LETTRE A L ' E D I T E U R
1993 ; 23:940 2
Activit antimicrobienne in vitro
de solutions de B tadine® 10 %
et 4 %de polyvidone iod e*
A. CHANTEFORT**
Les sp&cialit~s B4tadine D e r m i q u e ® ......... et B~tadine
Scrub® .........sont des antiseptiques de la famille des oxy-
dants dont le principe actif est la polyvinylpyrrolidone io-
d&e (PVPI), 10 % pour la B~tadine Dermique®, 4 % pour
la B~tadine Scrub®. La polyvinylpyrrolidone iod~e ou po-
lyvidone iod4e est un complexe du polym&re de polyvi-
nylpyrrolidone et d'iode ; l'iode s'en lib~re progressivement
(8). De nombreux essais d~montrant l'activit~ antimicro-
bienne des sp4cialit~s B~tadine® ont 4t4 publi4s depuis
plus de trente ans (2, 3, 4, 5, 9) ; ils ont ~t& completes en
1992-93 et les r~sultats sont d&taill~s ci-apr&s.
METHODES
Les essais ont consist~ ~ mettre en contact dans le pro-
duit ~tudi~, ~ diff~rentes dilutions, un ou plusieurs inocu-
lums de microorganismes puis ~ effectuer le d~nombrement
des survivants apr~s le temps de contact choisi. Pour cela
il est n~cessaire d'arr~ter l'action du produit ~ la fin de ce
temps de contact. Les normes AFNOR de la s~rie T72 (1)
et la note Pharrnacopea Antiseptica (6) qui en d~rive pr~-
voient deux possibilit~s : la neutralisation de l'antiseptique
par l'adjonction d'un ou plusieurs compos~s chimiques ou
la filtration sur membranes du m~lange antiseptique-mi-
croorganismes avec lavages des membranes pour ~limi-
net les ~ventuels r~sidus d'antiseptique retenus sur ou dans
le r~seau d'esters de cellulose constituant ces membranes.
La seconde technique est plus commode ~ mettre en oeuvre
que la premiere qui n~cessite la recherche d'un neutrali-
sant adapt~ ~ la formulation ~ l'essai, elle est de ce fait la
plus largement utilis~e. C'est cette technique par filtra-
tion sur membranes qui a ~t~ employee pour ces nou-
veaux essais. La PVPI est parfaitement ~limin~e du r~seau
de cellulose par 3 ringages successifs avec 50 ml d'eau
* Regu le 04.05. ] 993. Acceptationd~finitivele 15.11.1993.
**Institut de Recherche Microbiologique,rue Newton, F-77290 Mitry
Mory.
*** Laboratoires Sarget, Avenue J.F. Kennedy, F 33701 Merignac
cedex.
940
M6ctMal Infect.
distill~e sterile additionn~e ~ventuellement de 0,5 % (v/v)
de polysorbate 80 : des essais pr~liminaires sont tou-
jours men~s en parall~le avec les essais proprement dits
pour v~rifier sur les membranes filtrantes la totale ~limi-
nation du produit ~ la fin du temps de contact choisi.
Une autre technique mise en oeuvre est celle figurant
au paragraphe V.2.1.C. de la Pharmacop~e Frangaise
(janvier 1989)intitul~e "Efficacit~ des agents de conser-
vation antimicrobiens" (7).
RESULTATS
Les essais men~s selon la n o r m e A F N O R T 7 2 - 3 0 1
( n o v e m b r e 1989) "Essai de suspension par filtration
sur membranes" sont bas~s sur la m6thodologie NF T 72-
151 (1) mais en laissant le libre choix des souches, temps
et temperature de contact, substances interf~rentes ~ven-
tuelles. Les souches suivantes de la Collection Nationale
de Cultures de Microorganismes (Collection de l'Institut
Pasteur Paris CIP ou IP) ont ~t~ utilis~es ; elles sont con-
serv~es et contr61~es selon la norme AFNOR T 72-140
(aoQt 1 9 8 8 ) : P s e u d o m o n a s aeruginosa CIP A 22,
Escherichia coli CIP 5 4 127, Staphylococcus aureus
CIP 53 154, Enterococcus hirae CIP 58 55, Mycobacterium
smegmatis CIP 73 26, Propionibacterium acnes CIP 53
1 1 7 T , Propionibacterium avidum CIP 102 0 6 5 et
Staphylococcus epidermidis CIP 68 21. L'inoculum de
d~part est de l'ordre de 108 bact~ries par ml. Pour les
essais effectu~s selon la Pharmacop~e Frangaise V.2. I.C.
"Efficacit~ des agents de conservation antimicrobiens"
(7) on utilise des inoculums de 105 microorganismes par
ml des esp~ces Pseudomonas aeruginosa CIP 82 118,
Staphylococcus aureus CIP 53 156, Candida albicans
IP 48-72, Aspergillus niger IP 1431-83 et Bacillus sub-
tilis var. niger CIP 77 18 (spores).
La d~termination du t e m p s de r~duction d~cimale D
(temps de contact n4cessaire qui p e r m e t de r&duire le
nombre de spores de 1 logarithme d~cimal) est r~alis~e
 Tableau I : B~tadine dermique®.

