Chapitre Etapes et Mécanisme de la photosynthèse

3partie 1-II
https ://www.afblu m.be/b ioafb/chlorop l/chlorop l.htm
https ://edun um.apolearn.com/course/84372 /view ?embed=true
http://nfabien-svt.fr/cours lycee2019/1ere_ens_sc2019 /03the me3/chap06.htm
http://ohayon .lucie.free.fr/articles.php?lng=fr&pg=707&prt=1
http://www.profsv t71.fr/pages/terminale-specialite-svt/de-la-plante-sauvage-a-la-plante-domestiquee/la-production-de-matire-par-les-plantes-a-fleurs.html

II- Les pigments chlorophylliens et leurs caractéristiques

https://fasoeducation.bf/cours_esu/secondaire/premiere/1ered/svt/extraction_chlorophylle_brute/co/grain_cont_extr.html (motivation)

Motivation : La couleur verte des plantes est due à la présence des chloroplastes dans les cellules chlorophylliennes des
plantes chlorophylliennes. Qui donne la couleur verte au chloroplaste et où ils sont localisés ?
Pb : comment extraire et isoler les pigments chlorophylliens ?
1-extraction de la chlorophylle brute et séparation des pigments constitutifs.
1-1-extraction de la chlorophylle brute (Doc )
Document 5 : Extraction de la chlorophylle brute
Prix de T P Presence de chlorophylle b par chromatographie
http://acces.ens-lyon.fr/acces/thematiques /evolution/archives-2/corbeille/relation s-de-parente/enseigner/activites-pratiques-et-classification/les-tp/tp-presence-de-chlorophylle-b-par-chromatographie
https:// fasoeducation. bf/cours_e su/s econdaire/ pre miere/1ere d/svt/extraction_chl orophylle_brute /co/exercice_reda ct_extr_chl. html
http://a cces .ens -lyon. fr/a cce s/the matique s/evoluti on/ar chives -2/ corbeille/r elations -de -pare nte/en seigner/a ctivites-pratiques -et-classifi cation/les-t p/prot ocoles-en-pdf/TP% 20Pres ence%20de%20phycoerythrine%20 par%20chromatographi e.pdf TP Pré sen ce de phycoérythrine par chromatographie
alcool 95°
Protocole expérimental : Protocole d’extraction d’une solution de
chlorophylle brute
- Placer dans un mortier de porcelaine un peu de sable fin.
-préparer les feuilles bien vertes (par exemple : pélargonium, chou, haricot,
épinard), coupées les en petits morceaux que vous mettez dans le mortier
- Broyer à l’aide du pilon (pour déchirer les cellules).
- Ajouter progressivement environ 10 ml d’alcool à 95° (ou d'acétone) Morceaux
(pour dissoudre les pigments), on peut ajouter de carbonates de de feuille
calcium (pour neutraliser l'acide) et continuer à broyer 5 min. Jusqu’à + pincée de
l'obtention d'une solution bien verte, sable
- Filtrer le contenu du mortier. Vous obtenez une solution verte de Solution alcoolique de
chlorophylle foliaire brute https://fasoeducation.bf/cours_esu/secondaire/premiere/1ered/svt/extraction_chlorophylle_brute/co/grain_cont_extr.html
la chlorophylle brute

1-2- Séparation des pigments chlorophylliens par chromatographie. (Doc )

http://beaussier.mayans.free.fr/IMG/pdf/chhlorophylle_et_photosynthese.pdf

Document Séparation des pigments chlorophylliens par chromatographie sur papier

http://beaussier.mayans .free.fr/IMG/pdf/chhlorophy lle_et_ph otosy nthese.pdf
http://acces.ens-lyon.fr/acces/thematiques /evolution/archives-2/corbeille/relation s-de-parente/enseigner/activites-pratiques-et-classification/les-tp/tp-presence-de-chlorophylle-b-par-chromatographie

• Protocole de la chromatographie Principe : la chromatographie consiste à entraîner des

