ROYAUME DU MAROC

UNIVERSITE MOHAMED V
FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE RABAT

Mémoire de Fin de Spécialité

-Pharmacie Industrielle-

Screening phytochimique et évaluation de l’activité

antioxydante et antilithiasique de Juncus acutus

Réalisé par : Dr. Zineb ALIAT

Encadré par : Pr. Mustapha BOUATIA

Pour l’obtention du Diplôme de Spécialité

Année 2020
 REMERCIEMENT

Je tiens à exprimer toute ma reconnaissance à mon

encadrant de mémoire Pr Mustapha BOUATIA. Je

le remercie de m’avoir encadrée, orientée, aidée et

conseillée.

J’adresse mes sincères remerciements à tous les

professeurs, intervenants et toutes les personnes du

laboratoire de chimie analytique pour avoir mis à

ma disposition l’aide et le matériel nécessaires pour

la réalisation de ce travail.

A tous ces intervenants, je présente mes

remerciements, mon respect et ma gratitude

2
Table des matières
RESUME: ........................................................................................................................... 7
INTRODUCTION : ............................................................................................................... 8
MATERIEL ET METHODES : ................................................................................................. 9
Matériel végétal : ................................................................................................................................. 9
Préparation des extraits : ..................................................................................................................... 9
Caractérisation phytochimique : ........................................................................................................ 10
Détermination des polyphénols totaux : ........................................................................................... 10
Dosage des flavonoïdes totaux : ........................................................................................................ 11
Activité antioxydante: ........................................................................................................................ 11
Activité antilithiasique :...................................................................................................................... 12
Analyses statistiques : ........................................................................................................................ 13

RESULTATS ET DISCUSSION : ............................................................................................ 13

Rendements d’extraction : ................................................................................................................. 13
Caractérisation physicochimique : ..................................................................................................... 13
Polyphénols totaux:............................................................................................................................ 14
Flavonoïdes totaux : ........................................................................................................................... 15
Ativité antioxydante: .......................................................................................................................... 16
Activité antilithiasique :...................................................................................................................... 19

Conclusion: ..................................................................................................................... 22
Références: ..................................................................................................................... 23

3
 LISTE DES TABLEAUX

Tableau 1 : Screening de quelques groupes phytochimiques de 4 extraits de Juncus acutus

Tableau 2 : Teneur totale en polyphénols exprimée en milligrammes équivalent d'acide

gallique par gramme de poudre de Juncus acutus

Tableau 3 : Teneur totale en flavonoïdes exprimée en milligrammes équivalents de Quercétine

par gramme de poudre de Juncus acutus

4
 LISTE DES FIGURES

Figure 1 : Pourcentage d’inhibition des radicaux libres des différents extraits de Juncus acutus
en utilisant le test DPPH.

Figure 2 : Les valeurs de capacité de piégeage des radicaux DPPH (IC50) des différents
extraits de Juncus acutus

Figure 3 : Pouvoir réducteur des extraits de Juncus acutus

Figure 4 : Test au phosphomolybdate de Juncus acutus

Figure 5 : Taux de dissolution des calculs de cystine dans l'extrait de Juncus acutus et la
solution témoin

Figure 6 : Taux de dissolution des calculs d'acide urique dans l'extrait de Juncus acutus et la
solution témoin

Figure 7 : Taux de dissolution des calculs de carbapatite dans l'extrait de Juncus acutus et la
solution témoin

5
 LISTE DES ABREVIATIONS

AA : Acide Ascorbique

ABTS : Sel d'ammonium d'acide 2,2'-azinobis-3-éthylbenzothiazoline-6-sulfonique

AE : Acétate d’ethyle

BHA : Butylhydroxyanisole

BHT : Butylhydroxytoluène

DPPH : Diphényl-picrylhydrazyl

FRAP : Ferric Ion Reducing Antioxidant Parameter

FTIR : Spectrophotométrie Infrarouge à Transformée de Fourier

MET : Méthanol

ORAC : Oxygen Radical Absorbance Capacity

TRAP : Total Radical Trapping Antioxidant Parameter

UV-V : Ultraviolet-Visible

6
 RESUME:

L'objectif de ce travail était de réaliser un screening phytochimique des graines de Juncus

acutus et d'évaluer son activité antioxydante et son activité antilithiasique. Le screening

phytochimique a démontré la présence de catéchine, de tanins et d'alcaloïdes dans les différents

extraits étudiés. L'activité antioxydante des extraits méthanoliques et d'acétate d'éthyle par

ultrasons et macération a été évaluée par la méthode du DPPH, du FRAP et du

phosphomolybdate. L'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons, l'extrait méthanolique par

macération et ultrasons ont respectivement montré une IC50 avec DPPH de 1,449 mg / ml,

