles relatives aux
utilisations confines dorganismes gntiquement modifis ou pathognes.

Arrt du Gouvernement de la Rgion de Bruxelles-Capitale du 8 novembre 2001 relatif

l'utilisation confine d'organismes gntiquement modifis et/ou pathognes et au classement
des installations concernes.

Arrt du Gouvernement flamand du 6 fvrier 2004 modifiant larrt du Gouvernement

flamand du 6 fvrier 1991 fixant le rglement flamand relatif lautorisation cologique et
modifiant larrt du Gouvernement flamand du 1er juin 1995 fixant les dispositions gnrales
et sectorielles en matire dhygine de lenvironnement.

3 : NF EN 12740 : 1999 : Biotechnologie Laboratoires de recherche, dveloppement et analyse

guide pour la manipulation, linactivation et le contrle des dchets.
4 : Recommandations de bioscurit relatives au traitement et aux mthodes dinactivation des
dchets biologiques contamins. L. Berghmans, K. Pauwels, B. Van Vaerenbergh, C. Do Thi,
P. Herman, 2006. Bibliothque Royale de Belgique n D/2006/2505/33.
5 : ISO 11139 : 2006 : Strilisation des produits de sant Vocabulaire.
6 : NBN EN 285 : 1996 : Strilisation - Strilisateurs la vapeur d'eau - Grands strilisateurs
7 : NBN EN 13060 : 2004 : Petits strilisateurs la vapeur d'eau.
8 : NBN EN 12347 : 1998 : Biotechnologie - quipement - Critres de performance pour les
strilisateurs la vapeur d'eau et les autoclaves.
9 : " Un service de Strilisation lhpital" 2002. Fiche dexercice : interprter un diagramme de
strilisation, dfinir les diffrentes tapes dun cycle de strilisation, mettre en relation tapes et
comportement des emballages. CRDP du Nord Pas-de-Calais
10 : NBN EN 554, remplace par la norme NBN EN ISO 17665 1 : 2006 : Strilisation des produits
de sant Chaleur humide Partie1 : Exigences pour le dveloppement, la validation et le contrle
de routine dun procd de strilisation des dispositifs mdicaux.
11 : Arrt Royal du 18 octobre 1991 relatif aux appareils vapeur transposant la Directive
87/404/CEE du Conseil du 25 juin 1987 concernant le rapprochement des lgislations des tats
membres relatives aux rcipients pression simples.
12 : Assurance de la qualit dans le laboratoire d'analyse microbiologique des aliments. 1992,
Volume 12, Food and Agriculture Organization, Organisation des Nations Unies pour l'alimentation et
l'agriculture.

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13 : EN 867-1, remplace par la norme NBN EN ISO 11140-1 : 2005 : Strilisation des produits de
sant Indicateurs chimiques Partie 1 : Exigences gnrales.
14 : EN 867-5, remplace par la norme NBN EN ISO 11140-5 : 2007 : Strilisation des produits de
sant Indicateurs chimiques Partie 5 : indicateurs de classe 2 pour le test dlimination dair de
Bowie and Dick.
15 : NBN EN ISO 11138-1 : 2006 : Strilisation des produits de sant Indicateurs biologiques
Partie 1 : Exigences gnrales
16 : NBN EN ISO 11138-3 : 2006 : Strilisation des produits de sant Indicateurs biologiques
Partie 3 Indicateurs biologiques pour la strilisation la chaleur humide.
17 : EN 866-3 :1997 : Systmes biologiques pour lessai des strilisateurs et les procds de
strilisation Partie 3 : Systmes destins tre utiliss dans les strilisateurs la chaleur humide.
18 : Autoclave validation for microbiological and biomedical laboratories. F. Gmuender. Asia-Pacific
Biosafety Association Newsletter, Jan 2010, Vol3, N1.
19 : Guide de test de provocation microbiologique des autoclaves de traitement de dchets mdicaux.
J. Emmanuel et E. Krisiunas. United Nations Development Programme, GEF Global Healthcare
Waste Project. Novembre 2010.
20: NF X 30-503, Juin 2004: Rduction des risques microbiologiques et mcaniques par les appareils
de prtraitement par dsinfection des dchets dactivits de soins risques infectieux et assimils.
21 : Gestion des Dchets biologiquement contamins et lignes directrices et filires dlimination en
Rgion de Bruxelles-Capitale. Tableaux rcapitulatifs labors lIBGE par Mme C. Jasinski en
collaboration avec les services Autorisation, Inspection et le SBB.

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