Faculté de Médecine d’Alger – Département de Pharmacie – Laboratoire de Chimie Analytique

SPECTROMETRIE RAMAN
INTRODUCTION
Plusieurs phénomènes résultent de l’interaction de la matière avec le rayonnement
électromagnétique :
 Absorption du rayonnement incident
 Transmission
 Réflexion
 Diffusion
Une fraction très faible du rayonnement incident est concernée par le phénomène de diffusion,
principe de la spectrométrie Raman.

I. PHENOMENE DE DIFFUSION
Une fraction du rayonnement incident est :
 Soit diffusée à la même fréquence que celle du rayonnement incident ν0, il s’agit de la
diffusion lumineuse élastique appelée: Diffusion Rayleigh.
 Soit diffusée à une fréquence ν différente de celle du rayonnement incident, il s’agira de la
diffusion lumineuse inélastique, appelée: Diffusion Raman.
Dans le cas de la diffusion Raman:
 Si ν > ν0 : Processus anti-Stokes.
 Si ν < ν0 : Processus Stokes.

Remarque:
1 photon sur 108 est concerné par la diffusion Raman, d’où la nécessité d’utiliser des sources de très
grande intensité.

II. DIFFUSION RAMAN : HISTORIQUE

La diffusion du rayonnement électromagnétique a été découverte en 1928 par Raman lauréat du prix
Nobel de chimie en 1930.
Ce phénomène de diffusion est à l’origine du développement d’une technique analytique inscrite à la
Pharmacopée Européenne : « Spectrométrie Raman ».

III. SPECTROMETRIE RAMAN

1. Définition / Principe
La spectrométrie Raman est une méthode d’analyse fondée sur la diffusion de la lumière par une
substance soumise à un rayonnement lumineux monochromatique de grande intensité
(généralement fournie par un laser) et sur l’analyse des déplacements de fréquence dans le spectre
de diffusé (principe de la diffusion lumineuse inélastique).

2. Règle de sélection
- Une vibration active en spectrométrie infrarouge s’accompagne d’un changement du moment
dipolaire de la molécule.
- Une vibration active en spectrométrie Raman s’accompagne d’un changement de polarisabilité.

La polarisabilité est due à une déformation du nuage électronique autour d’une liaison.

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Exemple 01 : Molécules homonucléaires (N2, Cl2, H2 …)

Figure 01 : Vibration d’élongation des molécules homonucléaires

Pour les molécules homonucléaires, le mode de vibration est une vibration d’élongation, induisant
uniquement un changement de polarisabilité. C’est donc une vibration active en spectrométrie
Raman et inactive en spectrométrie infrarouge.

Exemple 02 : Molécules triatomiques linéaires (CO2).

Figure 02 : Règles de sélection pour les molécules triatomiques linéaires

- Dans cet exemple, on note que les modes de vibration actifs en spectrométrie Raman sont inactifs
en spectrométrie infrarouge et inversement. Il s’agit de la règle d’exclusion mutuelle.
- D’autres vibrations seront actives pour les deux techniques ou pour ni l’une ni l’autre.

3. Diagramme énergétique

La diffusion est due au passage des électrons à un niveau énergétique virtuel, qui n’est ni
électronique, ni vibrationnel, ni rotationnel.

La relaxation peut se faire soit :

 Vers le niveau énergétique initial: Diffusion Rayleigh.
 Vers un niveau énergétique plus bas que le niveau énergétique initial: Diffusion Raman anti-
Stokes.
 Ou vers un niveau énergétique plus élevé que le niveau énergétique initial: Diffusion Raman
Stokes.

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Remarque:
Les variations énergétiques sont de l’ordre de grandeur des énergies vibrationnelles (ou même
rotationnelles). De ce fait, la spectrométrie Raman est une technique spectrométrique vibrationnelle,
classée conventionnellement comme une spectrométrie Infrarouge.

Figure 03 : Diagramme énergétique

4. Spectre de diffusion Raman

Figure 04 : Spectre de diffusion

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Sur le spectre de diffusion, on distingue trois parties:

 ν = ν0 : Un maximum d’intensité correspondant au spectre Rayleigh.
 ν > ν0 : Un ou plusieurs maxima (s) d’intensité correspondant au spectre Raman anti-Stokes.
 ν < ν0 : Un ou plusieurs maxima (s) d’intensité correspondant au spectre Raman Stokes.

Le processus anti-Stokes ne concerne que les électrons à l’état excité, qui est une population moins
importante que celle des électrons à l’état fondamental. Ceci est à l’origine de l’amplification des
intensités Raman Stokes comparées aux intensités Raman anti-Stokes.

