République Algérienne Démocratique et Populaire

Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche

Scientifique
Université 20 Aout 1955-Skikda

Faculté des sciences

Département de chimie

Matière-UEF133 : Méthodes d’analyse

Quantitatives

Chapitre 1 : problématique de l’analyse

• Définition de la chimie analytique
• Déroulement d’une analyse ; (définition du problème, échantillonnage,
choix d’une méthode d’analyse, préparation, analyse proprement dite et
dépouillement)
• Méthodes officielles d’analyse chimique

Préparé par :

Dr : AMIRI Rana

Année universitaire

2022
2022/2023
/2023
 Chapitre 1 : Problématique de l’analyse

Chapitre 1 : Problématique de l’analyse

1- Définition

La chimie analytique est celle de l'analyse et des expérimentations. Que les résultats soient
quantitatifs ou qualitatifs, ceux-ci décrivent généralement la composition d’un échantillon
donné.

La chimie analytique touche non seulement les propriétés chimiques mais aussi une partie des
propriétés physiques, comme par exemple la granulométrie d’un solide ou l'indice de
réfraction d’un liquide.

Les principaux domaines de la chimie analytique sont la spectroscopie, chromatographie,

résonance magnétique nucléaire, caractéristiques physico-chimiques diverses (point
d'ébullition, de fusion, etc).

La chimie analytique joue un rôle capital dans le contrôle de la qualité des produits, qui est
indispensable pour les industries chimiques, pharmaceutiques et alimentaires ; dans les
problèmes d'environnement (contrôle du taux et de la nature des substances, polluantes ou
non, contenues dans les fumées, les eaux usées, les déchets industriels ou autres, les résidus d'
engrais, d'insecticides ou de défoliants dans les sols, dans les produits agricoles) ; dans le
diagnostic médical (taux de glucose, d'urée, de fer, de calcium ou de potassium contenus dans
le sang ou l'urine, pH, gaz du sang...)

2- Outils utilisés
La chimie analytique utilise un large éventail d’outils, Tels que:
Chimique: réactifs et réactions chimiques,
Biochimique: enzymes immobilisés,
Physique: sources de laser, balances, spectrophotomètres,
Mathématique: traitement statistique des données,
Ordinateur: logiciels pour traitement des résultats et données, stockage des informations,
Biologique: tissus d’animaux ou de plantes,
Engineering: séparation, préconcentration,

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3- Classification de la chimie analytique

c) Nature de l’échantillon
Analyse physique (résistance électrique, masse volumique, …… )
Analyse biochimique (concentration d’un pesticide dans une plante, sang, …..)
Analyse biologique (concentration d’un pollen dans l’atmosphère, …….)
Analyse chimique (concentration d’un pesticide dans une rivière, composition d’un
minerai…..)
En général, l’analyse chimique englobe les trois derniers types (Bio) chimie.
En fonction de la nature des objets ou des systèmes analysés, des noms plus précis sont
évoqués tels que analyse environnementale, alimentaire, pharmaceutique, …… etc.

d) Chimie analytique qualitative et quantitative

La chimie analytique englobe deux grandes classes:
- Chimie analytique qualitative: cherche à identifier les composantes d’un échantillon
(éléments, ion, groupe fonctionnel, composé, famille de composés).
L’analyse qualitative est réalisée grâce à des réactions chimiques sélectifs (identifier une
famille de composés) ou spécifique (un composé).
Réactif sélectif: un composé qui réagit seulement avec un groupe de composé bien définit.

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Exemple Ag+ NO3- avec les halogénures.

