5ème année pharmacie les éléments liés à la potabilité

Le cortège azoté

Introduction :

L’azote peut se présenter sous diverses formes et à degrés d’oxydation variable.

Dans le domaine de l’eau, les dérivés azotés minéraux les plus importants sont :
 L’ammoniaque ( NH3) et les dérivés ammoniacaux (NH4+ )
 Les nitrites (NO2- ).
 Les nitrates (NO3- ).
 L’azote organique.

I. Le cycle de l’azote :
1. L’étape de fixation :
Elle correspond au passage de l’azote atmosphérique N 2 en azote combiné sous
l’action de certains microorganismes.
2. L’étape de l’assimilation :
Elle correspond à la transformation de la matière azotée minérale en matière
vivante. (Synthèse des acides aminés et protéines).
3. L’étape de l’ammonification :

La putréfaction des végétaux et des animaux morts ainsi que, l’élimination d’urine
et d’excréments, apportent de grandes quantités d’azote organique. Cet azote est
dégradé par les micro-organismes et transformé en ammoniac (NH 3) ou en sels
d’ammonium NH4+
4. L’étape de la nitrification :
En milieu aérobie, les dérivés ammoniacaux sont oxydés progressivement en
nitrites, puis en nitrates, par les bactéries nitrifiantes type nitrobacter.
5. L’étape de la dénitrification :
En milieu anaérobie, la réaction inverse peut se produire sous l’action des
bactéries dénitrifiantes.

1
5ème année pharmacie les éléments liés à la potabilité

II. Evaluations analytiques

1. l’azote ammoniacal

a) Origine :

- Produit normal de la biodégradation de l’azote organique (protéines, acides

aminés, urée,etc).
- Sa teneur dans les eaux naturelles devrait être relativement faible puisque
l’ammoniac est oxydé graduellement en nitrites et en nitrates.
- On associe une concentration élevée en azote ammoniacal à une pollution
récente. En milieu anaérobie l’azote ammoniacal peut résulter de la
dénitrification bactérienne.

b) Dosage

 Dosage par colorimetrie : Méthode de Nessler

Principe :

L’ammoniac et les composés ammoniacaux réagissent avec l’iodomercurate de

potassium pour donner un composé jaune orangé dont l’intensité de la
coloration est proportionnelle à la quantité initiale d’azote ammoniacal
contenue dans l’échantillon. On peut utiliser un spectrophotomètre préablement
étalonné (λ=420 nm) ou faire une comparaison visuelle avec une série

2
5ème année pharmacie les éléments liés à la potabilité

d’étalons préparée à partir d’une solution de chlorure d’ammonium à 10 mg

d’N/l.
Le dosage se fait en présence de sels de seignette : tartrate double de K et Na,
qui empêche la précipitation de Ca2+ et Mg2+ contenus dans l’eau en les
fixant et en cédant les alcalins.

Réaction mise en jeu :

Le réactif de Nessler ( iodo- mercurate de potassium alcalin) en présence

d’ions ammonium est décomposé avec formation d’iodure de
dimercuriammonium qui permet le dosage colorimétrique des ions NH4+
HgI2 + 2KI HgI42- + 2K+
2 HgI42- + 2 NH3 2 NH3 HgI2 + 4I-
2 NH3 HgI2 NH2Hg2I3 + NH4+ I-

Normes et interprétation :

Les eaux potables ne devrait pas contenir les sels ammoniacaux cependant on
peut tolérer jusqu’à 0.05 mg d’N/l.
On associe une concentration élevée en azote ammoniacal à une pollution
récente ou un milieu dépourvue d’oxygène.
La présence d’ammoniac dans l’eau peut entrainer le développement de
certains germes donnant des goûts désagréables.
Elle présente l’inconvénient de nécessiter une augmentation de la
consommation en chlore lors de la désinfection.

2. L’azote Kjeldahl
Azote total réduit :Norg+Nréduit

Principe

Après minéralisation de l’azote organique, l’ammoniac déplacé par une solution

de lessive de soude est entrainé par un courant de vapeur d’eau puis dosé par
volumétrie ou colorimétrie.

