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L’ELECTROPHORESE
Découvrez nos marques Fisherbrand™, Fisher Chemical™ et
Fisher Bioreagents™. Des produits complémentaires, fiables et
d’électrophorèse les plus exigeantes.
Depuis plus de 50 ans, l’équipe Fisher Scientific a utilisé cette même passion sans limites pour créer et améliorer continuellement la gamme Fisherbrand :
des produits au rapport qualité-prix incroyable pour mieux travailler en laboratoire, chaque jour, aux moments les plus importants.
La création de partenariats avec des fabricants clés du marché nous permet de proposer des produits de grande qualité parfaitement adaptés à vos
besoins, qui plus est dans les catégories que vous utilisez le plus souvent, soit, entre autre :
En complément de la large gamme Fisherbrand, nous vous proposons également une offre étendue de produits Fisher Chemical et Fisher Bioreagents.
Praticité, qualité et constance sont les promesses de nos marques Fisher Chemical et Fisher Bioreagents, des gammes de produits largement utilisées
dans de nombreux secteurs de recherche, notamment dans le secteur universitaire, pharmaceutique, les biotechnologies et la santé.
• La marque Fisher Chemical propose plus de 4 000 produits chimiques de la plus grande qualité, notamment des réactifs et composés organiques
et inorganiques, des solutions prêtes à l’emploi et des solvants de haute pureté. Tous ces produits chimiques sont certifiés ISO 9001:2008 et sont
soumis à des procédures strictes de tests et de contrôle qualité, pour garantir un niveau de constance élevé entre les lots et entre les flacons. Avec une
structure d’application et de classification simple et claire, choisir le produit le mieux adapté à vos exigences est on ne peut plus simple
• La marque Fisher Bioreagents propose plus de 1 000 produits dédiés à la recherche en biologique moléculaire, biochimie et biologie cellulaire. C’est la
référence pour vos produits de haute pureté
Lorsqu’ils sont utilisés ensemble, les produits Fisherbrand, Fisher Chemical et Fisher Bioreagents vous aideront à rendre
votre travail meilleur chaque jour.
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Cette brochure est destinée à vous offrir un aperçu complet de notre gamme de produits d’électrophorèse. Avec tout un choix d’instruments, de
consommables, de produits Fisher Chemical et Fisher Bioreagents ainsi que des ressources utiles concernant nos produits comme des formules
vous permettant de produire vos propres solutions mères, des guides de résolution des problèmes, des FAQ et des protocoles, c’est un excellent
compagnon de laboratoire.
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Introduction sur l’électrophorèse horizontale Produits Fisher Bioreagents pour
électrophorèse verticale
Cuves d’électrophorèse horizontale
EZ-RUN solution de gel de protéine
Mini système d’électrophorèse EZ-RUN solution standard de protéine
Cuves d’électrophorèse horizontale, SUB-GEL EZ-RUN solution de coloration de protéine
SUB-GEL Mini Tampons pour électrophorèse de protéines
SUB-GEL Midi Acrylamide, bisacrylamide et catalyseurs
SUB-GEL Midi-Plus Réactifs de dénaturation/détergents
SUB-GEL Maxi
Cuves d’électrophorèse horizontale, grand format Produire vos propres solutions pour
Grand format, Mini-Plus électrophorèse verticale
Grand format, Midi-Plus
Cuves RunView Blotting
Cuves dédiées à l’enseignement
Appareils de blotting semi-sec
Ressources techniques
Ressources techniques
Workflow en génomique
Guide de résolution des problèmes - électrophorèse Guide de résolution des problèmes des générateurs
horizontale Foire aux questions (FAQ) – générateurs
Foire aux questions (FAQ) – électrophorèse
horizontale
Equipements liés
Introduction sur l’électrophorèse verticale
Armoires de stérilisation UV
Cuves d’électrophorèse verticale Transilluminateur LED à lumière bleue
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Introduction à l’électrophorèse horizontale
Bien que l’électrophorèse horizontale soit une technique établie de longue date, elle offre de nombreux avantages concernant la séparation des
acides nucléiques et elle reste aujourd‘hui un pilier de la biologie moléculaire. C’est une technique analytique utilisée pour séparer les molécules
d’ADN ou d’ARN selon leur taille. Les échantillons sont introduits dans les cuves avec du gel d’agarose, qui est immergé avec un tampon, et est
soumis à un champ électrique. Vu la charge négative de la molécule d’ADN/ARN, appliquer le courant électrique induit une migration vers l’anode.
La séparation est obtenue dans la matrice de gel car les molécules plus grandes migrent lentement et restent près de la cathode, tandis que les
molécules les plus petites migrent vers l’anode.
Cette section présente les cuves d‘électrophorèse horizontales Fisherbrand, qui figurent parmi les gammes les plus complètes et les plus polyvalentes
actuellement disponibles pour les applications sur ADN et ARN à débit faible et élevé.
Pour voir les modes d’emploi de la gamme complète de cuves horizontales, rendez-vous sur eu.fishersci.com/go/fisherbrand.
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Mini cuve d‘électrophorèse horizontale
Il suffit de verser le gel, de charger les bandes de contraste et d’appuyer sur le bouton de démarrage. La mini cuve d’électrophorèse Fisherbrand™ est
idéale pour les petits laboratoires ou les travaux pratiques.
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Cuves Horizontales, SUB-GEL
La gamme Fisherbrand SUB-GEL comporte des cuves Mini, Midi, Midi-Plus et Maxi. La taille relativement compacte de chaque appareil permet une
économie de consommation de gel et de tampon sans compromettre la vitesse de séparation et ni la résolution.
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Conception de la cuve et du couvercle
Construction moulée à injection de haute qualité et conception étanche durable pour une
sécurité totale de longue durée
Électrodes de style cassette - difficiles à briser, peu onéreuses et faciles à changer - composées de platine pure
résistant à 99,99 % à la corrosion
Retrait facile du couvercle en un clic - conception asymétrique du couvercle avec emplacement des pouces sur
les électrodes avec codes couleurs permettant d’effectuer toujours l’électrophorèse dans la bonne direction - c.à.d.
Négatif à positif
Peignes
La gamme la plus large de peignes disponibles - s’adapte pratiquement à toute application, de l’électropho-
rèse préparatoire aux analyses à haut débit
Disponible en quatre épaisseurs et avec code couleur:
• Blanc – 1 mm fourni en standard
• Noir – 0,75 mm pour les bandes étroites
• Rouge – 1,5 mm pour maximiser le volume de l’échantillon
• Bleu – 2 mm pour maximiser le volume de l’échantillon
Les peignes noir et blanc sont recommandés pour des gels à haute résolution et la publication de données de haute
qualité ; rouge et bleu pour les volumes à plus grande échelle lors des techniques préparatoires
Hauteur ajustable, sans besoin d’outils spécialisés ou de porte-peignes, permettant à l’utilisateur de contrôler totalement la
profondeur de la cuve et le volume de l’échantillon ; le dos rigide du peigne empêche toute courbure thermique
Guide de chargement réversibles directement au-dessus de chaque cuve fournissant un modèle de chargement
facile avec des pipettes monocanal ou multicanaux
Plateaux
Multiples supports disponibles - élimine le besoin de cuves supplémentaires permettant le moulage de gel en dehors de
la cuve. La cuve restant disponible à tout moment et dédiées aux cycles d’électrophorèse.
D’autres supports comprenant d’autres supports de moulage en plastique et flexicaster sont disponibles sur demande
Accessoires
• Guides de chargement rouges - permettent une visualisation d’échantillon et de cuve lors de la migration
• Plateforme blanche - fournit un contexte contrastant pour voir les fronts de migration du bleu de bromophénol et
déterminer le progrès de l’électrophorèse pendant chaque essai
Table de nivellement de gel. Pieds de nivellement ajustables utilisés avec un niveau à bulle offrant une surface égale
sur laquelle on peut verser des gels grand formats assurant ainsi une migration uniforme et constante
Cool-pack et support runFAST - siège directement au-dessus du gel dans le tampon pour fournir une résolution améliorée et
des durées d’essais plus courtes adaptés aux formats horizontaux plus grands :
(1) Remplir le réservoir de tampon
(2) Insérer le support au-dessus du gel
1 2 3 (3) Placer le Cool-pack pré-congelé sur le support ; branchez la cuve et analyser les échantillons à des tensions plus élevées
• Cordons d’alimentation – avec raccords 4 mm compatibles avec la plupart des générateurs modernes ; conforme
CE. Adaptateurs disponibles
• Blocs économiseurs de tampon – bénéfique notamment pour les unités à plus grand format
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Cuve Mini SUB-GEL
Conçue pour des vérifications rapides d‘un nombre d’échantillons faible à moyen
Caractéristiques techniques
Réf. Description
11863303 Cuve Mini SUB-GEL
Peignes et accessoires
Peignes Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL
Épaisseur 0,75mm Épaisseur 1,0mm Épaisseur 1,5mm Épaisseur 2,0mm
Prép 1, 1 échantillons 11873473 152 11823483 203 11833483 304 11843483 405
Prép 2, 2 échantillons 11833493 68 11843493 90 11857553 135 11867553 180
Prép 4, 2 échantillons 11877553 36 11887553 48 11897553 72 11807563 96
8 puits,, MC 11857563 8 11867563 11 11877563 17 11887563 23
8 puits, 11817563 19 11827563 25 11837563 37 11847563 50
10 échantillon 11883473 14 11893473 18 11803483 27 11813483 36
12 puits, MC 11853483 10 11863483 14 11873483 20 11883483 27
16 puits 11893483 7 11803493 10 11813493 15 11823493 20
Accessoires
Réf. Description
11847573 Support de gel transparent 70 mm x 70 mm
11837573 Support de gel transparent100 mm x 70 mm
11837633 Plaque de fermeture
11863473 Support de coulage externe Mini / Midi Flexicaster
11897563 Guides adhésifs
11867573 Plateforme
11807583 Cool-pack avec plateforme
11877633 Blocs économiseur tampon (x2)
11857573 Pelle pour gel UV 70 mm
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Cuve Midi SUB-GEL
Parfaite pour des vérifications rapides d’échantillons de PCR* et pour le clonage
Caractéristiques techniques
Dimensions [L x I], mm..............................................70 x 100, 100 x 100 (gel)
Dimensions [L x l x h], mm...............................................220 x 125 x 90 (cuve)
Capacité.............................................50 échantillons (100 mm x 70 mm max.)
100 échantillons (100 mm x 100 mm max.)
