Spectrophotometrie d’Absorption Atomique

Définitions

La strectroscopie désigne les méthodes d’analyse basée sur l’absorption, l’émission ou la fluorescence
de certaines molécules.
Les méthodes spectroscopiques sont des méthodes basées sur l’interaction des radiations
électromagnétiques avec les molécules
Un spectre représentele graphique d’absorption, d’émission ou de la fluorescence en fction de la
longueur (ou du nombre d’onde pour l’IR)

Introduction
Méthodes d’analyse qui permet la détection et la quantification de la grande majorité des éléments de la
classification périodique.
 Met en jeu des atomes libres à l’état de vapeur (ne faisant plus partie d’une molécule), d’où
l’appareillage va produire une vapeur atomique à partir de l’échantlllon en induisant la destruction de la
molécule à analyser

1 Principe général

1.1 Excitation des atomes

A la différence de la spectro moléculaire, ici la source d’excitation peut être :

Chaleur ( spectrométrie d’émission)
Lumière (spectrométrie d’absorption)

Lorsque qu’un atome à l’état fondamental va recevoir une énergie correspondant à ces transitions
électroniques, l’électron périphérique va exéder sur une orbitale plus externe d’energie élevée
EXCITATION
Absorption ou émission à une longueur d’onde précise
Haute spécificité, même si milieu complexe.

1.2 Retour à l’état fondamental

L’atome ne reste à l’état excité que 10-9 secondes

Le retour à l’état fondamental s’accompagne d’une libération d’énergie égale à la différence entre
2 niveaux électroniques.
Elle peut se faire de manière non radiative (si excitation = choc), ou radiative EMISSION d’u
rayonnement de longueur d’onde caractéristique

2 Spectrométrie d’absorption atomique en flamme (SAAF)

2.1 Principe

Un échantillon liquide est introduit sous forme d’aérosol dans une flamme
Lors de la traversée de la flamme, les atomes à l’état fondamental vont absorber le rayonnement
spécifique émis par une source lumineuse.
La mesure de cette absorption (rapport des intensité incidentes et transmises), est proportionnelle à la
quantité d’atomes de l’élément à doser et permet donc de déterminer la concentration de l’élément dans
la solution par rapport à une gamme de calibration.
L’intensité de l’absorption dépend directement des particules absorbant la lumière selon la loi de BEER-
LAMBERT
A=ε.c.l

2.2 Appareillage
Il comprent les modules suivants
 Système d’introduction de l’échantillon :
 Nébuliseur pneumatique qui aspire l’échantillon et le fragmente en fines gouttelettes
 L’aérosol formé arrive dans une chambre de nébulisation qui élimine les gouttelettes les
plus grosses

 Atomiseur :
Constitué par un bruleur à fente
Alimenté par un mélange air/acétylène ou air/protoxyde d’azote (N2 O) o Production d’une flamme
laminaire
En modifiant les débits de gazs, il est possible d’obtenir une flamme réductrice ou
oxydante selon les besoins d’analyses.

 Une source de rayonnement spécifique de l’élément à doser :

 Lampe à cathode creuse :
Il s’agit d’un tube remplie d’argon sous faible pression et comporte 2 électrodes.
La cathode est constituée de l’élément à doser ou d’un alliage de l’élément à doser, l’application d’une
diférence de pentontiel (mise sous tension) ce qui provoque l’ionisation des atomes d’argon qui vont
venir percuter la cathode provoquant l’excitation des atomes de celle-ci, Ces derniers vont alors émettre
un rayonnement spécifique intense dirigé vers la flamme qu’il traverse longitudinalement où les atomes
de l’échantillon vont l’absorber.

 Un système optique :
Permet de focaliser le faisceau et de sélectionner les longueurs d’onde grâce à un monochromater à
réseau.

 Détecteur
Il s’agit d’un photomultiplicateur permet de transformer l’énergie lumineuse en energie
électrique.

2.3 Phénomène intervenant dans la flamme

Lors de la traversée de la flamme, l’échantillon va subir une succession de transformations :

 Evaporation du solvant
 Fusions des sels
 Dissociation des molécules
 Production d’atomes libres
 Excitation

Ces 2 derniers phénomènes sont défavorables car ils diminuent le n ombre d’atomes à l’état
fondamental et donc les possibilités d’absorption.
L’ionisation obéit à la loi d’action de masse, elle diminue donc avec la concentration en
électrons, mais augmente quand l’énergie d’ionisation diminue ou quand le T° augmente.
Lorsque due l’on dose des éléments facilement ionisable, il est intéressant d’ajouter à l’échantillon un
élément plus facilement ionisable (Césium par ex.) qui déplacera l’équilibre précédent, c’est ce que l’on
appelle un tampon d’ionisation.