En analyse, on n’enregistre que le spectre Raman Stokes avec changement de l’échelle des fréquences
où le « 0 » de la nouvelle échelle correspond à la fréquence du rayonnement incident.

Le décalage des fréquences Δν est caractéristique des analytes et permet une analyse qualitative.

Peu importe la fréquence du rayonnement incident, on obtient toujours le même spectre Raman. Il
est donc important d’utiliser une source de lumière monochromatique pour éviter la superposition
de plusieurs spectres Raman.

Figure 05 : Spectres de diffusion Raman du méthanol et de l’éthanol

Figure 06 : Spectre infrarouge et spectre Raman du 2,5 dichloroacétophénone

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5. Appareillage
Il existe des spectromètres Raman de paillasse ou portatif qui sont tous constitués de :
 Une source de rayonnement
 Des filtres
 Un système de collection du rayonnement diffusé
 Un système de séparation des longueurs d’onde collectées
 Un détecteur

Figure 07 : Spectromètres Raman

a. Sources de rayonnement
Ceux sont des sources lasers fournissant un rayonnement monochromatique de grande intensité
émis dans l’ultraviolet, le visible ou le proche infrarouge.
Dans le commerce, les lasers les plus communs émettent aux longueurs d’onde suivantes:
♦ 532 nm ♦ 785 nm ♦1064 nm

b. Système de collection :
Collecte la lumière diffusée, c’est soit un microscope soit une fibre optique.

c. Séparation des longueurs d’onde:

Il existe deux systèmes pour la séparation des longueurs d’onde :
 Système dispersif : Prisme ou réseaux.
 Interféromètre: Pour la Spectrométrie Raman à Transformée de Fourier.

d. Détecteurs:
Selon le système de séparation des longueurs d’ondes :
 Détecteur CCD (Charged Coupled Device) pour les systèmes dispersifs.
 Détecteurs InGaAs (Indium Galium Arsenic) pour la spectrométrie Raman à Transformée de
Fourier.

5. Propriétés de la spectrométrie Raman

- Ne nécessite pas de préparation de l’échantillon.
- Utilisable pour tous les types d’échantillons: solide, liquide ou gazeux.

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- Analyse non destructive et facile à mettre en œuvre.

- L’eau peut être utilisée comme solvant et les cellules en verre sont utilisables.
- Se prête bien aux mesures in-situ.
- Exaltation possible du signal par la Résonance Raman.

6. Limitations de la spectrométrie Raman

- La diffusion Raman peut être totalement occultée par la fluorescence.
- L’épaisseur de l’échantillon doit être supérieure à 100 µm.
- Sensibilité moins bonne que les techniques de la spectrométrie infrarouge pour certains
échantillons.
- Bibliothèques spectrales incomplètes.

7. Applications de la spectrométrie Raman

a. Analyse qualitative
- Détermination de la structure chimique ; la spectrométrie Raman combinée aux autres techniques
spectrométriques donne une signature complète de la conformation moléculaire.
- Détermination de la configuration « cis-trans » pour les polymères.
- Etude de la conformation (arrangement planaire…)
- Détermination de la cristallinité.
- Étude de forces intra et intermoléculaires (liaisons hydrogènes).
- Étude de l’orientation des molécules (polarisation).

b. Analyse quantitative
L’analyse quantitative est possible grâce à l’outil chimiométrique (traitement mathématique des
données).

c. Domaines d’application

Industrie pharmaceutique
- Identification des matières premières à la réception avec possibilité d’analyse direct des substances
au travers leur conditionnement.
- L’imagerie Raman permet de caractériser la répartition des principes actifs et des excipients dans
un produit fini (carte d’identité du médicament) d’où la possibilité de discriminer d’éventuelles
contrefaçons.
- Contrôle en ligne dans les unités de fabrication pharmaceutiques:
 Analyse off-line: Prélèvement et analyse des échantillons dans un laboratoire indépendamment
du processus de fabrication.
 Analyse at-line: prélèvement et analyse des échantillons à proximité du procédé dans un
intervalle de temps restreint.
 Analyse on-line: Automatisation du prélèvement de l’analyse et de la réintroduction de
l’échantillon.
 Analyse in-line: Analyse directe au cours du processus de fabrication sans prélèvement
d’échantillon.

Autres domaines d’application

- Industrie pétrolière: analyse des mélanges d’hydrocarbures…
- Industrie agro-alimentaire: Suivi des réactions de fermentation…
- Environnement : Identification des particules atmosphériques inhalables et des cendres volatiles
produites par les usines.

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