Volume, mL..................................................................................300 (tampon)
Peignes
- Nb d’échantillons................................1, 2, 4, 8, 10MC, 12, 16, 20MC, 25
- Épaisseur, mm.....................................................................0.75, 1, 1.5, 2
Réf. Description
11853303 Cuve Midi SUB-GEL
Peignes et accessoires
Peignes Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL
Épaisseur 0,75mm Épaisseur 1,0mm Épaisseur 1,5mm Épaisseur 2,0mm
Prép 1, 1 échantillons 11883303 270 11833313 360 11843313 540 11853313 720
Prép 2, 2 échantillons 11843323 118 11893323 158 11803333 236 11813333 315
Prép 4, 2 échantillons 11863333 57 11873333 77 11883333 115 11893333 153
8 puits 11803343 30 11813343 41 11823343 61 11813353 81
10 puits MC 11893303 20 11803313 27 11813313 41 11823313 54
12 puits 11863313 17 11873313 23 11883313 34 11893313 45
16 puits 11803323 12 11813323 16 11823323 24 11833323 32
20 puits MC 11853323 10 11863323 14 11873323 20 11883323 27
25 puits 11823333 7 11833333 10 11843333 15 11853333 20
Accessoires
Réf. Description
11873353 Support de gel transparent 70 mm x 100 mm
11863353 Support de gel transparent 100 mm x 100 mm
11807633 Plaque de fermeture
11863473 Support de coulage externe Mini / Midi Flexicaster
11823353 Guides adhésifs
11803363 Plateforme
11897573 Cool-pack avec plateforme
11867633 Blocs économiseur tampon (x2)
11893353 Pelle pour gel UV 100 mm
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Cuve midi-plus SUB-GEL
Parfaite pour l’analyse des fragments de restriction, pour la préparation des échantillons ou l’analyse d’un grand nombre d’échantillons
Caractéristiques techniques
Dimensions [L x I], mm...............................................70 x 150, 100 x 150, 150 x 150 (gel)
Dimensions [L x l x h], mm.................................................................265 x 175 x 90 (cuve)
Capacité..............................................................70 échantillons, max. (70 mm x 150 mm)
140 échantillons, max. (100 mm x 150 mm)
210 échantillons, max. (150 mm x 150 mm)
Volume, mL........................................................................................................500 (buffer)
Peignes
Nb d’échantillons..........1, 2, 4, 10, 10MC, 12, 14MC, 16, 18MC, 20, 28MC, 30MC, 35
Épaisseur, mm...........................................................................................0.75, 1, 1.5, 2
Réf. Description
11833293 Cuve Midi-Plus Sub-Gel
Peignes et accessoires
Peignes Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL
Épaisseur 0,75mm Épaisseur 1,0mm Épaisseur 1,5mm Épaisseur 2,0mm
Prep 1, 1 échantillon 11823363 371 11813373 495 11823373 743 11833373 990
Prep 2, 2 échantillon 11803393 169 11853393 225 11863393 338 11873393 450
Prep 4, 2 échantillon 11803413 91 11813413 122 11823413 182 11833413 243
10 puits 11833363 34 11843363 45 11853363 68 11863363 90
10 puits, MC 11873363 22 11883363 29 11893363 44 11803373 59
12 puits 11843373 30 11853373 41 11863373 61 11873373 81
14 puits, MC 11883373 22 11893373 29 11803383 44 11813383 59
16 puits, MC 11823383 20 11833383 27 11843383 41 11853383 54
18 puits, MC 11863383 8 11873383 11 11883383 17 11893383 23
20 puits 11813393 16 11823393 21 11833393 32 11843393 43
28 puits, MC 11883393 8 11893393 11 11803403 17 11813403 23
30 puits, MC 11823403 9 11833403 13 11843403 19 11853403 25
35 puits 11863403 7 11873403 10 11883403 15 11893403 20
MC = compatible pipettes multicanaux
Accessoires
Réf. Description Réf. Description Réf. Description
11803423 Support de gel transparent 70 mm x 150 mm Support de coulage externe 11877573 Cool-pack avec plateforme
11813363
11883413 Support de gel transparent 100 mm x 150 mm Midi-Plus / Maxi Flexicaste 11847633 Blocs économiseur tampon (x2)
11893413 Support de gel transparent 150 mm x 150 mm 11823423 Guides adhésifs 11813423 Pelle pour gel UV 150 mm
11817633 Plaque de fermeture 11843413 Plateforme d’observation
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Cuve maxi SUB-GEL
Principalement conçu pour séparer un grand nombre d’échantillons PCR* ou de clonage
• Fourni avec des supports pour gel 200 mm x 100 mm. Des supports
200 mm x 200 mm. Également disponible au format 200 mm x 250 mm
• Analyse jusqu‘à 550 échantillons
• Faibles volumes de tampon
• Moulé par injection
Caractéristiques techniques
Dimensions [L x I], mm.........................................................100 x 200, 200 x 200 (gel)
Dimensions [L x l x h], mm...........................................................395 x 230 x 90 (cuve)
Capacité......................................................200 échantillons, max. (200mm x 100mm)
450 échantillons, max. (200mm x 200mm)
550 échantillons, max. (200mm x 250mm)
Volume, mL............................................................................................1,200 (tampon)
Peignes
- Nb d’échantillons................................1, 2, 4, 10, 16, 20MC, 25, 30, 36, 40MC, 50
- Épaisseur, mm....................................................................................0.75, 1, 1.5, 2
Réf. Description
11843303 Cuve Maxi SUB-GEL
Peignes et accessoires
Peignes Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL Réf. Volume puits, μL
Épaisseur 0,75mm Épaisseur 1,0mm Épaisseur 1,5mm Épaisseur 2,0mm
Prep 1, 1 échantillon 11833423 508 11883423 675 11893423 1013 11803433 1350
Prep 2, 2 échantillon 11853433 236 11803443 315 11813443 473 11823443 630
Prep 4, 2 échantillon 11853453 115 11803463 153 11813463 230 11823463 306
10 puits 11843423 54 11853423 72 11863423 108 11873423 144
16 puits 11813433 30 11823433 41 11833433 61 11843433 81
20 puits, MC 11863433 20 11873433 27 11883433 41 11893433 54
25 puits 11833443 16 11843443 21 11853443 32 11863443 42
30 puits 11873443 13 11883443 17 11893443 26 11803453 34
36 puits 11813453 11 11823453 14 11833453 22 11843453 29
40 puits, MC 11863453 8 11873453 11 11883453 17 11893453 23
50 puits 11833463 8 11843463 10 11853463 16 11863463 21
Accessoires
Réf. Description Réf. Description
11813473 Support de gel transparent 200 mm x 100 mm 11873463 Guides adhésifs
11823473 Support de gel transparent 200 mm x 200 mm 11853473 Plateforme
11833473 Support de gel transparent 200 mm x 250 mm 11887573 Cool-pack avec plateforme
11827633 Plaque de fermeture 11857633 Blocs économiseur tampon (x2)
11813363 Support de coulage externe Midi-Plus / Maxi Flexicaster 11843473 Pelle pour gel UV 200 mm
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Cuves horizontales, Format large
Les cuves horizontales larges Fisherbrand sont parfaites pour l’analyse d’une large gamme d‘échantillons y compris pour les produits de PCR, les
mini-préps d’ADN, les vecteurs plasmidiques et les fragments de restriction. Elles permettent d‘analyser un grand nombre d’échantillons sur un
seul gel sans compromettre le volume de l’échantillon.
Possède quatre emplacements de peignes pour une migration plus rapide Possède quatre emplacements de peigne pour une migration plus rapide
Réf. Description d’échantillons multiples avec ports de recirculation du tampon
Inclut : Cuve, large format, Mini-Plus, 1 x plateau de moulage de gel, Réf. Description
11553352 2 x 1,0 mm 20 peignes d’échantillons, ports de recirculation du tampon, Inclut : Cuve, large format, Midi-Plus, 1 x plateau de moulage de gel,
branchements d’alimentation et pistes de dissociation 11563382 2 x 1,0 mm 16 peignes d’échantillons, ports de recirculation du tampon,
branchements d’alimentation et pistes de dissociation
Peignes Peignes
Peignes Réf. Volume Réf. Volume Réf. Volume Peignes Réf. Volume Réf. Volume Réf. Volume
puits, µL puits, µL puits, µL puits, µL puits, µL puits, µL
Épaisseur 1.0mm Épaisseur 1.5mm Épaisseur 2.0mm Épaisseur 1.0mm Épaisseur 1.5mm Épaisseur 2.0mm
4 puits 11523362 42 11503372 213 11583372 284 12 puits, MC 11523392 72 11593392 108 11563402 144
8 puits, MC 11533362 67 11513372 100 11593372 133 16 puits, 11533392 52 11503402 78 11573402 104
10 puits 11543362 52 11523372 77 11503382 103 20 puits, 11543392 40 11513402 60 11583402 80
12 puits 11553362 40 11533372 61 11513382 81 25 puits, MC 11553392 30 11523402 45 11593402 60
16 puits, 29 44 58 28 puits, 11563392 26 11533402 39 11503412 52
11563362 11543372 11523382
MC 40 sample 11573392 17 11543402 25 11513412 34
20 puits 11573362 22 11553372 32 11533382 43 50 sample, MC 11583392 15 11553402 23 11523412 30
MC = compatible pipettes multicanaux MC = compatible pipettes multicanaux
Accessoires Accessoires
Réf. Description Réf. Description
11563352 Support de coulage 11573382 Support 100 mm x 230 mm
11573352 Plaques de fermeture en silicone, pack de 2 11583382 Support 140 mm x 230 mm
11503392 Plaques de fermeture en silicone, pack de 2
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Systèmes Mini et Midi runVIEW™
runVIEW™ est un système novateur qui combine un éclairage LED bleu et une alimentation électrique intégrée afin de créer un système d’électrophorèse
en temps réel vous permettant de vérifier presque instantanément les résultats. Parfait pour gagner du temps lors de vérifications rapides d’échantillons ou
pour apprendre les principes de l’électrophorèse.
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Systèmes runView™, suite
Informations techniques
Plateforme d’observation ajustable runVIEW™
Longueur d’onde de lumière bleue, nm................................................................................................................................................................. 470
Dimensions [L x l], mm................................................................................................................................................................................. 180 x 125
Température de fonctionnement oC.................................................................................................................................Température ambiante de 40
Tension nominale.......................................................................................................................................................................100 à 240 V, 50/60 Hz
Système runVIEW™ SUB-GEL Mini
Dimensions [L x l x H], mm................................................................................................................................................................... 170 x 210 x 90
(quand montée sur la plateforme d’observation ajustable runView™)
Dimensions du gel [L x l], mm......................................................................................................................................................... 70 x 70 ; 100 x 70
Volume du tampon, ml........................................................................................................................................................................................... 225
Conception du couvercle bluVIEW.............. Filtre d’émission spécial en ambre avec ventilateur d’extraction inclus, alimenté par l’unité de base
Peigne* (standard)
Nombre d’échantillons.............................................................................................................................................. Deux peignes à 8 échantillons
Épaisseur, mm.................................................................................................................................................................................................. 1 mm
Système runVIEW™ SUB-GEL Midi
Dimensions [L x l x H], mm................................................................................................................................................................... 170 x 220 x 90
(quand montée sur la plateforme d’observation ajustable runView™)
Dimensions du gel [L x l], mm..................................................................................................................................................... 70 x 100 ; 100 x 100
Volume du tampon, ml........................................................................................................................................................................................... 300
Conception du couvercle bluVIEW............. Filtre d’émission spécial en ambre avec ventilateur d’extraction inclus, alimenté par l’unité de base
Peigne* (standard)
Nombre d’échantillons......................................................................................................................................... Deux peignes à 16 échantillons
Épaisseur, mm................................................................................................................................................................................................. 1 mm
*Consultez la liste « Peignes et accessoires » sur la page suivante pour toutes les options de peigne disponibles.
