PATHOLOGIES DU CUIR CHEVELU

Apports de l’analyse des cheveux en toxicologie

Thomas Gicquela, Sylvie Lepagea, Isabelle Morela,*

RÉSUMÉ
Ces dernières années, un intérêt croissant s’est manifesté pour la recherche
et le dosage de xénobiotiques dans les laboratoires de toxicologie.
L’utilisation de matrices alternatives comme les cheveux permet d’élar-
gir la fenêtre de détection des xénobiotiques. En revanche, celle-ci est
soumise à des contraintes de performances analytiques en termes de
sensibilité et de spécificité. De plus, de nombreuses précautions quant à
l’interprétation des résultats doivent être observées. Cet article présente de
manière synthétique les différents aspects, modes d’emploi, précautions
et applications de l’analyse toxicologique des cheveux.
Toxicologie – cheveux – xénobiotiques – médico-judiciaire.
SUMMARY
Interest of hair testing in toxicology
These last few years, an increasing interest appea-
red for the search and the dosage of xenobiotics at
the laboratory. The use of the alternative hair matrix
allows a large detection time window. However, this
requires constraints in analytical performances such as
sensitivity and specificity and major cautions should
be observed in result interpretations. This article
presents various aspects of the use, cautions and
applications related to hair testing.

1. Introduction Toxicology – hair testing – xenobiotics – forensic.

Dans le contexte des analyses toxicologiques réalisées dans

les laboratoires spécialisés, la recherche de techniques
et méthodologies permettant de détecter des traces de
xénobiotiques est une préoccupation majeure des toxi-
cologues analystes. De plus, la recherche d’échantillons
biologiques permettant de déceler une exposition ancienne
aux xénobiotiques oriente vers l’utilisation de matrices dites
« alternatives » telles que les cheveux, ou autres phanères
ou bien encore vers la moelle osseuse lorsque l’individu est
décédé [1]. Cette double préoccupation de détecter des
traces de xénobiotiques au moyen d’outils technologiques
performants en termes de sensibilité et de spécificité et
de pouvoir élargir la fenêtre de leur détection a conduit
à l’utilisation des cheveux comme matrice d’exploration.
Dans cet article, nous décrirons de manière synthétique
les modes d’utilisation, précautions, interprétations et
applications liés à l’analyse des cheveux en toxicologie.
2. Contexte et objectifs
de l’analyse des cheveux
Habituellement, les analyses toxicologiques au laboratoire
sont principalement réalisées à partir de sang ou d’urines,
a Laboratoire de toxicologie biologique et médico-légale
Centre hospitalier universitaire Pontchaillou
Rue Henri-Le Guilloux
35033 Rennes cedex
* Correspondance
isabelle.morel@chu-rennes.fr
article reçu le 12 février, accepté le 23 mars 2013
© 2013 – Elsevier Masson SAS – Tous droits réservés.
matrices classiques et facilement accessibles. Ces matrices
fournissent des informations sur la présence de substances
médicamenteuses, de stupéfiants ou d’autres toxiques dans
une période de temps rapprochée par rapport au moment
du prélèvement. Ainsi le sang fournit généralement des
indications sur la présence ou non de xénobiotiques dans
un délai de quelques heures ou jours après exposition.
Quant aux urines, les délais sont là aussi dépendants des
substances et de leur pharmacocinétique et dépassent
rarement plusieurs jours en cas d’exposition unique. La
recherche de nouvelles matrices, adaptées à la mise en
évidence d’expositions anciennes remontant à plusieurs
semaines, voire plusieurs mois, oriente le toxicologue vers
l’utilisation des cheveux.
Sur la base d’une vitesse de pousse d’environ 1 cm par
mois, une simple mèche de cheveux de plusieurs centi-
mètres permet d’effectuer des recherches toxicologiques
sur des périodes remontant à plusieurs mois, ce qui élargit
considérablement la fenêtre de détection des xénobiotiques
et complète utilement l’utilisation des autres matrices
classiques [2].
3. Imprégnation des cheveux
par les xénobiotiques
D’un point de vue physiologique, le cheveu comprend deux
parties : une partie vivante incluse dans le follicule pileux
et la partie morte du cheveu qui sort du follicule pileux au
fur et à mesure de la pousse. Le follicule pileux, toujours
annexé à une glande sébacée, est richement vascularisé
par un réseau de capillaires participant à l’incorporation
des xénobiotiques dans les cheveux [3]. Ainsi, il existe
plusieurs hypothèses quant au mode d’incorporation des
substances. L’incorporation peut être active, via le sang et

