MASTER 1

REPONDRE BRIEVEMENT et AVEC PRECISION AUX QUESTIONS SUIVANTES :

1) Qu’est ce qu’une pharmacopée, une monographie et ses principales parties, les indiquer et
préciser les principales méthodes d’analyse mises en jeu dans ces parties
Pharmacopée : ensemble de monographies. Une monographie est un protocole d’analyse de
- Matières premières avec trois parties essentielles
o Identification : méthode principale : spectroscopie infra-rouge
o Essais : principale partie : substances apparentées (impuretés), méthode d’analyse
la plus employée : HPLC
o Dosage : potentiométrie, parfois HPLC
- Produits finis : essentiellement l’HPLC
Principales pharmacopées/ Européenne, Américaine, japonaise et Anglaise
2) L’HPLC est-elle une méthode d’analyse rapide ? Expliquer
Dans la microparticule, la distance de diffusion dans le pore est faible permettant au soluté de
pénétrer de subir le partage et de ressortir rapidement du pore
3) Les conditions opératoires en HPLC sont-elles faciles à mettre en œuvre. Expliquer
Non, le partage met en jeu 2 propriétés qu’il faut déterminer, solubilités du soluté dans la
phase stationnaire apolaire (silice greffée C18) et dans la phase mobile polaire contenant de
l’eau
4) Quel est le paramètre qui est à l’origine de l’apparition de l’HPLC
La microparticule est à l’origine de l’HPLC
5) Qu’est-ce que l’adsorption ? quel est son impact en HPLC
Adsorption est l’accumulation d’un liquide ou d’un gaz à la surface d’un solide. Son impact est
faible : solide utilisé : gel de silice, fonction SiOH polaire. Si la phase stationnaire est polaire ; la
phase mobile est apolaire. Peu de solvants peuvent être utilisés : hexane, chloroforme
6) Comment expliquer que le partage est le phénomène de la chromatographie sur silice greffée
C18 sachant qu’elle est solide
Un solide est fixe dans l’espace, un liquide est mobile
La liaison simple est mobile, un greffon C18 sur la silice en compte 17, toutes mobiles. La silice
greffée C18 est un solide dont une partie (greffon C18H37) est mobile, c’est un pseudoliquide
Le partage nécessite 2 phases liquides non miscibles ; un solvant aqueux et le greffon C18
apolaire
7) Comment expliquer le succès des phases greffées C18
La phase mobile est un solvant aqueux, donc eau+ …..(sels, tampons, solvants solubles dans
l’eau donc un choix infini de phases mobiles
8) la taille d’une microparticule engendre un certain nombre de propriétés. Lesquelles
rapidité dans l’analyse, cause : profondeur des pores ou distance de diffusion faibles
pression élevée (100 à 200 atmosphères) à cause un espace interparticulaire faible
9) Qu’est-ce que le « end-capping ? A quoi sert-il ?
End capping : le greffage C18 des silanols de la silice n’est pas total, des silanols résiduels
subsistent. Pour les bloquer, on utilise un greffage au préalable par Si-CH3
Le End-capping sert à bloquer au maximum les SiOH résiduels responsables d’un phénomène
d’adsorption indésirable dans une HPLC de partage voulue
10) Comment analyse-t-on les bases en HPLC
- Utiliser une base dans la phase mobile
- Utiliser une silice « endcappée
- Utiliser les 2 points précédents en même temps
11) Pourquoi la pression est élevée en HPLC
L’espace interparticulaire est faible
12) Les conditions opératoires en HPLC sont-elles faciles à mettre en œuvre. Expliquer
 Non, Raison : 2 propriétés qu’il faut déterminer, solubilités du soluté dans la phase stationnaire
apolaire (silice greffée C18) et dans la phase mobile polaire contenant de l’eau

13) Quel est le paramètre qui permet d’assurer la capacité d’une phase stationnaire en HPLC
La surface spécifique de la silice (300m 2/g, nombre de pores très élevé) offre une surface
considérable pouvant
14) Les matières biologiquement actives sont-elles surtout neutres, acides ou basiques
De par la fonction amine souvent présente, les molécules biologiquement actives sont en
majorité basiques mais faibles
15) Pourquoi l’HPLC n’a pas son prix Nobel
L’HPLC est née dans les années 60, la chromatographie liquide est née en 1905, à c’est à ce
moment, le prix Nobel aurait être du être attribué
16) Quelle est la fonction chimique du gel de silice
Si-OH, ce n’est pas un alcool C-OH, c’est un silanol
17) Le « Spasfon » est un médicament sous forme de comprimés destinés à traiter les spasmes de
l’estomac. Les principes actifs sont le 1,3,5 trihydoxy-benzène et le 1,3,5 trimethyl
-hyoxybenzène (1). Déterminer leur ordre de sortie en HPLC d’adsorption (préciser la nature
de la phase stationnaire) et en HPLC de partage (préciser la nature de la phase stationnaire)
1,3,5 trihydoxy-benzène (2), de par ces 3 fonctions alcool, est plus polaire que le 1,3,5
trimethyl -hyoxybenzène avec fonction OCH 3
Chromatographie d’Adsorption
- Phase mobile apolaire, phase stationnaire polaire (nature : silice microporeuse -Si-OH) ; le
composé le plus polaire (tri-hydroxy-Benzène) a plus d’affinité pour la phase stationnaire
polaire, il est plus retenu 
Ordre de sortie : triméthoxy- suivi du trihydroxy-benzène
Chromatographie d’Adsorption
- Phase mobile polaire, phase stationnaire apolaire (nature : silice microporeuse -Si-C18H37 ;
le composé le moins polaire (tri-methoxy-Benzène) a plus d’affinité pour la phase
stationnaire polaire, il est plus retenu 
Ordre de sortie : trihydroxy- suivi du triméthoxy-benzène

trihydroxy-benzène triméthoxy-benzène