2.5 Application / Avantages

La plus ancienne des techniques, mais parfaitement approuvée et rependue

Avantage :
Grande simplicité d’utilisation et rapidité d’utilisation à des prix relativement modestes

Inconvénients :
Mais peu sensible (seuil de détetction = 0,1 à 10 mg/L – CV < 1%)
Ne permet de doser que certains éléments dans les milieux biologiques : Ca, Fe, Mg, Li, Cu, Zn
Consomme un grand volume d’échantillon
Technique mono-élémentaire (mais peu gênant en biologie)
 COLOROMETRIE

1) Colorimétrie

La colorimétrie est une technique de la spectrophotométrie qui consiste à l’analyse qualitative et quantitative
des substances qui absorbent un rayonnement électromagnétique dans le domaine du visible dont la longueur
d’onde est comprise entre 400 et! 700 nm avec le type d’appareil utilisé. Lorsqu’une substance absorbe dans le
domaine du visible (400 - 700 nm), l’œil ne perçoit en regardant cette substance, que les radiations non
absorbées, c’est pourquoi celle-ci apparaît colorée, de la couleur complémentaire à celle de la radiation
absorbée.

1.1) Principe

Soit un faisceau monochromatique de longueur d’onde λ et d’intensité I0 traversant une solution absorbante de
concentration C sur une épaisseur de la cuve d’absorption de 1 cm. L’intensité du faisceau transmis est IT .

On définit la transmittance T% par:

Io IT

Lumière incidente Lumière transmise

Échantillon

Transmittance (T%) =
2 On définie l’absorbance de la façon suivante :
1.2) Loi de Beer-Lambert
Elle permet de déterminer A grâce à la relation empirique suivante : A = ε l c
c : concentration (mol.L-1 ) dans un solvant non absorbant ou dont l’absorption est compensée.
ε : coefficient d’extinction molaire du soluté.
l : longueur de la cuve (cm).
ε dépend de la substance absorbante, de la longueur d’onde du faisceau et de la température. La loi de Beer-
Lambert est une loi limite, valable si la solution est diluée et si on se place à une longueur d’onde proche du
maximum d’absorption.
1.3) Loi d’additivité des densités optiques
Dans le cas de mélanges homogènes dilués, les densités optiques des différentes espèces contenues sans le
mélange sont additives A = ε l c. Le solvant est souvent lui-même absorbant. Pour connaître l’absorbance d’un
soluté, il faut compenser l’absorbance du solvant en réglant le « zéro » de l’appareil. Par la suite, on notera
absorbance ou densité optique d’une espèce, la valeur de l’absorbance due uniquement à la contribution de cette
espèce (absorbance totale diminuée de l’absorbance du solvant).
1.4) Colorimètre
L’appareil comprend :
• Une source lumineuse (lampe à iode)
• Un dispositif optique (prisme ou réseau) permet de sélectionner une longueur d’onde, afin de disposer d’un
faisceau quasi monochromatique. Après avoir traversé une cuve contenant le solvant seul ou la solution étudiée,
le faisceau arrive sur une cellule photoélectrique permettent de mesurer l’intensité lumineuse émergente. Il est
préférable de tenir les cuves par l’extrémité supérieure afin de ne pas laisser de traces de doigts sur la partie
traversée par le faisceau lumineux. Les cuves doivent être remplies avec précaution afin d’éviter la formation
de bulles. On les essuie avec du papier Joseph avant de les introduire dans le porte-cuve.
2) Vérification de la loi de Beer-Lambert
On dispose d’une solution colorée de concentration C0 = 510 -4 mol.L-1 de KMn O4 . A l’aide d’une fiole
jaugée de 50 mL et des pipettes disponibles, réaliser des solutions diluées de concentration C0 /2, C0 /5 et C0
/10. Sachant que l’on a besoin seulement de quelques mL de chaque solution pour effectuer une mesure
d’absorbance, on peut prélever une fraction de solution diluée pour réaliser une solution encore plus diluée. 3
En vous plaçant au maximum d’absorption de la substance colorée, indiquée sur le flacon de la solution initiale,
mesurer les absorbances des 4 solutions de concentration différentes. Vérifier ainsi la loi de Beer-Lambert.

3) Analyse qualitative et quantitative

Le Colorimètre permet de caractériser le spectre d’absorption d’une molécule et de déterminer la
concentration de celle-ci dans une solution.

3.1) Analyse qualitative

Le spectre d’absorption d’une molécule est réalisé par le fait de faire subir une molécule au balayage
(scan) des longueurs d’ondes dans la région précise du visible, par mesurage de la DO en fonction de la
longueur d’onde du scan, le spectre est obtenu en traçant le graphe DO = f (λ).

DO

λma
λmax λmax

Figure 14 : spectre d’absorption des molécules

Le spectre d’absorption des molécules est très important dans le domaine analytique pour
l’identification des molécules par détermination la longueur d’one maximale (λmax).
Le spectre Visible est utilisé pour confirmer la structure d’une molécule et d’indiquer la présence d’un
ou plusieurs chromophores, un spectre avec multiples bandes
Peut discerner l’existence de beaucoup de chromophores conjugués.

