TP :SPECTROPHOTOMETRE

TP03 UV-VIS

Compte rendu

NOME ghamoud

PRENOME RAID

PROFE M.HAMZA

Chimie pharmaceutique
Master 1

2023/2024

abdelhamidUNIVERSITE : Ferhat abbas setif 1

FACULTE :Des sciences
Departement : de chimie
 Sommaire
1. Introduction.
2. But de l’expérience.
3. Principe de la manipulation.
4. Les matériels et les produits.
5. Mode opératoire.
6. Conclusion.
7. Référence.
1. Introduction :
La matière interagit avec les ondes électromagnétiques. La spectroscopie est l'étude
quantitative des interactions entre la lumière et la matière. Elle permet de déterminer
la nature et la concentration d'espèces chimiques présentes dans un échantillon de
matière.
la spectroscopie UV-Visible permet d’accéder qualitativement à des renseignements
quant à la nature des liaisons présentes au sein de l’échantillon mais également de
déterminer quantitativement la concentration d’espèces absorbant dans ce domaine
spectral. Non destructive et rapide, cette spectroscopie est largement répandue en
travaux pratiques de chimie ainsi qu'en analyse chimique ou biochimique.
2. But de l’expérience :
Dans cette séance, nous allons réaliser un dosage, c’est-à-dire déterminer la
concentration d’une espèce chimique en solution. Cette espèce étant colorée, nous
utiliserons sa propriété d’absorbance dans le visible pour l’identifier puis la doser par
étalonnage.
Les capacités expérimentales explicitement visée pour cette séance, à
maîtriser pour l’épreuve expérimentale de terminale, sont :

 Respecter les règles de sécurité préconisées lors de l’utilisation de produits

chimiques et de verrerie
 Préparer une solution par dissolution ou par dilution en choisissant le matériel
adapté
 Réaliser le spectre d’absorption UV-Visible d’une espèce chimique
 Réaliser des mesures d’absorbance en s’aidant d’une notice
 Initiation aux principes de fonctionnement d’un spectrophotomètre ultraviolet-
visible
 Détermination de la concentration d’une espèce chimique colorée en solution
en utilisant la spectrophotométrie et une échelle de teinte.
 Tracé de la courbe d'étalonnage et détermination du coefficient d'extinction
molaire

3. Principe de la manipulation :
Nous avons vu que les molécules organiques possédant au moins sept doubles
liaisons conjuguées sont des espèces de la matière colorée, car elle absorbe des
rayonnements dans le domaine du visible (longueur d’onde compris entre 400 et
800nm environ). La spectroscopie UV – visible est une technique d’analyse
quantitative : elle permet en effet de déterminer la quantité d’une espèce absorbante
présente dans un échantillon.
Un spectrophotomètre UV-visible est constitué de: - une source de lumière blanche -
un monochromateur permettant de sélectionner une radiation monochromatique de
longueur d'onde précise - un séparateur de faisceau. En sortie du séparateur, un
faisceau traverse la cuve contenant le solvant (généralement de l'eau distillée), un
second faisceau traverse la solution à analyser. - la comparaison des 2 faisceaux
d'intensités respectives I (la solution) et Io (le solvant) permet de calculer
l'absorbance A de l'échantillon. ) qui représente l'absorbance en fonction de la
longueur d'onde A f() la courbe est appelée le spectre de l'échantillon.

5. Les matériels et les produits :

Fig1 : fiole de 100 ml fig2 : pissette d’eau distillée

Fig3 : Naphtalen99 fig.4 : balance magnétique

Pipette de 5ml ; Pipette de 10ml ;

2 cuves en quartz. ; Béchers.

Produits:

0.04 g anthracène ; Méthanol.

Solutions X : (X : solutions contenant simultanément les 2 produits : anthracène et le naphtalène quand

doit doser qualitativement et quantitativement

Fig. : le spectrophotomètre uv –vis

Manipulation :

Pour préparer une solution mère de naphtalène de 100 ppm ;on pèse 0.01 g de
naphtalène on la verse dans une fiole de 100 ml et on complète avec le méthanol
jusqu'à le trait de jauge .Apres on fait des dilution pour obtenir notre solutions ;
On prend 5 fioles de 25 ml on verse dans chaque fioles successivement
t :5 ;10 ;15 ;20 ;25ml de la solution mère et on complète avec e méthanol jusqu'à
le trait de jauge on obtient des solution de concentrations suivant
respectivement :20 ;40 ;60 ;80 et 100ppm .

