COLLECTE ET

ANALYSE DE LA
SEMENCE ANIMALE
Dr Bilkiss V. M. ASSANI
ATER Chirurgie - Reproduction
RAPPELS ANATOMIQUES

BARONE R., 2001. Anatomie comparée des mammifères domestiques.

Tome quatrième, Splanchonologie II. Editions VIGOT – 3ème édition,
75006 Paris, 888p.
 RAPPELS ANATOMIQUES
Organes Nombre et Position Fonctions

Testicules Position sous-inguinale pendants entre les Elaboration des spz

cuisses chez les Ruminants et près de l’aine Sécrétion des hormones sexuelles mâles
chez l’Etalon
Position périnéale sous-anale chez le Verrat
Enveloppes Scrotum Thermorégulation
testiculaires Tunique celluleuse Protection : fuite en cas de choc ou de compression
Sac fibreux Fixation du crémaster et protection du testicule
Muscle Crémaster Thermorégulation
Voies spermatiques Epididymes, Canaux déférents et Urètre Maturation et acheminement des spz vers les voies
génitales femelles
Glandes annexes Vésicules séminales, Glandes de Cowper et Elaboration du liquide spermatique pour la dilution et la
Prostate nutrition des spz afin de leur faciliter survie et transport
Pénis « S » pénien post-scrotal (fibro-élastique) les Accouplement
Ruminants, pré-scrotal chez le Verrat et
absent chez l’Etalon (musculo-vasculaire)
RAPPELS PHYSIOLOGIQUES

Déterminisme hormonal de la
production de sperme

Bonnes, G., Desclaude, J., Drogoul, C., Gadoud, R., Jussiau, R.,
Montméas, L., et al., (2005). Reproduction des animaux d’élevage.
Educagri édition, deuxième édition, 407 P.
 RAPPELS PHYSIOLOGIQUES

Pénis = urètre pénien + muscles + formations érectiles

Tissus érectiles = TC parcouru par un système de capillaires s’élargissant en lacunes et
cavernes et situés dans les corps caverneux et spongieux
RAPPELS PHYSIOLOGIQUES

Contrôle neuro-hormonal de
l’érection et de l’éjaculation
Phénomènes réflexes
contrôlés par les centres
nerveux supérieurs

Bonnes, G., Desclaude, J., Drogoul, C., Gadoud, R.,

Jussiau, R., Montméas, L., et al., (2005).
Reproduction des animaux d’élevage. Educagri
édition, deuxième édition, 407 P.
 FACTEURS DE VARIATION
• Saison et Photopériodisme : intérêt de la mélatonine
• Age : puberté, maturité sexuelle, vieillissement
• Alimentation : restrictions énergétiques et protéiques
• Etat général : infection, baisse de la pulsatilité LH, intégrité physique des appareils
reproducteur et locomoteur
• Environnement social : réactivité sexuelle du mâle dépendante de la capacité
stimulante de la femelle, ratio mâle/femelles (fréquence récoltes), régie
d’accouplement
• Stress : activation de la fonction corticotrope
• Agents toxiques : phyto-œstrogènes, cadmium
• Facteurs génétiques : race, individu modulant les facteurs environnementaux
 RÉCOLTE DU SPERME
Techniques Avantages Inconvénients / Limites
Vagin Bonne qualité de la semence Nécessité d’entraîner les mâles non
artificiel puisque reproduction des CNTP seulement à la présence humaine mais
du vagin naturel également aux manipulations et surtout à
Observation de la capacité à la collecte de semence avec un vagin
saillir du mâle artificiel
Nécessité de susciter sa motivation avec
une femelle en chaleurs (chaleurs
naturelles ou induites)
Incapacité à collecter les mâles qui
refusent de donner le coup de rein
concomitant de l’éjaculation et nécessaire
à la collecte au vagin artificiel
https://youtu.be/lR3NXk6-3as
 RÉCOLTE DU SPERME
Techniques Avantages Inconvénients / Limites
Electro- Facilité de récolte avec un matériel Baisse de la qualité et la quantité du
éjaculateur facilement transportable et sperme recueilli
pouvant fonctionne sur mode Inconfort ou douleur du mâle lors des
automatique stimulations électriques
Examen de la verge lors de
l’érection
Possibilité de collecter les mâles
incapables de donner le coup de
rein, à faible libido, avec défauts
physiques empêchant le saut,
refusant le VA
 RÉCOLTE DU SPERME
Techniques Avantages
Massage Examen de la verge lors de
l’érection
Possibilité de collecter les mâles
à faible libido, avec défauts
physiques empêchant le saut,
refusant le VA
Inconvénients / Limites
Irritation de la muqueuse rectale
Faible fréquence des érections observées
Difficulté à masser des mâles peu dociles
Technique assez laborieuse (2-3mn)
 ANALYSE DU SPERME
❑ POURQUOI? ❑ COMMENT?
• Analyses macroscopiques
• Évaluation du potentiel reproducteur d’un
✓ Volume
mâle avant achat ou saison de reproduction ✓ Couleur
✓ Apparence
• Détermination des caractéristiques de
• Analyses microscopiques
l’éjaculat et vérification de sa qualité
✓ pH
• Investigation de l’infécondité de troupeau ✓ Motilité
✓Concentration
• Calcul optimal de la dose à inséminer
✓ Morphologie
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses macroscopiques

