C.H.I.T.S. Guide de Laboratoire 18-03-2013

LABORATOIRE DE BIOLOGIE
MEDICALE
Processus de Ralisation
R-PRE-MO-01
Version
GUIDE DE LABORATOIRE
DE BIOLOGIE MEDICALE
CHI TOULON-LA SEYNE SUR MER
Rdig par
Valid par
Date
01
01/12/2012
Pages
98
Approuv par
Nom/fonction
date
Nom/fonction
date
Nom/fonction
date
L. Jauffret
(Gestionnaire Qualit)
16/03/2013
Dr E. Jullian
(Responsable laboratoire)
Dr G. Imbert (Biologiste)
17/03/2013
Dr C. Poggi
(Responsable Qualit)
18/03/2013
Historique des modifications

Version
Page
01
02
3, 32, 38
Paragraphe
Nature de la modification
Date de diffusion
Version initiale
Secteur biochimie : Dr Flachaire / hmolyse/Tests dynamiques
02/01/2013
18/03/2013
Madame, Monsieur,
Une nouvelle version du guide de laboratoire du CHITS est disponible.

Ce guide, sans tre exhaustif, se veut le plus complet possible afin de faciliter la prise en charge de vos patients.
Il est compos de deux parties :
- Le manuel de prlvement
- Le catalogue des examens
Une large place a t faite aux recommandations pr analytiques, le respect de cette tape tant primordial la qualit des analyses suivre.
Nos documents de rfrence sont :

-
Guide de Bonne Excution des Analyses (GBEA) arrts du 2 novembre 1994, 26 novembre 1999, projet du 07 juillet 2010.
Norme ISO 15189.
Recommandations fournisseurs de dispositifs de prlvements, socits savantes
Il vous est toujours possible de contacter le laboratoire pour toute information complmentaire.
Nous sommes galement attentifs (laboratoire.qualit@ch-toulon.fr) toute remarque ou suggestion de votre part qui aideraient lamlioration de ce
document.
Nous souhaitons que ce guide corresponde vos attentes et vous apporte une aide utile et prcieuse dans votre pratique professionnelle quotidienne.
VOS INTERLOCUTEURS
Secteur / Fonction
Responsable du laboratoire
Cadres de sant
Cadre de sant - FF
Rfrent Secrtariat
Secrtaires
Tlcopieur
Cellule Assurance Qualit
Gestionnaires qualit :
Membres
Responsable secteur pranalytique

Responsable secteur informatique
Responsable Biochimie / Biochimie spcialise
Responsable Immunopathologie / Allergologie

Responsable Microbiologie / Bactriologie / Hygine
Responsable Microbiologie / Virologie/ Biologie molculaire/ Srologie
Responsable Hmatologie / Hmostase
Responsable Biologie dlocalise
Agents de service
Dr Eric Jullian
Maryse Derrien
Marie Odile Boy
Jean Pascal Borrot
Corinne Somoza
41198 / 41199 / 41197 / 41200
04 94 14 51 27 / 45127
laboratoire.qualit@ch-toulon.fr
Dr Ccile Poggi
Gilles Gavotto
Lucette Jauffret
Maryse Derrien
Dr Lionel Chollet
Dr Guenivre Imbert
Dr Myriam serre
Dr Guenivre Imbert
Dr Martine Chouraqui
Dr Eric Jullian
Dr Odile Lafon
Dr Laurence Koulmann
Dr Elisabeth Flachaire
Dr Lionel Chollet
Dr Myriam Serre
Dr Guenivre Imbert
Dr Dominique Sansot
Dr Ccile Poggi
Dr Lionel Chollet
Dr Caroline Cuquemelle
Dr Myriam Serre
Dr Laurence Koulmann
41205
Tel 04 94 1
45992
45311
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41162
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45990
45745
SOMMAIRE
1. LA PRESCRIPTION .................................................................................................................................................................................................................................. 8
1.1. LES PRESCRIPTEURS ................................................................................................................................................................................................................... 8
1.2. LES SUPPORTS DE PRESCRIPTION .............................................................................................................................................................................................. 8
1.3. LES IMPRIMS HOSPITALIERS (BONS) DE DEMANDE DANALYSE.............................................................................................................................................. 8
1.4 RAJOUT DANALYSES ................................................................................................................................................................................................................ 11
1.5 LES RENSEIGNEMENTS CLINIQUES ........................................................................................................................................................................................... 11
2. LES CONDITIONS PRE-ANALYTIQUES PARTICULIERES .................................................................................................................................................................... 12
2.1. ETAT DE JEUNE ......................................................................................................................................................................................................................... 12
2.2. A DISTANCE D'UN REPAS.......................................................................................................................................................................................................... 12
2.3 REGIME ALIMENTAIRE PARTICULIER ....................................................................................................................................................................................... 12
2.4. PARAMETRES VARIANT SELON UN RYTHME CIRCADIEN ......................................................................................................................................................... 13
3. LE PRELEVEMENT ............................................................................................................................................................................................................................ 14
3.1. GENERALITES ............................................................................................................................................................................................................................ 14
3.2 ETAPES DUN PRELEVEMENT POUR ANALYSES DE BIOLOGIE .................................................................................................................................................. 15
3.3 FACTEURS AYANT UN IMPACT SUR LA QUALITE DU PRELEVEMENT ....................................................................................................................................... 16
3.4 TUBES ET SUPPORTS DE PRELEVEMENT .................................................................................................................................................................................. 17
3.5 PEREMPTION ET CONDITIONS DE STOCKAGE.......................................................................................................................................................................... 22
3.6 IDENTIFICATION PRIMAIRE DES ECHANTILLONS ..................................................................................................................................................................... 23
3.7. CONDITIONNEMENT DES ECHANTILLONS ............................................................................................................................................................................... 24
4. LES PRELEVEMENTS SANGUINS ...................................................................................................................................................................................................... 25
4.1 UTILISATION DU GARROT ........................................................................................................................................................................................................ 27
4.2 DESINFECTION DU SITE DE PONCTION .................................................................................................................................................................................... 28
4.3 EFFECTUER LA PONCTION VEINEUSE EN IMAGE ..................................................................................................................................................................... 29
4.4 ORDRE DE PRELEVEMENT DES TUBES...................................................................................................................................................................................... 30
4.5 QUALITE DE LECHANTILLON.................................................................................................................................................................................................... 31
4.6 LES PRELEVEMENTS ARTERIELS................................................................................................................................................................................................ 33
4.7 LES TESTS DYNAMIQUES .......................................................................................................................................................................................................... 38
5. LES PRELEVEMENTS DURINE EN IMAGE ........................................................................................................................................................................................ 45
5.1 CHEZ UN PATIENT NON SOND ............................................................................................................................................................................................... 45
5.2 CHEZ UN PATIENT SOND ........................................................................................................................................................................................................ 46
5.3 A PARTIR DUNE POCHE AUTO-COLLANTE............................................................................................................................................................................... 47
5.4 LES RECUEILS D'URINES DE 24 HEURES ................................................................................................................................................................................... 48
5.5 TRANSFERT A PARTIR DU CONTAINER DE 24H ........................................................................................................................................................................ 49
6. EXAMEN PHYSIQUE ET CHIMIQUE DES SELLES............................................................................................................................................................................... 50
4
LES PRELEVEMENTS MICROBIOLOGIQUES ............................................................................................................................................................................................. 51

1. COMMENT UTILISER LES ECOUVILLONS ESWAB ............................................................................................................................................................................ 52
2. LES HEMOCULTURES EN IMAGE .................................................................................................................................................................................................... 53
3. RECUEIL DES URINES ........................................................................................................................................................................................................................... 55
3.1. ECBU............................................................................................................................................................................................................................................. 55
3.2 URINES 1ER JET ........................................................................................................................................................................................................................ 56
3.3 URINES RECHERCHE DE MYCOBACTERIES ............................................................................................................................................................................... 57
3.4 URINES RECHERCHE DE SCHISTOSOMES ................................................................................................................................................................................. 57
4. RECUEIL DES SELLES ........................................................................................................................................................................................................................ 58
4.1. BACTERIOLOGIE, MYCOLOGIE ET VIROLOGIE .................................................................................................................................................................................. 58
4.2. PARASITOLOGIE ............................................................................................................................................................................................................................... 59
5. LES SECRETIONS BRONCHO-PULMONAIRES ................................................................................................................................................................................... 60
5.1. EXPECTORATION HORS RECHERCHE DE MYCOBACTERIES .......................................................................................................................................................... 60
5.2. ASPIRATION ENDO-BRONCHIQUE ............................................................................................................................................................................................... 61
5.3. PRELEVEMENTS PROTEGES.......................................................................................................................................................................................................... 62
5.4. RECHERCHE DE MYCOBACTERIES, NOCARDIA ET ACTINOMYCES ............................................................................................................................................... 63
6. PRELEVEMENTS CUTANEO-MUQUEUX............................................................................................................................................................................................... 64
6.1. BACTERIOLOGIE / VIROLOGIE: PRELEVEMENTS CUTANES ...................................................................................................................................................... 64
6.2. PRELEVEMENTS ORL: BOUCHE / GORGE ................................................................................................................................................................................. 66
6.3. PRELEVEMENTS ORL: NEZ / SINUS ........................................................................................................................................................................................... 67
6.4. PRELEVEMENTS ORL: OREILLE ................................................................................................................................................................................................. 69
6.5. PRELEVEMENTS OCULAIRES ........................................................................................................................................................................................................ 70
7. LES PRELEVEMENTS POUR MYCOLOGIE / PARASITOLOGIE ........................................................................................................................................................... 72
7.1. MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DE PEAU ................................................................................................................................................................................... 72
7.2. MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DONGLE .................................................................................................................................................................................. 73
7.3. MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DE CHEVEUX ............................................................................................................................................................................ 74
7.4. PARASITOLOGIE : SCOTCH TEST ............................................................................................................................................................................................... 75
8. PRELEVEMENTS GENITAUX ............................................................................................................................................................................................................. 76
8.1. PRELEVEMENT GENITAL EXTERNE ........................................................................................................................................................................................... 76
8.2. PRELEVEMENT VAGINAL .......................................................................................................................................................................................................... 77
8.3. PRELEVEMENT URETHRAL........................................................................................................................................................................................................ 78
8.4. PRELEVEMENT DE SPERME ...................................................................................................................................................................................................... 79
9. PRELEVEMENTS MAMAN-BEBE ...................................................................................................................................................................................................... 80
10. LES PRELEVEMENTS DE LIQUIDES ................................................................................................................................................................................................ 82
11. PUS, PUS PROFOND, MATERIEL INORGANIQUE .......................................................................................................................................................................... 85
5
12.
13.
14.
15.
16.
PRELEVEMENT DE MOELLE OSSEUSE .......................................................................................................................................................................................... 87