Réactif spécifique: un composé qui réagit seulement avec un seul composé.
Exemple: Diméthyle glyoxime (DMG) pour la détection de Ni2+.
HO-N=C(CH3)-C(CH3)=N-OH
Malheureusement, on a que peut de réactifs spécifiques. Pour faire une analyse qualitative, on
est obligé de faire des séparations ou éliminations (chromatographie, précipitation, …..).
Ou par des instruments (spectoscopie IR pour les alcohols)

- Chimie analytique quantitative: cherche à déterminer la quantité (masse, volume,

concentration massique, concentration molaire (molarité), pourcentage massique (titre),
pourcentage volumique, molalité, fraction molaire, fraction massique, ….. etc.) d’un ou
plusieurs constituants dans un mélange homogène. Le ou les constituants peuvent être solide,
liquide ou gaz.
Pour une telle analyse connaitre la composition de l’échantillon est indispensable.
Exemple: La présence de poudre pour arme sur une main exige seulement une analyse
qualitative, alors que pour vendre une chaine (bague) en or, on est obligé de quantifier l’or
dans l’alliage.
4- Déroulement d’une analyse quantitative
Pour effectuer une analyse chimique, il faut définir un plan (procédure analytique) qui doit
comporter :
1- Définir le problème (Qu’est ce qu’on cherche, analyse qualitative et/ou quantitative, Les
informations nécessaires, qui va les utilisées, Le temps, Budget (moyens),
2- Choisir une méthode (type de l’échantillon (moléculaire, ionique, atomique. Quantité de
l’échantillon. Précision demandée. Temps.) {absorption atomique, émission atomique,
neutralisation acide base, …….
3- Avoir l’échantillon (représentatif par exemple agiter avant prélèvement, ……
4- Préparer l’échantillon pour analyse (dissolution, calcination, séparation, le concentré,
ajuster les conditions opératoires (pH, température, ajout de réactifs, …..)
5- Effectuer la mesure (après calibration, ……)
6- Traitement du résultat (traitement statistique, domaine d’erreur, …… .

5- Méthodes officielles d’analyse chimique :

Généralement au cours d’une analyse quantitative deux mesures sont nécessaires :

• La mesure de la masse ou du volume de l’échantillon à analyser ;

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• La seconde est la mesure d’une grandeur proportionnelle à la quantité d’analyte

présente dans l’échantillon.

Les analyses se caractérisent par l’emploi de méthodes de mesure très diverses.

Les chimistes classent les différentes méthodes analytiques selon la nature de la grandeur
mesurée.

1. Les méthodes gravimétriques: sont basées sur la mesure de la masse d’un composé pour
déterminer la quantité de l’analyte. Exemple : Détermination de Ca2+ dans une eau
naturelle.

2. Les méthodes volumétriques : sont basées sur la mesure du volume d’une solution
étalon qui contient un réactif et qui réagit complètement avec l’analyte. Exemple : les
différents dosages, dosage des chlorures, du TH, TA et TAC,……….

3. Les méthodes électroanalytiques : impliquent la mesure de grandeurs électriques

comme le potentiel, le courant, la résistance,…….

Exemple : dosage potentiométrique (dosage de fer II par KMNO4)

4. Les méthodes spectroscopiques : sont basées sur la mesure de l’absorbance comme

grandeur. Exemple : analyse du fer total, analyse des phosphates,………..

Parmi les méthodes sophistiquées de chimie analytique, on peut citer :

• la chromatographie

Définition de la chromatographie : est une méthode séparative qui permet l'identification et

le dosage des différents composés d'un mélange.
Le principe est basé sur les différences d'affinité des composés du mélange avec la phase
stationnaire et la phase mobile.
Le chromatogramme traduit la variation du soluté dans l'éluant en fonction du temps.

Il existe différents types de chromatographie suivant la méthode de séparation utilisée :

- d'adsorption
- de partage

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- d'échange d'ions
- d'exclusion

Abréviations des 3 grandes familles de chromatographie

CPG : chromatographie en phase gazeuse
HPLC : chromatographie liquide haute performance
CCM : chromatographie sur couche mince

Figure 1: Schéma de principe d'un système CPG

3 techniques complémentaires qui permettent de déterminer la structure des molécules sont

les suivants :

1. La spectrométrie infra-rouge

Généralités sur l'Infra-Rouge

Le domaine infra-rouge utilisé en analyse organique est compris entre 660 cm-1 et 4000 cm-
1 (soit des longueurs d'onde comprises entre 2.5 et 15 µm). L'énergie apportée par les photons
à ces longueurs d'onde modifie les énergies de vibrations et de rotation. L'énergie électrique
est inchangée.
Pour qu'il y ait une absorption IR, il doit y avoir une variation du moment dipolaire de la
molécule. Les molécules diatomiques symétriques (O2, N2...) n'absorbent pas l'infrarouge.
L'infra-rouge apporte des informations sur la structure fonctionnelle des molécules.
On rencontre 2 types de vibration:
- vibration de valence ou d'allongement (stretching)

