LABORATOIRE DE DÉVELOPPEMENT ET D’ANALYSES

7, rue du Sabot - B.P. 54 - 22440 PLOUFRAGAN - Tél. 02 96 01 37 22 - Télécopie 02 96 01 37 50 – contactLDA@cg22.fr

Conseils pour réaliser un « bon » prélèvement de surface destiné à

une analyse microbiologique et conditions générales des analyses

Le contrôle des opérations de nettoyage et de désinfection doit être réalisé sur des surfaces propres et
sèches et si possible avant toute reprise d’activité.
Température T° Délai mise en
Type de
Conditions de prélèvement et durée de stockage analyse
prélèvement
transport LDA (jour ouvré)
Chiffonnette - Au préalable, se laver ou se désinfecter les mains.
(avec Recherche
neutralisant)
- Ouvrir le sachet sans introduire les doigts. qualitative,
- Enfiler des gants stériles par-dessus les manches. T° ambiante
- Saisir la chiffonnette et la déplier. < 48 h
- Essuyer la surface (100-1000 cm²) horizontalement et verticalement en
pour recherches
qualitatives changeant de côté la chiffonnette, insister dans les coins et les zones Recherche
(Listeria, humides. quantitative,
Salmonella) ou
- Remettre la chiffonnette dans le sachet en évitant les frottements de la de
quantitatives sur
chiffonnette sur l'extérieur du sachet. préférence
grandes surfaces
(plan de travail, 1-8°C
- Refermer le sachet de manière à garantir l'absence de fuites.
table, évapora- < 24 h
- Si recherche de Listeria avec d'autres analyses, faire un 2ème prélèvement.
teur, gaine…) 3°C ± 2°C 24H
Ecouvillon - Au préalable, se laver ou se désinfecter les mains.
(avec - Sortir l'écouvillon de son emballage stérile et humidifier l'extrémité en
neutralisant) plongeant dans un tube contenant le diluant.
- Presser l'extrémité de l'écouvillon contre la paroi du tube pour l'excès de
De
liquide. Placer l'extrémité de l'écouvillon sur la surface à étudier et tracer
préférence
des stries sur une surface estimée entre 20 cm² et 100cm², tout en
pour recherches 1-4°C
qualitatives
faisant tourner l'écouvillon entre le pouce et l'index, dans deux directions
< 4 h
(Listeria, perpendiculaires l'une par rapport à l'autre.
Salmonella) ou - Mettre l'écouvillon dans le tube avec le diluant et rompre ou couper le
quantitatives sur
petites surfaces
bâtonnet dans des conditions aseptiques.
(20 à 100 cm²) - Si recherche de Listeria avec d'autres analyses, faire un 2ème prélèvement.
Boite contact Cf page
3°C ± 2°C Le jour même
ou Pétrifilm Cf page suivante suivante

Identifier vos échantillons à l’aide d’un marqueur indélébile. Joindre une feuille de demande d'analyse I-341-055 (sans
contact direct avec l'échantillon).

Dépôt des échantillons : période recommandée du lundi au jeudi midi ; éviter le vendredi ou veille de jour férié. Le
transport peut être assuré par un préleveur du LDA22 ou depuis un point de dépôt de la navette LDA22 ou par vos soins.
Critères d'acceptabilité des échantillons et accréditation COFRAC
Le non-respect des recommandations précédentes (intégrité de l'emballage, quantité, température, délai…) peut entraîner :
• une altération de l'échantillon, avec un impact éventuel sur les résultats et dans ce cas une réserve du laboratoire sur les résultats,
• une analyse hors accréditation, pour les paramètres sur lesquels le LDA22 est accrédité par le COFRAC,
• un refus par le laboratoire de réaliser l'analyse, dans les cas les plus difficiles.
Les résultats des analyses COFRAC sont édités avec logo, sous réserve du domaine d'application de la méthode (pour davantage de détails sur la
portée d'accréditation et sur ses conditions d'application, contacter le LDA22 ou consulter le site du COFRAC www.cofrac.fr - N°
d'accréditation du LDA22 : 1-0632, essais), et sauf problème particulier qui vous sera signalé en cas d'impact sur les résultats.
La réfrigération des milieux de culture liquides pendant le week-end a fait l'objet d'une validation AFNOR ou interne au LDA22 (recherche de
Listeria, Salmonelles, Staphylocoques, dénombrement de Clostridium perfringens).
Délai d'obtention des résultats et Durée de conservation des échantillons au laboratoire après analyse

Les délais dépendent de l'analyse demandée (généralement une semaine à réception au laboratoire). Le rapport d'analyse est envoyé lorsque
tous les paramètres demandés ont été analysés. Néanmoins, nous pouvons vous fournir des résultats partiels sur demande.