1,535 mg / ml et 4,771 mg / ml et un pouvoir réducteur a été observé à des concentrations de

419,561 mg BHA / 100 g, 207,143 mgBHA / 100g et 142,20mgBHA / 100g par la méthode de

FRAP et à des concentrations de 839,470mg AAE/100g, 283,260mgAAE / 100g et

141,018mgAAE / 100g par le test au phosphomolybdate. La détermination des polyphénols

totaux de l'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons, de l'extrait méthanolique par macération et

par ultrasons a présenté respectivement des teneurs de 2,428 mg GAE/g, 1,960 mg GAE/g et

1,172 mg GAE/g, de même, le dosage des flavonoïdes a montré respectivement des

concentrations de 14,469 mg EQ/g, 6,466 mg EQ/g et 3,143 mg EQ/g. L'activité antilithiasique

a été évaluée sur des calculs de Carbapatite, de Cystine et des calculs d'acide urique. La perte

de masse d'acide urique, de carbapatite et de cystine était respectivement de 42%, 7% et 16%.

143 mg EQ / g.

Mots clés: Juncus acutus - Activité antioxydante - Activité antilithiasique – flavonoïdes -

polyphénols.

7
 INTRODUCTION :

Les plantes médicinales sont le principal remède pour la fabrication de remèdes

pharmaceutiques. En effet, les substances naturelles provenant des plantes ont de multiples

intérêts mis à profit dans le système de soins traditionnel et dans différentes industries. Parmi

ces composés, on retrouve dans une large mesure les métabolites secondaires qui sont

particulièrement illustrés en thérapeutique [Hebi et Eddouks, 2016]. Dans notre étude, nous

nous concentrerons sur les activités antioxydante et antilithiasique de Juncus acutus.

Les antioxydants les plus populaires sont l'acide ascorbique (vitamine C),-carotène

(Provitamine A), tocophérol (Vitamine E) et les composés phénoliques. En effet, la plupart des

antioxydants synthétiques ou naturels ont des groupes hydroxyphénoliques dans leurs structures

et les propriétés antioxydantes sont attribuées en partie à la capacité de ces composés naturels

à piéger les radicaux libres tels que les radicaux hydroxyles et les superoxydes [Rice-Evanset

al.,1995; Bartosz, 2003; Popovici et al., 2010].

Plusieurs méthodes sont utilisées pour évaluer, in vitro et in vivo, l'activité antioxydante en

piégeant différents radicaux, tels que les peroxydes par la méthode ORAC (Oxygen Radical

Absorbance Capacity ou capacité d'absorption des radicaux libres), par le TRAP (Total Radical

Trapping Antioxidant Parameter) [Ricardo da Silva et al., 1991]; par la méthode au FRAP

(Ferric Ion Reducing Antioxidant Parameter) [Benzie et souche, 1996]; ou par les radicaux

ABTS (sel d'ammonium d'acide 2,2'-azinobis-3-éthylbenzothiazoline-6-sulfonique) [Re et al.,

1999], ainsi que la méthode utilisant le radical libre DPPH (Diphényl-picrylhydrazyl) [Popovici

et al., 2010; Sharma Om et Bhat, 2009].

Dans notre étude, trois méthodes seront utilisées pour évaluer cette activité: FRAP, DPPH et

test au phosphomolybdate.

8
Au Maroc tel que rapporté par Bouatia et al. (2015), le type de calculs prépondérant était

l'oxalate de calcium monohydraté (56,4%), suivi par l'acide urique (18,1%), de la carbapatite

(7,9%) et de la cystine (0,6%).

Dans cette étude, nous avons choisi d'étudier l'effet des extraits de Juncus acutus sur la les

calculs rénaux de la carbapatite, l'acide urique et la cystine.