Manipulation : séparation par chromatographie sur papier. Suivez le molécules par un solvant sur un support (papier ou gel de
protocole pour la réalisation silice). Sur un support donné et avec un solvant donné, chaque
- Repérer le bas de la bande de papier à chromatographie Whatman: pigment possède une vitesse de déplacement qui lui est propre.
extrémité opposée à l’orifice par lequel la bande sera suspendue.
- Déposer à la micropipette une goutte de pigments bruts, sur le
milieu d’une ligne à 2cm d’une extrémité bas de la bande de papier (10%)
Whatman (support). Sécher et renouveler l’opération jusqu’à obtenir
un dépôt très concentré en pigment. On peut remplacer cette opé-
ration en écrasant le coin d’une feuille avec un agitateur en répetant
l’opération plusieurs fois pour obtenir une petite tache très colorée.
10%
- Verser environ 1cm (5ml)du solvant organique dans l’éprouvette ;
préparé partir d’un mélange approprié de solvants organiques :
soit40% d’éther de pétrole et 60% d’éther diéthylique soit 5% de 60%
cyclohexane ,85% d’éther de pétrole et 10% d’acétone
-placer la bande de papier dans une éprouvette à chromatographie 20%
hermétique dans lequel ; la tache de chlorophylle brute doit être
située au-dessus du niveau du solvant. https://sites.ensfea.fr/physique-chimie/wp-content/uploads/sites/10/2016/10/chlorophylle.pdf

- Suspendre le papier à chromatographie à l’aide d’un crochet fixé Fig 1 : extraction et séparation des pigments foliaires
sur un bouchon, le placer et fermée l’éprouvette hermétiquement la Chromatographie sur couche mince (CCM). https: //sites. ens fea.fr /physi que -chimie /wp-content/uploads/sites /10/2 016/ 10/chlorophylle.pdf
 tâche de chlorophylle brute doit être située au-dessus du niveau du Fig 2 : Chromatographie de partage sur colonne de silice
solvant. - La phase fixe (support) est la silice et la phase mobile (éluant) est en
- Faire l’obscurité en recouvrant l’éprouvette d’un cache noir et éther de pétrole/ acétone. https://sites.ensfea.fr/physique-chimie/wp-content/uploads/sites/10/2016/10/chlorophylle.pdf

laisser migrer le solvant pendant 30 à50 minutes.

Le solvant monte dans la feuille (bande) par capillarité en entraînant
les pigments de manière différentielle selon leur affinité avec le
solvant ainsi ils se séparent progressivement en fonction de leur
vitesse de migration qui dépond de leur solubilité différentielle dans
le solvant (phase mobile) et de leurs affinités pour le support de
chromatographie (phase stationnaire).
Précautions
- Veiller à prendre le papier uniquement par les bords sans poser vos doigts
sur la zone de migration.
- Le dépôt ne doit pas tremper dans l’éluant
- Les bords de la bande de papier Whatman ne doit pas toucher la paroi de la
cuve à chromatographie.
- La préparation est placée à l’abri de la lumière (dénature les pigment isolés). Fractions des différents pigments (de gauche à droite : 1.Carotène,
- Autre méthode Fig.2: Chromatographie de partage sur colonne 2.chlorophylle A, 3. Chlorophylle B, 4. Xanthophylle). https://s ites.ensfea.fr/physiq ue-chimie/wp-content/uploads/s ites/10 /2016 /10/ch lorophy lle.pdf

-Analyser les résultats de la chromatographie sur papier réalisée

Prix de La production de matière par les pla ntes à fle urs http://ww w.pr ofsvt71.fr/pages/termina le-spe cialite -svt/de -la-plante -sa uvage -a-l a-plante -domestiquee /la -pr oduction-de -matire-par-l es-pla ntes-a-fle urs.html et
https://rnbi o. upmc.fr/physi o_veg_phot osynt hese_04_ pigments_1

Analyser les résultats

On peut distinguer plusieurs taches correspondantes chacune à l’un des pigments, on a donc une diversité de pigments
foliaire photosynthétiques que l’on peut classer ainsi en deux catégories principales (de bas en haut) : des pigments verts :
dont la première tâche, celle qui a le moins migré, correspond à de la chlorophylle b de couleur vert jaune. La deuxième
tâche correspond à de la chlorophylle a de couleur vert bleutée. et des pigments jaunes: dont la troisième de couleur jaune
correspond au xanthophylle et la dernière jaune-orangé au carotène .(xanthophylle +carotène =caroténoïdes)
Remarque :
- Les pigments extraits ainsi sont purs. Dans la feuille, ils étaient associés à des protéines dans les thylacoïdes des chloroplastes.
- Les pigments chlorophylliens sont solubles dans les solvants organiques : (chlorophylles, caroténoïdes).
- Les pigments non chlorophylliens insolubles dans les solvants organiques mais solubles dans l’eau : anthocyanes (bleus, rouge, jaune...).