3.2) Analyse quantitative

L’évaluation de la concentration d’une solution est déterminée par deux méthodes

a. Méthode de la solution étalon

Dans ce cas, une solution standard à concentration connue (c st) est préparée, puis sa densité optique est
déterminée (DOst), en parallèle la densité optique de la solution à analyser dont la concentration est inconnue
est déterminée (DOech),
DOst = ε l cst
DOech = ε l cech
Par proportionnalité la concentration inconnue de l’échantillon est déterminée comme suit :

b. Méthode de la courbe d’étalonnage

Dans ce cas cinq à six solutions standards sont préparées, ces solutions sont à concentrations connues
et différentes les unes des autres, puis les densités optiques des ces solutions standards sont déterminées et enfin
la courbe d’étalonnage DO en fonction de la concentration est tracée : DO = f (c).
 Les méthodes d’’analyses
II.1.INTRODUCTION

La détection d'une espèce chimique ou biochimique ainsi que l'évaluation de sa quantité

— ou de sa concentration — peuvent être faites soit à l’aide d’instruments d’analyse tels que
les chromatographes ou les divers spectromètres, soit à l’aide de capteurs.

Il est de ce fait nécessaire de faire une distinction aussi claire que possible entre ces deux
moyens d’analyse sachant que celle-ci sera inévitablement un peu caricaturale.

On peut dire des instruments d’analyse qu’ils sont généralement complexes, coûteux et
souvent difficiles à mettre en œuvre. Ils sont aussi le plus souvent volumineux et tributaires de
sources d’énergie relativement importantes, donc peu adaptés à l’analyse sur site. Ils sont
enfin affligés de temps de réponse souvent très longs (préparation des échantillons,
étalonnage, durée de l’analyse proprement dite, sortie des données...). En revanche, avantage
capital : la conception de ces instruments d’analyse permet d’obtenir une analyse complète du
milieu [1].

Dans ce chapitre, nous présenterons les principales techniques d’analyse d’eau pour la
détection des différents polluants.

II.2.Méthodes et moyens d'analyse

II.2.1.Les analyses dans les milieux environnementaux

Pour l'eau, il peut être nécessaire de prélever de grands volumes et par conséquent de
reconcentrer les germes sur un filtre ou de les adsorber sur un support puis de les extraire.
Pour les milieux solides, les microorganismes sont, soit prélevés directement par contact ou
bien extraits.
Les éléments à prendre en compte concernant la technique d'échantillonnage sont la
représentativité de l'échantillon constitué, le type d'analyse pouvant être réalisée sur
l'échantillon obtenu et les performances de l'échantillonneur en termes de récupération de
germes.
Quant aux techniques d'analyse, elles sont relativement nombreuses. A côté des méthodes
traditionnelles de culture ou des méthodes basées sur l'observation microscopique, de

41
 Les méthodes d’’analyses
nouvelles techniques s'appuyant sur la génétique moléculaire et l'immunologie sont apparues.
Chacune de ces méthodes possèdent des avantages et des inconvénients [2].
L'analyse est indispensable à l'élaboration d'un projet d'installation de traitement d'eaux ainsi
que pour le contrôle de son fonctionnement et l'appréciation de la qualité de l'eau traitée
(sortie station, réseaux, milieu naturel).
Les progrès incessants des techniques analytiques permettent d'améliorer la connaissance des
constituants des eaux et de leurs effets.
Les normes de qualité sont de plus en plus sévères, les traitements de plus en plus
sophistiqués et le contrôle demande à être d'autant plus précis et fiable [3].

Traitement Séparation Détection

Traitement du
Prélèvement signal

Demande Traitement
analytique Résultat (fiabilité ?) des données

Figure (II-1) : Etapes d’une méthode analytique [4].

II.3.Les prélèvements
Le premier objectif de l'échantillonnage est d'obtenir des prélèvements représentatifs de
l'élément que l'on désire analyser (eau, matériau, boue, dépôt, gaz, réactif...).
L'eau doit être prélevée dans des bouteilles particulièrement propres et rincées plusieurs fois
avec l'eau à examiner, sauf si la bouteille, provenant du laboratoire, contient un agent
chimique: par exemple déchlorant (bactériologie) ou encore acide préservateur (métaux), etc.

42
 Les méthodes d’’analyses
Dans la plupart des analyses physico-chimiques d'eaux destinées à l'alimentation (eau de
réseau, de forage...), il faut laisser couler le temps nécessaire à l'obtention d'une eau de qualité
permanente [3].

II.3.1.Mode de prélèvement

II.3.1.1.Prélèvement instantané
C'est le mode de prélèvement le plus fréquemment utilisé. Les flacons sont remplis sans agiter
l'eau au contact de l'air.
Pour cela, il est nécessaire d'utiliser un tuyau adapté à la prise d'échantillon et plongeant au
fond de la bouteille, de laisser renouveler plusieurs fois le contenu de celle-ci puis boucher
aussitôt Certaines analyses (oxygène, gaz carbonique, pH...) exigent d'éviter toute agitation et
contact avec l'air.
Les échantillons pour analyses bactériologiques sont prélevés en flacons stériles après avoir
flambé le point de puisage (robinet métallique) et laissé couler l'eau à débit constant pendant
une minute environ sous la protection de la flamme avant de prélever. Il est indispensable de
noter sur chaque échantillon la date, l'origine et la nature de l'eau.