Mode opératoire

Le dosage s’effectue en 3 étapes :

1. L’étape de minéralisation
- Dans un matras de 500 ml, l’azote kjeldahl subit une digestion oxydative
énergique en présence d’H2SO4concentré et à chaud en ajoutant un catalyseur
de minéralisation.
3
5ème année pharmacie les éléments liés à la potabilité

Ce processus de digestion convertit Norg en sulfate d’ammonium.

- La digestion doit être conduite sous la hotte car il y a émission de vapeurs
d’anhydride sulfurique (SO2), qui sont irritantes et suffocantes.
2. Distillation
Par passage en milieu alcalin, on déplace l’ion ammonium NH 4+ de son sel, vers la
formation de NH4OH qui va être entrainé par la vapeur d’eau dans une solution
d’acide borique, on dosera ensuite l’ammoniaque formé par acidimetrie.
(NH4 )2SO4 + 2 NaOH 2 NH4OH + Na2SO4

3. Le dosage de l’ammoniaque formé

En présence d’acide faible (acide borique), l’ammonique est piégé sous forme
borate d’ammonium au fur et à mesure qu’il est entrainé selon la réaction :

NH4OH + H3BO3 [NH4+, H2BO3-] + H2O

Acide borique borate d’ammonium
L’indicateur coloré utilisé est un mélange de rouge de méthyle et de bleu de
méthylène. Il est violet en milieu acide et vert en milieu tamponné.

Réactions mises en jeu

L’indicateur est ajouté directement à la solution absorbante d’acide borique.

À T0 : il s’agit d’un milieu acide, la solution se colore en violet.
Dès que la solution commence à devenir verte c-à-d il y arrivée de NH4OH et
formation de borate d’ammonium.
On titre le borate formé par une solution d’acide sulfurique au fur et à mesure
de sa formation selon la réaction :
[NH4+, H2BO3-] + H2SO4 H3BO3 + (NH4)2 SO4
On a une reconstitution de l’acide borique. donc, on aura un virage au violet
La distillation et le titrage se font en même temps.

Expression des résultats

La quantité d’acide sulfurique mise en jeu correspond exactement à la

quantité d’ammonium fixée par l’acide borique.
1L H2SO4 1N 1Eq 14 g d’N
1ml H2SO4 N/10 0.1mEq 1.4 mg d’NK
n ml H2SO4 N/10 n 0.1mEq n 1.4 mg d’NK

4
5ème année pharmacie les éléments liés à la potabilité

n 0.1mEq PE
1000

La teneur en azote ammoniacal exprimée en milliéquivalent par litre est

donnée par la relation
n 0.1 ×1000 ×/PE
n 14 mg d’N PE
1000
La teneur en azote ammoniacal exprimée en milligrammes par litre est
donnée par la relation
1.4×1000 ×n/PE mg N.K/l

3. L’azote organique

L’azote organique est calculé par différence entre l’azote dit total et l’azote
ammoniacal
L’azote organique= azote dit total- azote ammoniacal

Norme

La concentration en azote kjeldhal ne doit pas dépasser 1 mg/l.

4. Les nitrites
a) Origines :
Origine naturelle
Les nitrites constituent une forme intermédiaire de l’azote. Ils résultent :
 Soit de l’oxydation partielle de l’azote ammoniacal sous l’action des
bactéries nitreuses du type Nitrosomonas.
 Soit de la réduction des nitrates par les bactéries dénitrifiantes.
Origine industrielle

Les nitrites peuvent également provenir de rejets industriels puisqu’ils

sont utilisés pour inhiber la corrosion des réservoirs.

Origine agricole

A la compagne, à cause de l’utilisation intensive d’engrais azotés, l’eau de

certains puits peut être particulièrement chargés en nitrates et contenir des
nitrites.

5
5ème année pharmacie les éléments liés à la potabilité

b) Dosage
La recherche et le dosage de l’azote nitreux met toujours à profit la propriété
qu’a l’acide nitreux de fournir avec une amine aromatique, telle que l’acide
sulfanilique, une réaction de diazotation ; par copulation du diazonium obtenu
avec un phénol ou une amine, on obtient une matière colorante, ce qui permet
d’effectuer une détermination colorimétrique ou spectrophotométrique.
 Méthode au réactif de Zambelli

Principe

L’acide sulfanilique en milieu chlorhydrique, en présence d’ions

ammonium et de phénol, forme avec les ions NO2- un complexe coloré jaune
dont l’intensité est proportionnelle à la concentration en nitrites.