Réf. Description
Le produit runVIEWTM CONVERTER comprend la plateforme d’observation runVIEW™ et le couvercle bluVIEW
15391357
pour utilisation avec les SUB-GEL Mini
Le produit runVIEWTM CONVERTER comprend la plateforme d’observation runVIEW™ et le couvercle bluVIEW
15301367
pour utilisation avec les SUB-GEL Midi
Le produit runVIEWTM STANDARD comprend la plateforme d’observation runVIEW™ et le système runVIEW™
15321367
SUB-GEL Mini
Le produit runVIEWTM STANDARD comprend la plateforme d’observation runVIEWTM et le système runVIEW™
15331367
SUB-GEL Midi
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Peignes pour système runVIEW™ SUB-GEL Mini
Peignes Réf. Taille d’échantillon, μl Réf. Taille d’échantillon, μl Réf. Taille d’échantillon, μl Réf. Taille d’échantillon, μl
Épaisseur 0,75 mm Épaisseur 1,0 mm Épaisseur 1,5 mm Épaisseur 2,0 mm
Prép. 1, marqueur 1 11873473 152 11823483 203 11833483 304 11843483 405
Prép. 2, marqueur 2 11833493 68 11843493 90 11857553 135 11867553 180
Prép. 4, marqueur 2 11877553 36 11887553 48 11897553 72 11807563 96
8 échantillons, MC 11857563 8 11867563 11 11877563 17 11887563 23
8 échantillons 11817563 19 11827563 25 11837563 37 11847563 50
10 échantillons 11883473 14 11893473 18 11803483 27 11813483 36
12 échantillons, MC 11853483 10 11863483 14 11873483 20 11883483 27
16 échantillons 11893483 7 11803493 10 11813493 15 11823493 20
Réf. Description
Plateau transparent aux UV 70 mm x 70 mm pour
11847573
SUB-GEL mini
11837633 Système de coulée pour SUB-GEL mini
Plateau transparent aux UV 70 mm x 100 mm pour
11873353
SUB-GEL mini
Plateau transparent aux UV 70 mm x 100 mm pour
11837573
SUB-GEL midi
Plateau transparent aux UV 100 mm x 100 mm pour
11863353
SUB-GEL midi
11807633 Système de coulée pour SUB-GEL midi
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Cuves dédiées à l’enseignement SUB-GEL
Idéal pour faire la démonstration de l’électrophorèse horizontale
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Cuves dédiées à l’enseignement SUB-GEL, suite
Informations techniques
Cuves dédiées à l’enseignement SUB-GEL 4X Mini Cuves dédiées à l’enseignement SUB-GEL 6X Mini
Peignes standard Huit x 8 échantillons, 1 mm MC (deux peignes par gel) Douze x 8 échantillons, 1 mm MC (deux peignes par gel)
64 échantillons avec l’option peigne standard, 128 échantillons avec 96 échantillons avec l’option peigne standard, 192 échantillons avec
Capacité d’échantillons maximum
les peignes à 16 échantillons facultatifs les peignes à 16 échantillons facultatifs
Volume du tampon, ml 500 1200
Peignes
– Nombre d’échantillons 1, 2, 4, 8 MC, 8, 10, 12 MC, 16 1, 2, 4, 8 MC, 8, 10, 12 MC, 16
– Épaisseur, mm 0,75, 1, 1,5, 2 0,75, 1, 1,5, 2
MC = compatible avec le pipettage multicanaux
Réf. Description
SUB-GEL 4X Mini,cude d’apprentissage comprend quatre plateaux transparents aux UV de 70 mm x 70 mm, huit peignes à 8 échantillons, huit supports coulée, des guides
15341357
de chargement et des câbles
SUB-GEL 4X Mini,cude d’apprentissage comprend quatre plateaux transparents aux UV de 70 mm x 70 mm, huit peignes à 8 échantillons, huit supports coulée, des guides
15351357
de chargement et des câbles avec alimentation électrique (réf. 12643546)
SUB-GEL 6X Mini, cude d’apprentissage comprend six plateaux transparents aux UV de 70 mm x 70 mm, douze peignes à 8 échantillons, douze supports de coulée, des
15321357
guides de chargement et des câbles
SUB-GEL 6X Mini, cude d’apprentissage comprend six plateaux transparents aux UV de 70 mm x 70 mm, douze peignes à 8 échantillons, douze supports de coulée, des
15331357
guides de chargement et des câbles avec alimentation électrique (réf. 12643546)
15361357 SUB-GEL 6X Mini station de travail pour salle de classe de 24 étudiants, comprend quatre cuves SUB-GEL 6X Mini (réf. 15321357) et alimentation électrique (réf. 12613546)
Peignes
Peignes Réf. Taille d’échantillon, μl Réf. Taille d’échantillon, μl Réf. Taille d’échantillon, μl Réf. Taille d’échantillon, μl
Épaisseur 0,75 mm Épaisseur 1,0 mm Épaisseur 1,5 mm Épaisseur 2,0 mm
Prép. 1, marqueur 1 11873473 152 11823483 203 11833483 304 11843483 405
Prép. 2, marqueur 2 11833493 68 11843493 90 11857553 135 11867553 180
Prép. 4, marqueur 2 11877553 36 11887553 48 11897553 72 11807563 96
8 échantillons, MC 11857563 8 11867563 11 11877563 17 11887563 23
8 échantillons 11817563 19 11827563 25 11837563 37 11847563 50
10 échantillons 11883473 14 11893473 18 11803483 27 11813483 36
12 échantillons, MC 11853483 10 11863483 14 11873483 20 11883483 27
16 échantillons 11893483 7 11803493 10 11813493 15 11823493 20
Accessoires
Réf. Description
15371357 Plateaux transparents aux UV, formation de 70 mm x 70 mm
11837633 Supports pour la coulée (x 2) pour plateaux de gel de 70 mm
11813363 Roulette SUB-GEL Midi-Plus/Maxi flexi
11897563 Guides de chargement adhésifs
11853473 Plateforme d’observation pour SUB-GEL 6X Mini
11823423 Plateforme d’observation pour SUB-GEL 4X Mini
11847633 Blocs économiseurs de tampon (x 2), 190 ml
11857633 Blocs économiseurs de tampon (x 2), 450 ml
11857573 Pelle UV, 70 mm
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Produits Fisher Bioreagents
pour électrophorèse
horizontale
Réf. Qté
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Produits Fisher Bioreagents
pour électrophorèse
horizontale
d‘électrophorèse.
bp ng/10µL bp ng/10µL
bp ng/10µL
Les Ladders d’ADN exACTGene™ sont parfaits pour l’analyse qualitative, l’estimation quantitative
NEW! et NEW! bp ng/10µL
10000 58 10000 58
Ethanol,Grade,
Ethanol, Molecular Biology Molecular
is Biology Grade, is
1000 90 1000 90 8000 53 8000 53
l’évaluation de la taille anbiology
an ultrapure molecular ultrapure molecular biology grade
grade 900 66 900 66 6000
5000
46
67
6000
5000
46
67
ethanol usedand
for the purification 800
and 800 58 4000 56 4000 56
ethanol used for the purification 58
Réf. Application Plage de la poids Nombre de Nombre de of biomolecules
precipitation precipitation
suchofasbiomolecules such as
700 48 700 48 3000 47 3000 47
nucleic acids and proteins.
moléculaire bandes dissociations
nucleic acids and proteins. 600 41 600 41 2500 41 2500 41
500 69 2000 34 2000 34
Cat. No. 500
Size 69
10214973 Analyse de fragment de PCR 25 à 650bp 14 100/10μL
Cat. No. Size
BP2818-100100mL 100mL 400 28 1500
BP2818-100 400 28 29 1500 29
10657633 Analyse de fragment PCR, petites digestion d’ADN 25 à 1,000bp 12 100/10μL
BP2818-500 BP2818-500500mL 500mL
300 21
BP2818-4 BP2818-4 4L 3004 L 21
Vérification rapide de PCR ou résultats de digestion 50 à 2,000bp 8 100/10μL 1000 18 1000 18
10224973 200 28 200 28
enzymatique 700 13 700 13
100 20 100 20
10061413 Petits fragments d’ADN 100 à 1,000bp 10 100/10μL 500 23 500 23
10021463 Durées d’essais rapides, petits fragments d’ADN 100 à 2,000bp 11 100/10μL 50 14 50 14
300 14 300 14
25 15 25 15
10306943 Identification de clone 100 à 2,686bp 14 100/10μL
10031463 Clonage ou PCR de grande taille 300 à 5,000bp 10 100/10μL BP2571 BP2571 BP2578 BP2578
® exACTGene
routine®DNA and ladders
routine DNA ladders
10122823 Petite ou large application de clonage 100 à 5,000bp exACTGene
16 and 100/10μL N° Cat 10657633 N° Cat 10489883
Ready-to-use
Ready-to-use (pre-mixed (pre-mixed
with loading with
dye), room loading dye),
temperature room
stable temperature
DNA ladders arestable DNAfor
available ladders are available
all common for all common
electrophoresis app electrophoresis
lications. app lications.
10489883 Grands fragments d’ADN 300 à 10,000bp 13 100/10μL
exACTGene
exACTGene DNA ladders are idealDNA ladders areanalysis,
for qualitative ideal for quantitative
qualitative analysis,
estimation quantitative estimation and size assessment
and size assessment
10499883 Large gamme de séparations 100 à 10,000bp 19
Cat. No. Cat. No.
Application
100/10μL Application Size Range Size
NumberRange
of Bands Number of Bands
Number of Loadings Number of Loadings
BP2570-100
fragment analysis PCR fragment analysis 25 to 650bp 14 100/10µL
10699163 Très larges fragments d’ADN 300 à 24,000bp 15
BP2570-100 PCR
BP2571-100
100/10μL PCR fragment analysis, small DNA digests
25 to 650bp
25 to 1,000bp
14 100/10µL
12 100/10µL
BP2571-100 PCR fragment analysis, small DNA digests 25 to 1,000bp 12 100/10µL
BP2572-100 BP2572-100
Quick Quick check
check of PCR or enzyme of PCR
digestion or enzyme digestion
results results
50 to 2,000bp 50 to 2,000bp 8 8
100/10µL 100/10µL
Les Ladders d’ADN de routine sont conçus pour l’analyse qualitative et l’évaluation de la taille
BP2573-100 BP2573-100
General General
purpose, small DNA purpose, small DNA fragments
fragments 100 to 1,000bp 100 to 1,000bp 10 10
100/10µL 100/10µL
BP2574-100 BP2574-100 Fast run
Fast run times, small DNA fragments times, small DNA fragments 100 to 2,000bp 100 to 2,000bp 11 11
100/10µL 100/10µL
Réf. Application Plage de la poids Nombre de Nombre de
BP2575-100 BP2575-100
Clone identification Clone identification 100 to 2,686bp 100 to 2,686bp 14 14
100/10µL 100/10µL
BP2576-100 BP2576-100
Large size PCR or cloningLarge size PCR or cloning 300 to 5,000bp 300 to 5,000bp 10 10
100/10µL 100/10µL
moléculaire bandes dissociations
BP2577-100 BP2577-100 Small and
Small and large cloning application large cloning application 100 to 5,000bp 100 to 5,000bp 16 16
100/10µL 100/10µL
BP2578-100 BP2578-100
General General DNA
purpose, large digested purpose, large digested DNA300 to 10,000bp 300 to 10,000bp 13 13
100/10µL 100/10µL
10284633 Petits fragments, évaluation rapide de la taille 50-2000bp 11
BP2579-100 BP2579-100
General 200/5µL General purpose,
purpose, wide separation range wide separation range 100 to 10,000bp 100 to 10,000bp 19 19
100/10µL 100/10µL
BP2580-100 BP2580-100
General General
purpose, extra large DNApurpose,
fragments extra large DNA 300
fragments
to 24,000bp 300 to 24,000bp 15 15
100/10µL 100/10µL
10450464 Évaluation rapide d’une vaste gamme de tailles 50-10,000bp 16 200/5µL
Autres bioréactifs
Réf. Description Qté
10021123 Acide acétique glacial 500mL
10021083 Glycérol, sans DNAse, RNAse et protéase 382 382 1L
10468343 Ficoll 400 p.m. 400.000, grade Biologie moléculaire sans DNAse, RNAse et protéase 100g
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50X TAE (solution) 1X TAE (solution de travail)
Vous aurez besoin de ces produits Fisher Bioreagents...
Méthode
• Base Tris (réf. 10376743)
Diluer la solution dans de l’eau distillée selon un rapport 1/50.
• Acide acétique glacial (réf. 10021123)
Les concentrations finales sont :
• EDTA en 0,5 M (réf. 10618973)
• 40 mM Tris à pH 7,6
• 20 mM d’acide acétique glacial
Méthode
• 1 mM EDTA
Pesez une base Tris de 242 g (FW = 121) et dissolvez-la dans 750 ml d’eau distillée.
Ajoutez 57,1 ml d’acide acétique glacial et 100 ml de 0,5 M EDTA (pH 8,0).
Mélangez avec 1 L d’eau distillée.
La solution mère peut être conservée à température ambiante. Le pH du tampon n’est pas ajusté, mais doit être compris entre 8,2 et 8,5.
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Tampon de chargement d’ADN 6X
Vous aurez besoin de ces produits Fisher Bioreagents...
• Glycérol (réf. 10021083)
• 1 M Tris-HCl pH 8,0 (consultez la recette pour 1 M Tris-HCl)
• EDTA en 0,5 M (réf. 10618973)
• Bleu de bromophénol (réf. 10679733)
• Xylène cyanol FF (réf. 10532965)
• Eau (réf. 10336503)
Méthode
Avec une pipette, versez 60 ml de glycérol dans un bécher en verre.
Ajoutez 6 ml de Tris-HCl en 1 M pH 8,0 et 1,2 ml d’EDTA en 0,5 M pH 8,0.