Pb : Pourquoi les pigments sont-ils colorés ? Quel est le lien entre ces pigments et la photosynthèse ?
2- Spectre d’absorption de la chlorophylle brute et de ses pigments constitutifs 7 - Spectres d'absorption et spectre d'actio

2-1- aperçus sur la nature de la lumière et le spectre de la lumière blanche. (Doc)

http://nfabiensv t.fr/courslycee2019/1ere_ens_sc201 9/03 theme3/chap06.h tm
https ://www.afblu m.be/b ioafb/chlorop l/chlorop l.htm

Document aperçus sur la nature de la lumière et le spectre de la lumière blanche.

- MAXWELL a déduit en 1864 que la lumière est une onde électromagnétique, autrement dit une variation périodique d'un
champ électrique et un champ magnétique perpendiculaires entre eux.
- PLANCK (1858-1947), propose que l'énergie lumineuse est émise de façon discrète, c-à-d discontinue ou encore par
"grains d'énergie" appelés quanta (pluriel de quantum) ou photons.
Cette dualité ondulatoire- corpusculaire considère que la lumière est constituée de corpuscules appelés photons. A chaque
photon correspond une onde électromagnétique de longueur d’onde 
− Lorsqu'un rayon de lumière blanche (solaire ou lampe) traverse un prisme de verre, il se décompose en une infinité de
radiations monochromatiques (du grec "monos" = "unique" et "chroma" = "couleur") recouvrant tout le spectre de l'arc-en-
ciel.et allant du rouge au violet. Chaque radiation correspond à un photon ou onde électromagnétique de longueur d’onde
 c'est-à-dire la distance séparant deux points successifs en concordance de phase (deux maxima successifs, deux minima
successifs de l'onde) et sa fréquence , c'est-à-dire le nombre de cycles effectués par seconde. Le temps mis pour parcourir
une longueur d'onde est la période  .et de célérité ‘c’dans le vide (c=3, 00x108m.s)., Un photon a une masse nulle et une
énergie E. L'énergie transportée par un photon se déplace dans le vide peut-être aisément calculé à l'aide de
l'équation : : E = h. = h = h.c Unité : E en joule ; h=6,62.10-34 J.s ; T période de l’onde électromagnétique (s);
T  ‘ ’ fréquence en (Hz) ; ‘c’célérité (m.s-1). h ttps://ressour ces. unis ciel.fr/ photosynthe se/ co/grain_ 15_1. html
L’énergie d’un photon étant très faible on Sch. Explicitant les caractéristiques d'une onde
utilise souvent l’électronvolt (eV) comme
unité d’énergie.1eV = 1,60 x10-19 J.
-Autre les rayons ou ondes de la lumière
dite visible d’autre radiations ou ondes
électromagnétiques ont été découvertes
chacune d’elle est caractérisée par sa
longueur d'onde ou sa fréquence qui
détermine sa nomenclature (de gamma aux
radio), l’ensemble constitue le spectre
électromagnétique. En effet les ondes
lumineuses ne sont qu'une infime partie
d'un large éventail d'ondes électromagné-
tiques (photons) connues sous différents noms:
Remarque :
Les radiations bleues ( = 492 à 455 nm)
sont plus énergétiques que les radiations
rouges ( = 780 à 622 nm) https://slideplayer.fr/slide/2678692/

-Diffraction de la lumière blanche par un prisme .

