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Action de lacide beta indole butyrique (AIB) sur les jeunes tiges de pois

Dosage biologique des auxines par le "test de pois" Introduction Les hormones vgtales interviennent de faon importante dans les processus biologiques qui rglent la croissance et le dveloppement des vgtaux. Une mthode biologique couramment utilise est le test de pois. Si lon fend longitudinalement les picotyles de pois, les 2 moitis se courbent vers lextrieur ; en prsence dauxine il y a stimulation prfrentielle des cellules de lpiderme, ainsi les 2 moitis se courbent lune vers lautre. Langle de courbure peut donc servir de mesure dactivit. Cet article est plutt destin aux prparateurs, en effet on expliquera ici la manire de prparer des solutions dacide beta indole butyrique partir dune poudre de bouturage. Quelques photos la fin pour vous montrer les rsultats que lon peut obtenir.
Prparation de solutions dAIB 2 E-4 M, 1E-4M, 1E-5, 1E-6M, 1E-7M

(La notation 2E-4M signifie : deux fois dix puissance moins quatre mole par litre, cest la notation adopt par certains tableurs...) On trouve diverses auxines chez les fournisseurs de produits chimiques, il est donc facile de se procurer de lacide indole butyrique (AIB) bon march. Le parti pris ici a t de raliser ce test avec ce que lon avait sous la main : savoir une poudre de bouturage de la marque Sem (HBS) contenant de lAIB raison de 0.25% sur chryzotop vert. Un sachet de 5 g dhormone de bouturage contient donc en ralit 12.5 mg dAIB. Prparation du liquide de KNOP avec lequel seront faites les dilutions : Nitrate de Calcium : 2 g Nitrate de Potassium : 0.50 g Dihydrognophosphate de Potassium : 0.50 g Sulfate de Magnsium : 0.50 g Sulfate ferrique : 0.002 g Eau distille : 2000 ml Prparation de la solution mre dAIB 2E-4M : On sait que la masse molaire de lAIB ( MmAIB) est de 203.2g/mol. 0.4 g de poudre de bouturage contient 1E-3 g dAIB soit nAIB= 1E-3 / 203.2= 4.92 E-6 mol Donc pour un litre de KNOP contenant 2E-4M il faut : mAIB= ((2E-4 *1E-3)/ 4.92E-6)=0.0406 g dAIB pure donc avec notre hormone de bouturage mHBS= (0.0406*0.4)/0.001 = 16.26 g Bien voila pour ce qui est des petits calcules prliminaires pour raliser cette solution. Maintenant il faut savoir que lAIB est trs peu soluble dans leau, et a fortiori le chryzotop vert qui est un intrant servant de support lhormone. Il va donc falloir " extraire " lAIB ; pour cela il suffit de mlanger dans un bcher les 16.26g de poudre de bouturage 20 ml dthanol 95 non dnatur. Homognisez et laissez reposer une ou deux heures (para filmez le bcher). Normalement, aprs ce lapse de temps, lAIB est solubilis, et le chryzotop non. Utilisez cette "bouillie " verdtre pour raliser la solution mre de la faon classique (fiole jauge, qsp 1litre de KNOP). Filtrez ensuite sur papier filtre et coton afin dobtenir une solution limpide. (nota : la concentration de la solution nest pas des plus prcise, je vous rappelle quil sagit ici de " bidouiller" et non pas de faire de la chimie de haut vol !) Prparation des dilutions suivantes partir de la solution mre :

Replongeons rapidement dans quelques calcules de dilution ; ici on utilisera la sacro-sainte formule suivante Ci * Vi =Cf * Vf (Avec i pour initial [solution mre donc], et f pour final [solution fille]) Donc pour la premire solution 1E-4M, si on dsire en prparer 100ml, il nous faut : V sol mre = (Cf * Vf)/ C sol mre= (1E-4 *100)/2E-4= 50ml On utilisera donc une fiole jauge de 100ml dans laquelle on placera les 50ml de solution mre, puis ............ bah oui vous avez devin : QSP 100ml avec du liquide de KNOP. Bon pour les autres solutions je vous donne directement les rsultats (on prpare toujours 100ml de solution dans du liquide de KNOP, hein ! oubliez pas !) 1E-5M V sol mre : 5ml 1E-6M V sol mre : 0.5ml 1E-7M V sol mre : 50l Aprs le reste est expliqu ici et ici Maintenant place aux photos ! Pois germs lobscurit :

Aprs 24h

Tmoin KNOP :

AIB 2E-4M :

AIB 1E-4M :

AIB 1E-5M :

AIB 1E-6M :

AIB 1E-7M :

Voila pour preuve quil est possible dobtenir quelque chose de probant avec les moyens du bord !