Dans l’appareille on me le méthanol pure comme référence et on passe les

échantillons (notre solutions) et on note les résultats donnée par le logiciel.

Le solvant utilisée : méthanol est le solvant le plus utilisé ; il est suffisamment

bon solvant pour beaucoup de composés organiques.
Logiciel :

1/ allumer l’ordinateur en suite l’appareil

2/Allumer le logiciel UV probe :

3/Appuie sur F4= pc contrôle (sur l’appareil)

4/ clique sur connect (logiciel)

5/ on a rince les 2 cuves avec le solvant, après on les remplie avec ce solvant
(solution de référence) et mettre dans l’appareil pour donner la ligne de base

6/clique sur Baseline →méthode →OK→ Baseline →OK

7/Après laisser la cellule de référence et prendre la cellule d’échantillon et la

remplissez aves la solution

8/clique sur l’icône edit méthode ou edit →méthode→ start →OK

9/ pour nommer le spectre →clique sur bouton droit sur le graphe →Label

10/ pour changer la couleur→ clique sur bouton droit→ customize →choisir la
couleur →OK

11/ pour éliminer les Valleys clique sur Operations→peak pick → clique sur
bouton droit→ show Valleys

12/pour énumérer les pics clique sur →Mark Peaks

13/pour donner le tableau clique sur →shows peaks

 14/pour enregistrer clique sur →File →Save As

15/ pour imprimer clique sur →print preview

Fig. : le logiciel de l’UV-VIS

Résultats et discussion :

1/calcule pour la préparation des solutions :

CfVf=CmVm Vm= (Cf*Vf)/Cm

Cm ; Vm : la concentration et le volume de la solution mère respectivement.

Cf ; Vf : la concentration et le volume da la solution fille respectivement.

2/ les résultats :

 a/ pour le naphtalène

: On fixe λ =275

Concentration de
naphtalène (ppm) 20 40 60 80 100
L’absorbance 0.8 1.5 2.3 3.3 4
  La courbe :

absorbance
4,5

4,0

3,5

3,0
absorbance

2,5

2,0

1,5

1,0

0,5

20 40 60 80 100

concentration (ppm)

Solution x:
Abs=1.8 [Napht x] =45.85 ppm
D’après la projection de l’absorbance 1.8 sur la courbe on obtient la
concentration de la solution inconnue.
 b/ pour
l’Anthracène : on fixe
=356
Concentration de 20 40 60 80
Anthr (ppm)
Absorbance 0.8 1.5 2.2 4

 La courbe :
 P a g e | 10

absorbance
4,5

4,0

3,5

3,0
absorbance

2,5

2,0

1,5

1,0

0,5

20 30 40 50 60 70 80

concentration de Anthr (ppm)

Solution x :
Abs=2.0 [Anthrx]=47.57 ppm.
Après la projection de l’absorbance sur la courbe
on obtient la concentration de la solution
inconnue.

7. Conclusion :
Dans ce TP on a Initiation aux principes de fonctionnement d’un
spectrophotomètre ultraviolet-visible et Déterminer de la
concentration d’une espèce chimique colorée en solution en utilisant
la spectrophotométrie et une échelle de teinte.et Tracé de la courbe
d'étalonnage et détermination du coefficient d'extinction molaire

8. Référence :
https://physique-chimie.dis.ac-guyane.fr/IMG/pdf/
spectroscopie_uv-visible.pdf

10
 P a g e | 11

http://www.univ-oeb.dz/fsesnv/wp-content/uploads/
2020/04/TP-Spectroscopie-M1-Chim-des-Mat.pdf
http://www.univ-oeb.dz/fsesnv/wp-content/uploads/
2020/04/TP-Spectroscopie-M1-Chim-des-Mat.pdf
https://www.physagreg.fr/CoursTS/Chimie/TP/Chimie-TP1-
prof.pdf
https://physique-pt-cluny.monsite-orange.fr/file/
f208ff7a62d46793dcca0ed2196ad378.pdf

11