Cette étude s'est fixée comme principaux objectifs :

• Réalisation d'un screening phytochimique pour rechercher certains groupes phytochimiques.

• Détermination des polyphénols totaux et des flavonoïdes totaux contenus dans les graines de

Juncus acutus.

• Etude de l'activité antioxydante des extraits méthanoliques et de l'acétate d'éthyle de Juncus

acutus.

• Etude de l'activité antilithiasique des extraits méthanoliques et de l'acétate d'éthyle de Juncus

acutus.

MATERIEL ET METHODES :
Matériel végétal :

L'échantillon prélevé provient de la région sud du Maroc. Au laboratoire, nous avons broyé les

graines de Juncus acutus avec un broyeur jusqu'à obtention d'une poudre fine.

Préparation des extraits :

Nous avons utilisé deux types d’extraction : la macération sous agitation pendant 24 heures et

l'extraction aux ultrasons pendant 60 minutes.

Extraction par macération:

40 g de poudre des graines de Juncus acutus sont extraits dans 100 ml d'acétate d'éthyle par

macération sous agitation pendant 24 heures à température ambiante. Après filtration et séchage

9
de la même poudre, une deuxième extraction dans 100 ml de méthanol a été réalisée dans les

mêmes conditions précédemment décrites.

Extraction par ultrasons:

40 g de poudre des graines de Juncus acutus sont extraits dans 100 ml d'acétate d'éthyle sous

ultrasons pendant 60 minutes à 39 ° C. Après filtration et séchage de la même poudre, une

deuxième extraction dans 100 ml de méthanol a été réalisée dans les mêmes conditions

précédemment décrites.

Les 4 filtrats sont concentrés dans une étuve à 40 ° C afin de se débarrasser du solvant et de

récupérer les extraits. Les 4 extraits ainsi récupérés, sont conservés dans des flacons stériles au

réfrigérateur.

Caractérisation phytochimique :

Nous avons effectué, séparément, des réactions qualitatives sur nos différents extraits de Juncus

acutus pour le screening de certains groupes phytochimiques en utilisant les méthodes de

Harborne (1998),Trease et Evans (1989) ainsi rapporté par Buvaneswari et al. (2011) et Touré

(2015).

Détermination des polyphénols totaux :

La teneur totale en composés phénoliques a été déterminée en utilisant la méthode de Folin

Ciocalteu [Hashemi et al., 2016]. 1,25 ml du réactif Folin (dix fois dilué) a été ajouté à 250 µl

d'extrait ou d'étalon (préparé dans le méthanol) avec des concentrations allant de 0,3 à 3 mg/ml.

Après 4 min, 1 ml d'une solution de carbonate de sodium (7,5 g/100 ml) est ajouté au mélange

précédent. L'ensemble est incubé dans l'obscurité à température ambiante pendant 30 min.

L'absorbance a été mesurée à 765 nm. La concentration des polyphénols totaux est exprimée en

milligrammes équivalent d'acide gallique par gramme d'extrait (mg GAE / g d'extrait).

10
Dosage des flavonoïdes totaux :

La méthode du trichlorure acétique [Tohma et al., 2016] est utilisé pour estimer les flavonoïdes

totaux dans les extraits. 1,5 ml de la solution d'AlCl3 (2%) est ajouté à 1,5 ml de l'échantillon

ou de standard. Après 1 heure de réaction en absence de lumière, la densité optique est

déterminée à 415 nm. La concentration en flavonoïdes a été exprimée en milligramme

équivalent de quercétine par gramme d'extrait (mg EQ / g d'extrait).

Activité antioxydante:

Capacité de piégeage des radicaux libres: DPPH

Le DPPH, un radical libre de couleur violette, est réduit en composé jaune en présence de

composés anti-radicaux libres [Hossain et al., 2015]. Dans les tubes à essai, 500 µl de chaque

extrait ou standard de concentrations différentes (2,5; 5 ; 10 et 15 µg / ml) et 2 ml de solution

de méthanol DPPH (50 µM) ont été introduits, après mélange au vortex, les tubes sont incubés

dans l’obscurité à température ambiante pendant 30 minutes. La mesure a été effectuée à l'aide

d'un spectrophotomètre UV-V à une longueur d'onde de 517 nm.

Des valeurs IC50 ont été calculées pour déterminer l'inhibition de 50% des radicaux DPPH.