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 les sécrétions dermiques. Dans ce cas, les xénobiotiques
présents dans le sang et les tissus diffusent vers les cel-
lules en croissance au sein du bulbe pileux et sont piégés
dans la structure kératinisée au moment de la constitu-
tion du cheveu. La présence de mélanine est importante
dans la rétention de certaines molécules xénobiotiques
au sein du cheveu. Les sécrétions telles que la sueur ou
celles des glandes sébacées interviennent elles-aussi dans
l’imprégnation des cheveux et l’incorporation active des
xénobiotiques dans la matrice kératinisée (figure 1) [4].
Complémentairement à ces mécanismes d’incorporation
dits « actifs » via le sang et les sécrétions, il existerait un
mode d’incorporation dit « passif » lorsque l’individu n’a pas
consommé la substance détectée mais qu’il y a été exposé
de manière passive. Si l’incorporation des xénobiotiques
via le sang et les sécrétions se fait dans la région médul-
laire de la matrice kératinisée, dans le cas de la contami-
nation passive, elle intervient plus superficiellement au
niveau cortical du cheveu. Ainsi une atmosphère chargée
de fumée de cannabis est susceptible de conduire à une
imprégnation passive de la partie corticale du cheveu qu’il
conviendra d’éliminer au moment des analyses par des
méthodes de décontamination.
Figure 1 – Modes d’incorporation et de dégradation
des xénobiotiques dans le cheveu.

















retrouvé dans les cheveux. Il
Un autre exemple d’incorporation passive dans le cheveu
correspond à celui du fœtus dont la mère consomme une
substance. Cette substance, au cours des trois derniers
mois de la grossesse, période de formation des cheveux,
est susceptible de se retrouver dans les cheveux du nou-
veau-né suite au transfert placentaire [5].
D’une manière générale, la nature du xénobiotique et notam-
ment ses propriétés physicochimiques, vont intervenir dans
son incorporation dans les cheveux. Ainsi des structures
chimiques de poids moléculaire inférieur à environ 800 Da
présentant un atome d’azote, une longue chaîne N-alky-
lée ou un cycle N-benzénique vont présenter une bonne
incorporation dans les cheveux [6]. De plus, une molécule
organique lipophile va diffuser rapidement au travers des
membranes de la matrice. Pour les molécules hydrophiles,
leur ionisation (pKa) et le gradient de pH entre la matrice
sanguine (pH = 7,4) et les cheveux (pH = 5, 5) sont à prendre
en considération dans leurs mécanismes de diffusion. Ainsi,
les drogues basiques telles que la cocaïne (pKa = 8,6),
la morphine (pKa = 8,1), l’amphétamine (pKa = 9,9)
vont facilement être incorporées dans les cheveux.
Il est important de noter que les substances incorporées dans
les cheveux correspondent principalement aux molécules
mères et faiblement à leurs
métabolites, à l’exception de
l’éthanol où c’est son méta-
bolite glucurono-conjugué,
l’éthyl-glucuronide, qui est




















est ainsi possible de retrou-











ver dans les cheveux de la




 






 
cocaïne ou de la 6-mono-







acétyl-morphine (provenant
de l’héroïne), plutôt que leurs
métabolites, ce qui n’est pas
le cas des autres matrices



sanguines et urinaires pour
lesquelles les molécules
mères disparaissent rapi-
dement au profit de leurs
métabolites [7]. L’analyse des
cheveux permettra ainsi de
confirmer une consomma-
tion d’héroïne (plutôt que de
morphine), molécule difficile
à mettre en évidence dans le
sang du fait de sa demi-vie
extrêmement brève.
Les autres facteurs influen-




çant l’incorporation des







xénobiotiques sont la nature
du cheveu et notamment
sa couleur et son origine
ethnique, ainsi que la pré-
sence de soins capillaires




(cosmétiques, décoloration).