ACHEMINEMENT DES ECHANTILLONS ......................................................................................................................................................................................... 88
ELIMINATION DES DECHETS D'ACTIVITE DE SOINS A RISQUE INFECTIEUX ................................................................................................................................. 95
ACCIDENT A EXPOSITION VIRALE (AEV) ...................................................................................................................................................................................... 96
CONSULTER LE CATALOGUE DES EXAMENS ................................................................................................................................................................................ 97
MANUEL DE PRELEVEMENT
1. LA PRESCRIPTION
1.1.
LES PRESCRIPTEURS
La prescription des analyses, par la personne habilite le faire est le point de dpart de la phase pr-analytique. Les personnes autorises prescrire des
examens de biologie mdicale sont les mdecins, les sages-femmes et le cas chant, les biologistes.
1.2. LES SUPPORTS DE PRESCRIPTION
L'ordonnance doit tre rdige par le prescripteur et doit mentionner :
Le nom, les coordonnes, le numro RPPS, et la signature du prescripteur.
L'identification univoque du patient (nom, nom de jeune fille, prnom, sexe, date de naissance).
Les examens raliser.
En fonction des circonstances cliniques, les renseignements cliniques requis.
1.3.
LES IMPRIMS HOSPITALIERS (BONS) DE DEMANDE DANALYSE
Les bons de demande utiliss dans les units de soins sont spcifiques chaque secteur excutant, elles sont identifies par le nom du secteur, et une couleur.
Ce sont des supports qui font partie de la structure documentaire et sont soumis une mise jour annuelle avec un changement de version. Afin de s'assurer du
bon choix de support, il est recommand de consulter le catalogue des examens la page de l'analyse souhaite.
Les analyses urgentes sont identifies par la coche URGENT , et conditionnes en sac rouge
Lidentification des patients
- Obligatoire : 1 seule tiquette (patronymique + 2 codes barres)
- Positionnement correct de ltiquette didentification sur emplacement ddi
Lidentification de lUF
- Positionnement correct de ltiquette didentification sur emplacement ddi
.
- Les consultations externes doivent utiliser les tiquettes de LEUR service et non pas celle du service dhospitalisation
Identification complte du prescripteur et du prleveur

Ces identifications sont obligatoires (GBEA et norme ISO 15189). Les initiales ne sont pas autorises
Si ces items ne sont pas renseigns, une non-conformit sera notifie sur le compte rendu de rsultats
10
1.4
RAJOUT DANALYSES
Le prescripteur peut demander oralement un rajout d'analyse(s) sur un chantillon utilis pour un examen antrieur en tlphonant au responsable du secteur
ou son supplant. Le laboratoire acceptera ou non la demande en fonction des conditions pr-analytiques et la quantit d'chantillon requises pour l'examen
demand. Dans certains cas il sera demand au prescripteur, dans un deuxime temps, le complment de prescription
1.5
LES RENSEIGNEMENTS CLINIQUES
Ces renseignements peuvent tre indispensables pour le calcul dun rsultat:
La diurse si examen sur urines de 24H ou temps calcul

La taille et le poids pour la clairance la cratinine corrige par rapport la surface corporelle
Selon le cas, des informations peuvent aider la validation biologique des rsultats:
Le nom et la posologie de l'anticoagulant pour les analyses d'hmostase.

Le nom du mdicament, la posologie, la date et l'heure de la dernire prise pour le dosage srique d'un mdicament.
Date des dernires rgles et traitement hormonal pour les dosages hormonaux.
Pour certains examens, des imprims (fiche de renseignements, consentement du patient, etc.) doivent tre remplis et joints la demande. Ils sont
indispensables la ralisation de l'analyse.
Si l'examen souhait n'est pas rpertori au niveau du guide des analyses, il est indispensable d'appeler le laboratoire avant d'effectuer le prlvement.
L'absence de document associ entrainera un retard dans la prise en charge de lexamen et peut mme conduire au rejet de la demande.
11
2.
LES CONDITIONS PRE-ANALYTIQUES PARTICULIERES
2.1.
ETAT DE JEUNE
Etre jeun signifie un dlai de 12 heures entre le dernier repas et la prise de sang. En gnral, pour des prlvements effectus le matin. Le laboratoire
prconise d'tre jeun pour une prise de sang, car L'alimentation apporte elle-mme certains lments doss. Dans ce cas, il est recommand de prendre un
repas lger et pauvre en matires grasses la veille au soir.
2.2.
A DISTANCE D'UN REPAS
Signifie un jene de 3 4 heures entre le dernier repas et la prise de sang, aprs le repas la qualit de l'chantillon sanguin est modifie (trouble, viscosit), ces
modifications peuvent perturber le fonctionnement des appareils d'analyse ou gner la lecture (recherche de cryoglobuline) et conduire des rsultats errons.
Les exigences de jene et d'horaire sont dtailles par analyse dans le catalogue des examens au niveau de la colonne QUAND ? .
Le respect de l'heure de prlvement est primordial car :
Pour la majeur partie des examens, les valeurs de rfrence ont t tablies jeun et au lever. Il est donc ncessaire de respecter ces conditions pour
pouvoir comparer le rsultat obtenu aux valeurs de rfrence et faire le suivi des rsultats si le test est rpt dans le temps.
Certains paramtres varient naturellement en cours de journe (rythme circadien).
Pour le dosage des mdicaments, il est indispensable de respecter un certain dlai entre le dbut du traitement et le moment du prlvement (lorsque
l'atteinte d'un tat stable est ncessaire). Il convient galement de s'assurer du dlai ncessaire entre le prlvement et la dernire administration du
mdicament lorsque l'on cherche dterminer des concentrations un temps prcis.
(Concentration maximale = pic = quelques minutes aprs la dernire prise ou Concentration rsiduelle = valle = quelques minutes avant la prise suivante)
Noter la date et heure de prise + posologie
2.3
Respect de priode de repos pour le dosage de la prolactine.

REGIME ALIMENTAIRE PARTICULIER
Certaines analyses exigent un rgime alimentaire particulier pendant une priode dtermine prcdant le prlvement. Le catalogue des examens dtaille le
rgime alimentaire respecter quand cela est ncessaire.
12
2.4. PARAMETRES VARIANT SELON UN RYTHME CIRCADIEN

Il existe pour ces paramtres biologiques un rythme circadien d'une amplitude suffisamment importante pour avoir une influence significative sur
l'interprtation clinique, do la ncessit de respecter les heures de prlvement.
ACTH - Corticotrophine - plasma
concentration maximale le matin
Corticostrone - Compos B - srum
Cortisol - Compos F - salive
Cortisol - Compos F - srum
Dsoxypyridinoline - urines
concentration maximale le soir ou la nuit. En cas de prescriptions renouveles, l'heure de recueil

devra tre toujours la mme
DHEA - Dhydropiandrostrone - srum
Sulfate de prgnnolone - srum
T4 - Thyroxine - urines
11 Dsoxycorticostrone - srum
11 Dsoxycortisol - compos S
17 Hydroxy Prgnnolone - srum
21 Dsoxycortisol - srum
13
3. LE PRELEVEMENT
3.1.
GENERALITES
Un prlvement biologique est un acte de soins qui consiste prlever un chantillon biologique en vue d'examen de biologie ou de diagnostic cytologique et
histologique. Le but est de raliser un prlvement de qualit dans des conditions d'hygine et de scurit pour le patient et le personnel.
En se basant sur le principe selon lequel tout chantillon biologique est potentiellement infectieux, il est ncessaire de respecter des prcautions de base lors de
la manipulation de tout produit biologique (sang, liquides, tissus, etc.) de tous les patients, et de tous les matriels ayant t en contact avec un produit
biologique, notamment :
Porter un quipement de protection adapt aux diverses situations (gants, blouse, masque, lunettes, etc.)
Se laver les mains avant et aprs chaque acte technique, les dsinfecter ensuite en cas de souillure avec un produit biologique.
Ne pas recapuchonner les aiguilles.
Manipuler avec soins les objets coupants et piquants et les dposer immdiatement aprs usage dans des conteneurs adapts.
Avant d'effectuer le prlvement :

- Vrifier l'identit du patient : concordance entre l'identit complte du patient, l'identit figurant sur le support de prescription et
celle des tiquettes autocollantes hospitalires.
- Recueillir les renseignements physiopathologiques, thrapeutiques et risque allergique (latex, etc.)
- S'assurer du respect des recommandations pr-analytiques requises pour la ralisation de l'analyse demande (prparation
particulire, tat de jene, rgime, etc.)
14
3.2
ETAPES DUN PRELEVEMENT POUR ANALYSES DE BIOLOGIE
Prescription dune analyse de biologie mdicale

Vrifier la prescription (nom de lanalyse, type dchantillon prlever)
Consulter le catalogue des examens (si besoin) pour connatre :

Condition de prparation du patient
Type de tube ou contenant
Condition dacheminement (temprature, dlai,)
Conditions particulires (jour pour prlever,)
Consulter le manuel de prlvement (si besoin)
Informer le patient du soin
Choisir le matriel adapt au type dexamen et au patient
Respecter lhygine des mains Cf. fiche CLIN FT 2
Vrifier lidentit du patient

Faire dcliner : nom et nom de naissance, date de naissance
Si impossible, se rfrer au bracelet didentification
Raliser une antisepsie cutane si ncessaire

Choix de lantiseptique
Respecter le temps de contact
Raliser le prlvement selon les prconisations de ce guide ou du CLIN

Respecter les prcautions standards (port de gants, limination des dchets, prvention des AEV)
Etiqueter lchantillon au chevet du patient
Remplir le bon de demande (identit du prleveur, heure, minutes, )
Acheminer au laboratoire
Respecter dlai et conditions
SI URGENCE :
Utilisation du sac rouge (Urgence Vitale)
Coche URGENT sur le bon de demande
Appel tlphonique si ncessaire
15
3.3
FACTEURS AYANT UN IMPACT SUR LA QUALITE DU PRELEVEMENT
NON RESPECT DU REMPLISSAGE CORRECT DES BONS DE DEMANDES
ERREUR
RISQUE
Absence didentit prleveur et/ou prescripteur

Date et heure de prlvement non mentionnes
Erreur de cochage des bons
Mauvaise prise en charge des chantillons biologiques

Mauvaise interprtation des rsultats
- Analyse non ralise
- Ralisation danalyses non prescrites
- Rsultats fausss
- dfaut dinterprtation des rsultats
Absence de renseignements cliniques
NON RESPECT DES MODALITES LIEES AU PRELEVEMENT

ERREUR
Absence de prlvement
Volume dchantillon insuffisant
Erreur de tube ou support
Quantit de tube insuffisante
Ordre des tubes non respect ou prlvement coagul
hmolyse
Tube dhmostase mal rempli
RISQUE
Analyse non ralise
NON RESPECT DIDENTIFICATION PATIENT (ORDONNANCES, BONS ET/OU ECHANTILLONS

RISQUE
ERREUR
Erreur didentification ou identification illisible ou incomplte
- Analyse(s) non ralise(s) (si dtect)
- Attribution des rsultats un autre patient
- mauvaise interprtation des rsultats
- retard dans le rendu des rsultats
- rsultats non rendus
NON RESPECT DES CONDITIONS DACHEMINEMENT
ERREUR
RISQUE
Dlai et/ou temprature dacheminement non respect
- Analyse(s) non ralise(s)

- rsultats fausss
16
3.4
TUBES ET SUPPORTS DE PRELEVEMENT
Vous trouverez dans le catalogue des examens la correspondance exacte entre le tube ou support et lexamen
Tube sec avec gel sparateur de srum et
activateur de coagulation
Permet lobtention dun chantillon de srum

de qualit suprieure et un volume plus
important.
* Protines spcifiques
* Immunochimie
* Hormonologie-Marqueurs
* Marqueurs tumoraux
* Marqueurs mtaboliques
* Exploration thyrodienne
* Hormones protiques et mtabolisme
* Strodes hormonaux et protines vectrices
* Srologies virales
* Srologies parasitaires
* Panel srologique
* Srologies bactriennes et mycologiques
* Toxicologie
* Pharmacologie
* Facteurs rhumatodes
* Auto-immunit
* Allergie
Tube sec sans gel sparateur
Les tubes secs en PET contiennent un activateur

de coagulation : microparticules de silice.
* Biochimie spcialise, Pharmaco-toxicologie
Citrate de sodium
Permet l'obtention de plasma

citrat ou sang total
(conservation echantillons 4 heures)

