REACTIFS BIOLABO

www.biolabo.fr RPR-CHARBON
FABRICANT : TEST de dépistage de la SYPHILIS
BIOLABO SAS,
Les Hautes Rives Test de floculation lipidique non-tréponémique sur lame pour la détermination
02160, Maizy, France qualitative et semi-quantitative des anticorps (réagines) dans le sérum ou le plasma humain.

REF 3800100 100 tests : R1 2,0 mL R2 0,5 mL R3 0,5 mL

REF 3800150 150 tests : R1 3,0 mL R2 0,5 mL R3 0,5 mL

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IVD USAGE IN VITRO
SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
Tel : (33) 03 23 25 15 50
Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1) (2) PREPARATION DES REACTIFS

La Syphilis est une maladie vénérienne causée par un micro-
organisme spirochaete T. pallidum. Ce micro-organisme ne pouvant
être cultivé sur milieu artificiel, le diagnostic de la syphilis est basé sur
la corrélation des données cliniques et la détection d’anticorps
spécifiques par des tests sérologiques.
Des réactions positives au Test RPR peuvent être dues chez certains
patients à une infection autre que la syphilis.
Le diagnostic clinique ne doit donc pas être établi sur la base des
résultats d’un seul test, il doit être étayé par des signes cliniques et des
résultats d’analyses biologiques complémentaires
(voir § INTERFERENCE).
PRINCIPE (3) (5) (6)
Le RPR-CHARBON est un test de floculation non tréponémique utilisé
pour la détection de la Syphilis dans le plasma ou le sérum chauffé ou
non chauffé.
La formation de liaisons entre le cholestérol, la cardiolipine, la lécithine
du réactif et les anticorps (réagines) du spécimen conduit à la
formation d’agglutinats.
Le test antigénique est une forme modifiée de l’antigène VDRL
(Veneral Disease Research Laboratory) dont les particules de charbon
s’adsorbent sur les agglutinats formés et améliorent leur visualisation
(amas gris).
L’absence de floculation visible indique un résultat négatif.
Le test RPR-CHARBON peut être utilisé en technique manuelle sur
carte test ou sur autoanalyseur mono ou multi-canal qui sont utilisés
dans les établissements de transfusion sanguine pour un dépistage en
routine de la Syphilis dans les dons de sang.
Ce test est raccordé sur un sérum de référence du WHO pour le
sérodiagnostic des infections tréponémiques.- Ref 3-1980.
Les résultats du test sont obtenus en 8 minutes.
REACTIFS
- 10 Cartes Test (usage unique, à éliminer après utilisation)
- 100 Pipettes à usage unique.
- 1 Flacon dispenseur et aiguille (16 µL/goutte)
Flacon R1 RPR CHARBON
Suspension contenant environ :
Charbon 0,2 g/L
Cardiolipine 0,003 %
Lécithine 0,02 %
Cholestérol 0,09 %
Flacon R2 Contrôle Positif
Sérum humain contenant des anticorps anti-Treponema Pallidum.
Flacon R3 Contrôle Négatif
Sérum humain exempt d’anticorps anti-Treponema Pallidum.
Les réactifs sont prêts à l’emploi.
Flacon R1 : déboucher le flacon dispenseur en plastique et insérer la
base de l’aiguille dans le col du flacon. Presser le flacon et insérer la
pointe de l’aiguille dans la suspension d’antigène préalablement
homogénéisée. Relacher ensuite doucement la pression sur le flacon
plastique afin de transférer la suspension d’antigène. Le stockage de
l’antigène dans le flacon plastique réduit sa durée de vie. Il est
conseillé de reverser l’antigène restant dans le flacon d’origine à la fin
de la série de tests.
Le flacon plastique dispenseur et l’aiguille doivent être rincés
immédiatement à l’eau déminéralisée et séchés à l’air.
REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES
1. Test semi-quantitatif: micropipettes et tubes à essais.
2. Chlorure de Sodium (9 g/L)
STABILITE ET CONSERVATION
Stocker à 2-8°C et à l’abri de la lumière
NE PAS CONGELER.
• En l’absence de contamination, stockés dans le flacon d’origine et
utilisés comme indiqué dans la notice, les réactifs sont stables jusqu’à
la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret.
• Rejeter tout réactif contaminé ou qui ne donne pas des résultats
corrects avec les sérums de contrôle.
• Ne pas utiliser les réactifs après la date de péremption.
• Ne pas stocker les cartes test au réfrigérateur, les ranger à
température ambiante.
• Ne pas toucher la surface des cercles test de la carte avec les doigts
car des dépôts gras pourraient fausser les résultats.
PRECAUTIONS
Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un
usage in vitro.
• Utiliser des équipements de protection (blouse, gants, lunettes).
• Ne pas pipeter avec la bouche.
• Ne pas utiliser de réactifs endommagés ou contaminés.
• En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment à
l’eau et consulter un médecin.
• Les réactifs contiennent de l’azide de sodium (concentration < 0,1%)
qui peut réagir avec les métaux tel que le cuivre ou le plomb des
canalisations. Rincer abondamment.
• Les contrôles sont réalisés à base de sérums humains. Chaque
sérum humain utilisé dans la fabrication des contrôles a été analysé
et a donné des résultats négatifs pour l’antigène de surface de
l’hépatite B (HBsAg), les anticorps de l’hépatite C (anti-HCV) et du
VIH 1 et VIH 2. Cependant comme aucun test ne peut garantir de
façon absolue l’absence de tout agent infectieux, traiter ce produit
comme potentiellement infectieux.
• Pour plus d’informations, la fiche de données de sécurité peut être
obtenue sur simple demande.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen comme potentiellement
infectieux, dans le respect des bonnes pratiques de laboratoire.
Respecter la législation en vigueur.