II.3.1.2.Prélèvement composite
Des échantillons moyens sont recueillis lorsqu'on cherche une mesure de qualité moyenne sur
une période (par exemple 2 heures ou 24 heures). Un certain nombre d'appareils de
prélèvement automatiques permettent de constituer des échantillons proportionnellement au
débit.

II.3.1.3.Prélèvement avec concentration

Une étape de concentration-extraction est nécessaire pour la mesure de micropolluants
organiques; elle peut être mise en œuvre au laboratoire, mais à partir d'un faible volume ou,
directement sur le site, au moyen d'appareils automatiques continus; dans ce cas, l'échantillon
peut correspondre à la concentration de plusieurs centaines de litres prélevés sur plusieurs
jours [3].

43
 Les méthodes d’’analyses
Trois types de matériel sont utilisés
- échantillonneur d'eau pour substances volatiles, en combinaison avec un strippage en boucle
fermée,
- système continu d'adsorption sur résines macroporeuses
- extracteur liquide-liquide en continu figure (II-2)

Figure (II-2) : Extracteur liquide-liquide en continu (Licence Lyonnaise des Eaux).

II.4.Les analyses
II.4.1.Analyses sur site
Certains paramètres peuvent évoluer pendant le transport des échantillons au laboratoire et il
est toujours préférable de faire ces déterminations sur le terrain pH, température, O 2, CO2,
H2S, NH3, potentiel d'oxydo-réduction, oxydants résiduels... La mesure de ces paramètres
repose souvent sur des méthodes de précision inférieure à celle des méthodes de laboratoire
mais l'intérêt de la mesure immédiate peut être prépondérant compte tenu des variations
susceptibles d'intervenir durant le transport et la conservation en laboratoire. Par ailleurs, ces
analyses sont aussi nécessaires lors de l'étude prolongée d'une eau brute ou d'un effluent en
vue de l'établissement d'un projet ou de l'optimisation d'une installation de traitement [3].

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 Les méthodes d’’analyses

Échantillonnage Analyse Interprétation

Figure (II-3) : Les trois étapes d’études de qualité des eaux naturelles [5].

II.4.1.1.Méthodes potentiométriques
Ces méthodes mettent en œuvre le plus souvent des électrodes spécifiques qui sont utilisées
par immersion dans l'eau; elles permettent de mesurer: pH, potentiel d'oxydo-réduction,
oxygène, turbidité, résistivité, fluorures, cyanures... Le couplage de ces sondes à une unité
centrale de saisie de données (microprocesseur ou 337 micros ordinateurs) permet de suivre
sur le site l'évolution de la qualité de l'eau dans le temps.

II.4.1.2.Méthodes colorimétriques
Ces méthodes mettent en jeu des "réactions colorées" dont l'intensité de la couleur obtenue est
évaluée au moyen de comparateurs possédant des disques, plaquettes ou bandes colorées
servant d'étalons.

II.4.1.3.Méthodes volumétriques
De nombreux paramètres sont déterminés par volumétrie (alcalinité, dureté totale, dureté
calcique, chlorures...). Des mallettes contenant de la verrerie classique de laboratoire
permettent ces déterminations (burettes, erlenmeyer, éprouvettes graduées, fioles...) [3].

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 Les méthodes d’’analyses

II.5.Les techniques d’analyse chimique de laboratoire

II.5.1.Spectrophotométrie

II.5.1.1.Spectrophotométrie d'absorption moléculaire

C'est la méthode analytique la plus utilisée en analyse d'eau. Elle nécessite la mise en œuvre
préliminaire d'une réaction colorée spécifique de (élément recherché. Elle s'appuie sur le fait
que toute solution colorée traversée par un faisceau de lumière laisse passer une fraction de la
lumière incidente; la quantité de lumière absorbée est proportionnelle à la concentration du
composé coloré recherché (loi de Beer-Lambert).
Cette technique a permis le développement de chaînes analytiques de laboratoire à flux
continu, l'utilisation industrielle de photocolorimètres pour la mesure "séquentielle-en
continu" de nombreux paramètres (silice, ammonium, etc.).

II.5.1.2.Spectrophotométrie d'absorption UV et IR
Dans le domaine de l'eau, ces techniques sont surtout utilisées pour quantifier des familles de
matière organique (MO).
La mesure de l'absorption UV à 254 nm est un indice caractéristique des substances
possédant une ou plusieurs doubles liaisons.
La même mesure à d'autres longueurs d'onde complète l'examen (par exemple, acides
humiques).
La mesure du COT (Carbone organique total) fait intervenir une minéralisation du carbone
organique par oxydation chimique et UV ou par combustion et une détection du CO 2 par IR.
La limite de détection de la méthode est de 0,2 mg.l-1 et la précision est de 10 % (figure (II-
4)).
L'indice CH2 permet de mesurer les pollutions par les hydrocarbures, on fait en général appel
à une technique fondée sur l'absorption des liaisons - CH, - CH2, - CH3, dans le domaine
infrarouge compris entre les nombres d'ondes 2 800 et 3 000 cm-1. Plusieurs méthodes
opératoires existent dont les champs d'application peuvent être incertains et l'interprétation
difficile [3].

