Université Ferhat Abbas Sétif -1

Faculté de Science –Département de Chimie

Master Chimie Pharmaceutique

Compte Rendu de TP N°2 :

Spectroscopie UV-visible

Module : Chromato-Spectro

Etudiant : Meskine Halima

Enseignant : A.Addala

Groupe : 2B

2022/2023
Sommaire :

1. Introduction …………………………………………………………………….

2. But de TP…………………………………………………………………………..

3. Principe……………………………………………………………………………

4. Partie expérimental…………………………………………………………..

5. Résultats et discutions………………………………………………………

6. Conclusion……………………………………………………………………….

7. Références……………………………………………………………………….
 I. INTRODUCTION :
Dans ce TP, nous étudions la spectroscopie UV-visible a partit d’un appareil appelé (spectrophotomètre)
utilisons cette appareil pour mesurons l’absorbance .

La spectroscopie UV-Visible permet d’accéder qualitativement à des renseignements quant à la nature des
liaisons présentes au sein de l’échantillon mais également de déterminer quantitativement la concentration
d’espèces absorbant dans ce domaine spectral. Non destructive et rapide, cette spectroscopie est largement
répandue en travaux pratiques de chimie ainsi qu'en analyse chimique ou biochimique. (1)

Le spectre UV-Visible est le tracé de A (absorbance) en fonction de λ (en nm) Bande dʼabsorption caractérisée
par : sa position λmax (nm) et son intensité εmax (L.mol-1.cm-1) ou coefficient dʼabsorption molaire (2)

La spectroscopie d’absorption dans l’UV et le visible est basée sur la propriété des molécules d’absorber des
radiations lumineuses de longueur d’onde déterminée Domaine UV-Visible Dans une molécule, les transitions
électroniques ont lieu dans la région de l’ultraviolet et du visible.

Le domaine UV-visible s'étend environ de 10 à 800 nm.

•Visible : 400 nm -800 nm.

•Proche-UV : 200 nm -400 nm.

•UV-lointain : 10 nm-200 nm. (3)

II. PRINCIPE DE TP :
L’objectif de ce TP est suivie l’analyse par l’absorbance
L’interaction électromagnétique est l’une interaction concernée par ce modèle unifié. Elle rend compte
de l’interaction entre une onde électromagnétique et une particule chargée.

Les méthodes spectroscopiques : Les méthodes spectroscopiques (optique, UV, Raman, proche
infrarouge ...) sont des techniques d’analyse qui permettent de connaître quantitativement et qualitativement la
composition chimique d’un mélange. Elles permettent des analyses simultanées de divers composants avec une
grande rapidité. L’inconvénient principal de ces techniques réside dans la quantité d’information contenue dans
un seul spectre (informations chimiques et physiques). Il est souvent difficile d’interpréter ces spectres à cause
du manque de corré- lation structurale entre l’information pertinente et les données physico-chimiques (2)

Spectroscopie ultraviolet-visible La spectroscopie ultraviolet-visible ou spectrométrie ultraviolet-

visible est une technique de spectroscopie mettant en jeu les photons dont les longueurs d'onde sont dans le
domaine de l'ultraviolet (100 nm - 400 nm), du visible
(400 nm 750 nm) ou du proche infrarouge (750 nm - 1 400 nm). Soumis à un rayonnement dans cette gamme de
longueurs d'onde, les molécules, les ions ou les complexes sont susceptibles de subir une ou plusieurs transition
électronique(s). Cette spectroscopie fait partie des méthodes de spectroscopie électronique. Les substrats
analysés sont le plus souvent en solution, mais peuvent également être en phase gazeuse et plus rarement à l'état
solide.

Le spectre électronique est la fonction qui relie l'intensité lumineuse absorbée par l'échantillon analysé en
fonction de la longueur d'onde. Le spectre est le plus souvent présenté comme une fonction de l'absorbance en
fonction de la longueur d'onde. Il peut aussi être présenté comme le coefficient d'extinction molaire en fonction
de la longueur d'onde. (3)
 Le principe fonctionnement de l’appareil spectromètre UV :

Schéma Montre Le principe de l'appareil spectrophotomètre UV-visible

- La loi de beer- Lambert est vérifiée seulement dans les très faibles concentrations

III. BUT :
 Déterminer la concentration inconnu de la solution .

IV. PARTIE EXPERE MENTALE :

1-Les produits et les matériels :
 spectrophotomètre ordinateur
deux cuves (cellules)

quatre fioles jaugées de 100ml Bécher

pissette d’eau distillée naphtalène 99%

pipette de 5ml et de 10ml

produits :

Anthracène et méthanol

2-manipulation :

pour préparer une solution mère de naphtalène de 100ppm ;on pèse 0.01g de naphtalène on la verse dans une
fiole de 100ml et en complète avec le méthanol jusqu’ à le trait de jauge. Apres on fait le dilution pour obtenir
notre solution ; on prend 5 fioles de 25ml on verse dans chaque fioles successivement t :5 :10 :15 :20 :25ml de la
solution mère et on complète avec le méthanol jusqu’a le trait de jauge on obtient des solution de concentrations
suivant respectivement :20 ;40 ;60 ;80 et 100ppm.

Dans l’appareille on me le méthanol pure comme référence et on passe les échantillons (notre solution ) et on
note les résultats donnée par logiciel .

Le solvant utilisée : méthanol est le solvant le plus utilisé ; il est suffisamment bon solvant pour beaucoup de
composés organique.

V. Résultats et discussion :
1/ calculer pour la préparation des solution :

C f VF =CMV M

V M=(CF.VF)/C M

CM ;V M ; la concentration et la volume de la solution mère respectivement .

CF et VF : la concentration et le volume de la solution fille respectivement.

2/les résultats :

a/pour le naphtalène :

On fixe

Concentration 20 40 60 80 100
de naphtalène
L’absorbance 0.8 1.5 2.3 3.2 4
La courbe :

Solution x :

Abs=1.8 : [napht x]=45.85ppm

D’après la projection de l’absorbance 1.8 sur la courbe on obtient la concentration de la solution

inconnue.

b/pour l’anthracène :

on fixe =246

Concentration de 20 40 60 80
Anthr(ppm)
Absorbance 0.8 1.5 2.2 4.0

La courbe :

Solution x :

Abs=2.0 [Anthr x]=47.57 ppm ;Après la projection de l’absorbance sur la courbe on obtient la
concentration de la solution inconnue.
VI. Conclusion :
La spectroscopie UV VIS méthode permet donc de doser précisément des domaines absorbants dans la domaines
de L’UV visible ,a conditions de choisir les matériaux pour les cuves de dosages et les solvants pour que ceux-ci
n’interférent pas dans le domaine d’application .Grassé a loi de beer –lambert , on peut déterminer la
concentration d’une solution étalon soit par la détermination du coefficient d’absorption moléculaire et par
l’établissement d’une gamme étalon.

VII. REFERENCES
- www.gougle .com
- Wikipidia.com
- Explication de enseignent
- Livre de spectroscopie IR et UV-VISIBLE