LA CONSERVATION DES

PRELEVEMENTS TISSULAIRES

Dr Dial C.
Dr DEGUENONVO GNC
Labo ACP HOGGY

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Le Formaldéhyde ou Formol

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 Le Formaldéhyde ou Formol
1- Avantages
Le Formol ne provoque pas de durcissement exagéré
des tissus ;

Il ne colore pas les tissus,

Il permet les colorations usuelles,

Il permet de faire l’IHC et la BioMol.

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 2- Inconvénients

Il entraine la dissolution des substances

solubles comme le glycogène

Il ne prépare pas bien pour les prélèvements

hématologiques.

Risque de toxicité cutané, pulmonaire et un risque

cancérigène
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Table de macroscopie avec aspiration

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 3-Indications

-l’histologie de routine
-les grosses pièces en première intention

4-Contre-indications (rares)

La mise en évidence de substances solubles.

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 5- Préparation du Formol Neutre à
10%
Le « Formol pur » commercial est une solution
aqueuse de Formaldéhyde à 40%.
La solution à utiliser doit être diluée à 10%, pour se
faire :
Formol « pur» commercial…………….10ml
Eau distillée…………………………………… 90ml
Carbonate de calcium……………………1gr
NB : Cette solution est neutralisée en y rajoutant 1gr
de Carbonate de Calcium qui permet d’éviter la
formation d’acide formique en diminuant le pH. 7
 6- Préparation du Formol Nacl

Formol pur commercial………………..13ml

Nacl………………………………………………0,9gr

Eau distillée………………………………....87ml

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 7-Temps réel pour fixer un tissu
Il est variable en fonction de la taille du
prélèvement !

De 6 heures à 24 heures : pour les petites biopsies

De 1 à 3 jours : pour les PO

NB : Il est souvent nécessaire de faire des tranches

d’environ 1-2cm d’épaisseur sur les PO à l’état frais
pour faciliter la pénétration du fixateur en
profondeur
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 8- Durée de conservation après
fixation

Plusieurs mois voire des années.

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Comment fixer?

Ne pas mettre un prélèvement dans un récipient

Inadapté.
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 Comment fixer?

Dans un récipient ne déformant pas la pièce, mettre

5 à 10 fois le volume de la pièce et y plonger le
prélèvement. Pour favoriser la pénétration du
fixateur, dès la réception de la pièce opératoire :
- on ouvrira les organes creux
- on fera des sections dans les organes pleins tous les
5 à 10 mm,
- on injectera le fixateur dans les bronches quand il
s’agit des poumons. 12
Le liquide de Bouin

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 1-Avantages

Il conserve correctement les substances

hydrosolubles comme le glycogène ;

Il permet la caractérisation immunologique (IHC) de

beaucoup d’antigènes intracellulaires.

Il permet une bonne étude morphologique

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 2- Inconvénients

Il pénètre mal les tissus qui ne sont pas atteints au-

delà de 2 – 3 mm en profondeur ;
Il durcit, rétracte et colore en jaune les tissus ;
Il ne permet pas les coupes en congélation ou pour
la M.E.
Il altère l’ADN : empêche de faire la Biologie
Moléculaire à cause de la présence de l’Acide
picrique qui présente en outre un risque toxique
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 3- Indications
Utilisé en histologie de routine pour fixer les petits
prélèvements (de moins de 1cm3), comme les
biopsies, pour une étude fine des structures
tissulaires.

4- Contre-indications
Pièce volumineuse
Recherche en Biologie Moléculaire
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 5- Préparation du Bouin aqueux
A. Formule du liquide de Bouin fort

- Formol pur commercial (40%) = 25 ml

- Acide acétique glacial =5 ml

- Acide picrique (à saturation dans l’eau) = 75 ml

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B. Formule du liquide de Bouin faible

- Formol pur commercial (40%) = 10 ml

- Acide acétique glacial = 5 ml

- Acide picrique (à saturation dans l’eau) = 50 ml

-Eau distillée = 35ml

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 6- Temps réel de fixation

Un fragment de moins de 2mm3 : 2 à 3 heures

Un fragment supérieur à 1cm3 : jusqu’à 1 à 3 jours

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 7- Durée de conservation

Quelques mois

NB1 :- Après fixation, on déshydrate directement

dans les alcools.

NB2 :-L’acide picrique a un léger pouvoir décalcifiant

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Autres Fixateurs dérivés du Bouin

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 Le liquide de Bouin alcoolique
(Dubosq Brasil)
Préparation
-Alcool à 80% ………………………….150ml
-Formol « pur » commercial ……60ml
-Acide acétique glacial……………..15ml
-Acide picrique…………………………1gr
Intérêt : très pénétrant, peut compléter le Bouin
aqueux.
Indication : Les petites pièces(moins d’1cm) sont
fixées en 30 minutes. 22
 Le liquide de Bouin Hollande
Préparation
-Formol »pur » commercial………..10ml

-Acide picrique……………………………4gr

-Acide acétique glacial………………..1,5gr

-Acétate neutre de cuivre…………..2,5gr

-Eau distillée……………………………….100ml 23
 Indications
-Toute l’histologie de routine
-En première intention pour les organes lymphoides
et hématopoietiques
-Pour les petits prélévements de moins de 1cm3
-Fixateur rapide

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Les autres fixateurs

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 Alcool-Formol-Acétique(A.F.A)
Préparation
-Formol « pur » commercial……………..20ml

-Acide acétique glacial……………………….50ml

-Alcool éthylique absolu…………………….750ml

-Eau distillée………………………………………180ml
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Indications : Tous tissus, petits fragments

Conservation : Excellente

Temps réel de fixation : 24 heures

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 Fixateurs à base de Chlorure de Zinc
Formule « solution faible »
-Formol »pur » commercial……………..130ml

-Acide acétique glacial………………………5ml

-Chlorure de Zinc………………………………10gr

-Eau distillée………………………………………860ml
Indications : Bonne étude morphologique.
La conservation des épitopes pour l’IHC
Temps réel de fixation : 24 heures au moins 28