Tube avec CTAD (liser rouge)
* Hmostase-coagulation
REMPLIR IMPERATIVEMENT
JUSQUAU TRAIT
(conservation chantillon 2 heures)

Tube SANSCTAD
* Hmostase primaire (exploration

de la fonction plaquettaire)
REMPLIR IMPERATIVEMENT
JUSQUAU TRAIT
Les tubes sont fournis par le
laboratoire, la demande
Hparinate Lithium sans gel sparateur de

plasma
Permet lobtention de plasma

hparin
* Virologie
* Toxicologie
* Biochimie
Pdiatrie
17
Hparinate Lithium avec gel sparateur de

plasma
Citrate de sodium
Permet lobtention dun chantillon de plasma

hparin de qualit suprieure, un volume plus
important.
* Biochimie
* Marqueurs cardiaques
Permet lobtention de sang total

*VS, test de Kleihauer
EDTA
* Hmatologie
* Virologie molculaire,
Gntique molculaire
* Hormonologie, Marqueurs,
Pharmacologie
* Biochimie
EDTA / PPT
- Charges virales VIH, VHB, VHC
- biochimie
- Gnotypage VIH, VHB, VHC,
REMPLIR IMPERATIVEMENT JUSQUAU TRAIT
Fluorure de sodium
Anti glycolytique
* Biochimie :
- Glycmie isole
- Cycles glycmiques
CPT citrate de sodium
Tube adulte 4 Ml
Tube pdiatrique 2 mL
Tube nonatologie 500 L
EDTA + ATROPINE
* Biochimie spcialise
Hparinate de sodium
* Oligolments
* Dosages intra rythrocytaires,
Pour la sparation des cellules mononucles du

sang total
Seringue hparine
Capillaire hparin
Gazomtrie
Examens de biologie dlocalise
Gazomtrie,
18
Sans additif -strile

Sans additif
LCR
* Biochimie des urines

* Biochimie des
liquides de ponction
Liquides et/ou solides au bloc

opratoire
Pot ULTRA TURRAX :

Recueil des chantillons peropratoire chirurgie
orthopdique
Mlange dadditifs action bactriostatique
Mlange dadditifs bactricides et fongicides
Bactriologie Urinaire
Cytologie urinaire
19
* Microbiologie
Milieux de transport viral
ESWAB
VIROCULT liquide
Eswab est un liquide

base de collection
polyvalente et systme
de transport qui
maintient la viabilit des
bactries anarobies,
arobies et fastidieux
pour un maximum de 48
heures temprature
ambiante
VIROCULT standard
PORTAGERM
VIROCULT per-nasal
Ecouvillons secs
Ecouvillons dacron
(fins)
Recherche de
CHLAMYDIAE,
Prlvements salivaires
KIT HPV
20
Autres supports Striles
Autres supports NON Striles

Poudriers
(1er jet durines, selles,
recueil de liquides de
ponction, sperme,
expectorations,)
Flacon de recueil
Urines 2L
Recueil strile des urines
Flacon de recueil LBA
Flacon de recueil
Urines 500 mL
( ADDIS )
Flacon de recueil gastrique
Flacons pour hmocultures
Tube ISOLATOR 10
21
3.5
PEREMPTION ET CONDITIONS DE STOCKAGE
La vrification de la date de premption est sous la responsabilit des utilisateurs
22
3.6
IDENTIFICATION PRIMAIRE DES ECHANTILLONS
L'identification des chantillons doit tre effectue par le prleveur au moment du prlvement.
Dcret n 2002-660 du 30 avril 2002, Art. 20-5 : Les prlvements destins tre transmis un laboratoire de biologie mdicale effectus par les professionnels
de sant, y compris ceux exerant au sein des tablissements et des centres de sant ne disposant pas de laboratoire d'analyses de biologie mdicale, doivent tre
parfaitement identifis. Ils le sont par le nom patronymique, le nom marital ou usuel, le prnom, la date de naissance et le sexe du patient, mentionns par le
professionnel de sant au moment du prlvement. Ce dernier spcifie son nom et prcise la date et l'heure du prlvement.
23
3.7.
CONDITIONNEMENT DES ECHANTILLONS
MISE EN SACHET KANGOUROU (1 patient / sachet), PUIS (pour le site de Ste Musse) EN SACHET PARACHUTE
ROUTINE : sac incolore
URGENCE VITALE : sac rouge
SAC PARACHUTE
Transport + 4C ou 37C
Utilisation dun travel-bag appropri demander au laboratoire avant deffectuer le prlvement
Pour les transports

37 c = rose
Pour les transports

+4c = bleu
24
4. LES PRELEVEMENTS SANGUINS

Choisir le matriel de ponction en fonction de la qualit de la veine et du type de prlvement effectuer.
- Le systme Vacutainer sous vide est un dispositif qui permet une bonne protection des soignants.
Corps de prlvement
Aiguille (taille, couleur)

8/10e 32mm
Aiguille Scurit BD Eclipse
7/10e 32mm
- Le systme hmoculture
Aiguille (taille, couleur)
Corps de prlvement
23G (6/10e)
tubulure courte 178mm
Unit prlvement de sang
scurit BD Safety-Lok
21G (8/10e)
tubulure courte 178 mm
- Les aiguilles picrniennes avec adaptateur Vacutainer ou aiguilles de ponction, sont utilises en pdiatrie et pour les personnes dont le capital veineux est
pauvre.
Epicrnienne
Corps de prlvement
Adaptateur BD Vacutainer
- Les cathters courts avec adaptateur Vacutainer pour perfusion intraveineuse permet galement de prlever du sang veineux (protocole spcifique respecter)
25
Choisir les tubes de prlvement en fonction de la prescription.

Le guide des analyses prcise pour chaque examen le ou les matriel(s) adapt(s) l'chantillon et l'analyse souhaite.
Tous les tubes de type Vacutainer sont sous vide, il ne faut en aucun cas les ouvrir.
Le vide permet l'aspiration d'un volume de sang calcul pour respecter le ratio sang / anticoagulant.
Chaque tube est identifiable par une couleur de bouchon et une tiquette spcifiques.
Comme pour tout matriel strile, la date de premption des tubes doit tre vrifie et les tubes prims doivent tre limins.
Ne jamais prlever dans un membre suprieur:
Avec un dispositif de perfusion en cours
Avec un dispositif de fistule rnale (hmodialyse)
Du ct du sein opr chez une femme mammectomise
Du ct paralys chez un hmiplgique
Si dermatose
Une vigilance particulire sera porte aux personnes sous traitement anticoagulant ou qui souffrent de troubles de la coagulation.
26
4.1
UTILISATION DU GARROT
Le rle du garrot est de dilater les veines en bloquant la circulation veineuse superficielle
Peu serr, maintenu moins d 1 minute, ds que le sang afflue dans le tube, le garrot doit tre desserr. (Recommandations GEHT 2007)
27
4.2
DESINFECTION DU SITE DE PONCTION
28
4.3
EFFECTUER LA PONCTION VEINEUSE EN IMAGE
Cf. fiche CLIN FT 65

RETRAIT DU GARROT
29
4.4
ORDRE DE PRELEVEMENT DES TUBES : 1 2 3 4 5
678
30
4.5
QUALITE DE LECHANTILLON
Pourquoi le rejet dun chantillon coagul ?

Dans un tube sans anticoagulant (jaune, rouge), la prsence dun caillot est ncessaire. Dans un tube avec anticoagulant (lavande, vert, bleu, noir,) la prsence dun caillot
entrane le rejet du spcimen.
Le caillot form renferme des lments cellulaires et leur dcompte est faussement abaiss (ex : plaquettes). La formation du caillot consomme les lments ncessaires aux
examens de coagulation et autres.
Pour viter la formation de caillots dans les tubes contenant un anticoagulant, les tubes doivent tre mlangs immdiatement aprs le prlvement, dlicatement, par
retournements successifs complets effectus de 5 10 fois. Une ponction non franche ou un coulement trop lent peut aussi entraner la formation de micro caillots dans le
tube
NB : Ne jamais enlever un caillot dans aucun tube, mais recommencer le prlvement
Pourquoi le rejet dun chantillon hmolys ?

Quest ce que lhmolyse ?
Lhmolyse se caractrise par le bris dune certaine quantit de globules rouges et par le dversement de son contenu dans le plasma ou srum. Celui-ci prend
alors une teinte rose rouge, dpendamment du degr dhmolyse.
Lhmolyse se voit principalement sur le plasma ou srum, suite la centrifugation du tube. Sur une analyse sur sang total comme la NF, on ne peut pas voir
lhmolyse
31
Pourquoi le refus dun tube hmolys ?

Certains dosages sont sensibles linterfrence de lhmolyse (K, LDH, ASAT, Fer, Magnsium) et peuvent tre rendus.
La prsence dhmolyse peut tre apparue suite un prlvement difficile, lapplication trop prolonge du garrot, une agitation violente du tube,
Pourquoi le rejet dun tube dhmostase mal rempli ?

Les tubes citrats bouchon bleu contiennent un anticoagulant liquide. Afin dviter lhmodilution il est impratif de respecter le niveau de remplissage indiqu
par un trait violet sur ltiquette du tube (sauf pdiatrique)
REF 367599
REF 367562
REF 367714
REF 36047
32
4.6
LES PRELEVEMENTS ARTERIELS
1. But
Prlever du sang artriel afin de raliser ou faire raliser une mesure des gaz dissous.
2. Pralables
Vrification de l'identit du patient et de la prescription
Vrification des contre indications :
Troubles de l'hmostase, traitement anticoagulant, athrome, tatouage ou lsion au point de ponction, allergies, test d'Allen ngatif
Choix du site de ponction (radial, fmoral, humral)
3. Matriel
+ Sachet pour le prlvement
+ Glace pile, si le prlvement n'est pas immdiatement analys
+ Prescription + tiquettes patient
4. Techniques
Le matriel est prpar sur une surface propre. Il est facilement accessible.
Le soignant s'installe confortablement (position assise et membre du patient hauteur de bras si possible).
4.1. Artre radiale Cf. FICHE CLIN FT 70
Ralisation du test d'Allen.
S'il est positif le soin se poursuit. S'il est ngatif, le reproduire sur l'autre bras. Dans le cas d'un double chec utiliser la voie fmorale.
Le poignet est plac en lgre hyper extension en position stabilise
Chausser les gants non striles
Ralisation de l'antisepsie (respecter le temps de contact)
Le pouls radial est palp avec la pulpe d'un ou deux doigts environ 3cm du poignet
La seringue est tenue comme un stylo bille, le piston peut tre tir au repre 3ml
L'aiguille est introduite biseau vers le haut dans l'axe de l'artre selon un angle de 30 45 avec la peau
Progression jusqu' l'obtention d'un reflux de sang rouge vif et saccad
Prlever 1,5 2ml de sang
D'un mme mouvement, retirer la seringue en respectant l'axe de l'aiguille et placer une compresse en appuyant fermement sur le point de ponction
Chasser soigneusement toute bulle d'air rsiduel de la seringue, jeter laiguille et boucher la seringue hermtiquement
La compression du point de ponction est maintenue pendant 5 minutes
33
34
Le saviez-vous ?
Attention la force exerce lors de la recherche du pouls.
Il peut arriver qu'elle soit suffisante pour empcher le reflux de sang dans la seringue. Lappui doit tre le plus lger possible
Pour reprer l'artre avec prcision, il faut qu'elle soit perue avec la plus petite surface possible au niveau de la pulpe des doigts.
En plaant les doigts de faon parfaitement verticale on peut percevoir le pouls la limite entre l'ongle et la pulpe digitale. Cest une faon trs prcise d'identifier
son trajet et d'augmenter les chances de russite
Si l'artre n'est pas ponctionne d'un seul geste, il faut utiliser la technique de l'ventail .
L'aiguille est retire la limite du derme, roriente lgrement droite o gauche (selon le ressenti de l'oprateur) puis avance nouveau. En cas d'chec et
en fonction de la tolrance du patient, rpter l'opration jusqu' l'obtention du reflux
La position peut tre optimise en plaant un appui sur la partie postrieure du poignet. Ainsi le patient peut dtendre compltement son bras et rester
parfaitement immobile
35
4.2. Artre fmorale