Le BHT a été utilisé comme standard.

Dosage du pouvoir antioxydant réducteur ferrique: FRAP

Le pouvoir réducteur de nos extraits a été déterminé en utilisant la méthode de Florentine Marie-

Chantal [Foe et al., 2016]. Le volume de 250 μl de chaque extrait ou de standard de

concentration (0,01 à 0,1 mg / ml) a été ajouté au mélange de 1,25 ml de tampon phosphate (0,2

M ; pH 6,6) et 1,25 ml de ferricyanure de potassium (1%). Après incubation pendant 20 minutes

dans un bain-marie à 50 ° C, 1.25 ml d'acide trichlorure acétique (10%) a été ajouté au mélange

puis centrifugé à 3000 tr / min pendant 10 minutes. Le surnageant (1,25 ml) a été ajouté à un

mélange de 1,25 ml d'eau distillée et 250 μl de chlorure ferrique (0,1%). L'absorbance a été

11
mesurée au spectrophotomètre à 700 nm. Une absorbance accrue du mélange réactionnel

suggère un pouvoir réducteur élevé. Les résultats ont été exprimés en milligrammes équivalent

de butylhydroxyanisole (BHAE) pour 100 grammes d'extrait (mg de BHA / 100g d'extrait).

Phosphomolybdate

Le test est basé sur la réduction du Mo (VI) en Mo (V) par l'échantillon et la formation

subséquente d'un complexe phosphate de Mo (V) vert à pH acide. Le volume de 0,3 ml de la

solution d'extrait est ajouté à 3 ml du réactif (acide sulfurique 0.6 M, phosphate de sodium

28mM et molybdate d'ammonium 4 mM). Le tube est fermé et incubé dans un bain-marie à

95°C pendant 90 minutes. Après refroidissement à température ambiante, l'absorbance de la

solution est mesurée à 695 nm contre un blanc avec un spectrophotomètre UV-Visible. L’acide

ascorbique a été utilisé comme standard. Les résultats ont été exprimés en milligramme

équivalent d'acide ascorbique pour 100 grammes d'extrait (mg AAE / 100g d'extrait).

Activité antilithiasique :

Douze calculs rénaux de carbapatite; cystine et acide urique pur du sud du Maroc ont été

sélectionnés après analyse par spectrophotométrie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR).

Leur masse était de 330 ± 12 mg. Un extrait de plante a été préparé par infusion de 3g de plante

sèche dans 100 ml de solution physiologique bouillante pendant 30 minutes. La solution de

NaCl de 9 g/l était utilisée comme milieu témoin pour apprécier les modifications de masse des

calculs. Après filtration, l'extrait a été partagé (60 ml) dans des flacons en verre Erlenmeyer.

Les calculs ont été placés dans un sac poreux de fibres tressées et suspendus dans l'extrait.

[Hannache et al., 2012]

La perte de masse des calculs rénaux a été évaluée en pesant le calcul après séchage à 40 ° C

pendant 18 heures. Chaque test a été effectué 3 fois.

L'évaluation de l'activité de l'extrait a été déterminée en calculant le taux de dissolution des

calculs après séjour dans le milieu expérimental en comparant le poids résiduel des calculs à

12
leur poids initial avant incubation avec notre extrait. Le pourcentage de dissolution a été

déterminé par la formule:

a% = (Winitial - Wfinal) × 100 / Winitial

Avec: a% est le taux de dissolution du calcul et Winitial et Wfinal sont les poids de calcul avant

et après incubation avec l’extrait de la plante.

Analyses statistiques :

Les résultats sont exprimés en moyenne  écart-type (SD) et toutes les analyses ont été

effectuées en triple. Les résultats ont été comparés par ANOVA unidirectionnelle avec le post-

test de bonferoni. Une différence est significative si p0,05.

RESULTATS ET DISCUSSION :

Rendements d’extraction :

Le rendement était de 0,517% pour l’extraction par macération réalisée au premier stade avec

de l'acétate d'éthyle sur la poudre de Juncus acutus, la deuxième extraction effectuée au

méthanol a donné un rendement plus élevé qui est de 1,62%.

Pour l’extraction sous ultrasons, les rendements étaient de 2,9% pour l'extrait à l'acétate d'éthyle

et de 1,16% pour l'extrait au méthanol.