Essais Souches R~sultats

T 72-301 Pseudomonas aeruginosa Taux de destruction de 5 logs

Concentration 90 % Escherichia coli en moins de 15 s.
Temperature : 32°C Staphylococcus aureus
Enterococcus hirae
Mycobacterium smegmatis

T 72-301 Propionibacterium acnes Taux de destruction de 5 logs en

Concentration 90 % Propionibacterium avidum moins de 15 s.
Temperature : 32°C

T 72-301 Staphylococcus aureus Taux de destruction de 5 logs

Concentration 50 % Staphylococcus epidermidis en moins de 15 s. avec ou sans
Temperature : 32°C prot~ines (albumine 1 % + extrait
de levure 1%).

Pharmacop~e V. 2. I.C. Pseudomonas aeruginosa Aucun survivant

Flacons de 500 ml Staphylococcus aureus 14 jours et 28 jours.
Temperature : 25°C Candida albicans
Aspergillus niger
Spores de Bacillus subtilis
var. n iger

Pharmacop~e V.2. I.C. Pseudomonas aeruginosa Aucun survivant

Flacons de 500 ml Staphylococcus aureus J+14 et J+28 soit 3 jours
Temp6rature : 25°C Candida albicans apr~s 6 ou 8 ensemencements.
Ensemencements r~it~r~s Aspergillus niger
~J0, J + l , J+2, J+3, J+4, J+11, Spores de Bacillus subtilis
J+18, J+25 vat. niger

D~termination du temps de Spores de Bacillus subtilis D = 3 h 45 min.

r~duction d~cimale (D) var. niger

T a b l e a u II : B ~ t a d i n e s c r u b ® .

Essais Souches R~sultats

Pharmacop~e V.2. I .C. Pseudomonas aeruginosa Aucun survivant

Flacons de 500 ml Staphylococcus aureus 14 jours et 28 jours,
Temperature : 25°C Candida albicans
Aspergillus niger

Pharmacop~e V.2. I.C. Pseudomonas aeruginosa Destruction imm6diate bact6ries et

Flacons de 500 ml Staphylococcus aureus levures. Destruction des conidies de
Temp&rature : 25°C Candida albicans moisissures de 4,9 logs en 24 h.
Ensemencements r&it~r~s Aspergillus niger Destruction des spores bact6riennes
h J0, J + l , J+2, J+3, J+4, J+11, Spores de Bacillus subtilis de 3,3 logs en 24 h.
J+14, J+18, J +2 4 var. niger

D£termination du temps de Spores de Bacillus subtilis D=6h.