La jambe est place en lgre abduction et en rotation externe.
Cette position facilite l'exposition de la zone de la ponction.
Ralisation d'une antisepsie large et soigneuse
Le reprage s'effectue sur la ligne du tiers interne de la ligne du pli inguinal
La seringue toujours tenue la manire d'un stylo, est introduite perpendiculairement au plan de la peau environ 1cm en dessous des doigts jusqu'
obtention du reflux Lorsque la quantit suffisante de sang a t prleve, retirer la seringue d'un geste vif et comprimer immdiatement le point de
ponction pendant 5 minutes Chasser soigneusement toute bulle d'air rsiduel de la seringue enlever laiguille et boucher la seringue hermtiquement
Le reste de la procdure est identique la ponction radiale
Le saviez-vous ?
Chez certains patients en surpoids, il peut tre ncessaire d'adapter une aiguille de longueur suprieure
celle propose avec la seringue.
S'il devait y avoir une ponction accidentelle de la veine fmorale (sang rouge fonc s'coulant en nappe et
non en saccade), se souvenir que la veine est toujours en dedans de l'artre. Par consquent, pour la
tentative suivante, il faut orienter l'aiguille ou choisir le point de ponction de faon plus externe (vers la
hanche du patient).
4.3 Sur un cathter de pression invasive

Un cathter artriel possde l'avantage d'afficher une pression artrielle de faon continue et prcise.
Il est galement d'un grand secours pour effectuer des prlvements itratifs pour bilans sanguins et gazomtriques.
Se munir d'un bouchon strile et d'une seringue de 10ml.
Chausser des gants (risque de contact avec un liquide biologique, mme sans aiguille.
Rincer le cathter avec le dispositif de pression mont.
Adapter la seringue de 10ml sur le robinet le plus proche du point de ponction.
Protger la manuvre par une compresse strile imbibe d'antiseptique
36
Purger une quantit de 5 10ml de sang. Mettre le robinet en position intermdiaire pour viter le reflux de sang au retrait de la seringue de purge.
Adapter la seringue de gazomtrie, prlever la quantit habituelle
Purger le robinet l'aide de la ligne de pression
Remplacer le bouchon strile
Purger la tubulure entre le robinet et le point de ponction
S'assurer de la pertinence de la valeur de pression artrielle par rapport aux chiffres avant prlvement
Le saviez-vous ?
Il est trs souvent possible d'adapter un support de
prlvement pour tubes de laboratoire. On peut de
cette faon utiliser un tube sec pour purger la
tubulure avant de prlever la gazomtrie
4.4 Prlvement en capillaire
Les chantillons capillaires doivent tre mlangs immdiatement aprs le prlvement: Insrer un barreau Placer 2 bouchons de part et dautre du capillaire.
Faire circuler le barreau avec un aimant pendant 5 secondes puis rouler dans les mains pendant 10 secondes.
37
4.7
LES TESTS DYNAMIQUES
HYPERGLYCEMIE SIMPLIFIEE OMS

But du test
Test de charge orale en glucose, en vue de diagnostiquer un diabte gestationnel, par le dosage des glycmies jeun et 1
et 2 heures aprs lingestion.
Cest ce test qui est recommand par le Collge National des Gyncologues et Obsttriciens Franais et par la Socit
Francophone de Diabte pour le diagnostic du diabte gestationnel.
Pralable
- Ce test s'adresse aux femmes enceintes avec une glycmie jeun infrieure 0.92 g/l lors de la premire visite de
consultation obsttricale possdant un des critres suivants: ge> 35 ans, IMC > 25 kg/m2, antcdents de diabte chez les
apparents au 1er degr, antcdents personnels de diabte gestationnel ou d'enfant macrosome.
- Ralisation du test entre la 24 et 28me semaine damnorrhe.
- La femme doit tre jeun depuis 8 14 heures : preuve effectue exclusivement le matin.
- Il est possible de boire de l'eau.
- Repos strict, allonge si possible, s'abstenir de fumer.
Matriel
3 Tubes fluors (bouchon gris)
1 sachet de 75 g de glucose
Bon
N3
Protocole
T 0 : jeun, prlever 1 tube pour glycmie.
Faire absorber en moins de 5 min les 75 g de glucose, dilus dans 250 ml deau.
(Il est possible de laromatiser pour une meilleure tolrance)
T 60 min : prlever 1 tube pour glycmie.
T 120 min : prlever 1 tube pour glycmie
Attention
Le test n'est pas interprtable si la patiente a vomi ou s'est alimente pendant l'preuve.
Interprtations
DBG si au moins 1 valeur pathologique :
T 0 >= 0,92 g/l (5,1 mmol/l)
T 1h >= 1,80 g/l (10 mmol/l)
T 2h >= 1,53 g/l (8,5 mmol/l)
38
Hyperglycmie provoque par voie orale 2H simplifie

But du test
Etude de la tolrance du patient charge orale en glucose, en vue de rechercher un diabte sucr, par le dosage des
glycmies jeun et 2 heures aprs lingestion. Exploration du pancras endocrine
Pralable
Matriel
Sujet a jeun depuis 12 h

Alimentation normale en hydrates de carbone dans les 3 jours qui prcdent
Pendant lpreuve, ne pas fumer, repos strict
Epreuve effectue exclusivement le matin
2 Tubes fluors (bouchon gris)
2 tubes secs (bouchons jaunes)
1 sachet de 75 g de glucose ou 1,75 g de glucose/kg de poids chez l'enfant (75 g maximum).
Bon
Protocole
N3
T 0 : prlever 1 tube pour glycmie +1 tube sec pour insulinmie
Faire absorber en moins de 5 min les 75 g de glucose chez l'adulte, dilus dans 250 ml d'eau (il est possible de laromatiser
pour une meilleure tolrance).
Attention
Interprtations
T 120 min : prlever 1 tube pour glycmie+ 1 tube sec pour insulinmie
Le test n'est pas interprtable si le sujet a vomi ou s'est aliment pendant l'preuve
-Normale : A jeun 1g/l (6,1 mmol/l) ; T120 <1,4g/l (7,8 mmol/l)

-Diabte :
- jeun > 1,26 g/l (7 mmol/l). Attendre confirmation mdicale avant de faire HPO
tous temps : glycmie > 2g/l (11 mmol/l)
39
TEST AU GLUCAGON
But du test
Voir si un DNID ancien doit tre pass ou non linsuline (valuation des rserves insulinmiques)
GLUCAGON : hormone hypoglycmiante et insulino-scrtante
Pralable
Matriel
Sujet jeun depuis 12 h et au repos depuis 30 min.

Glucagen 1 mg
Tubes secs (bouchons jaunes)
BON
Protocole
N 3
T 0 : prlever un tube pour peptide C
injecter en I.V. lente 1 mg de glucagon
T + 2 mn
: prlever un tube pour peptide C au bras controlatral.
T + 5 mn
T + 10 mn
Attention
Interprtations
Normalement, le peptide C doit augmenter de 50 % par rapport sa valeur de base lorsque la rserve insulinique est
bonne, sans toutefois doubler.
40
TEST AU SYNACTHNE FAIBLE

But du test
Exploration dinsuffisance surrnalienne post-corticothrapie
Pralable
Matriel
Ttracosactide (Synacthne, ampoule 0,25 mg dans 1 ml).
Tubes PPT (bouchons nacrs)
BON
N 3
Protocole
Diluer lampoule 0.25mg (250g) de Synacthneimmdiat dans 250 ml de srum physiologique ; en prlever 1ml.
T0 :
- ACTH
- Cortisol
Injecter le 1 ml de cette solution dilue en IVD
T+30, T+60 :
- Cortisol
Attention
Acheminer les tubes au laboratoire au fur et mesure
TEST AU SYNACTHNE 0,25mg (immdiat)
But du test
Stimuler les scrtions cortico-surrnaliennes (glucocorticodes et andrognes).
Diagnostic des insuffisances surrnaliennes ou dun bloc enzymatique
Pralable
Il est important de faire ce test 8 h le matin, car c'est le moment du nycthmre o le taux de cortisol plasmatique est le
plus lev
Matriel
Ttracosactide (Synacthne, ampoule 0,25 mg dans 1 ml).
Tubes PPT (bouchons nacrs)
BON
N 3
Protocole
T 0 : ACTH
Injection IV de 0.25mg (250g) de Synacthneimmdiat
INSUFFISANCE SURRENALIENNE :
T0, T+30, T+60 : Cortisol
BLOC ENZYMATIQUE (pendant les 5 premiers jours du cycle menstruel) :
T0, T+30, T+60 : Cortisol, 17OH Progestrone sur prescription, 21 Dsoxycortisol sur prescription, Compos S (sur
prescription)
Attention
Acheminer les tubes au laboratoire au fur et mesure
41
TEST AU GLUCAGON / BETAXOLOL

But du test
Exploration de la fonction somatotrope dans les retards de croissance par un test coupl de stimulation de la scrtion
srique de lhormone de croissance.
Il associe leffet du glucagon sur les rcepteurs -adrnergiques intervenant dans la scrtion du GH-RH et leffet inhibiteur
du
-bloquant sur la scrtion de la somatostatine, do une rponse plus importante en hGH.
Pralable
Matriel
BON
Protocole
- Sujet jeun de prfrence.

- Sujet labri de tout stimulus 2 heures avant le dbut de lpreuve.
surveillance +++ : risque de bradycardie avec malaise, li au btaxolol et
risque de vomissements, asthnie et hypoglycmie en fin dpreuve lis au glucagon
Contre-indications : asthme, insuffisance cardiaque
Glucagon : GLUCAGEN Utiliser la dose de 1 mg ou 0,5 mg si enfant < 1 an.
Btaxolol : KERLONE (comprims 20 mg). Utiliser la dose de 0,25 mg/kg per os sans dpasser 20 mg en tout. Faire
prparer des glules de 2 mg pour les jeunes enfants.
Ncessaire pour poser une voie veineuse priphrique (fiche CLIN T7.5) avec un srum physiologique de 100ml et un
prolongateur de 10cm pour effectuer les prlvements.
Tubes fluors (bouchons gris)
N 3
T - 30 mn : prlever 1 tube pour HGH, 1 tube pour glycmie, 1 tube pour IGF-1
perfusion de srum physiologique.
prise orale de btaxolol.
T 0 : prlever 1 tube pour HGH, 1 tube pour glycmie. (ou HmoGlucoTest)
injection I.M. de glucagon.
T +30, T +60, T +90, T +120, T +150, T +180 mn :
Prlever 1 tube pour HGH, 1 tube pour glycmie. (ou HmoGlucoTest)
Attention
42
TEST A LA LH RH
But du test
Pralable
Matriel
Bon
Protocole
Apprcier la libration de LH et FSH par lantpophyse

