TP -Outils et méthodes: Spectrophotométrie

Atelier 1:
➔ 1ère série de questions:

a) Voir la feuille de résultats.

Concentrati
Longueur
on molaire 0,025M 0,05M 0,07M 0,1M
d’onde (nm)
(mol.L-1)
700 Absorbance 0,149 0,327 0,476 0,639
ou densité
optique
800 (DO) 0,323 0,638 0,923 1,225

b)

Densité optique en fonction de la concentration molaire

1,4
f(x) = 12,144 x + 0,033
1,2

DO à 700 nm
Densité optique

0,8
Linéaire (DO à 700 nm)
0,6 Do à 800 nm
Linéaire (Do à 800 nm)
0,4 f(x) = 6,574 x − 0,005

0,2

0
0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,1 0,11
Concentration molaire (M)

c) Les courbes de régressions sont représentées sur le graphique de la question b).

- Pour DO à 700 nm: pente = 6,574 et ordonnée à l’origine = - 0,005

- Pour DO à 800 nm: pente = 12,144 et ordonnée à l’origine = 0,033

La DO à 700 nm en C=0 peut être considérée comme nulle car le spectrophotomètre a une
précisions au troisième chiffre après la virgule. Pour la DO à 800 nm, c’est donc presque zéro.
d) Pour DO à 700nm : Pour DO à 800nm :
ελ.C.L = αλ.L ελ = 12,144 / 0,1
ελ = αλ. / C = 121,44 L.mol-1.cm-1
ελ = 6,574 / 0,1
= 65,74 L.mol-1.cm-1 ελ = 12,144 / 0,07
= 173,49 L.mol-1.cm-1
ελ = 6,574 / 0,07
= 97,91 L.mol-1.cm-1 ελ = 12,144 / 0,05
= 242,88 L.mol-1.cm-1
ελ = 6,574/ 0,05
= 131,48 L.mol-1.cm-1 ελ = 12,144 / 0,025
= 485,76 L.mol-1.cm-1
ελ = 6,574 / 0,025
=262,96 L.mol-1.cm-1

Moyenne des coefficients d’extinction pour DO à 700 nm:

(65,74 + 97,91 + 131,48 + 262,96) / 4 = 139,52 L.mol-1.cm-1

Moyenne des coefficients d’extinction pour DO à 800nm:

(121,44 + 173,49 + 242,88 + 485,76) / 4 = 255,89 L.mol-1.cm-1

e) Sur le graphique de la question b) on a placé les valeurs correspondant aux 8 cuves:

(tableau ci-contre)

Longueur
Cuve 1 Cuve 2 Cuve 3 Cuve 4
d’onde (nm)
700 0,21 0,243 0,213 0,206

800 0,433 0,461 0,434 0,425

Ce qui nous donne le tableau suivant:

Valeurs pour
f) Longueur
les différentes Cuve 1 Cuve 2 Cuve 3 Cuve 4
d’onde (nm)
cuves
Densité
0,21 0,243 0,213 0,206
optique
700 Concentration
molaire 0,034 0,037 0,032 0,032
(mol.L-1)
Densité
0,433 0,461 0,434 0,425
optique
800 Concentration
molaire 0,033 0,035 0,033 0,032
(mol.L-1)
Moyenne = (0,034 + 0,037 + 0,032 + 0,032 + 0,033 + 0,035 + 0,033 + 0,032) / 8 = 0,0335 M
 Écart-type = 1,66.10-3 M

➔ 2ème série de questions:

a) Voir feuille de résultats.

b) Les mesures à 700 nm nous paraissent exploitables. En effet, les valeurs de densité optique sont
assez éloignées ce qui donne une courbe assez lisible. Les mesures à 600 nm en revanche nous
semblent moins exploitables.
c)
Graphique montrant la densité optique en fonction de la longueur de la cuve Les
1,4

1,2 f(x) = 0,32 x − 0,12

1
Densité Optique

DO à 600 nm
0,8
Linéaire (DO à 600 nm)
0,6 DO à 700 nm
0,4 Linéaire (DO à 700 nm)
f(x) = 0,07 x − 0,06
0,2

0
1 2 3 4
Longueur de la cuve (cm)

courbes de régression sont représentées sur le graphique de la question b).

Pour DO à 600 nm: pente = 0,07 et ordonnée à l’origine = - 0,06

Pour DO à 700 nm: pente = 0,32 et ordonnée à l’origine = - 0,12

Pour DO à 600 nm, la DO à L=0 peut être considérée nulle car l’ordonnée à l’origine est presque
égale à 0, par contre la DO à 700 nm elle est trop éloignée de 0.

d) Le coefficient d’absorption moyen de DO à 600 nm correspond à la pente (ou coefficient

directeur) de la courbe, c’est-à-dire 0,07.

e) ελ = αλ. / C et on a C = 0,0335 M
ελ = 0,07 / 0,0335
= 2,09 L.mol-1.cm-1

f) ελ(600nm) / ελ(700nm) = 2,09 / 139,52 = 0,015

ελ(600nm) / ελ(800nm) = 2,09 / 255,89 = 0,008

Atelier 2:
 ➔ Mesures de spectres de transmission des cuves:

a)

Spectres pour la cuve de PMMA vide et avec solvant

120

100

80
PMMA sans solvant
60
PMMA avec solvant
40

20

0
1
13
25
37
49
61
73
85
97
9
1
3
5
10
12
13
14

b) Voir feuille de résultats

Commentaire complémentaire:
On peut observer que le spectre de la cuve PMMA sans solvant est relativement stable en terme
d’absorption. En effet, les valeurs sont toujours autour de 100% de transmission et les quelques
interférences sont sûrement dues aux parois de la cuve.
Pour le spectre de la cuve PMMA avec solvant, il y a présence d’un pic de transmission à 65%
sûrement dû à l’absorption du solvant.
Ce qui prouve que avec solvant la transmission n’est pas constante alors que sans solvant elle est
relativement constante.

c)

os (%T)
115

110

105
os (%T)
100

95

90
1 10 19 28 37 46 55 64 73 82 91 00 09 18 27 36 45
1 1 1 1 1 1
 polystyrène (%T)
120

100

80
polystyrène (%T)
60

40

20

0
1 12 23 34 45 56 67 78 89 00 11 22 33 44
-20 1 1 1 1 1
OG (%T)
160
140
120
100
80 OG (%T)

60
40
20
0
1 10 19 28 37 46 55 64 73 82 91 00 09 18 27 36 45
1 1 1 1 1 1

quartz (%T)
160000
140000
120000
100000
80000 quartz (%T)

60000
40000
20000
0
1 12 23 34 45 56 67 78 89 00 11 22 33 44
1 1 1 1 1
 Transmittance des cuves (sans le quartz)
160

140

120

100 os (%T)
80 OG (%T)
polystyrène (%T)
60

40

20

0
1 9 17 25 33 41 49 57 65 73 81 89 97 05 13 21 29 37 45
-20 1 1 1 1 1 1

NB: Nous n’avons pas réussi à mettre les 4 spectres d’absorption ensembles sur un seul graphique à
cause des valeurs trouvées pour la cuve de quartz, les échelles sont beaucoup trop grandes.

d) Conclusion concernant leur domaine spectral d’utilisation sur la feuille de résultats.

➔ Mesures des spectres des différentes solutions:

Légende:
Kaki = Bleu de méthyle
Gris = CuSO4
Rouge = Éthanol
Vert = Rouge de méthyle
Bleu foncé = Jaune de méthyle
Bleu clair = Fluorescent