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Avant d’intégrer le fond de mon rapport, je tiens à remercier dans un premier temps, toute
l’équipe pédagogique de la Faculté des Sciences et Techniques d’ALHOCEIMA.
Je remercie également le professeur AHARI M’hamed pour son aide et ses conseils
concernant les missions évoquées dans ce rapport, ses directives et ses encouragements qui
m’a prodiguées tout au long de ce travail.
Ainsi, je remercie mes professeurs pour la qualité de l’enseignement qu’ils m’ont prodigué à
la Faculté des Sciences et Techniques d’ALHOCEIMA.
Je remercie mes parents qui m’ont toujours soutenu et sont toujours fiers de moi ce qui me
permis d’en arriver là et de ne jamais baisser les bras. Merci pour toutes les valeurs
essentielles que vous m’avez enseignées et qui me servent au quotidien.
2
RESUME
Les huiles essentielles extraites des plantes médicinales sont utilisées depuis longtemps
comme remèdes contre les maladies. Ainsi, ce présent travail a comme objectif de mieux
comprendre les méthodes d’extraction et d’analyse les huiles essentiels à partir des plantes
médicinales.
D’abord, en donnant une vision globale sur les plantes médicinales et les huiles essentiels,
et les compositions chimiques et les critères déterminants la qualité de ces derniers. Puis, nous
avons discuté les différentes méthodes d’extraction des HES, et les méthodes d’analyse.
Ensuite, nous avons cité une application d’extraction HES à partir des plantes d’Eucalyptus,
par entrainement à la vapeur d’eau et d’analyse par chromatographie en phase gazeuse couplé
à la spectroscopie de masse.
En plus les huiles essentiels extraits des plantes de genre Eucalyptus est utilisé comme un
remède de plusieurs maladies en raison leurs propriétés médicinales.
Les mots clés : Eucalyptus, chromatographie en phase gazeuse, la spectroscopie de masse, les
plantes médicinales, les huiles essentiels.
ABSTRACT
Essential oils extracted from medicinal plants have long been used as a remedy for
diseases. Thus, this present work aims to better understand the methods of extraction and
analysis of essential oils from medicinal plants.
First, by giving an overview of medicinal plants and essential oils, and the chemical
compositions and criteria determining the quality of the latter. Then, we discussed about the
different methods of extracting essential oils, and the methods of analysis. Next, we cited an
application for extracting essential oils from Eucalyptus plants, by steam stripping and
analysis by gas chromatography coupled with mass spectroscopy.
Essential oils extracted from plants of the genus Eucalyptus is used as a remedy for several
diseases due to their medicinal properties.
Les mots clés : Eucalyptus, gas chromatography, mass spectroscopy, essential oils, medicinal
plants.
3
TABLE DE MATIERE
REMERCIEMENT ..........................................................................................................................2
RESUME...........................................................................................................................................3
ABSTRACT ......................................................................................................................................3
TABLE DE MATIERE.....................................................................................................................4
LISTE DES FIGURES .....................................................................................................................5
LISTE DES TABLES .......................................................................................................................5
LISTE D’ABREVIATION ...............................................................................................................5
INTRODUCTION GENERALE ......................................................................................................6
I.LA GENERALITE SUR LES PLANTES MEDICINALES ET LES HUILES ESSENTIELS: ..7
1. Les plantes médicinales : .........................................................................................................7
2. Les huiles essentielles :............................................................................................................7
3. Chimie des huiles essentielles : ................................................................................................7
4. Critères déterminants la qualité des huiles essentielles : ...........................................................8
5. Caractérisation des huiles essentielles : ....................................................................................9
II.LES METHODES D’EXTRACTION ET D’ANALYSE LES HUILES ESSENTIELLES: ......9
1. Les méthodes d’extraction des huiles essentielles : ...............................................................9
A. Extraction par distillation :...................................................................................................9
B. Extraction par micro-onde : ............................................................................................... 11
C. L'extraction par fluides supercritiques : .............................................................................. 11
D. Extraction par solvant : ...................................................................................................... 12
2. Les méthodes d’analyse les huiles essentielles : .................................................................. 12
A. La chromatographie en phase gazeuse (CPG) :................................................................... 12
B. Chromatographie en phase gaz couplé à spectrophotométrie de masse : ............................. 14
II.LA PARTIE EXPERIMENTALE : EXTRACTION DES HUILES ESSENTIELLES PAR
ENTRAINEMENT A LA VAPEUR D’EAU ET ANALYSE PAR CPG/MS : ............................. 14
1. Les matériels : ..................................................................................................................... 15
A. Les Matériels végétal : ....................................................................................................... 15
B. Les matériels chimiques :................................................................................................... 15
2. Les méthodes : ..................................................................................................................... 15
A. Extraction par entrainement à la vapeur d’eau : .................................................................. 15
B. Analyse de la composition chimique des huiles essentielles : ............................................. 17
3. Résultats et discussion : ....................................................................................................... 18
Conclusion : .............................................................................................................................. 18
CONCLUSION GENERALE : ...................................................................................................... 19
BIBIOGRAPHIQUES .................................................................................................................... 20
LES ANNEXES : ............................................................................................................................ 22
4
LISTE DES FIGURES
LISTE D’ABREVIATION
5
INTRODUCTION GENERALE
Les huiles essentielles ont des propriétés médicinales nombreuses et variées. La plupart
des constituants des huiles essentielles ont un pouvoir antimicrobien d’où leur usage comme
antiseptiques [3]. D’autres possèdent des propriétés digestives ou des propriétés
antispasmodiques, sédatives, cicatrisantes, etc…Ces activités sont dues surtout à leurs
constituants terpéniques.