En cas d'urgence ou de nombre important d'échantillons ou souhait d'un délai particulier, consulter le laboratoire avant le dépôt de vos
échantillons et le préciser sur la demande d'analyse.

Les contrôles d'environnement ne sont pas conservés.

CC-340-002-00
 PRELEVEMENT DE SURFACE PAR PETRIFILM OU BOITE CONTACT

Des PETRIFILMS ou des BOITES CONTACT (1 boîte spécifique par germe) sont disponibles selon vos besoins pour
comptage de la flore aérobie mésophile (nous contacter en cas de demande spécifique : entérobactéries, coliformes,
levures et moisissures, etc…).
Exemples de surfaces à prélever : planche de découpe, plat, plan de travail, bac, poignée de porte, étagère de chambre
froide…

♦ Conservation avant et après utilisation

- au froid (4°C),
- dans leur conditionnement d’origine, La Date Limite d'Utilisation (DLU) ne doit pas être
- à l’abri de toute contamination,
dépassée à la date de retour au LDA22.
- protégés du dessèchement,
- à l’abri de la lumière.
Un rappel par tél ou par fax vous sera adressé afin d’éviter de dépasser les dates limites d’utilisation. Les
PETRIFILMS ou boîtes contact vous seront facturés en cas de non retour au LDA22.

♦ Utilisation des pétrifilms Au préalable se laver ou se désinfecter les mains :

1- Sortir les PETRIFILMS de leur emballage. lavage ou gel ou lingette.

2- Soulever doucement le film supérieur avec lequel la 3 – Appliquer le cercle de gélose du film supérieur sur la
gélose se décolle, en évitant de toucher cette gélose surface à contrôler. A l'aide d'un doigt, assurer le contact
(représentée par le rond sur le schéma) entre la gélose et la surface en appuyant doucement sur la
face externe du film supérieur sans l'écraser.
4- Laisser en contact environ 10 secondes.
5- Retirer doucement le PETRIFILM de la surface, refermer le PETRIFILM sans toucher ni endommager la gélose. Bien
noter sur le bord du PETRIFILM, l’intitulé complet ou le numéro correspondant à la surface contrôlée.
6- Désinfecter à l'aide d'une lingette la surface prélevée afin d'éliminer les traces de gélose ou remettre à laver.

♦ Utilisation des boîtes contact

1- Enlever le couvercle de la boîte contact et appliquer la surface de la gélose sur la surface à contrôler pendant 10
secondes en exerçant une légère pression (cependant, ne pas écraser la gélose).
2- Replacer le couvercle de la boîte contact et utiliser du scotch pour maintenir le couvercle fermé.
3- Bien noter, sur le couvercle de la BOITE CONTACT, l’intitulé complet ou le numéro correspondant à la surface
contrôlée.

♦ Expédition au laboratoire, résultats

Les pétrifilms peuvent être expédiés par courrier à température ambiante dans un sachet plastique fermé, le jour de
l’application, avec la fiche I-341-055 correctement renseignée.

Affranchir avec 1 timbre au tarif lettre si 1 à 4 PETRIFILMS envoyés (< 20 grammes) dans une enveloppe classique.
avec 2 timbres au tarif lettre si 5 à 18 PETRIFILMS envoyés (< 50 grammes) dans une enveloppe classique.

Les boites contact seront de préférence déposées à un point de dépôt de la navette du LDA22, au réfrigérateur, dans
un sachet plastique fermé, accompagnées de leur fiche I-341-055.

Les résultats qui correspondent à un nombre de bactéries ou levures/moisissures par surface contrôlée vous parviendront
par la poste, sous huitaine.
CC-340-002-00