Sujet allong
Effets secondaires : Nant
Tubes secs (bouchon jaune)
Voie veineuse maintenue par du srum physiologique
100g de LHRH
N3
Test LHRH
Base - TO
T30
T60
Sur FSH/LH
FSH/LH
FSH/LH
FSH/LH
sous-units
sous-units
Femme
(noter date dernires
rgles sur le bon)
Oestradiol (E2)
Progestrone
Injection de 100g de
LHRH
Testostrone
Homme
totale
Sur sous-units
Attention
sous-units
Sauf indication particulire, ne pas faire le test chez les femmes prenant des oestroprogestatifs (pilule,
par exemple) et les hommes prenant des andrognes (hormones mles type Pantestone,
Androtardyl,)
Interprtations
43
TEST la TRH
But du test
Pralable
Matriel
BON
Protocole
Stimuler de faon physiologique la scrtion de TSH et de Prolactine, et de faon paradoxale celle de HGH
et de FSH/LH//Sous units
Miction avant le test
Sujet allong
Voie veineuse maintenue par du srum physiologique
Contre-indication : Grossesse (demander date des dernires rgles)
TRH (Stimu-TSH, ampoules de 250 g).
N 3
Prlvement de base T0
Injection IV de 250g (=1 ampoule) de TRH
Selon lindication :
Test TRH
Base (T0)
T+30
T+60
Sur TSH
TSH, LT3, LT4
TSH
TSH
Sur Prolactine
PRL
PRL
PRL
Sur HGH
HGH, IGF1
HGH
HGH
Sur FSH/LH
FSH/LH
FSH/LH
FSH/LH
Homme : Testostrone Totale
Femme : Oestradiol
Attention
Sous units
Sous units
Sous units
Sur Sous units
Le test peut-tre pratiqu sur toutes ces hormones la fois
Dans certains cas dhypothyrodie dorigine supra-hypophysaire, la TSH doit tre mesure au temps
T+120
Effets secondaires : Sensation de striction, vertiges, douleurs abdominales fugaces, envie duriner
Interprtations
44
5. LES PRELEVEMENTS DURINE EN IMAGE

5.1
CHEZ UN PATIENT NON SOND
RECUEIL
Cf. FICHE CLIN FT 54

Uriner le 1er jet dans les
toilettes, arrter la miction
et uriner dans le flacon
TRANSFERT DE LURINE DANS LE(S) TUBE(S)
45
5.2
CHEZ UN PATIENT SOND
46
5.3
A PARTIR DUNE POCHE AUTO-COLLANTE
Mise en place de la poche autocollante:

- Conditions d'asepsie rigoureuses: Procder une toilette soigneuse de la rgion vulvaire, du mat et du prine ou du gland et du prpuce (savon doux,
lingettes).
- Poser le sac collecteur.
- Ne pas laisser en place plus de 30 minutes.
- Dtacher doucement la poche en soulevant un coin, puis en tirant doucement
Recueil :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Maintenir la poche contenant les urines verticalement et y plonger la canule de transfert.

Avec une main, maintenir la canule en place.
De l'autre main, introduire fond le tube dans le corps de la canule.
Attendre le remplissage complet du tube.
Homogniser l'chantillon par 8 10 retournements du tube.
Identifier le tube et le transmettre au laboratoire dans les meilleurs dlais (voir le catalogue des examens).
47
5.4
LES RECUEILS D'URINES DE 24 HEURES
Matriel :
1 ou 2 flacons de 2L rservs au recueil urinaire
1 tube Vacutainer beige sans additif
1 canule de transfert.
Technique :
Le recueil est effectu par le patient lui-mme sil est valide.
Pour les patients sonds, recueillir, dans le respect des rgles dhygine et de scurit de ltablissement, les urines partir de la poche et les transvaser dans
le(s) flacon(s) de 2L.
Au lever (par ex : 8 heures) :
Vider la totalit de la vessie dans les toilettes. Noter sur le flacon la date et lheure de dbut du recueil.
Pendant 24 Heures :
Recueillir la totalit des urines de la journe et de la nuit y compris celles du lendemain au lever la mme heure (8 heures) dans le flacon fourni par le
laboratoire.
Noter sur le flacon la date, lheure de fin du recueil.
Identifier le(s) flacon(s) avec le nom, prnom et date de naissance (ou tiquette patient).
Vrifier sur le guide des prlvements le volume ncessaire pour lexamen souhait.
Si la quantit ncessaire est < 20 mL : dans ce cas homogniser la totalit les urines de 24 H et remplir un ou plusieurs tubes bouchon beige laide dune
canule de transfert.
Homognisation du tube par 8 10 retournements successifs. Identifier immdiatement le tube et noter la diurse, la date et lheure du dbut et de fin du
recueil.
Si la quantit ncessaire est > 20 mL, envoyer une quantit suffisante des urines de 24H dans un pot "Addis"(500mL)
48
5.5
TRANSFERT A PARTIR DU CONTAINER DE 24H
1. Mesurer le volume total d'urines recueillies sur 24h (noter diurse).
2. Plonger la canule dans le flacon contenant les urines de 24h.
Insrer le tube urines sans additif
(tube de chimie) et le percuter
3. Attendre le remplissage complet du tube et le retirer.

4. Identifier le tube et indiquer le volume total des urines recueillies sur 24h sur le bon de demande d'analyses.
5. Transmettre le tube au laboratoire, temprature ambiante, dans les meilleurs dlais (voir le catalogue des examens).
1. Insrer les tubes et les percuter selon l'ordre recommand (

puis
)
2. Maintenir le tube en position jusqu' ce que le remplissage soit complet, veiller remplir le tube jusqu'au repre de remplissage minimum indiqu sur
l'tiquette.
3. Homogniser les tubes par 8 10 retournements.
Identifier les chantillons et les transmettre au laboratoire, temprature ambiante, dans les meilleurs dlais (voir le catalogue des examens).
49
6. EXAMEN PHYSIQUE ET CHIMIQUE DES SELLES
Les modalits de prlvement et de conservation

- Pour les analyses ncessitant un recueil sur 24h (Clairance alpha1 antitrypsine, Fcalogramme, recherche de laxatifs, Statorrhes, Cratorrhes, ionogramme),
le recueil de la totalit des selles s'effectue dans un rcipient sec diffrent pour chacune des journes (si recueil sur 3 jours) et sans contact urinaire.
- Pour les analyses ncessitant un simple chantillon (Calprotectine, Elastase, Porphyrines, sang dans les selles, un flacon non strile, propre et sec.
- Mettre l'abri de la lumire pour le dosage des porphyrines.
- Chaque type d'examen de selles peut tre consult sur le catalogue des examens.
50
LES PRELEVEMENTS MICROBIOLOGIQUES
RECOMMANDATIONS GENERALES
1 prlvement = 1 bon
Prlever avant le dbut de l'antibiothrapie si possible, sinon prvenir le laboratoire de l'antibiothrapie en cours.
Fournir les renseignements cliniques.
Prciser au mieux la demande d'examen: demande explicite pour la recherche d'agents infectieux particuliers, nature et localisation prcise de
l'chantillon.
Ralisation du prlvement:
o
Se laver les mains.
Mettre des gants usage unique (non striles ou strile en fonction du prlvement).
Porter un masque usage unique si risque d'inhalation d'agents pathognes.
51
1. COMMENT UTILISER LES ECOUVILLONS ESWAB
52
2. LES HEMOCULTURES
1. Dsinfecter la zone de
prlvement
5. Placer sur le flacon arobie en

le pressant sur le bord du flacon.
Procder de la mme faon avec
le flacon anarobie.
Prlever au maximum 10 mL de
sang par flacon
EN IMAGE
2. Retirer la capsule de scurit

puis dsinfecter avec la solution
recommande par le CLIN et
laisser scher entre 30 secondes
et 1 minute
la zone de prlvement
3. Relier ladaptateur
BACTALERT au dispositif
utilis en prenant soin de
le visser fond
4. Pratiquer la ponction laide de

laiguille type picrnienne protge
6. Si des tubes doivent tres

prlevs, placer le rducteur
BACTALERT dans ladaptateur.
Dsinfecter nouveau les
bouchons un fois la ponction
termine
7. Identifier le prlvement
En laissant libre ltiquette
dtachable
53
HEMOCULTURE ENFANT
Cf. CLIN PEDI 4.1/5.1
-Nouveau n et nourrisson : ponction veineuse par une veine picrnienne ou jugulaire ou ombilicale.
-Prlever un seul flacon par patient : flacon pdiatrique arobie (Bact/Alert PF, couleur JAUNE).
Un volume sanguin de 4 ml est recommand, soit une graduation. Le volume minimal prlever est de 1 ml.
-Remarque: le prlvement dhmocultures chez lenfant est difficile maitriser. Une approche rationnelle consiste adapter le volume de sang mis en culture en
fonction du poids de lenfant
(cf. tableau ci-aprs, donnes REMIC 2010 ; les volumes indiqus garantissent une trs bonne sensibilit et un risque danmie nosocomiale maitris).
Poids de lenfant (kg)
1
1,1 - 2
2,1 12,7
12,8 36,3
> 36,3
Volume de sang (ml) par flacon

0,5 - 2
1,5 4,5
3-6
5
10
Nombre de flacons prlevs

1 flacon arobie
1 flacon arobie
1 flacon arobie
2 flacons (arobie + anarobie)
2 flacons (arobie + anarobie)
HEMOCULTURE MYCOBACTERIES
Prlever 10 ml de sang au lit du malade sur tube Isolator et retourner le tube plusieurs reprises pour initier la lyse des cellules.
54
3. RECUEIL DES URINES

3.1. ECBU
Nature du prlvement et/ou de la demande
ECBU
ECBU sur patient sond
ECBU chez le nourrisson
( partir d'une poche autocollante)
ECBU sur patient appareill
Matriel
Mode de prlvement
Voir chapitre 5.1
Voir chapitre 5.2
Voir chapitre 5.3
Bactriologie
Points importants:
Prciser origine de chantillon d'urine: Urine
pylique droite ou gauche, nphrostomie,
urtrostomie, etc.
Ponction vsicale sus-pubienne

cytologie
55
3.2
URINES 1ER JET

Urine premier jet pour recherche de:
Gonocoque (Neisseria gonorrhoeae),
Chlamydia Trachomatis
et/ou mycoplasmes gnitaux
Matriel
Mode de prlvement
Utiliser le kit Chlamydia
De prfrence, recueillir les premires urines du matin

(ou s'abstenir d'uriner 2-3 heures avant le prlvement).
Recueil du premier jet (5-10 ml)
56
3.3
URINES RECHERCHE DE MYCOBACTERIES

Recherche de mycobactries urinaires
Matriel
Mode de prlvement
Recherche effectue uniquement si premier ECBU
ngatif avec leucocyturie > ou gale 20 000/ml.
La recherche s'effectue sur la totalit

des urines du matin aprs restriction
hydrique et pendant 3 jours
conscutifs.
3.4
URINES RECHERCHE DE SCHISTOSOMES

Recherche de Schistosomes urinaires
Matriel
Mode de prlvement
Recherche des ufs de schistosomes (bilharzies)
dans les urines de 24h ou de prfrence la 1re
miction matinale aprs un effort physique.
57
4. RECUEIL DES SELLES