Ajoutez 32,8 ml d’eau et mélangez bien.
Ajoutez ensuite à la solution soit 60 mg de bleu de bromophénol ou 60 mg de xylène cyanol FF.
Dans un gel d’agarose 1 %, les colorants de suivi doivent s’activer à environ 300 bp pour le bleu de bromophénol et à environ 40 000 bp pour le xylène de cyanol.
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LE WORKFLOW GÉNOMIQUE
Workflow Génomique
Purification d’ADN Amplification de Purification d’ADN génomique Purification d’ARN
plasmidique génôme Kit de purification sur colonne Kit de purification sur colonne
Kit de purification sur plaque Kit de purification sur plaque
Kits de purification en spin colonne
Kit de purification sur billes magnétiques Kit de purification sur billes
Purification de plasmides en plaque
Purification organique magnétiques
Purification avec billes magnétiques
Purification automatique Purification organique
Purification automatique de plasmide
Purification automatique
Electrophorèse
• Cuves et accessoires
• Réactifs (agarose, acrylamide, tampons)
• Gels précoulés
• Marqueurs de poids moléculaires Southern Blotting, In-vitro- Northern Blotting,
Membranes Translation Membranes
• Coloration d’ADN Tampons Tampons
Synthèse de sonde, marquage Synthèse de sonde,
kits RT-PCR
Kits qPCR et qRT-PCR
Détection par SYBR Green
Détection par sonde marquée
Microarrays
Lames
Tampons
Eléctroporation Synthèse de sonde et kits de marquage
Génotypage et analyse
Array CGH labelling systems
Electroporateurs
de fragments Kits d’amplification d’ARN
Cuvettes
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Ressources techniques
De l’aide à portée de main !
L’équipe d’assistance technique de Fisher Scientific est une ressource qui vous est consacrée. Nos conseillers du service après-vente sont des
professionnels hautement qualifiés dont le but est de répondre rapidement et efficacement à votre question.
La présente section comprend un guide de résolution des problèmes utiles et une foire aux questions. Si toutefois ces informations ne vous permettent
pas de résoudre le problème rencontré, ou si vous avez des questions qui ne sont pas abordées ci-après, contactez nos conseillers du service après-
vente.
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Guide de résolution des problèmes
Le tableau suivant reprend quelques-uns des problèmes les plus courants des électrophorèses horizontales ainsi que des suggestions pour les
résoudre.
Problème Suggestions
• Aucune bulle n’apparaît au niveau des électrodes lorsque la
• Assurez-vous que l’alimentation électrique c.c. est correctement raccordée
tension de fonctionnement est utilisée
• Lorsque vous utilisez des supports de coulage, assurez-vous que les surfaces
d’étanchéité du plateau roulant et les portillons de coulage de gel sont propres
• De l’agarose fondu fuit lors du coulage
• Assurez-vous que les extrémités du plateau roulant sont plates et dépourvues
d’entailles
• Assurez-vous que le peigne est vertical lors du coulage pour éviter de déformer
le puits
• Réduisez le niveau du tampon à 1 mm au-dessus de la surface du gel. Ceci
• Motif à doubles bandes
permettra de réduire le gradient de température dans le gel.
• Augmentez la concentration de l’échantillon et utilisez un gel fin (2 à 3 mm)
avec un peigne fin (1 mm)
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Problème Suggestions
• Fluorescence excessive au-dessus de la bande • Réduisez la quantité d’acide nucléique de l’échantillon
Q. J’aimerais utiliser un gel pour séparer des fragments d’ADN de 100 à 2 000 bp. Quel agarose suggérez-vous ?
R. L’agarose Fisher BioReagents réf. 10766834, de qualité biologie moléculaire, convient bien pour la séparation de routine de l’ADN et de l’ARN dans
une plage allant de 500 bp à 23 kb. Pour la séparation de fragments dans une plage allant de 100 à 2 000 bp, nous suggérons le Fisher BioReagents réf.
10766834, en augmentant la concentration de gel (> 2 %) et en utilisant le tampon TBE (pas le TAE).
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Q. Quelle Qté d’ADN dois-je charger sur un gel ?
R. Vous ne devriez pas charger plus de 100 ng d’ADN. Cette Qté devrait vous donner une bande claire et bien définie lorsque vous la colorez au bromure
d’éthidium et l’examinez sous une lampe UV. Si vous chargez trop d’ADN, vous verrez une tache.
Q. Avez-vous des informations concernant la Qté de plasmide d’ADN pour chaque bande de la réf. 10284633 ?
R. Nous ne disposons pas d’informations concernant la Qté d’ADN dans chaque fragment (bande) de Fisher BioReagent réf. 10284633, marqueur de
taille moléculaire ADN à basse échelle (100 bp). Le marqueur de taille moléculaire ADN est conçu comme un étalon polyvalent de détermination de la
taille des fragments d’ADN comme les amplicons PCR séparés sur mini gels d’agarose. Il n’est pas conçu pour une utilisation comme étalon quantitatif.
Cependant, pour la quantification, nous proposons les marqueurs de taille moléculaire ADN exACTGene tels que le produit Fisher BioReagents réf.
10021463, ce marqueur de taille moléculaire ADN de plage basse précise la Qté approximative d’ADN contenue dans chaque bande.
Références
1. Maniatis, T., Fritsch, E. F. and Sambrook, J. (1982) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New
York
2. Rickwood, D. and Hames, B. D. (eds.) (1982) Gel Electrophoresis of Nucleic Acids: A Practical Approach, IRL Press, Oxford, England
3. Longo, M. C. and Hartley, J. L. (1986) Focus 8:3, 3
4. Ausubel, et al., (eds). (1993) Current Protocols in Molecular Biology. Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York
AVIS DE NON-RESPONSABILITÉ : veuillez noter que, même si Fisher Scientific s’efforce de s’assurer que les informations fournies aux clients sont exactes, toutes les informations et suggestions fournies par Fisher Scientific sont basées sur les
informations fournies par les clients et sont uniquement de nature générale. Fisher Scientific ne peut garantir qu’une information ou suggestion est adaptée aux besoins ou aux nécessités spécifiques des clients et il est vivement conseillé à ces derniers
de procéder à leur propre évaluation des informations ou suggestions fournies.
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Introduction à l’électrophorèse verticale
L‘électrophorèse en gel de polyacrylamide contenant du laurylsulfate de sodium (SDS-PAGE) est la méthode la plus directe pour évaluer, de manière rapide et
réplicable, le poids moléculaire relatif (Mr) des protéines dénaturées et chaînes de polypeptides ainsi que la pureté d‘une préparation à base de protéine. Lors de
la SDS-PAGE, l’échantillon à mettre dans le gel est d‘abord traité par l’agent anionique SDS, qui dénature les protéines de l’échantillon et se lie étroitement aux
molécules de protéines. Les molécules de SDS confèrent une charge négative relativement uniforme au polypeptide en proportion de sa longueur. Lorsqu‘un
courant électrique passe à travers le gel, toutes les protéines migreront à travers la matrice de gel vers l’anode. De cette façon, le SDS-PAGE sépare les protéines
selon leur taille car les protéines revêtues de SDS ont une charge uniforme : ratio de la masse ; les protéines ayant moins de masse voyagent plus rapidement à
travers le gel que celles dont la masse est plus grande vu l’effet de la matrice contenant le gel.
Cette section offre un vue globale de la gamme des cuves verticales Fisherbrand. Les cuves comprennent une conception modulaire de réservoirs portant des
inserts spécifiques pour l‘électrophorèse de polyacrylamide (PAGE), le transfert et la focalisation isoélectrique (IEF) capillaire. Elle comprend aussi les systèmes
de transfert semi-secs Fisherbrand et des séchoirs de gel ainsi que les bioréactifs essentiels Fisher Bioréagent, comme les acrymalides, les normalisations
protéiniques, les tampons et les agents de visualisation de l’ADN.
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Cuves Verticales
La gamme Fisherbrand de cuves d’électrophorèse verticale comprend à la fois les ucuves Mini (pour les gels 100 mm x 100v mm) et les cuves Maxi (pour les
gels 200 mm x 200 mm). Chaque cuve verticale est fournie avec des peignes, des plaques de verre et des accessoires pour analyser jusqu’à quatre Mini gels
ou deux Maxi gels. La même cuve peut s’utiliser à la fois pour le coulage de gel et pour l’analyse du gel, éliminant ainsi le long transfert des gels fragiles entre
des modules distincts.
Pour voir les modes d’emploi de la gamme complète de cuves verticales, rendez-vous sur eu.fishersci.com/go/fisherbrand.
Caractéristiques techniques
Les composants de la cuve 1
Nombre de gels......................................................................................................................... 1 à 4
Compatible avec gel précoulés Mini Verti-Gel
(Jusqu’à deux gels) ............................. Gel Thermo Precise Pierce, IDGel™, Novex™, SERVAGel™
1 Couvercle et câbles d‘alimentation
Gels standards
2 Module OmniPAGE
(Jusqu’à quatre gels)...............................................Utilisant les plaques de verre 100 mm x 100 mm
3 Charnières
Dimensions des plaques (l x h x é), mm .....................................................................100 x 100 x 20
4 Plaques de verre
Dimensions des gels (l x h), mm .............................................................................................80 x 85
5 Chambre tampon
Total volume tampon pour deux gels, mL.......................................................Min : 250 ; Max : 1 200
6 Joint
Total volume tampon pour quatre gels, mL.....................................................Min : 250 ; Max : 1 200 10
7 Réservoir externe
Durée d’analyse standard SDS-PAGE............................................................................ 1 à 2 heures
8 Support de coulage
Générateur recommandé................................................................................................... 12613546
9 Tapis de coulage ultra souple
Dimensions des cuves (l x p x h), mm .......................................................................190 x 130 x 150 4
10 Peignes
Poids, kg....................................................................................................................................... 1,8
5
6
Avantages techniques de la cuve Verti Gel Mini:
2
• Exécute un maximum de quatre gels par heure
3
• Effectue l’analyse en 2 dimensions et le transfert en une journée
Chargement et fonctionnement 7
• Les peignes réversibles servent aussi d‘indicateurs de chargement afin d‘assister à l’alignement de la pipette
et de la cuve, empêchant ainsi les erreurs de chargements - insérez simplement votre peigne dans un gel
fraîchement coulé, qui doit néanmoins figer avant d’utiliser le peigne comme guide de chargement des puits 8
9
• Gère jusqu‘à quatre gels en un seul module omni PAGE en utilisant une combinaison de plaques de verre à
encoches avec séparateur
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Modules spécifiques pour différentes applications
• Les modules interchangeables pour les gels précoulés, l‘électrophorèse bidimensionnelle et l’électrotransfert permettent à l’utilisateur
de permuter rapidement et facilement d‘une technique d’électrophorèse à une autre, en utilisant la même cuve et le même couvercle
avec un simple tampon universel. Nos configurations sont les suivantes :
- N°. Cat 15136624, 15116624 et 15146624 – fourni avec une cuve moulée et un module externe moulé pour effectuer quatre gels
standard ou deux gels précoulés PAGE natif ou SDS-PAGE
11843293
- N°. Cat 15156624, 15126624 et 15176624 – comprend aussi le module de transfert pour transférer jusqu’à quatre gels sur le en
Western Blot ; le module 2D est disponible séparément
- N°. Cat 11893293 – fourni seulement avec la cuve, le couvercle et l’insert PAGE pour utiliser les gels précoulés 100 mm x 100 mm et
100 mm x 80 mm (l x h)
- N°. Cat 11843293 – complet avec peignes, et plaques de verre à encoche, pour analyser jusqu‘à deux gels précoulés type
« tapecast » et deux gels standard « handcast »
- N°. Cat 11883293 – système de transfert complet avec modules de transferts et PAGE ; plaques de verre pour deux gels
Module de transfert en option 11883293
Le module Transfert de Mini Verti-Gel utilise la même cuve et couvercle que votre Verti-Gel Standard ou Tetrad dans le butvd’effectuer un
électrotransfert rapide de haute qualité des mini-gels. Capable de transférer quatre gels à la fois, le module devtransfert Mini Verti-Gel est
disponible en format traditionnel. L‘insert seul est disponible en option (N° Cat 11837623) ou dansvun système complet pour de multiples
techniques d‘électrophorèse (N° Cat 11883293).
