Cette méthode met en œuvre une minéralisation des substances organiques par de

l'acide sulfurique concentré et chaud. Les atomes de carbone de la substance se retrouvent

sous forme de CO2 et les atomes d'azote sous forme d'ion ammonium : on appelle "masse
d'azote Kjeldahl " la somme des masses d'azote sous forme d'ammoniac, ammonium et
organique dans un échantillon.

o Cette méthode quantifie l’azote total de l’échantillon.

o Pour passer aux protéines,
o Les protéines contiennent 16% d’azote :

Elle passe par 3 étapes :

1) Minéralisation
2) Distillation
3) Titration

1. Minéralisation :

Les composés organiques contenant de l'azote (protéines et acides nucléiques dans certaines
matrices) sont décomposés à chaud, sous l'action d'acide sulfurique H₂SO₄ et d'un catalyseur.
Ce catalyseur contient du sulfate de potassium (K2SO4), qui permet d’augmenter la
température d’ébullition de l’acide sulfurique, et du sulfate de cuivre (CuSO4) qui agit comme
catalyseur de la réaction. L'azote va donner quantitativement du sulfate d'ammonium(3).

o Cette réaction chimique est réalisée dans un minéralisateur à 420°C pendant une heure.
 2 -Distillation :

L'ammoniac est ensuite déplacé de son sel par la soude, distillé par entraînement à la vapeur
d'eau et recueilli dans une quantité connue d'acide chlorhydrique en excès(3).

• Déplacement de NH4+ en NH3

• L'ammoniaque est récupérée par condensation en utilisant la vapeur d'eau par alcalinisation
du minéralisât par une base forte soude

La lessive de soude étant en excès, tous les ions ammonium sont transformés en ammoniac et
donc tout l'azote se retrouve sous forme de NH3.
 3-Titration :

o La quantité d'acide chlorhydrique n'ayant pas réagi est dosée en retour par de la soude.

o L’ammoniaque est alors dosée par une solution d’acide sulfurique (ou HCL) de normalité
connue.

o Le point d’équivalence est repéré par le changement de coloration d’un indicateur ou par
un potentiomètre.

Calcul :