Ainsi, la mélanine selon son
type (eumélanine ou phaéo-
mélanine) et son degré
d’oxydation, (qui donne la
Adapté de Pragst F, et al. 2006 [4].
couleur naturelle au cheveu)

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Figure 2 – Préparation de la mèche de cheveu avant segmentation.
conduit à des différences d’incorporation des xénobio-
tiques par variation d’affinité. Dans ce sens, les cheveux
dépourvus de mélanine (cheveux gris, blancs ou albinos)
présentent une plus faible capacité d’incorporation des
xénobiotiques [8, 9]. Par ailleurs, les traitements cosmé-
tiques tels que les permanentes, décolorations, colora-
tions peuvent conduire à une perte partielle du contenu
en xénobiotiques des cheveux par dégradation, notam-
ment sous l’effet du peroxyde d’hydrogène ou d’autres
produits décolorants. De même, le vieillissement des
cheveux, avec augmentation de leur porosité, sous l’effet
du soleil ou de la pluie, peut conduire à des pertes en
xénobiotiques par dégradation (figure 1) [4].
4. Recueil des cheveux
et stockage des échantillons
Les nombreux facteurs pouvant influencer l’incorporation
des xénobiotiques dans les cheveux sont à prendre en
considération dans le mode de recueil des cheveux, de
préparation des échantillons pour analyse, dans le stockage
des cheveux et l’interprétation des résultats.
D’une manière générale, la mèche de cheveux doit être
prélevée au ras du cuir chevelu (sans arracher les cheveux)
par coupure avec des ciseaux dans la région du vertex
postérieur qui présente une vitesse de pousse et un taux
de remaniement cellulaire les plus constants d’un individu
à l’autre. Le diamètre de la mèche doit être de l’ordre de
celui d’un crayon à papier (80 à 100 cheveux) et cette
mèche doit être orientée, par nouage d’une cordelette, de
manière à différencier la racine de la pointe. Il sera ainsi
PATHOLOGIES DU CUIR CHEVELU
possible de réaliser une analyse segmentaire sur plusieurs
périodes de temps, selon la longueur de la mèche et de
déterminer les périodes d’exposition (figure 2).
Au moment du prélèvement des cheveux, il faut tenir
compte du délai d’apparition des substances à partir du
moment d’exposition et d’incorporation dans le follicule
pileux jusqu’à leur apparition dans les cheveux à la surface
du cuir chevelu. Ce délai est estimé à 3 semaines minimum
après la prise de la substance.
Le stockage de la mèche de cheveux est réalisé à tempé-
rature ambiante, à l’abri de la lumière et de l’humidité. Sa
facilité de conservation rend cette matrice très intéressante
en toxicologie médico-judiciaire.
5. Analyse des cheveux
Les xénobiotiques incorporés dans les cheveux sont pré-
sents en faible concentration, ce qui élimine la possibilité
d’utiliser les techniques analytiques de routine en toxi-
cologie et nécessite le recours à des technologies plus
sensibles et spécifiques telle que la spectrométrie de
masse. Actuellement, mise à part l’analyse des métaux, la
plupart des analyses toxicologiques sur les cheveux sont
réalisées par des techniques séparatives (chromatogra-
phie liquide ou gazeuse) couplées à la spectrométrie de
masse en tandem (triple quadripolaire) ou en masse exacte
(de type Orbitrap ou temps de vol) [10]. Des recomman-
dations quant aux analyses à effectuer font l’objet d’un
consensus de la Société française de toxicologie analytique
(SFTA) de novembre 2003 qui décrit les analyses à réaliser
selon les substances recherchées [11].
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 Au préalable, la mèche de cheveux orientée doit être
décontaminée par lavages successifs par des solutions
aqueuses et des solvants organiques (de manière à éliminer
la contamination passive et les traitements cosmétiques).
La mèche, en fonction de sa longueur, est ensuite seg-
mentée sur la base d’1 cm correspondant à une période
de temps d’environ un mois. Chacun des segments doit
ensuite être pulvérisé et un aliquote de 20 mg de cheveux
sera hydrolysé de manière à libérer les xénobiotiques
contenus dans la matrice des cheveux. Ce n’est qu’après
extraction et concentration éventuelle de l’hydrolysat que
l’analyse sera effectuée.
6. Interprétation des résultats
L’analyse séquentielle de segments de cheveux apporte
des renseignements quant à la période d’exposition ou
de consommation des xénobiotiques.
Un des aspects concernant le cheveu le plus discuté