Paramètres Volume (ml) Couleur Consistance

Taureau : 5 (1-12) Taureau, Chien, Rongeurs : Crémeuse
Bélier : 1 (0,1-1,5) Blanchâtre
Bouc : 1,2 (0,5-2,5) Bélier, Bouc : Blanc-
Verrat : 300 (150- jaunâtre
700) Verrat, Etalon : Blanc-
Etalon : 100 (20-300) laiteux, Grisâtre
Brunâtre (éléments Laiteuse
sanguins dégénérés) Liquide
Rosée ou Rougeâtre (sang) Trouble
Jaunâtre (pus, urine)
Bleuâtre (faible
concentration)
HIRECHE S., Physiologie de l’activité sexuelle mâle https://fac.umc.edu.dz/vet/Cours_Ligne/cours_21_22/Physio_rep_A3/Chapitre_V.pdf
 ANALYSE
• Analyses microscopiques
DU SPERME
✓ Motilité totale
✓ Motilité progressive
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Motilité totale
0 = Immobilité totale
1 = Mouvements individualisés
2 = Mouvements très lents
3 = Motilité massale générale de faible amplitude
4 = Motilité massale rapide, sans tourbillons
5 = Motilité massale rapide, avec tourbillons

Note 0 1 2 3 4 5
% spz 0% Environ Environ Environ Environ Près de
mobiles 20% 40% 60% 80% 100%

Présentation de la coopérative de l’AIGLE. http://www.cia-laigle.com/laboratoire.htm

 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓Motilité progressive
Critères Note
0 = Pas de déplacement
Azoospermie (absence de 0
1 = Déplacements très lents ou
Tremblements ou Oscillations de la queue spz)
2 = Déplacements lents, Tremblements, Absence de spz vivants 1
Mouvements inorganisés, Déplacements (absence de mobilité, spz
rapides de qq uns morts)
3 = Déplacements curvilinéaires sans 25% de spz vivants 2
tremblement 60% de spz vivants 3
4 = Déplacements rapides à trajectoire 80% de spz vivants 4
rectiligne ou courbe
100% de spz vivants 5
5 = Déplacements rectilignes et rapides
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Motilité globale
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ pH corrélé à la concentration et à l’existence d’une infection urinaire
✓ Plus un sperme est concentré, plus son pH est acide
✓ Si le pH est au-dessus des valeurs usuelles, il peut indiquer une infection
urinaire.
Taureau : 6,5-6,9
Bélier : 5,9-7,3
Verrat : 7,3-7,9
Etalon : 6,2-7,8
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Concentration (10⁹ spz/ml)
Taureau : 1,2 (0,5-2,5)
Bélier : 4 (1,5-6)
Bouc : 3 (1-5)
Verrat : 0,3
Etalon : 0,15 (0,03-0,8)