Expression des résultats

Pour une prise d’essai de 50 ml, la courbe donne directement la teneur en NO 2-

, exprimée en milligrammes par litre d’eau.
1 mole NO2- 1 mole d’N
46 g 14 g d’N
46 mg 14 mg d’N
Cette valeur multipliée par 0.305( 14/46) donne la teneur en azote nitreux,
exprimée en milligrammes par litre d’eau.

 Méthode à la sulfanilamide

Principe

La diazotation de la sulfanilamide en milieu acide et sa copulation avec le N

(1 naphtyl) éthylène diamine donne un complexe de couleur rouge susceptible
d’un dosage colorimétrique.

Normes et conséquences
La présence de nitrite dans les eaux de consommation est un signe de pollution
transitoire. La teneur toléré est de 0.1 mg de NO2-/l.

 Intoxication aigue
La présence de nitrites peut provoquer la méthémoglobinémie, intoxication grave
des nourrissons par asphyxie.la méthémoglobinémie résulte de l’oxydation par les
6
5ème année pharmacie les éléments liés à la potabilité

nitrites du fer ferreux de l’hémoglobine en fer ferrique, qui engendre la

méthémoglobine qui est incapable de fixer l’oxygène ce qui contribue à réduire le
transport de l’oxygène des poumons vers les tissus ce qui provoque une cyanose
voir une asphyxie.
 Effets cancérigènes
Différents types de tumeurs cancéreuses ont également été observés lorsque des
nitrites et des amines ont été administrés simultanément. La présence de ses
tumeurs serait attribuable à la réaction dans l’estomac, des nitrites avec les amines
secondaires et tertiaires et à la formation de composées N-nitrosés potentiellement
cancérigènes.

5- Les nitrates

a) Origine
Les nitrates jouent un rôle très important dans le cycle de l’azote. Sous
l’action des bactéries de type Nitrobacter, les nitrites sont rapidement oxydés
en nitrates. Ces derniers sont donc le produit final de l’oxydation des dérivés
azotés.
Azote organique azote ammoniacal nitrite nitrate
Origine agricole

Les nitrates contenus dans les engrais sont entrainés par les eaux de
ruissellement.

Origine industrielle

L’élevage industriel et les énormes quantités d’excrément qui en résultent,

causent dans certaines régions, une pollution encore difficile à juguler
( élevage intensif des porcs ou des volailles).

Origine urbaine

Puisque les protéines sont la principale source d’ammoniac, on retrouve

tout les maillons de la chaine NH3-NO2- - NO3- dans les eaux polluées par
des matières fécales.

b) dosage

 Méthode au salicylate de sodium

Principe

7
5ème année pharmacie les éléments liés à la potabilité

En présence de salicylate de sodium, les nitrates donnent du paranitro-

salicylate de sodium, coloré en jaune et susceptible d’un dosage
colorimétrique.

 Méthode de Granval et lajoux

Norme et interprétation :

La présence de nitrate indique une pollution plus ancienne ou plus lointaine, en

milieu oxygéné.
 Selon l’OMS : la teneur toléré est de 10 mg d’N/l qui correspond à 44.3 mg
d’NO3-/l
 Selon les normes algériennes : la teneur toléré est de 11.3 mg d’N/l soit 50
mg NO3- /l
Une teneur supérieur à 11.3 mg/L de N(soit 50 mg/L de nitrate) est un indice de
pollution.
La norme établie pour les nitrates repose sur des études soutenant que 10 mg/l
protègent adéquatement les jeunes enfants de la méthémoglobinémie mais
également des effets toxiques potentiels pré et postnataux des nitrates. Cette
méthémoglobinémie est causée par la réduction des nitrates en nitrites dans la
cavité buccale et l’estomac
- La consommation d’eau à forte concentration en nitrates serait à l’origine de
l’apparition de cancers de l’appareil digestif, appareil urinaire, tumeurs
cérébrale. En effet les l’organisme humain peut métaboloser les nitrosamines
en espèces actives alkylantes et en puissants composés électrophile qui
attaquent les macromolécules à caractère nucléophile comme l’ADN.