1 2 3 4
Avantage Transférer l’insert dans la base du Verser le gel, insérer le peigne et Transférer l’insert dans le la cuve,
support, et tourner jusqu’à ce que attendre la polymérisation remplir de solution tampon,
ce soit serré. charger les échantillons, remettre
le couvercle et mettre en marche.
Avantage : Joint ultra souple dans
la base compensant un mauvais
alignement de la plaque afin d’éviter
toute fuite.
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Cuve Verti-Gel Mini, Système 2-Gel (Standard)
Pour séparations bidimensionnelles et gradient d’acide nucléique, PAGE natif, avec Mini SDS-PAGE
Caractéristiques techniques
Dimensions [L x l], mm .........................................100 x 100 (plaque), 75 x 80 (gel)
Dimensions [L x l x h], mm ................................................. 190 x 130 x 150 (cuve)
Capacité .....................................................40 échantillons, 20 échantillons par gel
Volume, mL .......................................................................... 250 à 1.200 (tampon)
Nb d’échantillons...............................1, 5, 8 MC, 9, 10, 12,16 MC, 20 (par peigne)
Épaisseur, mm .............................................................0,5, 0,75, 1, 1,5, 2 (peignes)
MC = compatible pipettes multicanaux
Réf. Description
11843293 Cuve Verti-Gel Mini 100 mm x 100 mm avec support de coulage
11893293 Verti-Gel Mini 100 mm x 100 mm sans support de coulage
Système complet pour électrophorèse et transfert vertical Mini Verti-Gel
11883293
(100 mm x 100 mm)
Réf. Description
Système Tetrad PAGE Verti-Gel Mini avec charnières 100 mm x 100 mm, support de coulage, 4 x plaques simples / à
15136624
encoches avec séparateurs collés 0,75 mm, 4 plaques à encoches, 4 x peignes 0,75 mm 12 puits
Système Tetrad PAGE Verti-Gel Mini avec charnières 100 mm x 100 mm, support de coulage, 4 x plaques simples / à
15116624
encoches avec séparateurs collés 1 mm, 4 plaques à encoches, 4 x peignes 1 mm 12 puits
Système Tetrad PAGE Verti-Gel Mini avec charnières 100 mm x 100 mm, support de coulage, 4 x plaques simples / à
15146624
encoches avec séparateurs collés 1,5 mm, 4 plaques à encoches, 4 x peignes 1.5 mm 12 puits
Système Tetrad PAGE Verti-Gel Mini avec module transfert 100 mm x 100 mm, support de coulage, 4 x plaques simples
15156624
/ à encoches avec séparateurs 0,75 mm, 4 plaques, 4 x peignes 0.75 mm 12 puits, 4 x cassette, 8 x coussinets
Système Tetrad PAGE Verti-Gel Mini avec module transfert 100 mm x 100 mm, support de coulage, 4 x plaques simples
15126624
/ à encoches avec séparateurs 1 mm, 4 plaques, 4 x peignes 1 mm 12 puits, 4 x cassette, 8 x coussinets
Système Tetrad PAGE Verti-Gel Mini avec module transfert 100 mm x 100 mm, support de coulage, 4 x plaques simples
15176624
/ à encoches avec séparateurs 1,5 mm, 4 plaques, 4 x peignes 1.5 mm 12 puits, 4 x cassette, 8 x coussinets
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Cuve Verti-Gel Mini, Système
Peignes
Peignes Réf. Volume Réf. Volume Réf. Volume Réf. Volume Réf. Volume
puits, μL puits, μL puits, μL puits, μL puits, μL
Épaisseur 0.50mm Épaisseur 0.75mm Épaisseur 1.0mm Épaisseur 1.5mm Épaisseur 2.0mm
1 prép, 1
11837583 330 11847583 500 11807593 650 11817593 1,000 11827593 1,300
marqueur
5 puits, 11887603 45 11897603 70 11807613 100 11817613 140 11827613 200
8 puits MC 11837613 25 11847613 40 11857613 60 11867613 80 11877613 120
9 puits 11887613 23 11897613 35 11807623 50 11817623 70 11827623 100
10 puits 11857583 20 11867583 30 11877583 40 11887583 60 11897583 80
12 puits 11837593 16 11847593 25 11857593 35 11867593 50 11877593 70
16 puits MC 11887593 13 11897593 20 11807603 25 11817603 40 11827603 50
20 puits 11837603 10 11847603 15 11857603 20 11867603 30 11877603 40
Accessoires
Réf. Description Qté
Accessoires - Général
11847623 Support de coulage 100 mm x 100 mm 1
11857623 Tapis de remplacement en silicone 100 mm x 100 mm 1
11853293 Module interne à charnières 1
11887623 Cool-pack Mini 1
11887633 Plaques de verre à encoche 100 mm x 100 mm 2
11847643 Plaques de verre simple 100 mm x 100 mm 2
11857643 Plaques de verre simple 100 mm x 100 mm avec séparateurs 0,5 mm collés 2
11897633 Plaques de verre à encoche 100 mm x 100 mm avec séparateurs 0,5 mm collés 2
11807643 Plaques de verre à encoche 100 mm x 100 mm avec séparateurs 0,75 mm collés 2
11867643 Plaques de verre simple 100 mm x 100 mm avec séparateurs 0,75 mm collés 2
11817643 Plaques de verre à encoche 100 mm x 100 mm avec séparateurs 1 mm collés 2
11877643 Plaques de verre simple 100 mm x 100 mm avec séparateurs 1 mm collés 2
11827643 Plaques de verre à encoche 100 mm x 100 mm avec séparateurs 1,5 mm collés 2
11887643 Plaques de verre simple 100 mm x 100 mm avec séparateurs 1,5 mm collés 2
11837643 ques de verre à encoche 100 mm x 100 mm avec séparateurs 2 mm collés 2
11897643 Plaques de verre simple 100 mm x 100 mm avec séparateurs 2 mm collés 2
11877623 Plaques factices 100 mm x 100 mm 1
11807653 SSéparateurs 10 mm x 100 mm épaisseur 0,5 mm 2
11817653 Séparateurs 10 mm x 100 mm épaisseur 0,75 mm 2
11827653 Séparateurs 10 mm x 100 mm épaisseur 1 mm 2
11837653 Séparateurs 10 mm x 100 mm épaisseur 1,5 mm 2
11847653 Séparateurs 10 mm x 100 mm épaisseur 2 mm 2
11817583 Fil de remplacement en platine pour électrode - 500 mm x 0,2 mm 1
11863293 support de coulage seul 1
Accessoires - Transfert
11837623 Module transfert Mini 1
11827583 Cassette Transfert Verti-Gel mini 1
11857653 Coussinet en fibres pour transfert gels 100 mm x 100 mm 1
Accessoires - Électrophorèse bidimensionnelle
11867623 Module IEF Mini 1
11877653 Tube Capillaire 75 mm long, 1 mm D.I. 1
11867653 Plaque factice 1
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Cuves verticales, Verti-Gel Maxi
La cuve Verti-Gel Maxi Fisherbrand a été conçue pour les gels 200 mm x 200 mm. Elle est capable d’effectuer une
variété de séparations, y compris SDS-PAGE 1 et 2 dimensions, électrophorèse native, préparatoire, à gradient
et haute résolution mais également IEF ou en tube et électrotransfert. Le Verti-Gel Maxi Fisherbrand est l‘un des
systèmes disponibles en grand format les plus polyvalents.
Équipé d’une nouvelle technologie innovatrice de charnières dans l‘insert, seulement 4 vis sont nécessaires pour
l’ajuster aux plaques de verre 200 mm x 200 mm. Ainsi, le Verti-Gel Maxi possède un avantage d’installation
beaucoup plus rapide. En outre, cette nouvelle technologie assure une distribution uniforme de la pression sur la
hauteur du gel plutôt que sur le centre, éliminant une courbure de la plaque et la compression du gel. Le Verti-Gel
de Fisherbrand maintient un joint hermétique pendant le moulage et la conception ergonomique de l‘insert aide à
la fois l‘installation et la manutention permettant une utilisation rapide et facile.
Versatilité et adaptabilité
• Plus de gels : Opère deux gels simultanément sur le système standard Verti-Maxi
• Personnalisez votre système : Pour les essais 2 dimension avec des tubes et des gels IPG de 180 mm en utilisant le kit de conversion IEF (N° Cat 15116634)
• Utilisez les modules optionnels : Avec la même cuve universel pour adapter votre cuve standard Vert-Gel Maxi en un système 2D ou de transfert :
- N°. Cat 15186634 avec l’insert pour tube pour l’électrophorèse bidimensionnelle
- N°. Cat 15106644 pour l’électrotransfert simultané de 2 gels
Autres avantages
• Les séparateurs collées et les peignes sont codés par couleur selon les épaisseurs
• Une large sélection de peignes permet une séparation jusqu’à 192 échantillons
• Plaques de verre épaisses robustes de 4 mm
• Conception asymétrique du couvercle et vis-broches codées selon la couleur dans l‘insert pour empêcher
l‘inversion de la polarité
• Toutes les pièces sont moulées par injection en utilisant un plastique de qualité industrielle durable pour
garantir une performance fiable et constante
Composants de la cuve Verti-Gel Maxi
1 Couvercle et câbles d‘alimentation
Caractéristiques techniques 2 Insert PAGE
Nb de gels.................................................................................................................1 à 2 3 Vis-broche verticale
Gel standards .............................................. Utilisant plaque de verre 200 mm x 200 mm 4 Charnières
Verti-Gel Maxi et peignes 5 Plaques de verre
Dimensions des plaques (l x h x é), mm ...................................................... 200 x 200 x 4 6 Chambre tampon
Dimensions des séparateurs (l x h), mm ............................................................. 20 x 200 7 Joint
Dimensions séparateurs (l x h), mm....................................................................... 6 x 200 8 Système de refroidissement amovible
Volume total chambre interne tampon, mL...................................................................640 9 Réservoir externe
Total volume tampon pour deux gels, L.........................................................................5,3 10 Support de coulage
Durée d’analyse standard pour SDS-PAGE
11 Tapis de coulage ultra souple
Sans refroidissement, h..............................................................................................4 à 5
12 Peignes
Avec refroidissement, h..............................................................................................3 à 4
Dimensions des cuves (l x p x h), mm ..................................................... 300 x 180 x 270
Poids, kg.......................................................................................................................2,5
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Coulage antifuite avec technologie vis-broche verticale
1 2 3 4
Assembler chaque cassette sur une Desserrer les vis-broches verticales dans Insérer une cassette de chaque côté de la Continuer de serrer les vis-broches jusqu‘à
surface plate égalisée, en posant la plaque l‘insert pour libérer le mécanisme de chambre interne du tampon dans l’insert, ce que les charnières glissent hors des fentes
de verre simple avec les séparateurs vers verrouillage, permettant aux charnières de et commencer à serrer les vis-broches porteuses et les serrer contre les plaques de
le haut puis en posant la plaque de verre s’asseoir sur les encoches prévues. verticales. verre en les poussant vers le haut.
à encoche.
Avantage : Les séparateurs codés par
couleur cohérents avec l’épaisseur du
peigne sont collés sur les plaques de verre Vis-broches verticales, codées
rodé pour assurer un bon alignement et un par couleur pour empêcher
coulage sans fuite. l’inversion de la polarité,
pousser pour enlever les
5
charnières hors des fentes
porteuses pour fixer les
plaques de verre fermement
dans l‘insert.
Les fentes porteuses
permettent aux charnières de Le joint plat égalisé empêche
bien se loger hors du passage, toute fuite de la chambre
pour faciliter un chargement interne du tampon.
sans encombre des cassettes
dans l’insert.