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- vibration de déformation (bending)

Les vibrations de valence sont celle qui demande le plus d'énergie (partie gauche du spectre)

Spectrophotomètres IR

Les spectrophotomètres sont le plus souvent à transformée de Fourrier car l'intensité

lumineuse reçu est améliorée ainsi que le rapport signal/bruit de fond.
Ils comportent 5 parties:

• la source IR
• l'interféromètre
• le compartiment à échantillon
• le détecteur
• l'enregistreur

Le faisceau laser présent dans le spectromètre IR permet positionner avec précision le miroir
mobile de l'interféromètre grâce à la fréquence du faisceau laser.

2. résonnance magnétique nucléaire

L'intérêt principal de la RMN en chimie est de déterminer la structure d'une molécule. Mais
avec le développement des RMN de paillasse, le dosage est devenu une application très
intéressante.

Principe de la RMN

La spectroscopie RMN consiste à observer les transitions entre 2 niveaux d'énergie très
proches d'un noyau soumis à un champ magnétique.
Lorsque l'on soumet un noyau d'hydrogène à un champ H0, les noyaux vont s'aligner sur
champ magnétique (c'est à dire leur moment magnétique de spin µ). Leur nombre
quantiquemagnétique de spin aura soit comme valeur ms = ½ , état le plus stable dans le
même sens que H0, soit ms=-1/2 à l'opposé de H0 et minoritaire (valable pour les noyaux de
nombre de spin I = ½). Le rapport entre les 2 populations est proche de 1. Il en résulte une
légère aimantation notée M0. Une transition électronique entre ces 2 niveaux est possible, d'où
le phénomène de résonnance. Au niveau macroscopique, l'apparation de 2 niveaux d'énergie
avec des populations de spins différentes entraine une aimantation résiduelle alignée à H0

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Figure 2: Schéma de principe d'un spectromètre de RMN

3. la spectrométrie de masse

La spectrométrie de masse est une technique analytique très puissante et très sensible
permettant d'analyser des composés organiques solides, liquides ou gazeux. Elle permet de
déterminer la masse moléculaire, de corréler le spectre d'un composé avec sa structure,
d'expliquer des mécanismes de ruptures de liaisons, de trouver les facteurs rendant plus ou
moins probable la formation de l'un ou l'autre des fragments ioniques. Par spectrométrie de
masse, on peut réaliser des analyses qualitatives et quantitatives. Des limites de détection
inférieures au nanogramme et même au picogramme (10-12 g) sont souvent atteintes.

La spectrométrie de masse joue aujourd'hui un rôle important dans les études de pollution de
l'environnement et de dopage grâce à sa sensibilité, sa sélectivité et sa possibilité de faire des
analyses quantitatives rapides.

Actuellement, les progrès les plus spectaculaires se rencontrent dans le domaine de l'analyse
des molécules biologiques (protéines, sucres...) et dans l'étude des polymères grâce à une
nouvelle technique : l'électrospray. Celle-ci permet de travailler sur des molécules
multichargées et de connaître avec précision la masse moléculaire du composé analysé.

Appareillage

Description de base d'un spectromètre de masse

Un spectromètre de masse est constitué au minimum :

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• d'un système d'introduction de l'échantillon

• d'une source d'ions ou chambre d'ionisation
• d'un analyseur qui sépare les ions en fonction de leur masse et de leur charge
• d'un détecteur qui détecte les ions sortant de l'analyseur

Le vide étant fait dans chacun de ces éléments.

Figure 3: Schéma de principe spectrométrie de masse

Le principe d'autres techniques fréquemment employées pour les dosages seront également
exposées :

1 Absorption atomique

L'absorption atomique (SAA) est une méthode d'analyse très précise et particulièrement
sensible utilisée pour la détermination de la concentration des minéraux en solution.