46
 Les méthodes d’’analyses

Figure (II-4) : Principe de la mesure du COT.

II.5.1.3.La spectrophotométrie d'absorption atomique (AA)

II.5.1.3.1.Principe général
Cette méthode d’analyse dite élémentaire permet de doser des éléments chimiques à l’état de
traces (en très faible quantité : quelques ppm) contenus dans une solution. Ainsi est on
capable à partir d’un échantillon de connaître les concentrations des espèces présentes.
Cette méthode est quantitative notamment dans le domaine UV-visible.
La spectrométrie d’absorption est basée sur la théorie de la quantification de l’énergie des
atomes.
En effet un atome qui passe de son état (d’énergie) fondamental à un état excité quelconque
absorbe un ou plusieurs photons. La fréquence n du photon dépend de l’énergie ΔE acquise
par l’atome par la relation :
E=h

47
 Les méthodes d’’analyses
Où h est la constante de Planck.

Figure (II-5) :Schéma d’une transition électronique.

On associe au phénomène d’absorption un spectre d’absorption.

Les photons absorbés étant caractéristiques des éléments absorbants, et leur quantité étant
proportionnelle au nombre d'atomes d'élément absorbant, l'absorption permet de mesurer les
concentrations des éléments que l'on a décidé de doser.
II.5.1.3.2.Mise en œuvre
L’analyse par absorption atomique utilise la loi de Beer- Lambert :
ABS=εγ.l.c

Avec : εγ constante qui dépend de l'atome absorbant.

l : longueur de la flamme.
c: concentration de la solution en élément absorbant.

Il existe donc une relation entre l’absorbance et la concentration de l’élément absorbant. Pour
une longueur d’onde correspondant à un élément absorbant de l’échantillon, on peut mesurer
l’absorbance associée traduisant le nombre de photons absorbés et ainsi à partir de la loi de
Beer-Lambert est-on capable de connaître la quantité de l’absorbant considéré.
La manipulation est la suivante :
on mesure d'abord le profil ou la bande d'absorption pour le déterminer ou les maxima
d’epsilonlambda (avec une solution de concentration donnée permettant une
absorption suffisante). Dans le domaine infrarouge, on est plus en mesure de
distinguer des maximums et donc de rendre la méthode plus qualitative.
on choisit alors la longueur d'onde lambda pour laquelle epsilonlambda est maximum
c’est-à-dire la longueur d’onde associée à un élément de l’échantillon.

48
 Les méthodes d’’analyses

on mesure l’absorbance pour cette longueur d’onde

comme pour toutes les méthodes quantitatives, on établit une courbe d'étalonnage
donnant l'absorbance en fonction de la concentration connue des solutions étalons.
On doit obtenir une droite ABS=f(c) passant par l’origine
enfin à partir de l’absorbance de l’échantillon pour la longueur d’onde associée à un
élément absorbant et la courbe d’étalonnage, on calcule sa concentration.

On réalise cette manipulation pour chaque élément de l’échantillon en se plaçant à une

longueur d’onde fixée. Il faut donc à chaque manipulation choisir une source adaptée pour
éclairer l’élément que l’on cherche à exciter.

II.5.1.3.3.Avantages et limites de la méthode

Cette méthode est peu chère car elle ne demande pas une technique complexe. Cependant elle
reste très quantitative et ne permet pas toujours de connaître les éléments contenus dans
l’échantillon. De plus elle nécessite un étalonnage à chaque nouvelle manipulation et
demande ainsi beaucoup de temps [6].

Dans l'absorption atomique avec flamme (air/acétylène ou protoxyde d'azote/acétylène),

(échantillon d'eau qui contient les éléments métalliques recherchés, est dispersé en nuage de
fines gouttelettes dans la flamme. Les métaux ainsi libérés forment un plasma d'atomes libres
(figure (II-6)).

Figure (II-6) : Principe de la spectrométrie d’AA.

49
 Les méthodes d’’analyses
Dans le cas de l'atomisation sans flamme, obtenue par voie électrique, les volumes utilisés
sont plus faibles. Le dispositif d'atomisation est constitué d'un tube de graphite que l'on
chauffe à une température comprise entre 1500 et 2 800 °C. Il a pour objectif de produire une
vapeur atomique à partir de l'échantillon d'eau [3].