4.1. BACTERIOLOGIE, MYCOLOGIE ET VIROLOGIE
Coproculture
Matriel
Mode de prlvement
La prescription d'une seule coproculture est en
gnral suffisante.
Analyse bactriologique
Recherche de toxine de Clostridium difficile
Recherche de virus (Rotavirus, Adnovirus)
Fournir au patient un rcipient propre o les selles

frachement mises ne seront pas souilles
d'urines, d'eau, o d'autres lments contaminants
(sang des rgles, papier hyginique, etc.)
Aprs avoir enfil des gants non striles usage
unique, prlever une aliquote de la selle, du volume
d'une noisette une noix, l'aide d'un flaconcuillre ou d'une spatule puis transfrer dans un
pot bouchon rouge (conteneur hermtique
propre usage unique). La partie muco-purulente
ou sanglante doit tre privilgie, en cas de
prsence. Fermer hermtiquement le pot.
Ecouvillonnage rectal pour examen bactriologique
Possibilit de pratiquer un couvillonnage rectal

notamment chez le nourrisson et le petit enfant et
en particulier dans le cadre d'un SHU post-diarrhe.
58
4.2. PARASITOLOGIE
Parasitologie des selles
Matriel
Mode de prlvement
Recueil des selles chez un patient qui n'aura pas
subi une coloscopie ou un examen radiologique
rcent du tube digestif avec usage d'un produit de
contraste (transit oeso-gastro-duodnal, lavement
baryt) et qui se sera abstenu au moins pendant
deux jours de la prise de poudres insolubles (gel
d'alumine, charbon, argiles, etc.), de mucilages, de
lubrifiants (huile de paraffine), de laxatifs
contenant des mtaux lourds ou de suppositoires
- Fournir au patient un rcipient propre o les selles
fraichement mises ne seront pas souilles
d'urines, d'eau, o d'autres lments contaminants
(sang des rgles, papier hyginique, etc.)
Parasitologie des selles avec recherche d'amibes

Scotch test anal ou test la cellophane adhsive
pour recherche d'ufs d'helminthes
Scotch transparent, lame porte objet et boite de

transport pour lame porte objet
- Aprs avoir enfil des gants non striles usage

unique, prlever l'aide d'une spatule l'quivalent
de 4 noix de selles et le placer dans un pot
bouchon rouge
Les selles doivent tre achemines dans l'heure qui
suit l'mission
Appliquer un morceau de scotch au niveau de la
marge anale le matin, avant dfcation et avant
toute toilette intime.
Appliquer le scotch sur une lame porte objet
Identifier la boite et la lame avec nom et prnom.
59
5.
LES SECRETIONS BRONCHO-PULMONAIRES
5.1. EXPECTORATION HORS RECHERCHE DE MYCOBACTERIES

Expectoration pour examen mycologique ou
examen cytobactriologique de crachat (ECBC)
Matriel
Mode de prlvement
Effectuer de prfrence le matin au rveil
(scrtions accumules dans les bronches au cours
de la nuit) et jeun.
Le recueil peut ncessiter l'aide d'un
kinsithrapeute ( clapping ). Aprs brossage des
dents et rinage de bouche l'eau strile, au
liquide physiologique ou au moyen d'une solution
antiseptique (afin de limiter la contamination oropharynge)
Expliquer au patient l'importance de faire un effort
de toux aprs avoir pris plusieurs respirations
profondes.
Faire cracher le patient et recueillir l'chantillon en
fin de toux dans le flacon strile.
60
5.2. ASPIRATION ENDO-BRONCHIQUE

Aspiration endobronchique pour examen
bactriologique ou mycologique au lit du patient
par sonde daspiration
Matriel
Mode de prlvement
Mthode alternative lorsque les mthodes
invasives sont contre-indiques.
OU
Aspiration des scrtions broncho-pulmonaires par

la sonde d'intubation ou de trachotomie pour les
patients de ranimation, de soins intensifs, ou
patients alits en chambre lors des manuvres
daspiration
61
5.3. PRELEVEMENTS PROTEGES

Prlvements cathters Brun Buisson Bronchique
(CBB ou combicath) ou mini LBA pour examen
bactriologique ou mycologique
Matriel
Mode de prlvement
Prlvement ralis par un mdecin habilit de
ranimation chez les patients intubs.
OU
OU
Mini lavage (mini LBA) par instillation d'un volume

infrieur 20 ou 25 ml, souvent l'aveugle,
permettant de recueillir 2 3 ml ou extrmit du
cathter bronchique mis dans un tube avec 1ml de
srum physiologique strile
Prlvement ralis sous fibroscopie par mdecin

habilit.
Prlvement distal protg (brosse) pour examen

Produit de brossage bronchique (brosse

tlescopique protge de Wimberley ou cathter)
recueilli dans un tube strile contenant 1 ml de
srum physiologique strile. Bien boucher le tube
et agiter au lit du malade.
Liquide de lavage bronchiolo-alvolaire (LBA) pour

examen bactriologique, virologique ou
mycologique

habilit.
Lavage d'un territoire pulmonaire par du srum
physiologique strile par fractions de 50 ml, jusqu'
300 ml, permettant de recueillir entre 20 et 60 %
de la quantit injecte.
OU
62
5.4. RECHERCHE DE MYCOBACTERIES, NOCARDIA ET ACTINOMYCES

Matriel
expectoration pour recherche de mycobactries
Mode de prlvement
Spontan ou aprs clapping
Rpter le prlvement 3 jours de suite le matin, au
rveil et jeun
Aspiration bronchique ou Liquide de lavage

bronchiolo-alvolaire (LBA) sous fibroscopie pour
recherche de mycobactries, Nocardia,
Actinomyces
OU

habilit.
Remarque: la fibroscopie est responsable d'une
irritation se manifestant dans les heures suivantes
par l'mission de crachats qui peuvent tre
recueillis pour analyse.
Lavage d'un territoire pulmonaire par du srum
physiologique strile par fractions de 50 ml, jusqu'
300 ml, permettant de recueillir entre 20 et 60 %
de la quantit injecte.
Rcuprer 2 3 ml minimums.
63
6. PRELEVEMENTS CUTANEO-MUQUEUX
6.1.
BACTERIOLOGIE / VIROLOGIE: PRELEVEMENTS CUTANES
Quelque soit la demande, Les renseignements cliniques sont indispensables

Matriel
Mode de prlvement
Ouvrir le sillon avec un vaccinostyle ou une curette en grattant
les squames et les petites vsicules
(On peut mettre un peu de vaseline liquide sur les lsions
avant de gratter)
Prsence de liquide dans la vsicule :
Le dposer sur 2 lames
Mettre les lames dans un porte-lame.
Absence de liquide dans la vsicule :
Mettre les squames dans un pot strile bouchon rouge
Recherche de gale
Prlvement cutan pour examen

virologique
Prlvement ano-rectal pour recherche de
portage de bactries entriques multi
rsistantes ABRI (Acinetobacter Baumanii
Rsistant lImipenme)
UTILISER LE KIT HERPES
Prlever la priphrie des lsions rosives. Si prsence de

vsicules, presser avec l'couvillon pour recueillir les srosits.
Insrer l'couvillon au niveau de l'anus.
64
Prlvement de lsion cutane superficielle

(furoncle, imptigo, folliculite, etc.) pour
examen bactriologique
Prlvement de pied diabtique pour

examen bactriologique
( mal perforant)
Prlever avec un couvillon (+/- imbib avec une goutte de

srum physiologique strile si la lsion est sche) en frottant
au niveau de la lsion.
OU
Prlvement de plaie, ulcre, suppuration

cutane pour examen bactriologique
OU
Pas dInfection Pas de Prlvement

-Ecoulement : pas de rinage, ni dsinfection cutane
1. aspiration la seringue avec un cathlon
2. cathlon dans un pot strile
-ulcre sans coulement
1. rinage srum physiologique
2. exrse complte (bistouri, curette,..) des tissus non sains
(kratose, ncrose etc...)
3. rinage large avec une compresse strile imbibe de srum
physiologique
4. prlvement : si possible par biopsie pot strile
si impossible et quantit suffisante, la curette
pot strile
si insuffisante, par couvillon ESWAB

- Ne prlever qu'en prsence de signes locaux d'inflammation
+++
- Eviter si possible de prlever l'couvillon. Contreindication formelle pour la recherche de mycobactries.
- Antisepsie sur la zone cutane proximale de la lsion. Rincer
au srum physiologique strile.
- Plaie du site opratoire (cicatrice): prlever l'coulement de
la cicatrice de prfrence par aspiration la seringue, puis
transfrer dans flacon strile ou, si coulement spontan,
prlever avec un couvillon pralablement imbib de srum
physiologique
- Morsure: Aspirer le liquide prsent dans la blessure avec une
seringue, puis transfrer dans flacon strile. A dfaut,
pratiquer un couvillonnage profond.
- Ulcre, lsions ncrotiques: Biopsie ou ponction l'aiguille
monte sur seringue, puis transfert dans flacon strile.
65
6.2.
PRELEVEMENTS ORL: BOUCHE / GORGE
Nature du prlvement et/ou de la

demande
Matriel
Mode de prlvement
Prlever au niveau de la face interne des lvres et des joues, du frein

de la langue, du palais, des faces externes et internes des gencives
(au niveau des collets) et de la langue.
Prlvement buccal pour examen

mycologique
En cas d'hypertrophie de la muqueuse linguale, un grattage pralable

au moyen d'un abaisse-langue permet une abrasion des dpts
saburraux et des villosits, donc une meilleure pntration de
l'couvillon pass ensuite dans les cryptes.
Pas d'examen bactriologique
Prlever la priphrie des lsions rosives.

Prlvement buccal pour examen
virologique
Si prsence de vsicules, presser avec l'couvillon pour recueillir les

srosits.
Prlvement de gorge pour examen

bactriologique
Prlvement salivaire pour recherche de

virus de la rougeole
UTILISER LE KIT ROUGEOLE
Eviter de toucher la langue ou la luette.

Effectuer un couvillonnage de la muqueuse buccale (entre la joue et
la gencive) laide de lembout en ponge jusqu son imprgnation
en salive
66
6.3. PRELEVEMENTS ORL: NEZ / SINUS

Matriel
demande
Mode de prlvement
UTILISER LE KIT GRIPPE
Prlvement naso-pharyng pour

recherche virale par PCR (grippe,)
UTILISER LE KIT COQUELUCHE

Prlever 2 couvillons, les dcharger dans le milieu de transport
Prlvement de pus de sinus
Ou
si fait au bloc
opratoire
67
Prlvement nasal Pour recherche

de portage de Staphylocoque Aureus
Lavage naso-pharyng pour

recherche de virus respiratoire
(VRS,)
Frotter l'couvillon au niveau de la partie antrieure des deux

fosses nasales.
Injecter quelques ml de srum physiologique par une narine, puis
immdiatement recueillir les scrtions pharynges dans le flacon
strile en demandant au patient de se moucher en tenant le flacon
sous son nez.
Utilisation possible d'un flacon pige pour aspiration des scrtions
nasopharynges avec une seringue (chez le petit enfant)
68
6.4.
PRELEVEMENTS ORL: OREILLE

demande
Matriel
Mode de prlvement
Introduire l'couvillon dans le conduit auditif externe et le faire tourner
plusieurs fois.
Prlever au niveau des lsions si visibles.
Prlvement auriculaire pour examen

OU
Prlvement de pus de paracentse
Ou
si fait au bloc
opratoire
69
6.5. PRELEVEMENTS OCULAIRES

Nature du prlvement et/ou
de la demande
Matriel
Mode de prlvement
Prlever les scrtions ou le pus par frottis conjonctival et dans angle interne
dil sans toucher la peau
Prlvement conjonctival pour

examen bactriologique ou
mycologique

recherche de Chlamydiae
Grattage conjonctival des paupires suprieure et infrieure aprs

retournement.
Remarque: il est important de rcuprer des cellules.
Ouvrir le tube contenant le milieu de transport liquide, y plonger l'couvillon
puis le casser en appuyant la tige sur le bord du tube (couvillon scable) Bien
reboucher le tube avec le fragment de l'couvillon l'intrieur.