6
7 8 9
Insérer et serrer en tournant et en tirant Verser le gel, insérer les peignes et attendre Transférer l‘insert dans la cuve. Remplir Replacer le couvercle, brancher sur
l’insert dans le support pour former un joint la polymérisation. les chambres interne et externe la cuve l’alimentation et mettre en marche.
hermétique. tampon avant de charger les échantillons.
Avantage : Tapis en silicone ultra-souple
dans le support assurant un coulage
anti-fuites.
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Cuve Verti-Gel Maxi, Système 2-Gel (Standard)
• Construction par injection moulée, durable et étanche
• Compatible avec les plaques 200 mm x 200 mm
• Moulage facile à utiliser
• Installation et refroidissement rapides
Caractéristiques techniques
Dimensions, plaque [L x l], mm ...............................................................200 x 200
Dimensions [L x l x h], mm ............................................................300 x 180 x 270
Capacité ............................................................................ 48 échantillons par gel
Volume, mL ........................................................................... 640 à 5.300 (tampon)
Nb d’échantillons ............................................1, 5, 10, 18 MC, 24, 30, 36 MC, 48
Épaisseur, mm ...............................................................................0,5, 1,0, 1,5, 2,0
Réf. Description
Système double Verti-Gel Maxi 200 mm x 200 mm, système de refroidissement & coulage, 2 x plaques de verre
12623546
avec séparateurs collés 1 mm, 2 x plaques de verre à encoches, 2 x peignes à 24 puits (1 mm)
Système d’électrotransfert double Verti-Gel Maxi 200 mm x 200 mm, système de refroidissement & coulage, 2 x
15126644
plaques de verre avec séparateurs collés 1 mm, 2 x plaques de verre à encoches, 2 x peignes à 24 puits (1 mm)
Combs
Combs Réf. Volume puits, µL Réf. Volume puits, µL Réf. Volume puits, µL Réf. Volume puits, µL
Épaisseur 0.75mm Épaisseur 1.0mm Épaisseur 1.5mm Épaisseur 2.00mm
1 prep, 1 marqueur 11807813 1100 11857813 1500 11867813 2200 11877813 3000
5 puits 11887833 160 11897833 200 11807843 320 11817843 400
10 puits 11817813 80 11827813 100 11837813 160 11847813 200
18 puits MC 11887813 40 11897813 50 11807823 80 11817823 100
24 puits 11827823 30 11837823 40 11847823 60 11857823 80
30 puits 11867823 25 11877823 35 11887823 50 11897823 70
36 puits MC 11807833 20 11817833 25 11827833 40 11837833 50
48 puits 11847833 15 11857833 20 11867833 30 11877833 40
Accessories
Réf. Description Qté Réf. Description Qté Réf. Description Qté
Accessoires - Général 11814542 Plaques simples séparateurs 1,5 mm 2 Séparateurs, épaisseur 200 mm x 2
11864542
Support de coulage Verti-Gel 1 11824542 Plaques simples séparateurs 2 mm 2 2 mm
15166624
Maxi 11854532 Plaques à encoche 2 Fil de remplacement en platine pour 1
11887803
électrodes - 1 m x 0,2 mm
15196624 Insert Verti-Gel Maxi 1 Plaques à encoche séparateurs 2
11864532 Accessoires - Transfert
Système de refroidissement amovible, 1 0,75 mm
15106634 Cassette de transfert Maxi, Verti-Gel 1
Verti-Gel Maxi Plaques à encoche séparateurs 2 12348007
11874532 Maxi
15186624 Base de coulage Verti-Gel Maxi 1 1 mm
11854502 Plaques factice, 200 mm x 200 mm 1 12358007 Coussinet de fibre Maxi 1
Tapis de remplacement en 2
11864672 Accessoires - Électrophorèse bidimensionnelle
caoutchouc pour coulage 200 mm 11884502 Bloc refroidissement Maxi 2
15146634 Réservoir, Verti-Gel Maxi 2 Séparateurs, épaisseur 200 mm x 2 15186634 Module tube Maxi, Verti-Gel Maxi 1
11834542
11884532 Plaques de verre simple 2 0,75 mm Kit de conversion IEF pour Verti-Gel 1
15116634
Séparateurs, épaisseur 200 mm x 2 Maxi
Plaques simples séparateurs 2 11844542
11894532 1 mm 15196634 Tubes capillaires Mini 10
0,75 mm
11804542 Plaques simples séparateurs 1 mm 2 Séparateurs, épaisseur 200 mm x 2 11867653 Ports d’obturation capillaires Maxi 10
11854542
1,5 mm
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Bioréactifs Fisher BioReagents pour électrophorèse verticale
Une fois de plus, Fisherbrand et Fisher Bioreagents vous proposent une gamme complète de produits pour vos besoins en électrophorèse. Cette section
détaille les bioréactifs essentiels comme les tampons PAGE, les détergents et les réactifs dénaturant ainsi que les marqueurs protéiques. Fisherbrand et
Fisher Bioreagents sont fabriqués selon la plus haute norme et se sont engagés à offrir des produits de qualité, fiables à des prix abordables.
La technique SDS-PAGE a été affinée au fil des années (voir la chronologie ci-après). Par exemple, les systèmes spécialisés comme les gels à haute
porosité et Tricine-SDS-PAGE ont été développés pour prolonger la gamme d‘analyse et pour améliorer la résolution des petites protéines. La plupart des
laboratoires du monde entier ont adopté ces protocoles.
Cependant, les gel EZ-Run Fisher Bioreagents sont une solution simple système de gel continu pour SDS-PAGE qui offre la résolution d‘un gel gradient tout
en nécessitant moins de travail préparatoire que le système de gel discontinu Laemmli. C’est une solution prémélangée d‘acrylamide, de bis-acrylamide,
de tampon et de SDS qui élimine le besoin d’un stacking. Les propriétés similaires au gradient de la matrice de gel EZ-Run ralentissent la migration des
protéines à travers le champ électrophorétique, permettant ainsi la résolution de petits peptides et de grandes protéines sur le même gel.
Shapiro et al. Laemmli Lambin Schagger & von Jagow Fisher BioReagents
Biochem. Biophys, Res. Nature. Anal Biochem. Anal Biochem.
28, 815. 277, 680 85, 114 166, 368
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Gel pour protéine EZ-Run
• Prêt à l’emploi
• Résolution supérieure
• Une large gamme de séparation sur le même gel
• Aucun stacking nécessaire
• Chimie brevetée
• Stable deux ans à température ambiante
• Compatible avec toutes les méthodes de coloration conventionnelles
• Approprié pour les applications post-électrophorèse comme le transfert Western et l‘analyse MALDI
Le gel pour protéine EZ-Run est une solution unique pré-mélangée prête à l’emploi
Réf. Description Qté
d’acrylamide, de tampon, et de SDS qui permet une résolution supérieure de bandes
10284913 Acrylamide :Bis-acrylamide, EZ-Run 15 % 500mL
de protéines par SDSPAGE. Le mélange liquide exige seulement l‘ajout de persulfate
d’ammonium et TEMED pour préparer une matrice de qualité pour SDS-PAGE. La chimie
brevetée du gel offre des propriétés similaires de gradient de la matrice de gel polymérisé,
permettant la séparation des petits peptides et des protéines à poids moléculaires plus
élevés sur le même gel.
La matrice de gel EZ-Run est utilisée comme simple système de gel continu et ne
nécessite pas de stacking, ce qui économise du temps de coulage. Le gel EZ-Run sépare Gamme de séparation du gel EZ-Run
les petites protéines comme le Tricine-SDS-PAGE et possède une gamme plus large de
séparation similaire aux gels gradients (3 à 200 kDa sur le même gel mini). % Gel EZ-Run Plage de séparation MW ( kDa)
15 2 à 100
Les gels EZ-Run sont compatibles avec tout l‘équipement d‘électrophorèse standard
ainsi qu’avec les méthodes de colorations standards comme celle du bleu de Coomassie,
argentiques et fluorescentes. Les techniques post-électrophorèse comme le transfert
Western, le séquençage et l‘analyse MALDI peuvent être appliqués aussi aux protéines
séparées sur les gels EZ-Run.
For up to date GHS information on Fisher BioReagents products listed please refer to the safety data sheet available from eu.fishersci.com
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Ladder protéique EZ-Run
Conçue pour aider à caractériser les protéines inconnues des gels polyacrylamide et les
immunotransferts
• Marqueurs hautement purifiés et ladders fournissant des bandes claires et compactes
• Les ladders précolorées sont indispensables pour contrôler la séparation des protéines et
l’efficacité du transfert
• Les bandes de références permettent une évaluation rapide des progrès du gel
• Les normalisations sans coloration sont les plus appropriées pour un calibrage précis des
protéines
• Tous les ladders sont fournies dans le tampon de chargement et sont prêtes à l’emploi
90
80
70
60
IOD
50
Solution de coloration pour gel de protéine EZ-Run
40
30
Sensitivity 5ng!
20
10 y=0.0459x
2000 1500 500 500 200 100 50 20 10 50
R=0.9937
ng/band
0
0 500 1000 1500 2000
2500 Coloration bleu de Coomassie conventionnel
ng de BSA
Gamme linéaire de détection de protéine utilisant N° Cat 10786444 Décoloration de solution de coloration pour Sensibilité de la coloration de la solution de
Solution de coloration pour gel de protéine EZ-Run gel de protéine EZ-Run coloration pour gel de protéine EZ-Run
L’intensité de la bande a été mesurée et tracée par rapport au montant Comparé à la coloration conventionnelle du bleu de La dilution en série de BSA sur SDS-PAGE 10%
de protéine (BSA) chargé par voie de gel. Le résultat montre une Coomassie, la coloration EZ-Run produit des contextes démontre la sensibilité de la teinte de la solution de
gamme dynamique linéaire de 5 ng à 2.000 ng en utilisant la solution de très clairs en utilisant seulement l’eau comme décolorant. coloration pour gel de protéine EZ-Run
coloration pour gel de protéine EZ-Run.
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Tampons pour électrophorèse protéinique
Réf. Description Qté
15561106 Tris SDS PAGE running buffer, 10X 500mL
15586006 Tris SDS PAGE running buffer, 10X 1L
10746834 Solution Tris-glycine 10X sans DNAse, RNAse et protéase 1L
10356743 Solution Tris-glycine 10X sans DNAse, RNAse et protéase 4L
10437773 La poudre Tris-glycine 10X pour 1 L de solution 10X sans DNAse, RNAse 1L*
10051653 Solution Tris-glycine-SDS 10X sans DNAse, RNAse et protéase 1L
10102823 Solution Tris-glycine-SDS 10X sans DNAse, RNAse et protéase 4L
Tampon SDS-PAGE pour électrophorèse protéinique, mélange de poudre sèche de Tris-Glycine-SDS pour
10618203 1L
1 L tampon 5X, paquet de 92 g testé électrophorèse
10061653 Tampon Tris-glycine-SDS, poudre 10X 1L
10468543 Solution PBS (solution saline tamponnée au phosphate) 10X sans DNAse, RNAse et protéase 500mL
10204733 Solution PBS (solution saline tamponnée au phosphate) 10X sans DNAse, RNAse et protéase 1L
10649743 Solution PBS (solution saline tamponnée au phosphate) 10X sans DNAse, RNAse et protéase 20L
Comprimés PBS (solution saline tamponnée au phosphate) comprimé 1x dissout dans 200 mL d’eau pour
10388739 100 tabs**
0,01 M Tampon au phosphate, 0,0027 M KCl et 0,137 M NaCl, pH 7,4 à 25 °C
10648973 Solution saline tamponnée Tris (TBS) solution 10X pH 7,4 100mL
10153103 Solution saline tamponnée Tris (TBS) solution 10X pH 7,4 500mL
10776834 Solution saline tamponnée Tris (TBS) solution 10X pH 7,4 1L
10103203 Tris base sans DNAse, RNAse et protéase, testé électrophorèse 500g
10376743 Tris base sans DNAse, RNAse et protéase, testé électrophorèse 1kg
10724344 Tris base sans DNAse, RNAse et protéase, testé électrophorèse 5kg
10667243 Tris base sans DNAse, RNAse et protéase, testé électrophorèse 10kg
10336793 Tris base sans DNAse, RNAse et protéase, testé électrophorèse 25kg
10061653 Glycine 500g
10061073 Glycine 1kg
10754724 Glycine 5kg
* poudre prépesée pour faire 1 L. Se dissout dans l’eau
** Un comprimé dissout dans 200 mL d’eau produit une solution tamponnée de phosphate 0,01 M, 0,0027 M KCl, et 0,137 M NaCl, pH7,4 à 25 °C
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Détergents/réactifs de dénaturation
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Gel avec 30 % d’acrylamide Tampons gel 4X (solution mère)
Vous aurez besoin de ces produits Fisher BioReagents... Vous aurez besoin de ces produits Fisher BioReagents...