II.5.1.4.La spectrophotométrie d'émission de flamme

La pulvérisation d'une solution d'eau contenant des métaux dans une flamme se caractérise
par une décomposition et une dissociation à l'état atomique des traces métalliques. Les atomes
des métaux sont ainsi excités thermiquement par la flamme, et leur retour à l'état fondamental
s'accompagne de l'émission d'une radiation dont la longueur d'onde est spécifique de l'élément
recherché et dont l'intensité est directement proportionnelle à la concentration. Cette
technique est appropriée pour le dosage direct des éléments alcalins: Na, K, Li.

II.5.1.5.Spectrophotométrie de plasma à couplage inductif (ICP)

La spectroscopie de plasma à couplage inductif est une technique qui fait appel aux
phénomènes d'émission atomique dont la source d'atomes est un plasma d'argon. A haute
température, il se forme au sein de l'argon un mélange d'atomes et de particules chargés
suivant un équilibre.
Le plasma est produit par voie inductive par une génératrice haute fréquence.
Sa température varie entre 6 000 et 8 000°C. Les éléments recherchés sont introduits dans le
plasma et transformés en vapeur atomique et éventuellement ionique par excitation lors de
leur collision avec les éléments constitutifs du plasma.
Cette technique a un champ d'application plus large que l'absorption atomique sans flamme
mais son pouvoir de détection est plus faible. La haute température du plasma permet de
limiter les interférences de matrices et de ce fait l'ICP peut être très largement employée pour
la recherche des métaux lourds.
Tous les spectrophotomètres comportent un système de dispersion de la lumière pour le choix
de la longueur d'onde appropriée ainsi qu'un photomultiplicateur pour la mesure de l'intensité
reçue.

50
 Les méthodes d’’analyses

II.5.2.Fluorescence
La fluorescence est un phénomène de luminescence: des molécules émettent un rayonnement
dans toutes les directions grâce à l'énergie reçue d'une lumière incidente. Elle est la propriété
des composés cycliques aromatiques.
Sa mesure s'effectue à partir de spectrofluorimètres avec lumière incidente UV et lecture à 90°
en lumières UV et visible.

II.5.3.Chromatographie
Pour l'identification et le dosage des MO, on a, en général, recours à des techniques
chromatographiques.
En chromatographie en phase gazeuse (CG), la technique en colonne capillaire est utilisée
en raison de son pouvoir de résolution inégalé, de la disponibilité de détecteurs universels et
de son couplage aisé à la spectrométrie de masse (SM).
Un chromatographe en phase gazeuse ou liquide comporte trois parties: un injecteur, une
colonne de séparation et un détecteur.

Figure (II-7) : Schéma d’un chromatographe en phase gazeuse.

Après avoir introduit l'échantillon au moyen d'une microseringue par l'injecteur, la séparation
des molécules s'effectue dans la colonne en fonction d'un gradient de température.

51
 Les méthodes d’’analyses
A leur sortie de la colonne chromatographique, les composés séparés passent
individuellement dans un détecteur dont la fonction est de donner un signal (sous forme de
pic) dont l'intensité est proportionnelle à la quantité de composé injecté, ce qui permet
d'assurer, par le biais d'un étalonnage, une analyse quantitative.
Les détecteurs universels présentent une sensibilité moyenne pour la plupart des composés
organiques, alors que les détecteurs "spécifiques" donnent une réponse beaucoup plus intense
pour certaines familles chimiques.
Le détecteur universel par excellence est celui à ionisation de flamme (FID). Des détecteurs
spécifiques sont le détecteur à capture d'électrons (ECD) sensible aux composés halogénés, le
détecteur thermo -ionique pour des composés azotés et phosphorés, le détecteur à
photoionisation (PID) pour des composés aromatiques.
La chromatographie en phase liquide haute pression (HPCL) utilise normalement pour
phase mobile des solvants aqueux ou organiques.
Les techniques de mise en œuvre sont plus diversifiées qu'en phase gazeuse. La
chromatographie en phase inverse qui utilise une phase liquide polaire pour éluer une colonne
contenant une phase apolaire permet de déterminer les HPA. La chromatographie ionique (par
échange d'ions) permet de séparer un grand nombre de cations et d'anions.
La chromatographie d'exclusion sépare sur gel poreux des composés en fonction de leur
taille, et permet de déterminer leur poids molaire apparent; des fractions de poids molaires
différents sont ainsi disponibles pour des analyses complémentaires.

II.5.4.Polarographie
La polarographie est basée sur le suivi de courbes intensités de courant-potentiel. Entre deux
électrodes (l'une polarisable généralement à goutte de mercure et (autre de référence),
l'intensité de courant est enregistrée en fonction d'une variation continue de potentiel. La
différence d'intensité entre deux paliers est proportionnelle à l'élément oxydé ou réduit.
Une des principales applications est l'analyse des cations métalliques et de leurs "spéciations"
(degrés d'oxydation, complexation). Des variantes de cette technique améliorent sa sensibilité.

52
 Les méthodes d’’analyses

Figure (II-8) : chromatogramme d’une eau de surface polluée.

II.5.5.Spectrométrie de masse (SM)

L'utilisation d'un couplage CG-SM permet le dosage des différentes familles de composés

chromatographiables en phase gazeuse en utilisant un seul solvant d'extraction (ex.: le

dichlorométhane) et une seule séparation chromatographique.