Made in France Dernière version : www.biolabo.fr Version : 18/09/2014

PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE)
Sérum : Prélever un échantillon de sang de patient et laisser coaguler. METHODE QUALITATIVE
Centrifuger le sang coagulé et séparer le sérum clair. Travailler Changer de pipette à usage unique à chaque spécimen pour éviter les
impérativement sur sérum fraîchement prélevé. contaminations croisées.
Plasma : Prélever un échantillon de sang de patient dans un flacon de Ne pas toucher la surface des cercles test de la carte avec les doigts
collecte de plasma. Centrifuger le spécimen et séparer le plasma clair. car des dépôts gras pourraient fausser les résultats.
Travailler impérativement sur plasma fraîchement prélevé. 1. Ramener chacun des composants à température ambiante.
Ne pas utiliser de sérum ou plasma hémolysé, contaminé ou lipémique 2. Déposer une goutte de contrôle négatif sur un cercle de la carte-test.
qui sont susceptibles d’interférer avec le test. Répartir sur la totalité de la surface du cercle.
Le sérum peut être conservé à 2-8°C pendant au moins 48 heures. 3. Déposer une goutte de contrôle positif sur un cercle adjacent de la
Pour une durée prolongée, stocker à -20°C pendant un maximum de carte-test. Répartir sur la totalité de la surface du cercle.
4. A l’aide d’une pipette à usage unique fournie, déposer une goutte de
6 semaines.
spécimen (50 µL) sur un autre cercle de la lame de test. Répartir sur la
Homogénéiser les échantillons congelés avant utilisation. totalité de la surface du cercle à l’aide du côté aplati de la pipette.
Les spécimens décongelés ne doivent pas être recongelés ce qui 5. Remettre en suspension par retournements le Réactif
fausserait les résultats. RPR CHARBON (flacon R1).
NE PAS DILUER LES SPECIMENS AVANT DE REALISER LE TEST 6. Remplir le flacon dispenseur comme indiqué au § PREPARATION DES
QUALITATIF. REACTIFS
7. Ajouter une goutte de Réactif RPR CHARBON (16µL) sur chacune
des gouttes de contrôles et spécimen(s) de la carte-test. Ne pas
INTERFERENCES mélanger.
L’utilisation de spécimens autres que sérum ou plasma n’a pas été 8. Balancer doucement la lame manuellement ou à l’aide d’un balancier
validée pour ce test. automatique (100 tpm) pendant 8 minutes et observer l’agglutination
dans les cercles de test. Ne pas prolonger l’incubation au delà de
Il n’existe pas de protocole de réutilisation de ce produit. 8 minutes pour éviter les phénomènes d’évaporation pouvant conduire
Des résultats faiblement positifs ou suspects doivent être retestés. Si le à une erreur d’interprétation (faux positifs).
résultat d’un test RPR est positif, il doit être confirmé par un test 9. A la fin du test, éliminer les cartes-test usagées.
tréponémique spécifique. BIOLABO fabrique et commercialise un test
METHODE SEMI-QUANTITATIVE
TPHA (Treponema Pallidum Haemagglutination Assay) REF 4500100
Le test semi-quantitatif est effectué selon le même mode opératoire que
pour la détection spécifique des anticorps anti-tréponémiques.
le test qualitatif en réalisant des dilutions du spécimen dans NaCl 9 g/L
comme suit :
CONTROLE DE QUALITE Préparer les dilutions dans des tubes à essais:
Contrôles RPR positif et négatif inclus dans le coffret.
Dilutions 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/n
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants : NaCl 9 g/L 100 µL 100 µL 100 µL 100 µL 100 µL 100 µL 100 µL