examen virologique
Prlever les scrtions lacrymales dans l'angle interne de l'il.
UTILISER LE KIT CHLAMYDIA
70
Recherche d'acanthamibes :
- Prlvement de corne
Grattage cornen profond : lame de scalpel dans un tube strile
- Liquide de lentilles
Lentilles de contact envoyes dans un pot strile,
- Lentilles
Botiers et solutions d'entretien utiliss pour les lentilles de contact.
Prlvement de corne
Ponction de chambre
antrieure ou vitr, humeur
aqueuse
OU
71
7.
LES PRELEVEMENTS POUR MYCOLOGIE / PARASITOLOGIE
7.1. MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DE PEAU
Nature du prlvement et/ou de
Matriel
la demande
Matriel chirurgical particulier strile et en

bon tat: curette de Brocq fentre, scalpel
mousse ou vaccinostyle, ciseaux fins, pince
piler, etc.
Prlvement de peau pour

examen mycologique
Les renseignements cliniques sont
indispensables
ET/OU
Mode de prlvement
En cas de lsions multiples, les chantillons biologiques d'origines
diffrentes doivent tre nettement individualiss.
- Prlever au minimum une vingtaine de squames (ou plus si possible), audessus du flacon, avec un scalpel mousse ou une curette, sur toute la
surface d'une lsion dyschromique (notamment au niveau des
ventuelles zones fluorescentes sous lampe de Wood), en priphrie d'un
intertrigo humide, sur le relief rythmato-vsiculo-squameux en
priphrie d'une lsion circine (le centre est en voie de gurison), sur les
faces latrales macres des orteils, etc.
- Prlever au moins une quinzaine de poils casss courts, prlevs la
pince piler, au besoin en pinant les squames qui les engluent.
- Pour ces types de prlvements, l'utilisation du seul couvillon
(pralablement humect de quelques gouttes de srum physiologique
strile) doit rester exceptionnelle (otite externe, blpharite, lsions
pustuleuses ou trs suintantes,...) et toujours venir en complment du
recueil de squames (fond du pli des intertrigos humides et suintants) et
de poils (gouttelette de pus qui sourd par l'ostium aprs prlvement).
L'couvillon ne doit en aucun cas tre utilis seul pour les lsions sches.
72
7.2. MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DONGLE

Matriel
la demande
Mode de prlvement
Le prleveur ne doit en aucune manire compter son temps ,
brusquer le patient, ni rendre le prlvement inutilement douloureux.
Matriel chirurgical particulier strile et en

bon tat: curette de Brocq fentre, scalpel
mousse ou vaccinostyle, ciseaux fins, pince
piler, etc.
Prlvement dongle pour examen

mycologique
ET/OU
En cas de lsions cutanes associes (frquemment, un intertrigo

inter-digitoplantaire), les chantillons biologiques doivent tre
nettement individualiss, en terminant par le prlvement ungual.
Prlever un maximum de fragments d'ongle et de matire sousunguale, recueillis dans un flacon l'aide d'une curette et/ou d'un
scalpel au niveau d'une lsion proximale de candidose, jusqu' la limite
de dcollement de la tablette en cas de dermatophytose sous-unguale
latro-distale, par grattage des zones superficielles de leuconychie ou
sous le repli proximal en cas de paronychie
Il convient d'insister sur le fait que, pour ces types de prlvements,
l'couvillon ne doit en aucun cas tre utilis seul mais doit toujours
venir, pralablement humect de liquide physiologique, en complment
du recueil de fragments d'ongle et de matire sous-unguale (pus d'un
pri-onyxis, )
73
7.3. MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DE CHEVEUX

Matriel
demande
Matriel chirurgical particulier strile et en bon
tat: curette de Brocq fentre, scalpel mousse ou
vaccinostyle, ciseaux fins, pince piler, etc.
Prlvement de cheveux, cuir chevelu

pour examen mycologique
Mode de prlvement
- Prlever avec un scalpel mousse un maximum de
squames au-dessus d'un flacon sur toute la surface des
zones squameuses lors d'une suspicion de pityriasis capitis,
au moins une quinzaine de cheveux courts prlevs la
pince piler sur les plaques d'alopcie ou les placards
inflammatoires, au besoin en pinant les squames qui les
engluent (teigne trichophytique), le contenu des godets,
exprim la curette, en cas d'ventuel favus.
ET/OU
- Pour ces types de prlvements, l'utilisation de
l'couvillon (pralablement humect de quelques gouttes
de liquide physiologique strile) ne se justifie que pour
humidifier et dcoller pralablement les crotes recouvrant
les plaques d'une teigne trichophytique et pour recueillir,
aprs prlvement la pince piler, les squames restes
colles sur le cuir chevelu ou la gouttelette de pus qui sourd
par l'ostium des cheveux prlevs ; l'couvillon ne doit en
aucun cas tre utilis seul.
74
7.4. PARASITOLOGIE : SCOTCH TEST

Matriel
Mode de prlvement
Scotch
Scotch test cutan pour le diagnostic de pityriasis

versicolor
Appliquer un morceau de scotch au niveau de la

lsion cutane.
Appliquer le scotch sur une lame porte objet
Identifier la lame et la boite avec nom et prnom.
75
8.
PRELEVEMENTS GENITAUX
8.1. PRELEVEMENT GENITAL EXTERNE
demande
Prlvement gnital externe (vulve, grandes
lvres, petites lvres chez la femme; gland,
sillon balano-prputial chez l'homme)
Matriel
Mode de prlvement
Lsion rosive : Prlever avec un couvillon (+/- imbib avec
une goutte de srum physiologique strile si la lsion est sche)
en frottant au niveau de la lsion.
pour examen mycologique

+/- bactriologique (Staphylococcus aureus,
Streptococcus pyognes, Pseudomonas
Aeruginosa)
(hors chancre)
Scalpel mousse ou vaccinostyle
Lame de verre/lamelle
Prlvement au niveau d'un chancre
(suspicion de Syphilis ou chancre mou)
Gratter avec un vaccinostyle aprs avoir limin les tissus

ncross.
Prlever la priphrie du chancre les srosits qui
apparaissent aprs grattage pour examen au microscope aprs
coloration de Vago, pour le diagnostic de la Syphilis ou mise en
culture pour le diagnostic de H.ducreyi
Prlvement gnital externe pour examen

virologique
GLANDE DE BARTOLIN
Prlever la priphrie des lsions rosives. Si prsence de

vsicules, presser avec l'couvillon pour recueillir les srosits.
Dsinfecter la rgion pri-orificielle, puis recueillir le pus avec

l'couvillon aprs une pression douce sur la glande
Ou
si fait au bloc
opratoire
76
8.2. PRELEVEMENT VAGINAL

Nature du prlvement et/ou
de la demande
Prlvement vaginal
Etiqueter TOUS
les prlvements
Matriel
Mode de prlvement
UTILISER LE KIT PV
Le prlvement vaginal standard comprend
* 2 couvillons au niveau des parois
vaginales. Les prlvements se font sur les
lsions observes. Il faut charger les
couvillons dun maximum de scrtions.
Absence de toilette ou de rapport sexuel dans les 24h prcdentes.

Eviter la priode des rgles.
Prlvement endocervical pour
examen bactriologique +
recherche de Chlamydia
Trachomatis +/- mycoplasmes
gnitaux
Remarques : la recherche de
C.Trachomatis par PCR peut
seffectuer sur urine de premier
jet le matin de prfrence
ter les glaires de lexocol + rincer leau physiologique Ecouvillonner

lendocol par un mouvement rotatif lger mais prolong afin de ramener
des cellules en mme temps que la glaire cervicale.
UTLISER LE KIT PV + MYCOPLASME
+/KIT CHLAMYDIA
77
8.3. PRELEVEMENT URETHRAL

demande
Matriel
Mode de prlvement
Le prlvement urtral seffectue idalement le matin avant toute
toilette (un dlai de 4 heures doit sparer le prlvement de la
dernire miction).
Prlvement urtral pour recherche de

Gonocoque (Neisseria gonorrheae)
Ecouvillon dacron (fin)
Si une goutte de pus s'coule au niveau du mat, la recueillir sur un

couvillon.
Sinon, prlever au niveau du canal urtral en introduisant
l'couvillon sur environ 1 cm, puis tourner dlicatement.
Recherche de Chlamydia Trachomatis

Ce prlvement peut-tre associ (ou
remplac) un prlvement de premier
jet urinaire.
UTILISER LE KIT CHLAMYDIA
Faire un couvillon pour la recherche des bactries, un 2me

couvillon (spcifique en dacron) pour la recherche de Chlamydia
Trachomatis.
Ouvrir le tube contenant le milieu de transport liquide pour
Chlamydiae, y plonger l'couvillon puis le casser en appuyant la tige
sur le bord du tube (couvillon scable) Bien reboucher le tube avec
le fragment de l'couvillon l'intrieur.
78
8.4. PRELEVEMENT DE SPERME

la demande
Spermoculture
Spermogramme
Matriel
Mode de prlvement
Prlvement ralis par le patient aprs 2 ou 3 jours d'abstinence.
Boire abondamment (1,5 L) la veille.
Recueil du sperme :
- Uriner avant le recueil.
- Se laver les mains, puis dsinfecter soigneusement le gland, le
mat, le sillon balano-prputial et le prpuce au savon antiseptique ;
puis rincer avec du srum physiologique strile.
- Effectuer le recueil par masturbation dans le flacon strile fourni :
recueil de la totalit de l'jaculat.
- Attention ! Le recueil doit tre le plus aseptique possible : Eviter de
toucher l'intrieur du flacon, le cot interrompu est proscrire.
- Bien refermer le flacon aprs le recueil.
- Le prlvement doit tre transmis au laboratoire < 1H, 37C
79
9.
Nature du
prlvement
et/ou de la
demande
PRELEVEMENTS MAMAN-BEBE
Matriel
Mode de prlvement
Prlvements
priphriques
du nouveau n
La recherche au
niveau des
conjonctives du N.
gonorrheae doit
tre coche
conjonctive et
demande en
systmatique pour
les nouveaux ns
Localisation des 2 prlvements priphriques

(GRADE B, cf. : REMIC octobre 2010, HAS 2002) :
1. Oreille au moins
2. Autre choix : narine, ombilic, conduite auditif, bouche, yeux, anus
Liquide gastrique
Avant la premire toilette ou avant la douzime heure de dlivrance :

Aspiration gastrique de quelques millilitres
80
Carottage laide dun scalpel strile de prfrence une zone daspect

macroscopique anormale.
Placenta
OU
Donner la mre le kit usage unique pour tirer son lait.
Lavage simple des mains (mre)
Lait maternel
Cf. CLIN
NEONAT 1.2
Le personnel soignant rcupre le lait maternel :

Aprs lavage simple des mains
Ouvrir le biberon
Rcuprer la seringue usage unique entre 2 et 3 ml de lait maternel
et le transvaser dans 2 tubes
ETIQUETTE DE LA MERE
Rglementation en vigueur :
- Arrt du 10 fvrier 1995 relatif aux conditions techniques de fonctionnement des lactariums*.
- Circulaire du 16 dcembre 1997 relative au don de lait personnalis dune mre son enfant
hospitalis.
- Mmes normes bactriologiques pour le lait maternel relevant dun don anonyme et du don
personnalis (dlai >12h).
81
10. LES PRELEVEMENTS DE LIQUIDES

Nature du prlvement
Matriel
et/ou de la demande
Mode de prlvement
UTILISER LE KIT LCR