r~duction d~cimale (D) var. niger

941
avec des s p o r e s de Bacillus subtilis var. niger CIP 7 7 1 8 .
L'inoculum de d ~ p a r t est de 1 , 9 . 1 0 9 s p o r e s p a r ml avec
B 6 t a d i n e D e r m i q u e @ et de 6 , 6 . 1 0 8 s p o r e s p a r ml avec
B~tadine Scrub@ (tableaux I e t II).
DISCUSSION
aeruginosa, S t a p h y l o c o c c u s aureus et Candida albi-
cans. P o u r Aspergillus niger, la fongicidie (r~duction su-
p ~ r i e u r e ~ 4 logs) est o b t e n u e en m o i n s d e 2 4 h e u r e s ;
q u a n t a u x s p o r e s de Bacillus le t a u x de r&duction d~ci-
m a l e ~ 2 5 ° C est de 3 h e u r e s 4 5 m i n u t e s p o u r B~tadine
D e r m i q u e @ et de 6 h e u r e s p o u r B~tadine Scrub@.

La plupart des exp&rimentations publi~es r e c h e r c h e n t une CONCLUSION

c o n c e n t r a t i o n active de PVPI p a r dilutions d a n s d e l'eau
distill~e enrichie ou n o n e n s u b s t a n c e s interf&rentes. Nos
essais ont port~ sur des investigations diff~rentes : Jes sp&-
cialit~s sans dilution ou faiblement dilutes (90 % et 5 0 %),
c o m m e elles sont en pratique g~n&ralement utilis~es, sont-
elles efficaces d a n s d e s t e m p s tr~s courts ? Leur efficaci-
t~ b i o c i d e a ~t~ d ~ m o n t r ~ e p o u r d e s t e m p s inf&rieurs
15 s e c o n d e s sur les s o u c h e s G r a m positives et G r a m n~-
gatives test~es, sur d e s m y c o b a c t ~ r i e s (Mycobacterium
smegmatis) et sur des bact~ries ana~robies strictes (Propioni-
bacterium). C e t t e efficacit& antibact&rienne s'av&re d o n c
r a p i d e in vitro ainsi que l'avaient sugg6r~ des &tudes an-
t~rieures (4) et porte sur un large ~ventail de microorganismes
c o m m e e n t ~ m o i g n e n t de n o m b r e u x essais (2, 3, 5, 9).
Les a u t r e s essais men&s, c o n c e m a n t la m e s u r e d u p o u -
voir conservateur, o n t dSmontr~ l'activit~ bactSricide, fon-
gicide et s p o r i c i d e de B&tadine D e r m i q u e @ et B&tadine
Scrub@, m S m e en pr&sence d ' e n s e m e n c e m e n t s r&it&r&s :
la bact&ricidie et la d e s t r u c t i o n des levures sont totales et
imm~diates - e n quelques s e c o n d e s - p o u r P s e u d o m o n a s
Les sp~cialit~s B~tadine Dermique@ et B~tadine Scrub@.-
d~truisent les m i c r o o r g a n i s m e s p a r liberation p r o g r e s s i -
ve diode. L'activit~ de l'iode est due b son pouvoir oxydant :
les p r o t ~ i n e s d e s cellules m i c r o b i e n n e s s o n t d ~ n a t u r ~ e s
p a r oxydation, la m o r t celtulaire est instantan~e. In vitro,
les bact~ries G r a m positives et G r a m n~gatives, a~robies
ou a n a 6 r o b i e s , d o n t les m y c o b a c t ~ r i e s sont tu~es tr&s ra-
p i d e m e n t e n m o i n s de ] 5 s e c o n d e s . A u c u n e r~sistance
n'a p u ~tre mise e n ~vidence. L'activit~ tevuricide est aus-
si tr~s intense. P o u r les moisissures ou les s p o r e s bact~-
r i e n n e s le t e m p s n ~ c e s s a i r e ~ leur d e s t r u c t i o n est plus
long : quelques heures. Le t e m p s de r~duction d~cimale
(D) p o u r des s p o r e s de Bacillus subtilis a v e c l a B~tadine
Dermique@, la plus c o n c e n t r ~ e en PVPI, est de m o i n s de
4 heures.
l~a possibilit~ d e multiplication d'un b i o c o n t a m i n a n t issu
d e l ' e n v i r o n n e m e n t ou d e l'utilisateur d a n s un flacon d e
B~tadine@, m ~ m e de g r a n d e capacit~ (500 ml), est d o n c
tout-~-fait i m p r o b a b l e p o u r n e p a s dire impossible.