La lumière blanche émise par le soleil ou une lampe peut être décomposée en
ses différentes radiations grâce à un prisme intercalé sur le trajet du faisceaux
lumineux : on obtient alors une bande et colorée transversalement, aux
couleurs de l’arc en ciel : c’est le spectre de la lumière blanche. Les
radiations visibles par l’œil humain ont des longueurs d’ondes comprises
entre 400 et 700 nanomètres.
2-2- Le spectre d’absorption de la chlorophylle brute. (Doc) Tav -Liz ver- hadji – p 201 http://www.profsvt7 1.fr/pages/terminale-specialite-svt/de-la-plante-sauvage-a-la-plante-domestiquee/la-production-de-matire-par-les-plantes-a-fleurs.html

Document : mise en évidence de l’absorption de certain radiations lumineuse par la chlorophylle brute : spectre d’absorption
ver- hadji – p 201
Tav -Liz

Ce montage expérimental
simple permet d’observer
la modification du spectre
de la lumière blanche
(bande en haut), lorsque on
intercale une solution de
chlorophylle brute
(contenant tous les pigments
chlorophylliens) extrait
d’une plante verte, entre
une source de lumière
Spectre d’absorption de
blanche (projecteur) et un la chlorophylle brute Faisceau lumineux
prisme. On obtient ainsi le difracté
spectre d’absorption de
la chlorophylle brute,
(bande en bas) Remarque : On peut aussi utiliser un spectroscope à main en plaçant dans un tube une
solution de chlorophylle brute.
Comparer le spectre d’absorption de la chlorophylle brute avec, le spectre de la lumière blanche et interpréter la différence

Par comparaison avec le spectre de la lumière blanche on constate que le spectre d’absorption, présente des
bandes noires au niveau des radiations violettes à., qui correspondent aux d'ondes monochromatiques (couleurs) qui
n’apparaissent plus (s’absente) dans le spectre de la lumière blanche lorsqu’il a traversé la cuve contenant la chlorophylle
brute. Ces bandes sombres correspondent aux radiations lumineuses bleues et rouges absorbées préférentiellement
par les pigments contenus chlorophylle brute, par contres elle n’absorbe pas dans le vert et le jaune (ce qui explique
la couleur verte des plantes chlorophylliennes). Ce spectre est appelé le ainsi le spectre d’absorption de la
chlorophylle brute.
2-3- Spectre d’absorption de la chlorophylle brute et des différents pigments constitutifs
(Doc).
Document : une mesurée précise du spectre d’absorption de la chlorophylle brute.
- Un spectrophotomètre permet de comparer, pour différentes
radiations lumineuses, l’énergie lumineuse transportée avant et
après la traversée d’une solution de la chlorophylle brute. Pour cela
un capteur optique est déplacé ou une batterie de capteurs est
disposée dans les différentes régions du spectre ; l’énergie
lumineuse recueillit par les capteurs est convertie en signaux
électriques envoyés à l’ordinateur. Le traitement de ces signaux par
le logiciel permet de calculer pour chaque radiation le pourcentage
d’énergie lumineuse absorbée et d’afficher directement sur l’écran
le spectre d’absorption de la chlorophylle brute. Les résultats
sont représentés par le graphe la figure (1)
a- analyser en comparant les deux spectre et déterminer, quelle
sont les radiations lumineuses absorbées par la chlorophylle brute?
- De façon comparable, les spectres d’absorptions de chacun des
pigments de la chlorophylle brute peuvent être obtenue après
séparation de ces pigments. Les résultats sont représentés sur la
fig.2 -3)
b- analyser le spectre d’absorption des pigments séparés.(Fig.2 -3)
- Tracer l’allure de générale recouvrant l’ensemble des spectres
d’absorptions des différents pigments, puis comparer cette allure
avec le spectre d’absorption de la chlorophylle brute. Que Fig1: Spectre d’absorption de la chlorophylle brute
suggère(évoque) cette comparaison ? (mélange de pigments végétaux)

Fig.3: spectre d’absorption des pigments séparés (par un spectromètre à main) Fig.2:spectre d’absorption des pigments séparés (par un spectrophotomètre)
La production de matière par les pla ntes à fle urs http://www. profsvt71.fr /pages /terminale -s pecialite-svt/de -la-pla nte-sa uvage-a -la-plante-domestiquee/la -production -de -matire -par-le s-plantes -a-fleurs. html

a- L’analyse au spectroscope de la chlorophylle brute (mélange de pigments végétaux).(fig.1)