0 1 2 3 4 5 6
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Autre méthode : Hématimètre
- Dilution (1/10, 1/100) avec
solution de NaCl hypertonique à
3%
- Nombre de spz par ml de
semence = (Nombre de spz
comptés x facteur de dilution) /
(Surface considérée (mm²) x
profondeur des chambres)

https://youtu.be/O3O8V0Qd_Gk
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Autre méthode : NucleoCounter
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Autre méthode : Cytométrie
en flux
- Technique de caractérisation
individuelle, quantitative et
qualitative de particules en
suspension dans un liquide
- Viabilité, Concentration, Niveau
d'oxydation, Viabilité et
Intégrité de l'acrosome, Activité
des mitochondries, Fluidité de
la membrane
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Tout en un : système CASA (Computer Assisted Sperm Analysis)
Analyse automatique, répétitive et précise d’un échantillon de semence selon
les paramètres suivants :
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Morphologie
Morts et Anormaux ≤ 25%
Vivants > 60%

Dr. L. Brito
Dumont P., 1997. Appréciation de la fonction sexuelle du taureau reproducteur. Point Vétérinaire 28 (185), 19-30
 ANALYSE DU SPERME
• Analyses microscopiques
✓ Morphologie

https://youtu.be/j07wUoSi9LI
 CONSERVATION DE LA SEMENCE
• Objectif de la dilution: Accroître le volume total de la masse spermatique, assurer un
milieu favorable à la survie des spz et réaliser à partir d’un seul éjaculat l’insémination
d’un grand nombre de femelles.

• Critères d’un bon dilueur

✓ Avoir un pH et une pression osmotique voisins de ceux du sperme de l’espèce
concernée
✓ Ne pas contenir de substances toxiques pour les spz
✓ Contenir des substances favorables au métabolisme, à la vitalité et la longévité des
spz
https://youtu.be/Bo81aUotGwI
✓ Être facile à préparer et peu couteux
 CONSERVATION DE LA SEMENCE
• Types de dilueurs
✓ Pour semence fraîche/réfrigérée à base de lait écrémé en poudre
✓ Pour semence congelée : + jaune d’œuf et glycérol (cryoprotecteur)
➢ Le volume du dilueur est déterminé en fonction :
✓ du volume de l’éjaculat
✓ de la concentration de l’éjaculat en spermatozoïdes
✓ du nombre de spermatozoïdes souhaité par dose d’IA
Caractéristiques de la production de semence dans différentes espèces
 CONSERVATION DE LA SEMENCE
• Calcul du volume final de dilueur à ajouter pour l'utilisation de semence de bélier
✓ Volume de l'éjaculat Vo=1,2ml
✓ Concentration spermatique initiale Co = 4 600 x 106 spz/ml
✓ Nombre de spermatozoïdes collectés No = Vo x Co = 5 520 x 106 spz
✓ Concentration finale souhaitée CF = 1 600 x 106 spz/ml
✓ Volume final total à la concentration souhaitée VF = No/CF = 3,45 ml
✓ Volume final de dilueur à ajouter V = VF - Vo = 2,25 ml
 CONSERVATION DE LA SEMENCE
• Mode d’utilisation de la semence
✓ Pour une utilisation directe :
conditionnement en doses maintenues
dans un bain-marie (thermos) à 36-38°C
✓ Pour une utilisation à court terme dans
les 2-3j : conservation au frais (4-17°C)
✓ Pour une utilisation à long terme :
conservation dans une bonbonne
contenant de l’azote liquide à – 196°C
après conditionnement
MERCI POUR VOTRE
AIMABLE ATTENTION