• Acrylamide.................................................(réf. 10235203) • Base Tris....................................................(réf. 10376743)
• Bisacrylamide.............................................(réf. 10689923) • Dodécylsulfate de sodium (SDS.................(réf. 10356463)
• Eau..............................................................réf. 10336503) • Eau..............................................................réf. 10336503)
• HCl..............................................................réf. 10447450)
Méthode Méthode
Dissolvez 29 g d’acrylamide et 1 g de bisacrylamide dans un volume total de 60 ml Eau distillée Ajustez le pH Ajouter
Base SDS
d’eau distillée déionisée. Type de tampon déionisée à (avec de de l’eau
Tris (g) (g)
Faites doucement chauffer la solution (jusqu’à 37 °C environ) et mélangez jusqu’à ce (ajoutez à) l’HCl) à
que l’acrylamide et le bisacrylamide se soient dissous. Empilage
15,14 1 150mL 6,8 250mL
Portez le volume final à 100 ml avec de l’eau distillée déionisée et mélangez. (tampon supérieur)
Filtrez la solution avec un filtre ayant une membrane de 0,45 µm. Traitement
45,41 1 150mL 8,8 250mL
Ajustez le pH pour qu’il soit inférieur ou égal à 7,0 en utilisant de l’HCl. (tampon inférieur)
Stockez la solution dans des bouteilles sombres à température ambiante pour 3 mois Dans un bécher, versez le Tris, le SDS et l’eau selon les volumes indiqués dans le
maximum.
tableau ci-dessus.
Mélangez bien.
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suivants de la marque... Stockage à +4 °C.
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Tampon Tris-HCl 1 M, pH 6,8 10 % PA (solution
de persulfate d’ammonium)
Vous aurez besoin de ces produits Fisher BioReagents...
• Base Tris.......................................................................réf. 10376743) Vous aurez besoin de ces produits Fisher BioReagents...
• Eau............................................................................... (réf. 10336503) • Persulfate d’ammonium............................................... (réf. 10081503)
• HCl............................................................................... (réf. 10447450) • Eau............................................................................... (réf. 10336503)
Méthode Méthode
Pesez 12,11 g de base tris et ajoutez 80 ml d’eau. Pesez 0,1 g de persulfate d’ammonium.
Ajustez avec de l’HCl pour atteindre le pH souhaité. Dissolvez-le dans 1 ml d’eau distillée.
Portez le volume final à 100 ml avec de l’eau distillée. Conservez à +4 °C pendant 2 à 3 semaines.
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Méthode
Pesez 0,8 g de SDS et 8 mg de bleu de bromophénol.
Ajoutez 2 ml de Tris-HCl et 4 ml de glycérol.
Avec une pipette, ajoutez 0,4 ml ß-mercaptoéthanol et 1 ml d’EDTA.
Portez le volume final à 10 ml avec de l’eau distillée.
Aliquotez dans des tubes de centrifugeuses de 1,5 ml et stockez à -20 °C.
Diluez l’échantillon de protéines 1:3 dans un tampon de chargement d’échantillon 4X.
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Transfert
Le transfert, une technique qui comprend l‘immobilisation des protéines ou acides nucléiques sur un support de membrane solide et la détection
en utilisant un anticorps spécifique ou sonde de séquence complémentaire d‘acide nucléique, augmentant ainsi de manière importante le potentiel
d’indication et de caractérisation des protéines et des acides nucléiques. Lors du transfert sur un support en membrane, les protéines et acides
nucléiques sont beaucoup plus accessibles, permettant ainsi leur détection par les anticorps et sondes qui ce ne serait pas possible autrement dans un
gel. Puisque le fractionnement par électrophorèse dans un gel suivi d‘un transfert se révèle une excellente façon d’identifier les molécules spécifiques
dans une population mélangée de molécules protéiniques ou nucléiques, donc les deux techniques sont souvent combinées.
Les modules de transfert en option sont disponibles avec à la fois les unités Mini et Verti-Gel de Fisherbrand (N° Cat 11837623 et 15106644
respectivement), ils sont également disponibles comme faisant partie d‘un système totalement intégré pour de multiples techniques d’électrophorèse.
Les systèmes de transfert semi-secs offrent des durées courtes de transferts pour l’ADN et l’ARN et les protéines - typiquement 15 à 30 minutes. On peut
l‘utiliser pour tous les types de transferts : Western, Southern et Northern avec des épaisseurs de gel de 0,25 mm à 10 mm sans besoin d‘équipement
supplémentaire. Le transfert semi-sec apporte le bénéfice d’effectuer des transferts économiques vu les très faibles volumes de tampon - seulement
quelques millimètres de tampon sont suffisants pour le transfert. Les transféreurs semi-secs utilisent un couvercle à visser vers le bas qui fixe le sandwich
de transfert et permet un contrôle total de la pression tout en assurant un transfert uniforme. Les électrodes, comprenant une anode revêtue de platine
et une cathode en acier inoxydable, fonctionnent pratiquement sans corrosion, permettant ainsi des années d‘utilisation sans problèmes. Une dispersion
uniforme de la chaleur sur le sandwich de transfert offre des durées de transferts stables et aucune perte thermique induite par l‘échantillon ou distorsions
de transfert. Les électrodes sont totalement distinctes pour éviter tout arc ou dégât.
Réf. Description
Système de transfert semi-sec, mini, 100mm x
12357297
100mm
Système de transfert semi-sec, maxi, 200mm x
12367297
200mm
Accessoire
15136644 Semi câbles buvard sec (rouge et noir)
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FOCUS SUR LE WORKFLOW PROTEOMIQUE
Fisherbrand, Fisher Chemical et Fisher Bioreagents ensemble pour proposer des
produits accompagnant le Workflox protéomique.
Workflow Proteomique
Western Blotting Marquage Préparation d’échantillons Immunoassays
Membranes Kits d’extraction et tampons Kits ELISA
Individual DIGE fluors
Kits et tampons Inhibiteurs de protéases et phosphatases Anticorps
Complete DIGE labelling kits
Système de transfert
Concentration, dialyse, dessalage
Anticorps
Réactifs de détection
(chemiluminescent,
chromogénique, fluorescent)
Tampons
Films et cassettes
Imagerie
• Gels précoulés
• SDS page
• Marqueur de poids moléculaire
• IEP
Marquage
Fluorescent
Enzymatique
Purification
Par affinité
Des protéines taguées HIS ou GST
Des anticorps
Caractérisation Interaction protéines –
Colonnes prépackées
des protéines protéines
Par gel et filtration
Co-Immunoprécipitation (Co-IP)
Spectrophotométrie de masse Résine échangeuse d’ion Réactifs de réticulation
Coloration et détection Dissection des protéines Equipement de chromatographie Essais rétractables
Enrichissement Deux hybrides de levure tests
Colorant : argentique, fluorescent, KingFisher
Tableaux de protéines
Bleu de Comassie
Système de détection
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De l’aide à portée de main !
L’équipe d’assistance technique produit de Fisher Scientific est une ressource qui vous est consacrée. Nos conseillers du service après-vente sont des
professionnels hautement qualifiés dont le but est de répondre rapidement et efficacement à votre question.
La présente section comprend un guide de résolution des problèmes utiles et une foire aux questions. Si toutefois ces informations ne vous permettent
pas de résoudre le problème rencontré, ou si vous avez des questions qui ne sont pas abordées ci-après, contactez nos conseillers du service après-
vente.
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Guide de résolution des problèmes - électrophorèse verticale
Le tableau suivant reprend quelques-uns des problèmes les plus courants des électrophorèses verticales et des unités de blotting ainsi que des suggestions utiles
pour les résoudre.
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Foire aux questions (FAQ) – électrophorèse verticale
Cette section reprend les questions en lien avec l’électrophorèse verticale et le blotting les plus souvent posées à nos Spécialistes en science de la vie et
produits chimiques, avec les réponses apportées. Si vous ne trouvez pas la réponse à votre question, que vous êtes coincé et que vous avez besoin d’aide
ou tout simplement que vous êtes confus et incertain quant à savoir quel produit correspond le mieux à vos besoins de recherche, l’équipe d’assistance
technique est là pour répondre à vos questions.
Q. Quel pourcentage d’acrylamide dois-je utiliser ?
R. Il convient d’être attentif à sélectionner le pourcentage d’acrylamide ou la porosité appropriés de gel à utiliser. Le tableau ci-dessous détaille le
pourcentage de gel à utiliser pour séparer les tailles de protéines indiquées.
Q. Le colorant de charge de gel protéinique (réf. 10376363) contient-il des agents réducteurs tels que le ß-mercaptoéthanol ou le DTT ?
R. Pour l’électrophorèse protéinique, des tampons de charge d’échantillon type sont disponibles en formulation réductrice ou non réductrice. Le
dithiothréitol (DTT) est un agent réducteur commun utilisé dans les tampons d’échantillon de protéines. Cependant, la formulation du produit Fisher
BioReagents réf. 10376363, colorant de charge de gel protéinique (2X), ne contient pas d’agent réducteur tel que le DTT ou le mercaptoéthanol.
Q. Est-il possible d’autoclaver la réf. 10204733 ?
R. Il est déconseillé d’autoclaver le produit Fisher BioReagents réf. 10204733, 10X PBS, car du phosphate pourrait se séparer par précipitation. Pour
ce produit, nous filtrons la solution tampon à travers un filtre 0,2 micron dans un flacon poly stérile 1 L sous une hotte stérile.
Q. Pourquoi la taille de bande réelle d’un gel ou d’un Western blot est-elle différente de la taille prédite de la protéine ?
R. Le Western Blotting est effectué après la séparation des protéines en fonction de leur taille sur un gel. Cependant, la migration des protéines dans
la matrice du gel est également affectée par d’autres facteurs, ce qui peut résulter en des différences entre la taille de bande observée et la taille
prédite.
D’autres facteurs sont :
• La modification post-traductionnelle – par exemple la phosphorylation et la glycosylation augmentent la taille de la protéine.
• Le clivage post-traductionnel – beaucoup de protéines sont synthétisées comme protéines précurseures, puis clivées pour donner la forme active.
•L es multimères – par exemple la dimérisation d’une protéine. Dans des conditions de réduction, ce phénomène est généralement évité, même si
des interactions fortes peuvent faire apparaître des bandes plus élevées ;
• Les variantes d’épissage – un épissage alternatif peut produire des protéines de différentes tailles à partir d’un même gène.
• La charge relative – la composition des acides aminés (chargés vs non-chargés).
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Q. Quelle est la meilleure méthode de coloration des gels SDS-PAGE ?
R. La coloration au Coomassie est probablement l’une des techniques les plus connues de coloration de protéines. Il existe deux méthodes principales de
coloration au Coomassie, le Coomassie classique et le Coomassie colloïdal, mis au point plus récemment.
• Le Coomassie classique implique de colorer la totalité du gel, pas uniquement les protéines. En décolorant le gel, on visualise les protéines, étant donné que le
colorant est mieux conservé par les protéines que par le gel. La sensibilité du Coomassie classique (limite de détection) est d’environ 100 ng, ce qui rend difficile
la détection de protéines peu abondantes. C’est une méthode simple, bon marché et rapide qui présente l’avantage d’être compatible avec la spectrométrie de
masse. Cependant, la reproductibilité est problématique avec cette coloration, en raison des difficultés à standardiser l’étape de décoloration.