L'extraction par le méthanol de la poudre de graines de Juncus acutus par ultrasons a montré

un rendement plus élevé que celui obtenu par macération, et des rendements presque identiques

pour l'extraction avec de l'acétate d'éthyle pour les deux méthodes.

Caractérisation physicochimique :

Les résultats de la caractérisation qualitative de nos extraits sont résumés dans le tableau 1:

13
 Tableau 1: Screening de quelques groupes phytochimiques de 4 extraits de Juncus

acutus

Macération Sous échographie

Constituants Extrait d'acétate Extrait de Extrait d'acétate Extrait de
d'éthyle méthanol d'éthyle méthanol
Stérols et polyterpènes + + - -

Polyphénols - - - -

Flavonoïdes - - - -

Tanins catéchiques + + + +

Tanins gaulois - - - -

Alcaloïdes + + + +

Saponosides - - - -

(+) indique la présence; (-) indique l'absence

Le screening phytochimique des graines de Juncus acutus a montré la présence des tanins

catéchiques et d'alcaloïdes dans tous les extraits. Les stérols et les polyterpènes n'étaient

présents que dans les extraits de macération. Une étude des extraits aqueux de Juncus subulatus

Forsak a révélé la présence d'alcaloïdes, de glycosides, de saponisides, de flavonoïdes et de

terpénoïdes [Fawzy et al., 2013].

Polyphénols totaux:

La spectrophotométrie UV / Visible a permis de quantifier le niveau des polyphénols présents

dans les 3 extraits de Juncus acutus.

La courbe d'étalonnage établie à partir de différentes concentrations d'acide gallique a permis

d'estimer la teneur phénolique de chacun des 3 extraits. La concentration des composés

phénoliques a ensuite été calculée à partir de la courbe d'étalonnage et exprimée en mgGAE/g.

La teneur totale en polyphénols dans les différents extraits de Juncus acutus est présentée dans

le tableau 2.

14
 Tableau 2: Teneur totale en polyphénols exprimée en milligrammes équivalent d'acide
gallique par gramme de poudre de Juncus acutus

Extrait de Juncus acutus Teneur totale en polyphénols (mg GAE/g)

Extraction par macération
- Extrait de méthanol 1,960

Extraction par ultrasons

- Extrait d'acétate d'éthyle 2,428
- Extrait de méthanol 1,172

L'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons montre la teneur la plus élevée en composés

phénoliques 2,428 mg GAE / g.

Flavonoïdes totaux :

La courbe d'étalonnage est tracée en utilisant différentes concentrations de Quercétine. La

concentration de flavonoïdes dans les extraits de Juncus acutus est déterminée en se reportant

à la courbe d'étalonnage.

La teneur en flavonoïdes est exprimée en milligrammes équivalent de Quercétine par gramme

d’extrait (mg QE / g d'extrait).

La teneur en flavonoïdes totaux dans les différents extraits de Juncus acutus est donnée dans le

tableau 3.

15
 Tableau 3: Teneur totale en flavonoïdes exprimée en milligrammes équivalents de
Quercétine par gramme de poudre de Juncus acutus
Extrait de Juncus acutus Teneur totale en flavonoïdes (mgQE/g)

Extraction par macération

- Extrait de méthanol 6,466

Extraction par ultrasons

- Extrait d'acétate d'éthyle 14,694
- Extrait de méthanol 3,143

L'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons présente la teneur en flavonoïdes la plus élevée avec

une concentration de 14,694 mg QE / g.

Les teneurs totales en polyphénols et en flavonoïdes totaux de nos extraits étaient plus élevées

que celles trouvées dans d'autres études sur Juncus acutus [Erdem et al., 2015] et Juncus effusus

[Li et al., 2013].

Activité antioxydante :

DPPH :

Les différentes concentrations de l'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons (2,5; 5; 10 et 15 μg/ml)

ont montré des activités antioxydantes dose-dépendantes avec 52,30%; 59,14%; 71,83%; et

83,82% d'inhibition. Quant à l'extrait méthanolique, il a montré des taux de 50,46%; 57,35% ;

66,02% et 75,35% d'inhibition pour l'extraction par macération, et des taux de 48,30%; 50,45%;

53,36% et 56,65% pour l'extraction par ultrasons (figure 1).

