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ISSN 1991-8631
RESUME
L’objectif de cette étude a été d’analyser le profil protéique des vaches artificiellement inséminées en
fonction de leur statut physiologique. Des prélèvements de sang ont été effectués sur 81 vaches inséminées de
race zébu Gobra à J0, J21 et J35 post insémination. La protéinémie a été évaluée à J35 post insémination.
L’électrophorèse des protéines sériques a été mise en œuvre sur tous les échantillons. Le diagnostic de
gestation a été réalisé par dosage de la progestérone, des protéines associées à la gestation et la palpation
transrectale à J60 après l’insémination artificielle (IA). Au total, 47% des vaches étaient gestantes, 26% ont
présentées des mortalités embryonnaires tardives (MET) et 27% étaient non gestantes à J60 après l’IA. Le
rapport albumine sur globuline (A/G) était significativement différent (p < 0,05) entre les vaches non gestantes
et celles ayant subi des pertes embryonnaires. Chez les vaches ayant avorté, les fractions de gammaglobulines
étaient significativement plus élevées que chez les vaches gestantes (p < 0,05). Par conséquent, des causes
infectieuses seraient responsables de ces pertes embryonnaires. Un accent particulier doit être mis ces MET en
vu d’élucider les causes et limiter les pertes économiques car, en absence de subvention, le coût de l’IA reste
élevé pour l’éleveur africain.
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Mots clés: Profil protéique, électrophorèse, insémination artificielle, zébu Gobra, Sénégal.
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sélectionnés, la capacité des éleveurs à assurer 1994). Les densités optiques ont été lues à
la complémentation et en cas de nécessité l’aide d’un spectrophotomètre d’absorption
l’apport de soins (déparasitage, vaccination…) UV (BIOSYSTEMS® BTS-310).
aux animaux. Les inséminations ont été L’électrophorèse en zone sur gel
réalisées sur chaleurs induites avec un d’agarose (Alberghina et al., 2011) a été
protocole associant la spirale vaginale réalisée sur chaque échantillon en utilisant le
(PRIDND) à la prostaglandine F2α et à la kit d'électrophorèse Hydragel protéine K20
Pregnant Mare Serum Gonadotropin (PMSG). SEBIA® (France). Le profil électrophorétique
a été déterminé selon les recommandations du
Prélèvement de sang fabricant. Un volume de 10 µl de sérum non
De mai 2007 à mars 2008, des dilué a été appliqué sur le gel avec le peigne
prélèvements de sang ont été réalisés à J0, J21, fourni. Le gel a été placé dans une chambre de
et J35 après l’insémination artificielle (IA) par migration (SEBIA®, France) et le tampon
ponction de la veine jugulaire dans des tubes à utilisé a été le tampon tris-barbital (pH = 8,5).
héparines secs puis centrifugés (3500 tours La différence de potentiel utilisée pour la
par minutes pendant 20 minutes) pour obtenir migration était de 90 volts pendant une durée
le plasma et le sérum qui ont été conservés à - de 22 minutes. L’intensité du courant est de ±
20 ºC jusqu’à l’analyse. 12 mA par gel.
Apres la migration, le gel a été fixé et
Diagnostic de gestation et des mortalités séché dans un incubateur sécheur (IS 80
embryonnaires SEBIA®) à 80 °C pendant au moins 10
Les concentrations plasmatiques de minutes, coloré dans une solution amidoswarz
PAGs (J0 et J35) et de progestérone (J0, et J21) (acide acétique) pendant 4 minutes et décoloré
ont été mesurées par dosage radio- dans trois bains successifs de solution de
immunologique (RIA) (Zoli et al., 1992 ; décoloration jusqu’à obtention d’un fond clair.
Sousa et al., 2003 ; Ponsart et al., 2007) pour Les protéinogrammes ont été analysés à l'aide
déterminer l’état physiologique des femelles d'un densitomètre (HYRYS SEBIA®, France)
(gestantes, non gestantes ou mortalités à 570 nm. Le profil électrophorétique
embryonnaires). La palpation transrectale a représente les différentes fractions suivantes :
été réalisée à J60 après l’IA pour la albumine, α1-globuline, α2-globuline, β-
confirmation de l’état gravidique des globuline, et γ-globuline. Le pourcentage
animaux. L’association entre les différents relatif de chaque fraction protéique a été
dosages (PAGs et progestérone) et le calculé à l’aide d’un densitomètre.
diagnostic par palpation transrectale conduit à
l’obtention de différents statuts Analyses statistiques
physiologiques à J60 après l’IA. Les données collectées ont été saisies
et traitées par le logiciel SPSS 12.0®. Les
Dosage des protéines totales et résultats ont été exprimés en moyenne ± écart
électrophorèse type. La comparaison des moyennes entre
La protéinémie a été évaluée chez les groupe a été effectuée par ANOVA ou le test
animaux à J35 post insémination par dosage de Student (t-test). Les différences sont
colorimétrique à l’aide d’un kit fourni par le considérées significatives au seuil de
Laboratoire BIOSYSTEMS® S.A (Barcelone, probabilité p < 0,05.