Les composés sortant du chromatographe sont fragmentés par un bombardement d'électrons.

L'ensemble des ions détectés (masse/charge) constitue le spectre caractéristique de la

molécule. L'ordinateur vient au secours du technicien pour l'exploitation des spectres. Ce

détecteur est le plus performant car il permet une identification des molécules même en cas de

mauvaise séparation sur la colonne, d'où l'intérêt de la spectrométrie de masse par rapport aux

détecteurs spécifiques (figure (II-9)).

53
 Les méthodes d’’analyses

Figure (II-9) : principe de l’utilisation de spectrométrie de masse.

II.5.6.Mesure de la radioactivité

Pour le contrôle des eaux de distribution, les déterminations se font généralement sans
séparation chimique préalable
- activité globale α,
- activité globale β,
- spectrométrie γ.
Dans les cas plus complexes, on procède à des radioanalyses détaillées après séparation
chimique. Pour le contrôle des eaux, seules les activités β et γ sont généralement prises en
compte pour suivre l'évolution de la radioactivité; toutefois, la radioactivité de l'eau est
toujours faible et, de ce fait peu d'appareils font des comptages corrects. Les types de
détecteurs les plus utilisés sont :
-compteur à gaz utilisant l'ionisation (compteur Geiger-Muller, compteur proportionnel),
-détecteur à scintillations ou semiconducteurs, sensible aux rayonnements [3].

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II.6.Traitement des eaux

Dans tous les cas, l'eau mise à disposition du consommateur dans le réseau de distribution doit
être traitée, même si l'homme n'en consomme directement qu'une très faible proportion. Il est
en effet dangereux pour la santé et économiquement prohibitif d'envisager un double réseau
de distribution, l'un des réseaux distribuant l'eau destinée à la consommation et l'autre réseau
distribuant l'eau destinée aux autres usages.
Quel que soit l'usage qu'en fera le consommateur, l'eau arrivant au robinet de ce
consommateur doit donc être potable, Il est nécessaire de traiter l'eau chaque fois que l'un des
paramètres analytiques est supérieur aux normes en vigueur dans le pays considéré. L'OMS
(Organisation Mondiale de la Santé) établit pour chaque paramètre, des recommandations qui
doivent être adaptées dans chaque pays, en fonction de l'état sanitaire et des considérations
économiques de ce pays, pour aboutir aux normes réglementaires nationales.

CRITÈRES DE CHOIX

La quantité La qualité L’économie

Figure (II-10) : Le choix de l'eau à traiter.

Et le traitement des eaux usées, rejetées par le consommateur après utilisation, ont pour
objectif de collecter puis d’épurer ces eaux avant de les rejeter dans le milieu naturel.

Le ‹nettoyage› des eaux usées obéit donc à une logique de préservation des ressources en eau
et de protection de l’environnement, mais représente également une ressource potentielle en
eau ‹non conventionnelle› pour divers usages (agricole, industriel ou urbain) [7].

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 Les méthodes d’’analyses

Figure (II-11) : Traitement des eaux.

Ces traitements peuvent être classés ainsi:

II.6.1. Les procédés physiques
L’eau passe à travers des grilles qui bloquent les gros déchets. C’est le "dégrillage". L’eau
passe à travers des tamis qui la débarrassent des déchets plus petits. Ce filtrage plus fin a pour
nom le "tamisage".
Les déchets plus lourds que l’eau se déposent: c’est la "décantation".
L’eau passe aussi à travers un lit de sable. Plus les grains de sable sont fins, plus ils sont
capables d’arrêter des particules de taille réduite. C’est la "filtration". Cette filtration peut
aussi se faire sur des matériaux comme des filtres à charbon actif, qui a d’autres propriétés (ils
servent par exemple à éliminer les pesticides que l’on trouve parfois dans les eaux de la
nature).
Il existe aussi des membranes : ce sont de minces surfaces percées de trous extrêmement
petits qui retiennent tout ce qui est plus gros qu’eux.

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 Les méthodes d’’analyses

II.6.2.Les procédés physico-chimiques

On met l’eau en contact avec un produit spécial sur lequel s’agglutinent les fines particules
dispersées dans l’eau (matières en suspension), en formant des "flocons". Ces flocons sont
ensuite éliminés.
II.6.3.Les procédés chimiques
Des produits tels que le chlore et l’ozone sont ajoutés pour détruire les germes, virus et
bactéries.
II.6.4.Les procédés biologiques
L’eau est mise en contact avec des bactéries spécialement recueillies et mises en culture. Ces
minuscules organismes éliminent certains éléments indésirables. Certaines bactéries
permettent, par exemple, d'éliminer les nitrates éventuellement présents dans les eaux de la
nature.
Ces différents procédés se retrouvent au fil des étapes du traitement de l’eau. Suivant les cas,
les professionnels de l’eau font intervenir un procédé plutôt qu’un autre, mais voici comment
se déroulent en principe les étapes du traitement :
La clarification permet d’obtenir une eau limpide. Pour cela, on utilise des filtres et
des produits chimiques qui rassemblent et agglutinent les matières dispersées dans
l’eau.
Entraînées par leur poids, ces particules s’entassent au fond du bassin. C’est une étape
indispensable pour les eaux de surface et les eaux souterraines provenant de certains plateaux
calcaires.
L’affinage améliore le goût, l’odeur et la transparence de l’eau. Cette étape réunit des
procédés physiques de filtrage et des procédés chimiques.
L’étape de la désinfection sert à tuer tous les virus et bactéries pouvant apporter des