16
 I % of DPPH radical
90
80
70
60
Inhibition % EA Ultasound
50
Inhibition % Met Maceration
40
Inhibition % Met Ultrasound
30
20
10
0
0 5 10 15 20 Concentrations µg/ml

Figure 1: Pourcentage d’inhibition des radicaux libres des différents extraits de Juncus

acutus en utilisant le test DPPH.

La capacité antioxydante des différents extraits a été déterminée à partir de l'IC50, la

concentration nécessaire pour réduire 50% du radical DPPH. Plus la valeur de IC50 est faible,

plus l'activité de l'extrait testé est grande [Hebi et Eddouks, 2016].

Les valeurs IC50 pour les extraits de Juncus acutus sont présentées dans la figure 2.

IC50 (mg/ml)
6

5 4,771

2
1,459 1,535
1

0 Extract
EA Ultasound Met Maceration Met Ultrasound

Figure 2: Les valeurs de capacité de piégeage des radicaux DPPH (IC50) des différents
extraits de Juncus acutus

17
L'activité antioxydante la plus importante a été notée pour l’extrait d'acétate d'éthyle par

ultrasons de Juncus acutus avec une IC50 de 1,459 mg / ml.

FRAP (Reducing power assay) :

Le pouvoir réducteur ferrique peut servir d'indicateur significatif du potentiel antioxydant. Les

capacités de réduction des extraits de Juncus acutus ont été déterminées par référence à la

courbe d'étalonnage de l'anti-oxydant de référence BHA. Le pouvoir réducteur le plus important

a été noté pour l’extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons avec une concentration de 419,561 mg

BHAE / 100 g. (Figure 3)

Reducing power assay (mg BHAE/100g)

450
400
350
300
250
200
150
100
50
0 Extract
EA Ultasound Met Maceration Met Ultrasound

Figure 3: Pouvoir réducteur des extraits de Juncus acutus

Test au phosphomolybdate

Le test est basé sur la réduction de Mo (VI) en Mo (V) par l'échantillon et la formation

subséquente d'un complexe phosphate de Mo (V) vert à pH acide. Les capacités de réduction

des extraits de Juncus acutus ont été déterminées par référence à la courbe d'étalonnage de la

vitamine C. Le pouvoir réducteur le plus important a été noté pour l’extrait d'acétate d'éthyle

par ultrasons avec un taux de 839,470 mg AAE / 100 g (figure 4).

18
 Phosphomolybdate test (mg AAE / 100g )
900
800
700
600
500
400
300
200
100
0 Exract
AE Ultrasons Met Macération Met Ultrasons

Figure 4: Test au phosphomolybdate de Juncus acutus

Nos résultats ont montré une activité antioxydante plus importante que ceux trouvés dans

d'autres études réalisées sur Juncus Bufonius [El Gawad et al., 2015] et Juncus acutus [Erdem

et al., 2015].Il est également noté que la teneur en polyphénols totaux et en flavonoïdes totaux

et l'activité antioxydante la plus importante ont été observées dans l'extrait d'acétate d'éthyle

par ultrasons.

Activité antilithiasique :

La perte de masse des calculs de cystine était de 60 mg ± 5 mg pour Juncus acutus et 20 mg ±

2 mg pour la solution témoin (16% contre 4% pour la solution témoin (figure 5)).

19
 20

Juncus acutus

% Loss of mass (Cystine stones)

9 g/l NaCl/ H2O

10

0 1 2 3 4 5 6 7
Week

Figure 5: Taux de dissolution des calculs de cystine dans l'extrait de Juncus acutus et la

solution témoin

Cette perte de masse était de 158 mg ± 35 mg pour Juncus acutus et de 61 mg ± 3 mg pour la

solution témoin (42% contre 20% pour la solution témoin (figure 6)) pour les calculs d'acide

urique.

50
% Loss of mass (Uric acid stones)

45 Juncus acutus
40 9g/l NaCl/H2O
35

30

25

20

15

10

-5
0 1 2 3 4 5 6 7
Week

Figure 6: Taux de dissolution des calculs d'acide urique dans l'extrait de Juncus acutus et
la solution témoin

20
Et c'était 25 mg ± 4 mg pour Juncus acutus et 19 mg ± 2 mg pour la solution témoin (7% vs 5%

pour la solution témoin (figure 7)) pour les calculs de carbapatite.