Principe de la mesure

Les atomes de la solution sont atomisés thermiquement par une flamme ou dans un four. La
majeure partie de ces atomes se trouvent à l'état fondamental. Leur nombre peut être calculé
par la loi de distribution de Maxwell-Boltzman (N1/N0 = g.exp[-∆E/kT]). Pour plus d'information
consultez la page sur la photométrie de flamme.
A l'état fondamental, ils peuvent absorber l'énergie d'un faisceau lumineux. Ces absorptions se
font à des longueurs d'ondes caractéristiques de l'élément selon la relation ∆E=hν avec ∆E
l'écart énergétique entre le niveau fondamental et le niveau excité.

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On peut donc relier la concentration et l'absorption de lumière par les atomes restés à l'état
fondamental.
La relation de proportionnalité suit la loi de beer-Lambert
A = log(I0/I) = kC avec :
- A l'absorbance
- I0 l'intensité du faisceau inscident
- I : l'intensité transmise
- C la concentration
- k le faction de proportionnalité

2 fluorescence et de la phosphorescence

Définition de la fluorescence

Une molécule fluorescente possède la propriété d'absorber un rayonnement lumineux

incident (excitation) et de restituer rapidement (quelques nanosecondes) l'énergie absorbée
sous forme d'émission de lumière (fluorescence).dans le domaine du visible ou proche UV.
Elles émettent à une longueur d'onde supérieur à celle du faisceau incident.
La phosphorescence et le fluorescence ont de nombreuses applications dont la fluorimétrie qui
est une méthode de dosage utilisant cette propriété.

Principe de la fluorescence et de la phosphorescence

Pour bien comprendre le phénomène, il est utile d'étudier le diagramme de Jablonski. C'est
un diagramme énergétique comparant les phénomènes de retour à l'équilibre par fluorescence
et phosphorescence.

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Figure4 : fluorescence et phosphorescence

Lorsque la molécule se trouve dans un état excité suite à l'absorption d'un photon, elle
retourne au plus bas niveau d'énergie de l'état excité par relaxation (transfert d'énergie avec le
solvant suite notamment à des collisions). La durée de vie de ces relaxations vibrationnelles
non radiatives est de l'ordre de 10-12 seconde.
La molécule revient ensuite dans l'état fondamental soit par conversion interne ou externe
(choc avec d'autres molécules) soit par émission de lumière.
Cette émission lorsqu'elle a lieu s'appelle la fluorescence.
Dans le cas de la fluorescence, la multiplicité de spin est conservé.

Dans le cas de la phosphorescence, la passage à l'état excité s'effectue avec un retournement

de spin avec passage à un état triplet.
Le retour à l'état fondamental s'effectue plus lentement avec émission de photons et un
nouveau retournement de spin. L'emission lumineuse dure donc beaucoup plus longtemps
même après arrêt de la lumière incidente.

3 Spectroscopie UV-visible

Le domaine utilisé en spectroscopie UV-visible est compris entre 190 nm et 1100 nm. Le
domaine UV étant compris entre 190 nm et 400 nm (En dessous de 190 nm l'air absorbe les
UV).

Le domaine du visible débute à 400 nm.

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UV Infra-rouge

Sur le thème de la spectroscopie UV-visible

- principe de la spectrométrie UV-visible

- Instrumentation : spectromètre UV
- Le point isobestique
- les transitions électroniques

Couleur spectrale Domaine de longueur d'onde

Violet 380 à 435 nm

Indigo 435 à 465 nm

Bleu 465 à 482 nm

Cyan 487 à 492 nm

Vert 530 à 560 nm

Jaune 580 à 587 nm

Rouge 620 à 765 nm

La spectroscopie UV-visible a de multiples applications :

• L'étude fondamentale des différentes transitions électroniques d'un produit

• La réalisation des spectres pour déterminer la longueur d'onde correspondante au
maximum d'absorption du composé
• Cette longueur d'onde peut ensuite être utilisée pour doser le soluté après avoir établi
une droite de calibration
• Le suivi cinétique d'apparition ou de disparition d'un échantillon

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