Universidad Nacional Autónoma de México Página 1

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

TÍTULO DEL PROYECTO: Análisis espectrofotométrico en la región Visible de una

muestra de sulfametoxazol

OBJETIVOS:
● Realizar una lectura en un espectrofotómetro en la región visible.
● Realizar una serie de diluciones .
● Obtener color en la sustancia en función a su concentración.
● Realizar una curva estándar.
● Interpolar Absorbancia obtenida para obtener la concentración muestra.

CONTENIDO PÁGINA

Descripción del fundamento de la espectrofotometría en la región 2

visible.……………………………………………………………

Características estructurales de la molécula para poder analizarla por 2

Espectrofotometría Vis, generando efecto batocrómico……….……..

Descripción del método de curva estándar ………………..…….. 3

Presentación del método propuesto (Datos y cálculos previos del 4

anteproyecto)………………………………………………………..

Descripción del equipo utilizado………………………………….. 6

Presentación de resultados (pesadas, diluciones reales y lecturas) y un 7

breve análisis de ellos (validez, errores, sugerencias) ………….

Conclusiones con respecto a especificaciones (rechazar o no rechazar) 9

……………………………………………………………...

Lista de Referencias consultadas…………………………….. 10

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 2

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

Descripción del fundamento de la espectrofotometría en la región visible

Se debe a la capacidad de las moléculas para absorber radiaciones, entre ellas las
radiaciones dentro del espectro UV-visible. Basada en el proceso de absorción de la
radiación ultravioleta-visible por una molécula. La absorción de la radiación
ultravioleta o visible por moléculas, ya sean orgánicas o inorgánicas, generalmente
se produce por la excitación de los electrones de enlace, por lo tanto, la longitud de
onda de los máximos de absorción se puede relacionar con los enlaces de las
especies absorbentes, mide la intensidad de la luz que atraviesa una solución de
muestra en una cubeta y la compara con la intensidad de la luz antes de atravesar
la muestra.

Técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en

solución. La región visible, a la que es sensible el ojo humano, se localiza entre los
380 y 780 nm.

Características estructurales de la molécula para poder analizarla por

Espectrofotometría Vis, generando efecto batocrómico.

Para que una substancia sea activa en el visible debe ser colorida: el que una
substancia tenga color, es debido a que absorbe ciertas frecuencias o longitudes de
onda del espectro visible y transmite otras más. Por ejemplo: una solución es
amarilla debido a que dentro de la región visible absorbe radiación en el rango de
435 a 480 nm. En este rango de longitud de onda se encuentra el color azul del

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 3

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

visible, por lo que este compuesto absorbe el color azul y transmite los colores
complementarios que dan origen al color amarillo de la solución mencionada. La
absorción y transmisión de las longitudes de onda de la región visible de esta parte
del espectro no es la misma en substancias que den diferentes tonalidades de
amarillo, por lo que podemos tener una gama diferente de tonalidades como:
amarillo canario, amarillo limón, amarillo pálido, etc.

Descripción del método de curva estándar

Una curva de calibración es la representación gráfica de una señal (derivada de una

propiedad física) que se mide en función de la concentración de un analito.
Supongamos que disponemos de una serie de patrones de concentración x1, x2,
...xi, ... xn
que, una vez medidos por una determinada técnica presentan señales de respuesta
y1, y2, ... yi, ... yn.

Si representamos las señales en el eje y, frente a las concentraciones en el eje x,

obtenemos la denominada curva de calibración. En el caso más sencillo, como ya
se ha dicho, tendremos una recta de calibrado de ecuación y= mx+ b. Dónde m es
la pendiente ordenada en el origen.

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 4

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

Presentación del método propuesto

Se realizó una serie de diluciones de una muestra estándar, cada uno en matraz
aforado, con el objetivo de crear una curva estándar, para ello se realizaron las
diluciones a las concentraciones de 1, 2 y 3 ppm. Al realizar las últimas diluciones,
se agregaron reactivos al matraz en el orden que se muestra a continuación para
generar color en función de su concentración. La práctica fue realizada en medio
ácido

Tabla 1. Preparación de la solución estándar a distintas concentraciones

Preparación de la solución estándar.

1 ppm
Primera dilución Segunda dilución

2 ppm

3 ppm

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 5

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

Tabla 2. Preparación de la solución problema

Primera dilución Segunda dilución 2 ppm

Preparación del efecto batocrómico

Al último matraz de cada dilución, se le agregó los siguientes reactivos y cantidades.