% Loss of mass (Carbapatite stones)

Juncus acutus
9 g/l NaCl/H2O
8

0 1 2 3 4 5 6 7
Week

Figure 7: Taux de dissolution des calculs de carbapatite dans l'extrait de Juncus acutus et

la solution témoin

La masse des trois calculs rénaux lors de l'incubation avec l'extrait de Juncus acutus et la

solution témoin au cours des trois premières semaines a peu varié, le taux de dissolution est

resté faible (p> 0,05) et a commencé à augmenter entre la quatrième et la sixième semaine

(p=0,01).

Nos résultats n'ont pas montré de différence significative entre l'extrait et la solution témoin en

ce qui concerne la perte de masse des calculs de cystine, carbapatite et acide urique sur la

période expérimentale choisie. Cependant, la pente de la courbe de dissolution obtenue pour les

calculs de cystine et d'acide urique a fortement augmenté au cours des dernières semaines par

rapport aux courbes observées avec les calculs de carbapatite. Ce qui suggère que cette plante

est probablement plus efficace pour dissoudre les calculs de cystine et d'acide urique, mais

nécessite probablement plus de temps pour la dissolution des calculs.

21
 Conclusion:

Ces travaux nous ont tout d'abord permis de réaliser un screening phytochimique, afin de

rechercher certains groupes phytochimiques tels que les stérols et les polyterpènes, les

polyphénols, les flavonoïdes, la catéchine et les tanins galliques, les alcaloïdes et les

saponosides; dans des extraits de Juncus acutus.

Cela nous a également permis de quantifier les flavonoïdes totaux et les polyphénols totaux.

L'application de la méthode Folain-Ciocalteu et de la méthode au trichlorure d'aluminium a

montré que la teneur totale en polyphénols est comprise entre 1,172 et 2,428 mg EAG / g; et

que la teneur totale en flavonoïdes est comprise entre 3,143 et 14,469 mgEQ / g.

Concernant l'activité antioxydante, nous avons réalisé 3 tests: le test DPPH, le FRAP et le test

au phosphomolybdate. La teneur en polyphénols totaux la plus élevée ainsi que la teneur en

flavonoïdes totaux et l'activité antioxydante la plus importante ont été observées dans l'extrait

d'acétate d'éthyle par ultrasons. L'étude de l'activité antioxydante des extraits méthanoliques et

de l'acétate d'éthyle de Juncus acutus, a montré qu'ils possèdent une activité antioxydante non

négligeable.

L'étude de l'activité antilithiasique démontre que Juncus acutus est probablement plus efficace

pour dissoudre les calculs de cystine et d'acide urique, mais nécessite probablement plus de

temps pour la dissolution des calculs.

22
 Références:

- Bartosz G. Génération d'espèces réactives de l'oxygène dans les systèmes biologiques.