En outre, de nombreuses HES présentent une activité contre tous les différents types de
douleurs et sont très utilisées pour traiter les troubles articulaires inflammatoires. Elles ont la
propriété de renforcer et de relancer les défenses immunitaires de l’individu [4]. C'est dans ce
sens que l'on a pu dire que les essences aromatiques étaient cytophylactiques (protectrices des
cellules vivantes).
Les plantes du genre Eucalyptus sont présentes sous de nombreuses formes comme par
exemple d’huiles essentielles (d’Eucalyptus globulus, d’Eucalyptus radiata, d’Eucalyptus
citriodora…) pour soulager de manière « plus naturelle » toutes sortes de maux, de sirops
contre la toux et l’encombrement bronchique, de pastilles contre les maux de gorges, de
sprays pour le nez décongestionnants, d’inhalation pour améliorer le confort respiratoire,
d’huile de massage pour la récupération sportive, de produits d’hygiène buccale…[21]
Dans ce rapports, on ira démontrer les compositions principale dans l’huiles essentiels
extraits à partir des deux plantes : Eucalyptus globulus, Eucalyptus radiata.
Dans le premier temps, on parlera généralités sur HES : de leur définition et de leurs
modes d’extraction, et d’analyse. Dans le deuxième temps, on citera une application
d’extraction HES à partir des plantes d’Eucalyptus, par entrainement à la vapeur d’eau et
analyse par CPG/MS.
6
I. La généralité sur les plantes médicinales et les huiles
essentiels :
1. Les plantes médicinales :
Les plantes médicinales sont utilisées depuis longtemps comme remèdes contre plusieurs
maladies. Elles sont des plantes utilisées pour ses propriétés thérapeutiques. Cela signifie
qu'au moins une de ses parties (feuille, tige, racine etc.) peut être employée dans le but de se
soigner ou à la réduire l’incidence de la ou des matières premières utilisées dans la
préparation de matériel médical. Leur efficacité relève de leurs composés très nombreux et
très variés en fonction des espèces, qui sont autant de principes actifs différents. [5]
7
La plupart des composants des HES sont inclus dans deux groupes : les terpénoïdes et les
phénylpropanoïdes, les deux sont synthétisés à travers deux voies métaboliques séparées [8].
Les phénylpropanoïdes : Ils sont moins fréquents par rapport aux terpénoïdes.
Néanmoins, certaines plantes possèdent ces composés avec des proportions
significatives. Les phénylpropanoïdes dérivent majoritairement de la phénylalanine.
Ils sont constitués d’une chaine carbonée liée à un noyau aromatique à six carbones
(annexe 1) [10].
8
les constituants produits. Il est donc impératif de préciser la partie considérée lors de
l’extraction de l’HE ;
La période de récolte : la récolte doit se faire au moment où les principes actifs les
plus intéressants produits par la plante sont à leur concentration maximale ;
La conservation des huiles essentielles : elle doit se faire dans des flacons en verre
opaque hermétique, dans un endroit frais, à l’abri de la lumière et de la chaleur pour
éviter leur oxydation et la polymérisation de leurs composants.[22]
Il existe plusieurs techniques d’extraction des huiles essentielles. Elles peuvent être extraite
par distillation, par micro-onde, par fluides supercritiques et par le solvant.
9
procédés utilisant le principe de la distillation : l'hydrodistillation et l'entrainement à la
vapeur d'eau.