est l’existence d’une relation entre la dose consommée
et la concentration retrouvée dans les cheveux. Ainsi il
apparaît que la concentration plasmatique et la demi-vie
d’une substance ne déterminent pas à elles seules la
concentration retrouvée dans les cheveux. En effet, dif-
férentes propriétés liées à la molécule, comme son pKa,
sa liposolubilité, son métabolisme ainsi que la nature des
cheveux interviennent sur son taux d’incorporation. Ce
sont les raisons pour lesquelles, l’interprétation doit être
menée avec une extrême vigilance [10].
La Society of hair testing (SoHT) a émis des recomman-
dations pour les analyses de cheveux dans un cadre d’ex-
pertises toxicologiques médico-judiciaires concernant
notamment les seuils de positivité des différentes classes
de stupéfiants [12]. Des doses minimales détectables
Références
[1] Bévalot F, Gustin MP, Cartiser N, et al. Using bone marrow matrix to
analyze meprobamate for forensic toxicological purposes. Int J Legal
Med 2013. doi: 10.1007/s00414-013-0833-8 (en ligne)
[2] Barroso M, Gallardo E, Vieira ND, et al. Hair: a complementary
source of bioanalytical information in forensic toxicology. Bioanalysis
2011;3:67-79.
[3] Konstrand R, Scott K. Drug incorporation into hair. In: P. Kintz
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Raton:Taylor & Francis Group;2007:1-23.
[4] Pragst F, Balikova M. State of the art in hair analysis for detection of
drug and alcohol abuse. Clinica Chimica Acta 2006;370:17-49.
[5] Vinner E, Vignau J, Thibault D, et al. Neonatal hair analy-
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25:421-32.
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hair. Forensic Sci Int 2012;218:28-30.
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dans les cheveux ont pu être déterminées pour quelques
substances [6], permettant ainsi de différencier un résul-
tat réellement négatif (absence de drogue) d’un résultat
faussement négatif pour lequel la substance est présente
en quantité trop faible pour être détectable. En effet, les
concentrations retrouvées dans les cheveux sont faibles,
ce qui conditionne les techniques à mettre en œuvre pour
leur détection. Les concentrations de l’ordre du pg/mg de
cheveux correspondent le plus souvent à une exposition ou
prise ponctuelle ou unique, alors que des concentrations
de l’ordre du ng/mg de cheveux sont le signe d’une prise
plus importante, répétée dans le temps, comme lors d’un
traitement thérapeutique ou d’une toxicomanie.
7. Les applications
Alors que les premières applications médicales en matière
d’analyse des cheveux remontent à plusieurs dizaines
d’années, notamment avec le dosage de l’arsenic [13],
l’évolution technologique permettant l’analyse des subs-
tances organiques à l’état de traces a trouvé de nombreuses
applications en toxicologie. Ainsi l’analyse des cheveux
permet d’établir un profil de toxicomanie, de contrôler
le sevrage, ou de suivre l’observance thérapeutique. De
même, l’infraction à la législation sur les stupéfiants, la
mise en évidence d’exposition in utero aux xénobiotiques
et la soumission chimique (administration de substances
psychoactives à des fins délictueuses ou criminelles) [14]
trouvent un intérêt majeur dans cette matrice permettant
de dater la période d’exposition, même ancienne, et d’en
établir la chronicité.
Déclaration d’intérêts : les auteurs déclarent ne pas avoir de
conflits d’intérêts en relation avec cet article.
[7] Baumgartner WA, Hill VA, Blahd WH. Hair analysis for drugs of
abuse. J. Forensic Sci 1989;34:1433-53.
[8] Henderson GL, Harkey MR, Zhou C. Incorporation of isotpicallyla-
beled cocaine into human hair: Race as a factor. J Anal Toxicol 1998;
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84:53-60.
[10] Musshoff F, Madea B. Analytical pitfalls in hair testing. Anal Bioanal
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[11] http://sfta.org/presentation/main/consensus/techniques/
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[12] Society of hair testing. SoHT recommendations for hair testing in
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[13] Kintz P. Cheveux et toxicologie médico-judiciaire. In: Kintz P editor,
Traité de toxicologie médico-judiciaire. Elsevier Masson;2012:257-6.
[14] Balíková M. Hair analysis for drugs of abuse plausibility of inter-
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