Tabla 3. Reactivos agregados para generar color.

Orden Reactivo Cantidad

1 H2SO4 a 4 N 1 mL

2 Muestra (Dependiendo de la
(Estándar o problema) concentración en ppm)

3 Sulfamato 5 mL

4 Nitrito 5 mL

5 Acoplador (N-naftil) 5 mL

6 Los matraces se terminaron de aforar con H2SO4 a 0.1 N

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 6

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

Descripción del equipo utilizado

SPECTRONIC™ 200 Spectrophotometer

El “SPECTRONIC™ 200
Spectrophotometer” de Thermo Scientific
es un instrumento estándar para realizar
mediciones rutinarias en laboratorios de
formación y análisis. Este
espectrofotómetro cuenta con tecnología
inteligente, incluyendo una pantalla en
directo y software integrado para programar métodos estándar, lo que permite un
control total sin necesidad de un ordenador. Además, cuenta con una pantalla LCD
se ajusta al ángulo perfecto para que cualquier técnico utilice el panel de
navegación y los menús intuitivos. En cuanto a su diseño óptico, utiliza un haz
simple. La fuente de iluminación es una lámpara de tungsteno halógena y el
detector es un CCD de 2048 elementos. El intervalo de longitud de onda va de 340
nm a 1000 nm.

Presentación de resultados (pesadas, diluciones reales y lecturas) y un breve

análisis de ellos (validez, errores, sugerencias)

Tabla 4. Valores reales de las concentraciones obtenidas en las diluciones

Preparación de la solución estándar.

Primera dilución Segunda dilución 1.011 ppm

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 7

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

2.022 ppm

3.033 ppm

Tabla 5. Valores reales de la solución problema

Primera dilución Segunda dilución 2.024 ppm

Se preparó una muestra en blanco, con todos los reactivos, excepto muestra.

Tabla 6. Absorbancias obtenidas a 540 nm

Muestra Concentración Absorbancia

1.011 ppm 0.139

Muestra
2.022 ppm 0.319
estándar

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 8

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

3.033 pmm 0.382

Muestra problema 2.024 ppm 0.317

Gráfica 1. Curva estándar

Se obtuvo una r2: 0.92 (valor obtenido mediante calculadora científica), por lo que la
interpolación de datos en el método gráfico fue descartada.

Despejando x, de la siguiente ecuación de la recta:

y = mx + b
Donde:
- m = 0.1201
- b = 0.037
- y = 0.317
Obteniendo un valor de x de = 2.3313, el cual se multiplicó por el factor de dilución

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 9

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

Factor de dilución:

Obteniendo un valor final de 116.56 mg

Obteniendo el porcentaje mediante una regla de 3:

Se obtuvo una r2 menor a 0.98, por lo que la curva no es confiable para realizar una
interpolación de datos para conocer la concentración de la muestra problema, por lo
que se realizó el despeje de x mediante la ecuación recta pendiente. Este análisis
fue necesario realizarlo en medio ácido, usando como disolvente H2SO4 al 0,1 N.

Conclusiones con respecto a especificaciones

De acuerdo a la Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, en su octava

edición, una muestra de sulfametoxazol no debe contener menos del 98% y no más
del 102%, calculado con respecto a la materia prima seca, por lo que se rechaza la
muestra analizada, al encontrarse en una concentración del 115%, un porcentaje
mayor a los límites establecidos.

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando
 Universidad Nacional Autónoma de México Página 10

Facultad de Estudios Superiores *Zaragoza* Grupo: 1551

Semestre: 2024-1
Análisis de Fármacos y Materias Primas II

Lista de Referencias consultadas

1. Manual de Laboratorio de Análisis de Fármacos y Materias Primas II. (2015).

Universidad Nacional Autónoma de México. Recuperado el 26 de agosto de
2023,
de:https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/Licenciaturas/qfb/m
anuales/13Manual_Analisis_Farmacos_MateriasPrimas2.pdf
2. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, 8a Edición, 2004 vol I - II
3. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Undécima Edición. México:
2014.
4. Pérez-Vega FA, Velásquez-Vaquero MG. Fundamentos del Análisis
Farmacéutico, Métodos Ópticos de Análisis. México: FES Zaragoza; 2015.
5. Skoog DA, West DM, Holler FJ, Crouch SR. Fundamentos de Química
Analítica. 9a. Ed. México: Cengage Learning Editores; 2015.

Elaboró Revisó Revisó

Luna Velazquez Luis
Santillán González Sofía Maldonado Pérez Emiliano Armando