M1 Biologie Intégrative et Physiologie

M1 Neurosciences

UE Diphex - Différentiation et Physiologie des Cellules Excitables

La différentiation musculaire

Christine BERTHIER, PhD – MCF

christine.berthier@univ-lyon1.fr
Equipe ExSMuscle
Excitabilité et signalisation dans le muscle normal et pathologique (Dir. V.Jacquemond)

Institut NeuroMyoGène - CNRS UMR 5310 - INSERM U1217 – Univ. C. Bernard Lyon 1
Campus LyonTech La Doua, Bat. R. DUBOIS - 2e étage
8, rue Raphael DUBOIS, 69622 VILLEURBANNE Cedex
3
 Mésoderme Cellule souche

Indifférenciée
SOMITES
Non engagée: Multipotente

Division illimitée

Progéniteurs Cellule « Progéniteur »

Indifférenciée

Engagée (= Déterminée)

Division limitée

Fibres musculaires squelettiques

Muscles
4
 Cellules des
Type cellulaire: somites

Processus:
Marqueurs :
protéiques

5
 La Musculature:

Chez les amniotes: 3 groupes de muscles /myogènèse :

processus communs + spécificités

Tête

Tronc

Membres

6
Mésoblaste à la fin de la gastrulation vers le 25e jour

Dorsal
Posterieur

Anterieur
Ventral
 Embryo development in mouse and humans (erythropoiesis)

Blood 2012 119:4828-4837; doi:10.1182/blood-

8
2012-01-153486
Dorsum of human embryo,
2.11 mm in length. (The older
term primitive segments is
used to identify the somites.)

9
 extrémité
crâniale

extrémité
caudale

Embryon de poulet de 2 j
(HH13)
 Mouse and chick embryos.

Early
Stage
of
somitogenesis :

6 somites

Late
Stage
of
somitogenesis :

36 somites

Development 2009 136: 1591-1604;

doi: 10.1242/dev.021246 11
 1
2

4
14
 2

1
 DorsoMedial Lip of the Dermomyotome

VentroLateral Lip of
the Dermomyotome

Schéma d’une Coupe transversale d’un embryon : compartiments du myotome

17
C
= endomitoses

19

(D’après Mintz and Baker, 1967, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 58: 592-598.
 Myotome

CAILLE POULET

Sclérotome

Bourgeon de membre
Nucléole
de caille

Remplacement Latéral Latéral des demi-somites dans

les chimères caille/poulet.
Idem si remplacement Médial  latéral 21
Compartiments somitiques et leur dérivés Derme,
Muscles Muscles endothél
ventrola des ium,
Muscles du Derme, téraux membres muscle
dos endothélium, lisse
muscle lisse
Myotome Myotome
epaxial Dermatome hypaxial Dermatome

cellules épithéliales
cylindriques Dermomyotome epaxial Dermomyotome hypaxial

cellules
mésenchymateuses Cadrant Cadrant
=somitocèle médiodorsal latérodorsal
Transition
épithélio-
mésenchy-
mateuse

Sclérotome

Vertèbres côtes, Cartilage, Ligaments,

Tissu conjonctif 22
 Analyse après électroporation avec gène de GFP (plasmide) de la région centrale du
dermomyotome d’une somite de poulet (24h à 120h).

Cellules
épithéliales
du DM - 36h: Migration dans le
Myotome
primaire
myotome primaire des
premières cellules GFP
(+) après transition E/M
et délamination

Cellules
mésen-
chymateuses
du DM
-48h: De nombreuses
cellules GFP + ont
maintenant pénétré dans
le mytome primaire

-Modifications
morphologiques du
myotome secondaire er
présence de cellules
GFP(+)
après transition E/M et
délamination
Myotome
secondaire
 Figure 3: Greffe de cellules de cailles dans le centre
du dermomyotome
Figure 2: Electroporation avec gène de GFP des
cellules centrales du dermomyotome de poulet Greffe dans le
après 72h
dermomyotome

Myotome
primaire

Cellules de caille
vertes: QPCN +)
Immunomarquage
du myotome après 72h
QCPN + Pax7 = turquoise

2
 SOMITES

Dermomyotome
Myogénèse primaire
Myogénèse Progéniteurs
Myogénèse péri- secondaire
et post-natale Progéniteurs Myoblastes post-mitotiques
embryonnaires

Myoblastes
Cellules satellites post-mitotiques foetaux Fibres musculaires
primaires

Lame basale
Fusion
Fibres musculaires secondaires
Myoblastes
post-mitotiques

Fusion
Fibres
musculaires 26
matures
 Chez la souris Chez la souris à partir de
à partir de E11 E14

Fibres primaires et
myoblastes
embryonnaires
Fibres secondaires et
myoblastes fœtaux
Cellules satellites

Fibres matures

27

Chez la souris à partir de E17

28
Régulation par “kiss and Run” : Un mécanisme de signalisation dynamique par
contact cellule-cellule
Hiérarchie des facteurs de transcription régulant la progression le long de la lignée myogénique.

Satellite cells

Détermination

Bentzinger et al. ,Cold Spring Harb Perspect Biol 2012;4:a008342

Regul. Environnementale: Facteurs de transcription Six/Eya
gradients de
concentrations molaire et Regul.
temporelle (morphogènes) Cellulaire
Facteurs de transcription
à domaine pair et à homéobox (Hox)
Tube neural et
Pax-3 et Pax-7
Ectoderme
Protéines Wnt Kiss and Run:
voie Notch
Notochorde: SHH dépendante

Facteurs de régulation
Progéniteur myogénique (MRFs)
Myoblaste naissant
Myoblaste différencié Facteur myogénique 5 (Myf5)
Myotube Myf6 = Mrf4
Fibre musculaire Facteur de différentiation myogénique 1 (Myod1, = MyoD)
Myogénine (Myog)