L’hydrodistillation :
Le mélange des vapeurs d’eau et de composé qui a été extrait est ensuite condensé par un
réfrigérant. Le mélange des deux liquides obtenus, qui sont généralement non miscibles,
contient le composé extrait et l'eau qu’on peut ensuite les séparer en utilisant une ampoule à
décanter. [12]
C’est le procédé de distillation le plus courant. Le produit qui se sépare de l’eau est appelé
huile essentielle. Une fois portée à température, l’eau se transforme à en vapeur et passe à
travers les plantes dans le distillateur. Cette vapeur chargée en molécules aromatiques passe
ensuite dans un serpentin refroidisseur. La vapeur redevenue liquide se sépare en deux
éléments par différence de densité : l’huile essentielle et l’eau florale également appelée
hydrolat. La plupart des essences sont plus légères que l’eau. Elles sont récupérées dans la
partie supérieure de l’essencier également appelé vase florentin.
10
Figure 3: Représente le montage extraction par entrainement à la valeur d'eau.
Source : www.aroma-essentiel.fr
11
Toutefois cette technique d'extraction présente un inconvénient la basse polarité du CO2
supercritique qui le solvant d'extraction le plus employé. Le CO2 possède les propriétés
intermédiaires entre celle des liquides et celles des gaz, ce qui lui confère un bon pouvoir
d'extraction. [14]
Les solvants les plus utilisés à l'heure actuelle sont l'hexane, le cyclohexane, l'éthanol, le
méthanol, le dichlorométhane et l’acétone. Ces solvants ont un pouvoir d'extraction plus élevé
que l’eau.[11]
12
décomposition [15]. Les progrès technologiques réalisés dans le domaine des colonnes
capillaires, des phases stationnaires et des détecteurs ont contribué à rendre la CPG
incontournable pour la caractérisation des HES [16].
Avant de se lancer dans les étapes de la chromatographie, il est important, que dis-je,
primordial que vous visualisiez la tête d’un chromatographe pour bien tout comprendre.
Celui-ci comporte 3 parties différentes :
Le principe de CPG :
Les huiles essentielles sont injectées dans le chromatographe à l’aide d’une micro-
seringue, une toute petite seringue, que l’on plante dans un septum. Dans la chambre
d’injection, une température relativement élevée facilite l’évaporation de l’huile essentielle
pour dissocier les composés, puis ceux-ci sont transportés par un gaz que l’on qualifie de gaz
porteur, ou gaz vecteur pour le petit côté scientifique. [18]
Les composés sont alors séparés grâce à la phase stationnaire dans la colonne qui va créer
un phénomène de rétention plus ou moins fort selon les molécules. À la sortie de la colonne,
13
les molécules sont une à une détectées au fur et à mesure de leur élution (petit terme de
laborantin qui indique le retour en solution des molécules retenues), et identifiées à des temps
de rétention différents selon leur affinité avec la phase stationnaire. Plus une molécule mettra
de temps à sortir de la colonne, plus elle aura été retenue, et donc plus elle aura eu d’affinité.
A ce niveau-là, le détecteur envoie un signal électronique plus ou moins fort selon la quantité
de la molécule détectée, et l’ensemble des signaux est envoyé à un enregistreur qui s’occupe
de tracer le chromatogramme, les courbes qui nous permettent ensuite de quantifier les
différents composés. [17]
Pour le domaine des huiles essentielles, la technique de spectrométrie de masse est la plus
utilisée pour analyser et “peser” les molécules. Le mécanisme du spectromètre de masse est
relativement complexe, mais en bref, un rapport masse atomique sur charge électrique, noté
m/z est calculé de manière à trier les composés et à établir un diagramme d’abondance. [17]
14
1. Les matériels :
A. Les Matériels végétal :
Le matériel végétal est constitué par deux plantes de genre d’Eucalyptus : Eucalyprus
globulus, Eucalyprus radiata.
2. Les méthodes :
A. Extraction par entrainement à la vapeur d’eau :
La chaudière est conçue pour recevoir la corbeille dans laquelle l’échantillon végétal à
distiller (de 20 à 25 kg) est déposé. Il faut en premier lieu supprimer les résidus des huiles
essentielles dans l’extracteur pilote en effectuant 3 lavages : deux lavages à blanc, d’une durée
de deux heures chacun avec de l’eau et un troisième lavage d’une même durée avec la plante à
extraire. Il faut ensuite peser 25 kg de matière végétale à traiter et la placer dans le panier
perforé.
15
Figure 8: Représente l'extracteur pilote.