• Au moins un contrôle par série. Spécimen 100 µL - - - - - -

• Au moins un contrôle par 24 heures.
→ 100 µL
• Changement de flacon de réactif.
→ 100 µL 100 µL 100 µL 100 µL 100 µL
Lorsque les résultats du contrôle sont incorrects, appliquer les actions → → → → →
suivantes:
1. Répéter le test en utilisant le même contrôle. Transférer dans un cercle de la carte test: :
2. Si les résultats sont encore incorrects, utiliser un autre flacon de Spécimen dilué 50 50 50 50 50 50 50
contrôle et répéter le test. µL µL µL µL µL µL µL
3. Si les résultats sont encore incorrects, utiliser un autre flacon de Réactif (R1) 1 1 1 1 1 1 1
réactif et répéter le test goutte goutte goutte goutte goutte goutte goutte
4. Si les résultats sont encore incorrects, contacter le service technique 1 goutte = 16µL
BIOLABO ou le revendeur local. Le titre correspond à la dernière dilution conduisant à un résultat positif
(ex : ci-dessous le titre est de 1/32).
PERFORMANCES Résultats : +++ ++ ++ + +- - -
Des titres jusqu’à 1/128 peuvent être détectés avec le test RPR
Titre : 1/32
CHARBON sans effet de Prozone.
En 1995, le centre de référence de la Syphilis du laboratoire de la
Santé Publique de Bristol en Grande Bretagne a évalué les
performances du test RPR CHARBON. INTERPRETATIONS DES RESULTATS
RPR-CHARBON
METHODE QUALITATIVE
+ -
Spécimens négatifs 0 645
Spécimens positifs 30 0
Réaction Positive (+++) Réaction légèrement Positive (+-)
Tous les spécimens testés avec RPR-CHARBON ont donné des Présence de gros aggrégats gris Présence de petits aggrégats gris
résultats corrects.

REFERENCES
(1) McGrew, B.E. et al., Amer. J. Med Tech. , 34, 634 (1968a)
(2) McGrew, B.E. et al., Amer. J. Clin. Path., 50, 52 (1968b) Réaction Positive (++) Réaction négative (-)
(3) Norins, L.C. Automation in Clinical Chemistry, 1, 157New York Mediad (1968)
Présence d’aggrégats moyens Absence d’aggrégats
(4) Portnoy, J. et al., U.S. Publ. Health Report, 75, 985-988 (1960)
(5) Portnoy, J. et al., U.S. Publ. Health Report, 77, 645 (1962)
(6) Manual Test for Syphilis PHS Publications No 411, (1969

METHODE SEMI-QUANTITATIVE

Le titre est exprimé comme étant la plus haute dilution conduisant à une
floculation macroscopique

Fabricant Date de péremption IVD Usage »in vitro« Température de conservation REF Référence du produit Consulter la notice LOT Numéro de lot

Made in France Dernière version : www.biolabo.fr Version : 18/09/2014