L’analyse au spectroscope d'un faisceau de lumière traversant une solution de chlorophylle brute (solution de pigments
végétaux) révèle une absorption de certaines longueurs d'ondes : Donc les longueurs d’ondes des rayonnements
monochromatiques absorbée préférentiellement par la solution de la chlorophylle se situent entre 350 nm à 480 nm
qui correspondent aux radiations bleues, et entre 650 nm à 720nm qui correspondent aux radiations rouges.
les bandes noires correspondent à une absence d'ondes et donc au fait qu'elles aient été absorbées par les pigments contenus dans la cuve. Les pigments ont absorbé dans le rouge et dans le bleu puisque ces couleurs n’apparaissent plus dans le spectre de la lumière blanche.
b- Analyse du spectre d’absorption des pigments séparés (fig.2 -3)
https://uel.unisciel.fr/biologie/module1/module1_ch02/co/apprendre_ch2_07.html

La figure 2 et 3 montre que les différents pigments sont caractérisés par leur spectre d'absorption, dans la
gamme de longueurs d'onde visibles :
- En effet les piques d’absorption (en %) des longueurs d’ondes de chaque pigment chlorophyllien se répartissent
différemment entre les radiations bleues et rouges. La chlorophylle a absorbe la lumière dans les longueurs
d'ondes bleues (430 nm) et rouges (660 nm) ; tandis que la chlorophylle b absorbe la lumière dans les longueurs
d'ondes bleues (445 nm) et rouges (645 nm) ; les caroténoïdes, quand à elles, absorbent essentiellement dans
le bleu (entre 400 et 500nm).
- chaque pigment chlorophyllien absorbe préférentiellement
dans certaines longueurs d’onde appartenant aux couleurs Document :
rouges et le bleu pour cela ils n’ont pas toute la même couleur
- L’allure de générale du spectre d’absorption de l’ensemble de
pigments de la chlorophylliens voir (fig.2), correspond au
spectre d’absorption de la chlorophylle brute (mélange de tous
les pigments)

Conclusion (Doc ) .
http://ohayon.lucie.free.fr/articles.php?lng=fr&pg=707&prt=1

Les pigments chlorophylliens sont contenus dans la membrane

des thylakoïdes du chloroplaste. La couleur verte de la plante est
due à plusieurs pigments : les chlorophylles, les xanthophylles,
les carotènes. Les pigments donnent sa couleur à la plante car
ils ont des propriétés d’absorption de la lumière. N’ayant pas
exactement les mêmes, ils n’ont donc pas toute la même couleur.
Ils absorbent cependant tous essentiellement les longueurs
d’ondes rouge et bleu mais très peu les longueurs d’onde
vertes ; raison pour laquelle les végétaux nous apparaissent de
cette couleur.
Hypothèse : Ces longueurs d’onde absorber sont peut-être les plus
efficaces pour la photosynthèse : il s’agit du spectre d’action de la photosynthèse. Pour cette raison, les pigments chlorophylliens sont qualifiés de pigments photosynthétiques.

3- Spectre d’activité photosynthétique ou d’action de la chlorophylle brute.

3-1-mise en évidence du spectre d'action de la chlorophylle par des filtres
monochromatiques(Doc).
Document : efficacité des radiations
Expérience de Timiriazef
Timiriazef a fait pousser des plantes
en les éclairant au moyen d'un large
spectre, chaque plante étant éclairée
par une longueur d'onde donnée.
Remarque :Cependant cette expérience
est sujette à critiques car on ne connaît
pas l'intensité exacte de chaque
radiation. Timiriazef ne tenait pas compte
non plus de l'énergie de chaque photon.
Analyser les résultats et conclure.

Analyse
La quantité de dioxygène libérée exprime l’intensité photosynthétique, elle diffère selon la couleur du des rayons
lumineux du spectre visible.
Conclusion

Cette expérience a montré que la photosynthèse était maximum et efficace pour les lumières rouges et bleues, moyenne
pour le violet, faible pour le jaune et nulle pour le vert.