Source : CRD Saïdal, 2008
Il faut ensuite remplir l’extracteur d’eau et surveiller le niveau d’eau, puis procéder à la mise
en marche de l’équipement selon le mode d’utilisation.
Au départ, le réfrigérant est rempli d’eau, la température de l’appareil est réglée à 100°C pour
favoriser au maximum l’évaporation de l’eau du végétal (l’eau s’évapore, puis traverse les
différents tissus du végétal en entrainant les molécules d’huile essentielle).
Les vapeurs quittent la chaudière vers le réfrigérant, à travers un tube métallique inoxydable,
lequel est raccordé au serpentin du réfrigérant rempli d’eau et dont la température avoisine les
12 – 13 °C, de ce fait, les vapeurs condensées dans le serpentin sont récupérées dans
l’essencier.[20]
Les prélèvements des feuilles ont été effectués séparément, les feuilles de E. globulus, E.
radiata, en juin 2011. Le choix de ces plantes a été motivé par le fait que ce sont des espèces
végétales qui ne sont sujettes à aucune contrainte, qu’elle soit écologique ou physiologique.
Certaines poussent spontanément dans la région d’étude et d’autres sont largement cultivées
par la population locale. Ajoutons à cela, la richesse de leurs organes en huiles essentielles
(donc rentables économiquement), rapportée par la bibliographie.
16
Figure 9 : Huile essentielle dans une ampoule à décanter.
Source : http://tpe-parfum2014.e-monsite.com/
Les huiles obtenues sont conservées dans des flacons en verre opaque, à l’abri de la lumière et
à une température de 4°C. [20]
La température initiale de 40°C est maintenue pendant une minute. La température augmente
à raison de 2 °C/mn, jusqu’à atteindre 240°C. Cette dernière est maintenue pendant 20 mn. La
température régnant dans l’injecteur et l’interface est de 250° C, celle de la source est de
230°C.[16]
Les résultats des analyses des huiles essentielles sont présentés sous forme de
chromatogrammes. Le chromatogramme des ions totaux est enregistré en utilisant une source
d’impact électronique et l’énergie cinétique des ions est de 70 eV.
Le chromatogramme de chaque huile essentielle comporte plusieurs pics. Chaque pic est
représenté par un temps de rétention qui représente la nature du composé de l’huile essentielle
et par un pourcentage de l’aire du pic, qui constitue le pourcentage du composé de l’huile par
rapport aux autres composés.
Après identification des différents constituants des huiles essentielles, nous avons classé les
composés terpéniques selon le nombre d’unités en C10 qu’ils comportent, par rapport au
17
nombre total des composés de chaque huile essentielle (monoterpènes : C10H16 ;
sesquiterpènes : C15H24 et les diterpènes : C20H32). [19]
3. Résultats et discussion :
Dans cette partie nous traiterons séparément les résultats obtenus pour les échantillons de
feuilles prélevées en juin 2011. Les résultats des analyses des huiles essentielles sont
configurés sous forme de chromatogrammes. Chacun comportant plusieurs pics, 21 pour E.
radiata, 23 pour E. globulus.
Les deux huiles essentielles extraites sont formées d’hydrocarbures représentés par des
terpènes, des sesquiterpènes et des diterpènes ainsi que de composés oxygénés tels que les
alcools, les esters, les éthers, les aldéhydes, les cétones, les phénols.
L’α pinène et le β pinène sont les composés monoterpéniques les plus communs des huiles
extraites. Les concentrations en α pinène varient de 2 à 19 % et celles du β pinène de 0,21 à
3,71 % environ pour les deux espèces végétales étudiées. (Annexe 2)
Conclusion :
La période d’extraction, les méthodes d’analyse, l’origine géographie, l’environnement
dans lequel évalue une plante et l’organe étudié influencent considérablement la composition
chimique d’huile essentiels.
18
CONCLUSION GENERALE :
Dans le premier temps, on donne une vision globale sur les plantes médicinales et
identification les propriétés des huiles essentiels. Puis, on discute des différentes méthodes
d’extraction et d’analyse. Pendent cette étude bibliographie, nous parmi d’identifier les
composants principale des HES à partir de deux plantes (E. globulus, E.radiata) après
l’extraction par entrainement à vapeur et d’analyse par CPG/MS, ces composants principale
comme monoterpène, sesquiterpène et l’eucalyprol, qui ont des propriété médicinales, et ces
huiles essentiels intéressé à la remède de plusieurs maladies, tels que les maux de gorges, le
nez décongestionnants, et le confort respiratoire….