maladies. On ajoute alors à l’eau du chlore, sous forme liquide ou gazeuse, ou de

l’ozone qui est un gaz désinfectant. La désinfection peut aussi se faire par des

rayonnements ultraviolets ou par la filtration de l’eau à travers des membranes.

Le traitement final a pour but de préserver la qualité de l’eau tout au long de son

voyage dans les canalisations jusqu’aux robinets. Pour cela, une très petite quantité de

chlore est ajoutée à l’eau.

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 Les méthodes d’’analyses
De plus, des traitements complexes peuvent être utilisés pour éliminer spécialement certaines
substances comme les métaux lourds (le chrome, par exemple) qui proviennent de rejets
industriels. L’ammoniaque, lui, est éliminée par des procédés biologiques utilisant certaines
bactéries mises en culture.
II.7.Protection des ressources en eau
La mise en place des directives sur l’eau crée un contexte favorable à des démarches
innovantes et à la diffusion des écotechnologies dans ce domaine. La notion réglementaire de
« bonne qualité écologique des eaux » pousse des technologies qui aujourd’hui ne sont pas
encore compétitives à le devenir.
Cela nécessite également des recherches sur les changements de pratiques dans la gestion et
l’utilisation de l’eau. L’eau et les sols sont à divers titres également menacés. Il s’agit pour
l’essentiel d’une dégradation de leur qualité, résultats de contaminations de plus ou moins
forte intensité.
Pour des sites fortement contaminés, par accident (pollution marine notamment) ou par
héritage historique (décharges sauvages, anciens sites industriels…) la question de leur
traitement et réhabilitation se pose ainsi que celle de la prévention et la gestion des accidents
[8].

II.8.Conclusion
Pour un tel domaine et devant un marché aussi diversifié, il serait hasardeux de prévoir une
évolution à long terme ; cependant, les soucis en matière de contrôle de l’environnement, les
besoins de diagnostic en temps quasi réel, liés au développement des microtechniques et aux
progrès de la biologie moléculaire peuvent susciter l’émergence de nouveaux techniques de
faible coût unitaire [7].
On peut dire des capteurs chimiques ou biochimiques que l’on recherche pour eux la
compacité, les conceptions technologiques simples et un faible coût. Leur petite taille et leur
faible consommation d’énergie permettent leur utilisation sur site, même quand celui-ci est
difficile d’accès. Ils disposent de temps de réponse aussi brefs que possible, qui les rend aptes
à une utilisation en temps réel (surveillance, régulation). En revanche, il est clair que pour
l’analyse des mélanges l’utilisation d’un système multicapteur est nécessaire, chacun d’eux
étant le plus sélectif possible à une espèce [1].

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Références bibliographiques

[1] Nicole JAffrezic-Renault, développements analytiques: microcapteurs électrochimiques

pour le suivi in-situ des contaminants, Laboratoire IFOS, Ecole Centrale de Lyon, 69134

ECULLY Cédex (France) Reçu le, 06 Janvier 2003, Accepté le 16 Mai 2003.

[2]R. BONNARD, Rapport final (Le risque biologique et la méthode d'évaluation du risque),

Unité Evaluation des Risques Sanitaires Direction des Risques Chroniques, INERIS DRC-01-

25419-ERSA-RBn-383/microb6.doc, 2001, p38

[3] TEFIANI. VALETTE, L’eau, élément fondamental, p333-336.

[4] Marie-Claire Hennion, L'évolution des systèmes analytiques, impact sur les formations,

Laboratoire Environnement et chimie Analytique, ESPCI, Paris, JOURNEES MIEC-JIREC

2005.

[5] Réfia, analyse d’eau-Présentation général, 2000.

[6]Folco Laverdière,Anja Holstein,Laurent Thiebaut,Robert Mallee,Guillaume

Gravejat,Benjamin Desclozeaux, Dossier Couplage :Les principales methodes

d’analyse,1999,p5.

[7] Nicole JAFFREZIC-RENAULT, Claude MARTELET, Paul CLECHET, Club

Microcapteurs Capteurs chimiques et biochimiques Chimiques (CMC2) Ingénierie et

Fonctionnalisation des Surfaces (UMR 5621) de l’École Centrale de Lyon.

[8] A.Grasmick, Laboratoire de Génie procédés et d’élaboration de Bioproduits

LGPEB/UMII).

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