Liquide Cphalo-rachidien
Ponction lombaire
Cf. CLIN FT 30
Il est recommand de prlever en 1er le tube destin la cytobactriologie, en 2me le tube pour la biochimie et enfin en 3me, le
tube pour la biologie molculaire
En priode dalerte, utiliser le KIT LCR PERIODE DALERTE
TOSCANA, WEST NILE
Liquide pricardique
82
Liquide pleural
+
Liquide DPCA
(Dialyse pritonale)
83
Liquide articulaire
Exemple du genou : Demander au patient de mettre son

genou en extension quasi-complte. Tendre la peau vers
le haut afin que les orifices cutans et profonds ne
soient pas en regard l'un de l'autre aprs extraction de
l'aiguille.
Piquer 1 cm au-dessus et en dehors de l'angle suproexterne de la rotule (voie latro-rotulienne
externe).Recueillir environ 15 cm3 de liquide
Liquide dascite
Cf. CLIN SG 1.2
84
11. PUS, PUS PROFOND, MATERIEL INORGANIQUE

Mode de prlvement
Matriel
Pus gnital
Liquide pelvien
Pus profond
Produit daspiration
Abcs
Biopsie
strilet
Pacemaker
obligatoire au bloc
OU
cathter
Liquide de redon (drainage) au lit du patient

(spcifique chirurgie orthopdique, uniquement
en post-opratoire)
Le prlvement dpend de la quantit disponible
85
matriel inorganique
Prlvements opratoires orthopdiques

(os, muscle, prothse, redon, )
Au moins 5 prlvements per opratoire
OU
UTRA TURRAX :
dpt d'un chantillon : 1 cm maximum,

dans un tube strile ouvert en condition
strile, ajout d'un srum physiologique, TS
ou bouillon puis fermeture du tube sous
condition strile
matriel organique
86
12. PRELEVEMENT DE MOELLE OSSEUSE

Nature du prlvement
et/ou de la demande
Mode de prlvement
Matriel
Le prlvement de moelle osseuse tant anxiogne, il est essentiel

dexpliquer la nature du geste au patient et de le rassurer.
Il est ncessaire dtre assist, de prfrence par une IDE
Pour les patients anxieux, une prmdication, sur prescription mdicale
peut tre utilise, 30 minutes avant le geste.
+/-
Moelle osseuse
Si demande de BK
(milieux demander au laboratoire)
mylogramme
mylogramme
87
13.
ACHEMINEMENT DES ECHANTILLONS

PAR PNEUMATQUE POUR LE SITE DE SAINTE MUSSE
Le sachet kangourou contenant les

prlvements doit tre insr dans
un sac parachute avant le transfert
au laboratoire par pneumatique
88
Le laboratoire nest pas responsable de la

gestion de lacheminement des
chantillons par les pneumatiques
En cas de dysfonctionnement :
45500
89
TRANSPORT A PIED POUR SAINTE MUSSE
Sonner pour sannoncer,

un technicien prend en
charge la demande
90
POUR LES SITES EXTERIEURS
Transport par coursier ddi (voiture ou scooter)

STE MUSSE
CLEMENCEAU
7H45
RENE SABRAN
LA SEYNE
8H00
retour sur Ste Musse FACULTATIF
9H00
9H45
code porte labo RS
1235Z
9H50
prise en charge
journeaux +
mdicaments GC
10H00
10h15
FACULTATIF mdicaments LS
10h30
11h00
12h15
FACULTATIF mdicaments UCSA
13h00
14h15
14h30
code porte labo RS

1235Z
14h45
Planning des transports

Jours ouvrables
Planning des transports le

samedi et les jours fris
91
STE MUSSE
CLEMENCEAU
LA SEYNE
FACULTATIF
Planning des transports

Jours ouvrables
6H00
8H15
7H15
7h15
7H55
08h30
10h00
09h10
09h45
11h15
10h30
10h30
12h00
11h15
12h45
STE ANNE
CLINIQUE ST JEAN
LABO BILLIEMAZ
CLINIQUE DU CAP D'OR
LA COLOMBE
(lundi, mercredi, vendredi)
13h00
13h30
11h45
13h00
12h30
13h00
14h15
13h30
14H15 CDAG lundi/vendredi

14h00
14h30
15h00
15h30
15h15
FACULTATIF SCOOTER
16h15
17h15
17h15
FACULTATIF SCOOTER
IL EST IMPERATIF DE RESPECTER

CES HORAIRES POUR UNE
MEILLEURE PRESTATION
- Demande facultative des
transports sur Ste ANNE et St JEAN
Dpt au labo central 12H30 Avertir le chauffeur selon les
crneaux horaires ci dessus
De 13h45 21h45, pour les
demandes urgentes dexamen faire
appel au chauffeur au 10039 en
fonction de ses rotations
Tel port :
10040 ou 0613830826
17h15
18h15
19H30
17h30 pharma GC - LS
17h45
18h40
20h15
21h00
92
PROCEDURE TAXI
Ou appel Taxi par le cadre de garde
830 98 00 + N poste #
Conditionnement de lchantillon en triple emballage dans une bote de transport ddie

fournie par le laboratoire conforme la rglementation ADR version 2011 suivant linstruction
P650 de triple emballage concernant le transport des chantillons biologiques de catgorie B
et rpondent ainsi aux exigences des normes et de la rglementation en vigueur.
93
FICHE DE TRACABILITE DES TRANSPORTS
94
14. ELIMINATION DES DECHETS D'ACTIVITE DE SOINS A RISQUE INFECTIEUX

Llimination des Dchets issus dActivits de Soins Risques Infectieux (DASRI) est soumise la rglementation :
- Arrt du 24 novembre 2003 dfinissant les conditionnements en fonction de la caractrisation des dchets
- Article R.1335-6 du code de la sant publique prcisant les rgles dtiquetage et de marquage des conditionnements
- Arrt du 7septembre 1990 indiquant les conditions et dlais dvacuation des dchets
Ds la production des dchets, un tri doit tre effectu selon la rglementation et pour des raisons de scurit.
Les DASRI ne doivent en aucun cas tre mlangs et jets avec les ordures mnagres. Les dchets souills :
- perforants doivent tre recueillis dans des boites aiguilles ou mini collecteurs (norme NF). Les aiguilles ne doivent pas tre re-capuchonnes, ni laisses
abandonnes dans les boites de prlvements.
- mous doivent tre recueillis dans des sacs plastiques (norme NF) ou des cartons avec sacs de couleur jaune avec un marquage indiquant quil y a un risque
biologique.
95
15.
ACCIDENT A EXPOSITION VIRALE (AEV)
Cf. CLIN FT 38
1) Soins immdiats
EN CAS DE COUPURE OU PIQURE SEPTIQUE
- Lavage immdiat leau et au savon doux
- Trempage dans un antiseptique pendant au moins 5 minutes avec :
EAU DE JAVEL frachement dilue (2 cp / litre deau froide)
CONTACTER LE CADRE DU SERVICE OU DE GARDE

BIP 9800 (SM) / 28500 (GC) / 53004 (LS)
NE PAS FAIRE SAIGNER
EN CAS DE PROJECTION OCULAIRE

- Rinage immdiat leau courante pendant au moins 5
minutes, ou srum physiologique
- Puis consultation ophtalmologique.
EN CAS DE PROJECTION DANS LA BOUCHE

Rinage immdiat la BETADINE BAIN DE BOUCHE (Dilution : un 1/2 bouchon dans un verre d'eau tide)
Prescription en urgence par le mdecin des srologies du patient source :

Hep B, Hep C, VIH - BON N16 (+/- ARN VHC et VIH BON N9)
Pour le VIH : ncessit dobtenir laccord oral du patient, sauf dans les cas o le consentement ne peut tre exprim (circulaire du 13 mars 2008).
- Les srologies du patient source doivent tre envoyes IMMEDIATEMENT au LABORATOIRE, en sac rouge. Elles seront traites en urgence.
- Les srologies du patient accident seront traites dans la routine.
Immdiatement 45208 H24 (laboratoire de garde) ou 45126 heures ouvrables (secrtariat labo)
96
16. CONSULTER LE CATALOGUE DES EXAMENS

Les examens sont classs par ordre alphabtique.
Taper dans cette zone

un mot cl ou le dbut
dun mot
Numro du bon
+ Stylo ( rajouter)
ou croix cocher
Commander un travel bag au laboratoire
97
Fonction zoom + ou -
Utiliser les dfilements pour obtenir lexamen dsir
Type dchantillon
Envoyer dans un sac parachute
La page contenant le mot

recherch est affiche
automatiquement et le mot
recherch est surlign en bleu
Quel tube ?
Acheminer pied
Dans un travel bag
Dans les 2 H
98

C.H.I.T.S. Guide de Laboratoire 18-03-2013

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LABORATOIRE DE BIOLOGIE

CHI TOULON-LA SEYNE SUR MER

Historique des modifications

Une nouvelle version du guide de laboratoire du CHITS est disponible.

Nos documents de rfrence sont :

Norme ISO 15189.

Recommandations fournisseurs de dispositifs de prlvements, socits savantes

Responsable secteur pranalytique

Responsable Immunopathologie / Allergologie

LES PRELEVEMENTS MICROBIOLOGIQUES ............................................................................................................................................................................................. 51

PRELEVEMENT DE MOELLE OSSEUSE .......................................................................................................................................................................................... 87

LES IMPRIMS HOSPITALIERS (BONS) DE DEMANDE DANALYSE

Identification complte du prescripteur et du prleveur

LES RENSEIGNEMENTS CLINIQUES

Ces renseignements peuvent tre indispensables pour le calcul dun rsultat:

La diurse si examen sur urines de 24H ou temps calcul

Le nom et la posologie de l'anticoagulant pour les analyses d'hmostase.

LES CONDITIONS PRE-ANALYTIQUES PARTICULIERES

A DISTANCE D'UN REPAS

Respect de priode de repos pour le dosage de la prolactine.

2.4. PARAMETRES VARIANT SELON UN RYTHME CIRCADIEN

concentration maximale le matin

Corticostrone - Compos B - srum

concentration maximale le matin

Cortisol - Compos F - salive

concentration maximale le matin

Cortisol - Compos F - srum

concentration maximale le matin

concentration maximale le soir ou la nuit. En cas de prescriptions renouveles, l'heure de recueil

DHEA - Dhydropiandrostrone - srum

concentration maximale le matin

Sulfate de prgnnolone - srum

concentration maximale le matin

concentration maximale le matin

concentration maximale le matin

concentration maximale le matin

17 Hydroxy Prgnnolone - srum

concentration maximale le matin

concentration maximale le matin

Avant d'effectuer le prlvement :

ETAPES DUN PRELEVEMENT POUR ANALYSES DE BIOLOGIE

Prescription dune analyse de biologie mdicale

Consulter le catalogue des examens (si besoin) pour connatre :

Consulter le manuel de prlvement (si besoin)

Informer le patient du soin

Choisir le matriel adapt au type dexamen et au patient

Respecter lhygine des mains Cf. fiche CLIN FT 2

Vrifier lidentit du patient

Raliser une antisepsie cutane si ncessaire

Raliser le prlvement selon les prconisations de ce guide ou du CLIN

Etiqueter lchantillon au chevet du patient

Remplir le bon de demande (identit du prleveur, heure, minutes, )

Absence didentit prleveur et/ou prescripteur

Mauvaise prise en charge des chantillons biologiques

Absence de renseignements cliniques

NON RESPECT DES MODALITES LIEES AU PRELEVEMENT

Analyse non ralise

NON RESPECT DIDENTIFICATION PATIENT (ORDONNANCES, BONS ET/OU ECHANTILLONS

Dlai et/ou temprature dacheminement non respect

- Analyse(s) non ralise(s)

TUBES ET SUPPORTS DE PRELEVEMENT

Permet lobtention dun chantillon de srum

Tube sec sans gel sparateur

Les tubes secs en PET contiennent un activateur