A ce jour, on peut dire que les plantes du genre Eucalyptus n’ont pas encore révélé tous
leurs secrets et restent d’important sujet d’études pour des recherches scientifiques. La
recherche scientifique doit démontrer les bienfaits de l’Eucalyptus déjà mis à jour par les
usages traditionnels. Ces recherches permettront d’approfondir mais aussi de découvrir des
propriétés utilisables dans de nombreuses applications.
19
BIBIOGRAPHIQUES
[1]- Bruneton, J. (1999) Pharmacognosie , Plantes médicinales, Ed. Lavoisier, Techniques et
Documentation, Paris 1999, pp 405 ;
[2]- Lafon, J.P.; Thorand Prager, C. et Levy, G. (1988)« Biochimie structurale » Biologie
des plantes cultivées. Tome 1. Lavoisier. TEC. & DOC. 1988; p 58
[3]-Zambonelli, A.; Zechini, A.; D’aulerio, A.; Bianchi, A.; Albasni, A. J.(1996),
Phytopathology, pp 491-494;
[4]- Wei, A.; Shibamoto T. J.(2006)., Agric. Food Chem., 55,pp 1737-1742;
[5]-ABI FARAJ C., 2005. A guide to medicinal plants in North Africa.IUCN Centre for
Mediterranean Cooperation, Malaga (Spain).
[6]-Burt S., 2004. Essential oils: their antibacterial properties and potential applications in
foods–a review. International Journal of Food Microbiology. 94 : p 223–253.
[7]-Bakkali F., Averbeck S., Averbeck D., Idaomar M., 2008. Biological effects of
essential oils. Food Chemical Toxicology. 46: p 446–475.
[8]-KHENAKA Karima,(2011), Effet de diverses plantes médicinales et de leurs huiles
essentielles sur la méthanogenèses ruminale chez l’ovin, Algérie, pp 19
[9]-Benchaar C., Calsamiglia S., Chaves A.V., Fraser G.R., Colombatto D., McAllister
T.A. et al., 2008. Plant-derived essential oils in ruminant nutrition and production. Animal
Feed Science and Technology. 145:p 209–228.
[10]-Sangwan N.S., Farooqi A.H.A., Shabih F., Sangwan R.S., 2001. Regulation of
essential oil production in plants. Plant Growth Regulation. 34 :p 3–21.
[11]-Sallé J.I. (2004). Les huiles essentielles-synthèse d'aromathérapie. Edition Frison-
Roche. P 16
[12]-Bruneton J. (1999). Pharmacognosie, phytochimie. Plantes médicinales. Edition
Technique et documentation, 3ème Edition Lavoisier, Paris. 1095p.
[13]-Scheffer J.J.C. (1996). Various méthodes for the isolation of essentiel oils. Phytother.
Res., 10, p 56- 57.
[14]-Djarri L. (2011). Contribution à l'étude des huiles essentielles et des métabolites
secondaires de trois plantes Algériennes de la famille de Apiaceae Daucus reboudii coss. Ex
Batt. Et Trab., Kundmannia sicula (L.) D., et Elaeoselinum thapsioides Maire. Thèse de
Doctorat en sciences.p 120
[15]-P. Arpino, A. Prévôt, J. Serpinet, J. Tranchant, A. Vergnol, P. Witier, (1995)
Manuel pratique de chromatographie en phase gazeuse, Masson, Paris. p 59-70
20
[17]- Compagnie des sens, La chromatographie pour vérifier la qualité des huiles essentielles,
https://www.compagnie-des-sens.fr/chromatographie-huiles
[18]- BROWNING D.R. (1971), Chromatographie, Masson & Cie, Paris, 164 p. p 76
[22]- Jouault S., 2012. La qualité des huiles essentielles et son influence sur leur efficacité et
sur leur toxicité. Thèse de doctorat d’état en pharmacie. Université de Loraine. Faculté de
pharmacie. France. 137 p. p 72.
21
LES ANNEXES :
22
P. cymène 3,48 3,44
Terpinolène 0,24 0,24
Isopentyl-isovalérate 0,17 3,64
Thujone 0,15 0,15
α-campholenal 0,15 0,15
α-gurjunène 0,17 0,11
β-citral - 0,85
3cyclohexene-1-citral - 0,23
α-pinène oxyde - -
Linalylbutyrate - -
Myrtenol 0,17 0,17
Isobutanoate - -
Géraniol 0,15 1,04
Caryophylènne oxyde - -
Eugenolmethyl - -
1H-Cycloprop [e]
azulènne - -
Naphtalène - -
Borneol - -
Naphtalène cis - -
D-Fenchyl-Alcool 0,23 0,23
23
24