Espagne). Le principe du dosage est la
méthode de Biuret en milieu alcalin (Tietz,
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Figure 1: Carte du Sénégal montrant le site d'étude et les zones où les prélèvements ont été
effectués.
globuline (A/G) est significativement plus significative n’a été observée entre les
élevé (p < 0,05) chez les vaches non différentes fractions protéiques et la période
gestantes (1,09 ± 0,17). de survenue des MET. L’analyse comparée
Le Tableau 3 présente les moyennes du profil électrophorétique entre une vache
des fractions protéiques obtenues après ayant subi une MET et de celle de la vache
électrophorèse chez le groupe des vaches non gestante montre une hypergamma-
ayant subi une MET en fonction de la période globulinémie (Figure 2).
de survenu de la MET. Aucune différence
Tableau 1: Correspondance entre différentes situations après insémination artificielle et les résultats
des dosages de progestérone et PAGs.
Tableau 2: Valeurs moyennes et proportions des différentes fractions protéiques chez les vaches
Gobra en fonction de l’état physiologique.
Tableau 3: Valeurs moyennes et proportions des différentes fractions protéiques chez les vaches
Gobra ayant subi des pertes embryonnaires en fonction de la période d’apparition.
Figure 2: Profils électrophorétiques comparés de la vache ayant subi une mortalité embryonnaire
(MET) et d’une vache non gestante.
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d’albumine dans le sang est donc directement électrophorétique ; cela pourrait s’expliquer
fonction de la différence entre les apports par la courte différence de temps (>25 jours)
alimentaires et les prélèvements corporels entre ces deux périodes de pertes
(Rowlands and Manston ,1983). embryonnaires. Zvorc et al. (2000) par
Le rapport A/G dans les groupes de contre, avaient constaté que le stade de
gestantes et de MET sont en faveur des gestation influence le protéinogramme chez
globulines. Les globulines sont synthétisées les vaches.
par les lymphocytes et les plasmocytes. La
concentration en globulines apporterait donc Conclusion
des informations sur le statut humoral et D’après nos résultats, nous avons
l’état immunitaire des vaches, une observé que le rapport albumine sur
composante du système de défense de globuline a été significativement différent
l'organisme (Chorfi et al., 2004). L’élévation entre les vaches suivant leur statut
de la concentration des globulines pourrait physiologique. Chez les vaches ayant subi
être la conséquence d’un processus infectieux des pertes embryonnaires, les fractions de γ-
ou inflammatoire aigu ou chronique globulines ont été élevées. Ainsi donc, des
(Brugére-Picoux and Remy, 1995 ; Sattler, causes infectieuses de ces avortements
2003). Par ailleurs, il existerait une relation peuvent être suspectées. Un accent particulier
entre l’augmentation de la concentration en doit être mis pour rechercher les causes des
globulines et la fertilité des vaches MET afin de pouvoir les éradiquer et limiter
(Rowlands et al., 1977). L’augmentation les pertes économiques dans les productions
significative des α1-globulines chez les animales car le coût de l’insémination
vaches gestantes, serait due à l’ensemble des artificielle reste élevé pour l’éleveur africain.
phénomènes inflammatoires qui sont mis jeu
en début de gestation. Ce résultat confirme REMERCIEMENTS
celui de Zvorc et al. (2000) qui avaient Nous remercions l’Agence
observé une augmentation des α-globulines Universitaire de la Francophonie (AUF) et le
au cours de la gestation. Par contre, Cairoli et Programme National d’Insémination
al. (2006) avaient constaté une augmentation Artificielle (PNIA) pour leur soutien à ces
des α-globulines chez des vaches à inséminer travaux de recherche. Nos remerciements
atteintes des endométrites post-partum. vont également à l’endroit des éleveurs, des
Les moyennes de proportions de γ- inséminateurs et de tout le personnel du
globulines ont été élevées dans le groupe des Laboratoire de Biochimie de l’EISMV de
vaches ayant subi une MET par rapport aux Dakar pour leur disponibilité.
moyennes des autres groupes de vaches
(gestantes et non gestantes). L’un des intérêts REFERENCES
clinique de la fraction des γ-globulines est Abenga JN, Anosa VO. 2005. Serum total
que les immunoglobulines migrent proteins and creatinine levels in
essentiellement dans la zone des γ- experimental Gambian trypanosomosis
globulines. Ainsi, la fraction γ-globuline of vervet monkeys. Afr. J. Biotech., 4:
représente les protéines de l’immunité. 187-190.
L’augmentation de cette fraction de γ- Alberghina D, Giannetto C, Vazzana I,
globuline chez les vaches peut être due à des Ferrantelli V, Piccione G. 2011.
problèmes infectieux (Abenga and Anosa, Reference intervals for total protein
2005 ; Yameogo et al., 2008 ; Apaydin and concentration, serum protein fractions,
Dede, 2010), qui peuvent être la cause and albumin/globulin ratios in clinically
probable de ces ME. Dans cette étude, la healthy dairy cows. J. Vet. Diagn.
période de survenue des MET (J21 - J35 et J35 - Invest., 23: 111-114.
J60) n’a pas eu une influence sur le profil
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