SUMMARY M I C R O B I C I D A L A C T I V I T Y O F BETADINE@ S O L U T I O N , 10 %
A N D 4 % O F P.V.P. IODINE

C o n c e n t r a t e d solutions (90 %, 5 0 %) of B e t a d i n e D e r m i q u e ® and B e t a d i n e Scrub@ kill very

quickly Gram positive and Gram negative bacteria, aerobic and anaerobic bacteria (including
Mycobacterium), in less than 15 seconds. No resistance could be detected. P o t e n c y of such solu-
tions on yeast is also very intense. H o w e v e r , f e w hours are n e e d e d for a total destruction o f
moulds or bacterial spores. The multiplication o f a microorganism which c o m e s f r o m the envi-
r o n m e n t or the utilisator, in a Betadine® bottle is very improbable, even in a big bottle (500 ml).

Key-words : Antiseptic activity - Betadine®.

M o t s - c l 6 s : Activit~ antiseptique - Betadine@.

BIBLIOGRAPHIE

i. ASSOCIATION FRANCAISE DE NORMALISATION Recueil
de normes frangaises antiseptiques et d~sinfectants - 1989.
AFNOR - Tour Europe Cedex 7 - 92080 Paris La D~fense.
2. BOURLIOUXP., BARC M.C., BAHSOUN N., GERMAN A.
Activit~ bactericide de la polyvinylpyrrolidone iod~e in vitro et
in vivo sur la peau saine. Rev Inst Pasteur Lyon. 1982 ; 15 :
263-76.
3. CHANTEFORT A., DRUILLES J., HUET M. R~sistance de
certains Pseudornonas aux antiseptiques et d~sinfectants. M6d
Mal Infect. 1990 ; 20 : 234 40.
4. DRUILLES J., CHANTEFORT A., HUET M. - Activit~
bactericide in vitro de quelques antiseptiques. Rev Inst Pasteur
Lyon. 1986 ; 19 : 217-31.
5. GIRARDO P., REVERDY M.E., MARTRA A., FLEURETTE J.
- D~termination de la concentration minimale bactericide de
trois antiseptiques et un d~sinfectant sur 580 souches de
bacilles & Gram n~gatifs d'origine hospitali~re. Path Biol.
1989 ; 37 : 605-]1.
6. P h a r m a c o p ~ e Frangaise Xe adition - A d d i t i f 5 - M o n o g r a p h i e :
p r e p a r a t i o n s antiseptiques - activit~ - j a n v i e r 1 9 9 0 .
7. P h a r m a c o p ~ e Frangaise Xe ~dition - P a r a g r a p h e V . 2 . ] . C . -
Efficacit~ des agents de conservation antimicrobiens - Pr~pa
rations pour application locale -janvier 1989.
8. SHELANSKI H.A., SHELANSKI M.V. PVP-lodine : History,
toxicity and therapeutic uses. Jour lnt Co] Sarg. 1956 ; 25 :
727 34.
9. VIALLIERJ. - Etude de l'activit6 bact6ricide de la polyvinyl-
pyrrolidone iod6e sur les mycobact6ries. Lyon Med. 1975 ;
234 : 93 8.

942