Commentaires sur la toxicologie 2003, 9, 5-21.
- Benzie IF, souche J. La capacité de réduction ferrique du plasma (FRAP) comme mesure du pouvoir
antioxydant: le test FRAP. Analytical Biochemistry 1996, 239, 70-76.
- BOUATIA, M., BENRAMDANE, L., IDRISSI, M. Oulad Bouyahya, et al. Une étude
épidémiologique sur la composition des calculs urinaires au Maroc en fonction de l'âge et du sexe.
African Journal of Urology, 2015, vol. 21, no 3, p. 194-197
- Buvaneswari K; Ramamoorthy D; Velanganni J, World J. Agric. Sci., 2011, 7 (6), 659-666.
- EL-GAWAD, AM Abd, MASHALY, Ibrahim A., et AL-NAFIE, Rasool I. Activité antioxydante et
potentiel allélopathique de cinq plantes sauvages sur la germination et la croissance Bidens pilosa L.
Int. J. Curr. Res, 2015, vol. 7, p. 21019-21024.
- ERDEM, F., CETINKAYA, N., NISBET, C., et al. Estimation de la digestibilité de la matière
organique, de l'énergie métabolisable, des composés phénoliques et de l'activité antioxydante des tiges
et des graines de la plante Juncus acutus dans la nutrition des ruminants. Journal sud-africain des
sciences animales, 2015, vol. 45, no 5, p. 502-509.
- FAWZY, Mustafa Ahmed, HIFNEY, Awatief Fahmey, AISS, Ahmed Abdel-Salam, et al. Constituants
phytochimiques et effets allélopathiques de certaines plantes médicinales extraites sur la diversité des
algues du sol. Journal of Agricultural Science and Technology. A, 2013, vol. 3, no 12A, p. 1000.
- FOE, Florentine Marie-Chantal Ndoye, TCHINANG, Tatiana Flore Kemegni, NYEGUE, Ascencion
Maximilienne, et al.Composition chimique, propriétés antioxydantes et anti-inflammatoires in vitro
des huiles essentielles de quatre plantes alimentaires et médicinales du Cameroun. BMC médecine
complémentaire et alternative, 2016, vol. 16, no 1, p. 117.
- HANNACHE, B., BAZIN, D., BOUTEFNOUCHET, A., et al. Effet des extraits de plantes
médicinales sur la dissolution des calculs rénaux de cystine in vitro: étude à l'échelle mésoscopique.
Progrès en urologie, 2012, vol. 22, no 10, p. 577-582.
- Harborne JB. Méthodes phytochimiques: guide des techniques modernes d'analyse des plantes, 3e
édition, Chapman et Hall., Londres, 1998.
- HASHEMI, Seyed Mohammad Bagher, BREWER, Mary Susan, SAFARI, Javad, et al. Activité
antioxydante, mécanismes de réaction et cinétique de l'extrait de Matricaria recutita dans l'oxydation
d'huile mélangée commerciale. Journal international des propriétés alimentaires, 2016, vol. 19, no 2, p.
257-271.
- HEBI, M. et EDDOUKS, M. Évaluation de l'activité antioxydante de Stevia rebaudiana.
Phytothérapie, 2016, vol. 14, no 1, p. 17-22.

23
- HOSSAIN, M. Amzad et SHAH, Muhammad Dawood. Une étude sur la teneur totale en phénols et
l'activité antioxydante des huiles essentielles et des différents extraits de solvants de plantes
endémiques Merremia borneensis. Journal arabe de chimie, 2015, vol. 8, no 1, p. 66-71.
- LI, Sha, LI, Shu-Ke, GAN, Ren-You, et al. Capacités antioxydantes et contenu phénolique total des
infusions de 223 plantes médicinales. Cultures et produits industriels, 2013, vol. 51, p. 289-298.
- POPOVICI, Cristina, SAYKOVA, Ilonka et TYLKOWSKI, Bartosz. Évaluation de l'activité
antioxydante des composés phénoliques par la réactivité avec le radical libre DPPH. 2010.
- Re R., Pellegrini N., Proteggente A., Pannala A., Yang M., Rice-Evans C. Activité antioxydante
appliquant un essai de décoloration amélioré des cations radicalaires ABTS. Free Radical Biology
andMedicine 1999, 26, 1231-1237.
- Ricardo da Silva JM, Darmon N., Fernandez Y., Mitjavila S. Capacité de piégeur de radicaux libres
d'oxygène dans des modèles aqueux de différentes procyanidines de pépins de raisin. Journal of
Agricultural and Food Chemistry 1991, 39, 549-1552.
- Rice-Evans CA, Miller NJ, Bolwell PG, Bramley PM, Pridham JB Les activités antioxydantes
relatives des flavonoïdes polyphénoliques d'origine végétale. Free Radical Research 1995, 22, 375-
383.
- Sharma Om P., Bhat TK, DPPH antioxydant assay revisited. Chimie alimentaire 2009, 113 (4), 1202.
- TOHMA, Hatice, KÖKSAL, Ekrem, KILIÇ, Ömer, et al. Analyse RP-HPLC / MS / MS des composés
phénoliques, des activités antioxydantes et antimicrobiennes des espèces de Salvia L. Antioxydants,
2016, vol. 5, no 4, p. 38.
- Touré HA Criblage phytochimique et activité antioxydante des extraits aqueux-éthanoliques d'Opuntia
ficus indica, Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 2015, 7 (7): 409-415.
- Trease GE; Evans WC. Trease and Evans 'Pharmacognosy, 13th Edition, Balliere Tindall, Londres,
1989; 176-180.

24