• Le Coomassie colloïdal est une adaptation de la coloration classique au Coomassie, qui utilise un colorant de Coomassie modifié (G-250 au lieu du R-250).
Il a une sensibilité accrue par rapport au Coomassie classique, avec une limite de détection d’environ 10 ng. Il est facile à effectuer et comme le colorant
colloïdal ne pénètre pas le gel, la décoloration n’est pas nécessaire (elle peut toutefois être utilisée pour améliorer le fond). Comme le Coomassie classique, il
est compatible avec la spectrométrie de masse.
En plus de la coloration au Coomassie, la coloration à l’argent est une autre méthode fréquente de visualisation des protéines. Le principal avantage de la
coloration à l’argent est sa sensibilité élevée, qui permet de détecter moins de 1 ng de protéines, ce qui en fait la méthode de prédilection pour la détection
de protéines peu abondantes. La coloration à l’argent est toutefois une méthode longue et difficile. Le gel doit être développé après la coloration pour pouvoir
visualiser les protéines, et la durée du développement peut varier fortement d’un gel à l’autre, ce qui rend difficile la reproductibilité. La coloration à l’argent
implique aussi l’utilisation de formaldéhyde pour fixer le gel, ce qui la rend incompatible avec la spectrométrie de masse.
Q. Comment puis-je améliorer l’efficacité de transfert pour des protéines de plus grande taille lors du Western blotting ?
R. Voici quelques options pour obtenir une meilleure efficacité de transfert pour les protéines de plus grande taille :
1) P
ré-équilibrez le gel avec du SDS 0,02 à 0,04 %, dans un tampon de transfert 2X sans méthanol pendant 10 minutes avant d’assembler le sandwich.
2) Augmentez graduellement la durée du blotting (par intervalles de 15 min).
3) Ajoutez 0,01 % ou 0,02 % de SDS au tampon de transfert pour faciliter la migration de la protéine hors du gel.
4) Réduisez le contenu de méthanol dans le tampon de transfert.
5) P
assez à un gel de pourcentage inférieur plus adapté. Un gel de pourcentage inférieur peut permettre un meilleur transfert qu’un gel à pourcentage élevé.
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Q. Comment puis-je améliorer l’efficacité de transfert des marqueurs de protéines lorsque j’effectue un Western blotting sur une membrane PVDF ?
R. Il y a deux facteurs à prendre en compte : un mauvais transfert et le passage du marqueur à travers la membrane lors du transfert.
Q. Quels sont les tampons de lyse standard utilisés avec les cellules de mammifères pour la détection de l’expression des protéines par immunoprécipitation
ou analyse de Western blot ?
R. Le tampon le plus communément utilisé est le tampon RIPA avec SDS. La formulation habituelle est la suivante :
150 mM NaCl, 10 mM Tris, pH 7,2, 0,1 % SDS, 1,0 % Triton X-100, 1 % désoxycholate, EDTA de 5 mM
Inhibiteurs de protéases : 1 mM fluorure de phénylméthylsulfonyle, 10 mM benzamidine, 2 μg/ml inhibiteurs de phosphatase leupeptine
Inhibiteurs de phosphatase : 100 µM orthovanadate de sodium, 10 mM p-nitrophénylphosphate
Procédure :
1. Placez les cellules sur la glace.
2. Lavez les cellules au PBS glacé pour enlever les milieux de culture.
3. Ajoutez 1 ml de tampon RIPA à une boîte de 100 mm. Si nécessaire, augmentez ou diminuez l’échelle.
4. Versez les cellules dans le tampon RIPA en grattant et transférez dans un petit tube à centrifuger.
5. P
osez sur la glace pendant 10 min, en mélangeant au vortex à intervalles de quelques minutes pour dissoudre le matériau. Les lysats peuvent également
être passés dans une aiguille 22 G pour faciliter la solubilisation.
6. Centrifugez à 17 000 tr/min pendant 10 min.
7. Enlevez le surnageant pour les dosages de protéines et jetez le culot.
REMARQUE : pour les expériences pour lesquelles il n’est pas souhaitable de dénaturer complètement les protéines et d’éventuellement briser les interactions entre protéines, il est possible de remplacer le tampon RIPA par un tampon de solubilisation non
dénaturant NP40, recette : 150 mM NaCl, 20 mM Tris, pH 7,5, 1 % NP40 ou 1 % Triton-X-100 et 5 mM EDTA. Si ce tampon non dénaturant est utilisé, il est nécessaire d’homogénéiser les lysats ou de les passer dans une aiguille à plusieurs reprises, afin de
garantir une solubilisation adéquate.
Q. Comment puis-je réduire les bandes de bruit de fond de mon Western blot ?
R. Optimisez la concentration d’anticorps primaires et secondaires. Dans certains cas, augmenter la concentration d’agents de blocage (BSA ou poudre de
lait écrémé) permet de réduire le signal de bruit de fond. Après incubation avec l’anticorps primaire, lavez au moins deux fois au TBST (incluez 0,5 M de
NaCl dans une ou plusieurs étapes du lavage). Évitez d’utiliser du Nonidet™ P40 ou du Triton™ X-100 dans les tampons, car ces détergents réduisent la
détection des protéines.
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Q. Puis-je utiliser du BSA (Fisher BioReagents réf. 12737119) pour un tampon de blocage en vue d’un Western Blotting ?
R. Oui, la réf. 12737119 (albumine de sérum bovin, traitée par choc thermique de fraction V) peut être utilisé dans le cadre de plusieurs applications de biologie
moléculaire, dont les Western blots (comme agent de blocage) et l’ELISA comme stabilisateur des réactions enzymatiques. Vous pouvez également envisager
un autre produit BSA plus récent, la réf. 12871630 (BSA, traité par choc thermique et sans protéase). Ce produit a été utilisé de manière fructueuse pour des
RIA et ELISA ainsi que comme agent de blocage.
Souvent un traitement aussi rude n’est pas nécessaire pour enlever les anticorps de leurs protéines. Une méthode alternative et plus douce pour déshybrider
un blot consiste à diminuer le pH du tampon de déshybridation.
• Immergez le blot dans un tampon de déshybridation (1 % SDS, 25 mM glycine-HCl, pH 2,0) et incubez à 50 °C pendant 30 minutes en agitant de temps en
temps.
• Lavez 2 x 10 min au TBS-T/PBS-T à température ambiante.
• Bloquez la membrane en l’immergeant dans 5 % de réactif de blocage TBS-T ou PBS-T pendant 1 heure à température ambiante.
• Passez à la série suivante d’immunodétections.
Références
1. Sambrook, Fritsch, and Maniatis, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989
2. Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates and Wiley-Interscience,1989
3. Weiss, W., Weiland, F. & Görg, A. (2009), Protein detection and quantitation technologies for gel-based proteome analysis, in J. Reinders & A. Sickmann, eds, ‘Proteomics’, Vol. 564 of Methods
in Molecular Biology, Humana Press,
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fournies par les clients et sont uniquement de nature générale. Fisher Scientific ne peut garantir qu’une information ou suggestion est adaptée aux besoins ou aux nécessités spécifiques des clients et il est vivement conseillé à ces derniers de procéder à leur
propre évaluation des informations ou suggestions fournies.
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Générateurs pour Électrophorèse
Les techniques d‘électrophorèse nécessite un champ électrique fiable donc le choix approprié d’une bonne alimentation se révèle essentiel.
En général, lorsque vous utilisez des sources d‘alimentation à tension variable ou constante, plus la tension est élevée, plus la migration dans les
échantillons est rapide. Cependant, la tension maximale pouvant être appliquée dépend de la conception du dispositif d’électrophorèse et ne doit pas
dépasser les recommandations du fabricant. Par exemple, une tension trop élevée peut fondre le gel d’agarose pendant l’électrophorèse et causer une
distorsion des résultats.
Le choix de l’alimentation peut varier selon l‘application voulue. Par exemple, la focalisation isoélectrique (IEF), la technique d’électrophorétique pour la
séparation des protéines basée sur les points isoélectriques (pl) nécessite une haute tension (jusqu’à 3.000 mA) tandis que la migration de l’ADN sur une
unité de gel mini nécessite moins de tension 400 mA.
Le tableau suivant vous aidera à choisir le bon générateur pour votre application.
Application Mini 300V Plus PowerPlus 300 PowerPlus 500 PowerPlus 3AMP
Électrophorèse horizontale
Mini-Plus Large • • • •
Midi-Plus Large • • • •
Mini SUB-GEL • • • •
Midi SUB-GEL • • • •
SUB-GEL Midi Plus • • • •
Maxi Sub-Gel • • •
IEF
Électrophorèse verticale
Verti-Gel Mini, Système 2-Gel (Standard) • • • •
Verti-Gel Mini, Système 4-Gel (Standard) • • •
Verti-Gel Mini, Système 2-Gel (Standard) •
Séquençage ADN
Transfert
Transfert semi-sec, maxi •
Transfert Western • •
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Mini 300V Plus et Midi 300V/4
Ces modèles bénéficient d‘une plus petite empreinte carbone et sont compacts, avec des menus faciles à suivre facilitant le
réglage. Ces générateurs respectent IEC 61019 - l‘une des normes électriques les plus strictes.
L’interface aisée du Mini 300V à visualisation LED nette est facilement ajustable en incréments de
1 V et 1 mA, parfaite pour des séparations où un réglage précis s’avère nécessaire. Il possède une
empreinte carbone réduite et deux paires de terminaux d’alimentation en parallèle permettant aux cuves
d’électrophorèse de fonctionner simultanément.
Spécifications de sortie
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Générateurs Électrophorèse
Les techniques d‘électrophorèse nécessite un champ électrique fiable donc le choix approprié d’une
bonne alimentation se révèle essentiel.
En général, lorsque vous utilisez des sources d‘alimentation à tension variable ou constante, plus la
tension est élevée, plus la migration dans les échantillons est rapide. Cependant, la tension maximale
pouvant être appliquée dépend de la conception du dispositif d’électrophorèse et ne doit pas dépasser
les recommandations du fabricant. Par exemple, une tension trop élevée peut fondre le gel d’agarose
pendant l’électrophorèse et causer une distorsion des résultats.
Le choix de l’alimentation peut varier selon l‘application voulue. Par exemple, la focalisation isoélectrique
(IEF), la technique d’électrophorétique pour la séparation des protéines basée sur les points isoélectriques
(pl) nécessite une haute tension (jusqu’à 3.000 mA) tandis que la migration de l’ADN sur une unité de gel
mini nécessite moins de tension 400 mA.
Le tableau suivant vous aidera à choisir le bon générateur pour votre application.
Caractéristiques de sortie
Réf. Description
15818481 PowerPlus 300, 300 V, 700 mA, 150 W, cinq sorties
15838481 PowerPlus 500, 500 V, 400 mA, 3 000 W, cinq sorties
15828481 PowerPlus 3AMP, 300 V, 3 000 mA, 3 00 W, cinq sorties
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Guide de résolution des problèmes - générateurs
Le tableau suivant reprend quelques-uns des problèmes les plus courants des unités d’alimentation électrique ainsi que des suggestions utiles pour les
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Foire aux questions (FAQ) – générateurs
Cette section reprend les questions les plus souvent posées à nos Spécialistes en science de la vie et produits chimiques sur ce sujet, avec les réponses
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Cabines PCR
• Les lumières UV dénaturent les acides nucléiques en 5 à 30 minutes, ce qui les empêche de s’amplifier
• Comprend des fonctions de sécurité pour empêcher toute exposition de l’utilisateur aux lumières UV
• Les lumières UV sont contrôlées par minuteur
• Des commutateurs de sécurité placés sur les portes éteignent les lumières UV lorsqu’elles s’ouvrent
• Protège des émissions bêta radioactives
Spécification technique
Permet d’obtenir un moyen sûr pour afficher et documenter les gels et d’autres matériaux avec
une source de lumière bleue uniforme. Le transilluminateur à LED Fisherbrand™ SafeVIEW MINI2
n’endommage pas l’ADN ou l’ARN, comme ce serait normalement le cas avec les lumières UV.
• Conception compacte
• Source lumineuse unie
• Économique
• Léger, seulement 1,52 kg
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