Vous êtes sur la page 1sur 108

Remerciement

e remercie tout d’abord ALLAH le tout puissant de m’avoir

J donné la santé la patience, la puissance et la volonté pour réaliser


ce mémoire.
Je tiens à remercier infiniment madame la Dr. Badiaa lyoussi, chef de
laboratoire de physiologie et de pharmacologie et enseignante au sein
de la faculté de science Dhar Lemhraz, pour avoir donné à moi la
chance de s’inscrire au ce master , pour sa patience et ses conseils
précieux qui m’ont été très utiles. Permettez-moi Mme de vous
exprimer ma reconnaissance et mes remerciements les plus sincères. .

Je remercie également les membres du jury Mr. Abdelfattah


ABDELLAOUI et Mme Ilham El ARABI pour avoir accepté de juger
mon travail.

Je remercie Mlle Soukaina El-Gendouz madame Nawal El Menyiy


Mlle Meriem, et Mr Radouan El Haskoury pour leur présence, leur
gentillesse et leur aide tout au long de ce travail.

Je remercie également Mlle Hajar Jourhala, Mlle Hakima Fariss, et


Mlle Kashmira Hana pour leur contribution pour la réalisation de la
page de garde.

05 juillet 2014 1
Flavonoïdes

Dédicace

J e dédie ce travail et à mes parents Alami Mohammed et Khadija


El Mansouri et mes chers sœurs Meriem, Rajae et Zineb afin
de leur exprimer toute ma reconnaissance. Je ne sais pas si cela
sera suffisant mais je vous adresse un gigantesque
MERCI pour votre amour sans borne, votre soutien moral et financier
et d’avoir cru en moi depuis toujours.

Merci à mon frère Azzdine et à ma belle sœur Asmae qui ont su me


donner le plus beau des cadeaux, mon neveu, Yasser.

Un Merci particulier pour à mes copains du El Attki Yassin et


Zouhair boutrik et tous mes copains au Master SANBIOL pour tous
les bons moments passés et à venir Incha Allah.

05 juillet 2014 2
Table des matières
Remerciement ........................................................................................................................................ 1
Dédicace.................................................................................................................................................. 2
Table des matières ................................................................................................................................. 3
Listes des figures.................................................................................................................................... 8
Listes d’abréviations ........................................................................................................................... 11
Résumé ................................................................................................................................................. 13
Abstract ................................................................................................................................................ 14
Introduction et problématique ........................................................................................................... 15
Objectif du travail ............................................................................................................................... 16

Partie Bibliographique ........................................................................................................................ 17


I. Le stress oxydatif ......................................................................................................................... 18
1. Définition : ............................................................................................................................ 18
2. Les conséquences de stress oxydatif : ................................................................................ 20
3. Implications pathologiques de stress oxydant : ................................................................ 20
4. Les antioxydants :................................................................................................................ 21
a. Antioxydants endogènes : ............................................................................................... 21
b. Les antioxydants naturels : ............................................................................................. 21
II. Le diabète : ............................................................................................................................... 23
1. La définition :....................................................................................................................... 23
2. Classification de diabète : ................................................................................................... 23
a. Diabète type 1 « insulino-dépendant » : ........................................................................ 23
b. Diabète type 2 « non insulino-dépendant » : ................................................................. 24
c. Le diabète gestationnel : ................................................................................................. 24
d. Diabète secondaire : ........................................................................................................ 25
3. Epidémiologie du diabète : ................................................................................................. 25
a. Données mondiales : ........................................................................................................ 25
b. Donnée nationales : ......................................................................................................... 27
4. Les complications du diabète : ........................................................................................... 27
a. Complications microangiopathiques : ........................................................................... 27
b. Complications macroangiopathiques : .......................................................................... 28
III. Rappels sue la phytothérapie : ............................................................................................... 29

05 juillet 2014 3
1. Définition : ........................................................................................................................... 29
2. Les plantes médicinales : .................................................................................................... 29
a. Définition :........................................................................................................................ 29
b. Les caractéristiques des plantes médicinales : .............................................................. 29
3. Histoire de la phytothérapie : (Milan Nagy, History Of Phytotherapy And
Pharmacognosy), (CAZAU-BEYRET Nelly, 2013). .................................................................... 30
a. L’antiquité : ..................................................................................................................... 30
b. Les moyens âges : ............................................................................................................ 34
c. La renaissance : ............................................................................................................... 36
IV. Les composés phénoliques : .................................................................................................... 38
1. Généralités : ......................................................................................................................... 38
2. Les principales classes des composés phénoliques : ......................................................... 38
3. Les effets biologiques des composés polyphénoliques : .................................................... 39
V. Les flavonoïdes : .......................................................................................................................... 42
4. Classification des flavonoïdes : ........................................................................................... 42
5. Effets biologiques des flavonoïdes :.................................................................................... 43
a. Effet antioxydant : ........................................................................................................... 43
b. Effet antibactérien :......................................................................................................... 44
c. Effet anticancéreux : ....................................................................................................... 44
d. Effet anti-inflammatoires : ............................................................................................. 45
e. Effet antiviral :................................................................................................................. 45
f. Effet cardiovasculaires :.................................................................................................. 45
g. Autres effets biologiques : ............................................................................................... 46
VI. La plante Capparis Spinosa L. : ............................................................................................. 47
1. Généralités : ......................................................................................................................... 47
2. Classification de la plante Capparis Spinosa L. : ............................................................. 48
3. La description botanique de la plante Capparis Spinosa L. :........................................... 48
4. Conditions écologiques de la plante Capparis Spinosa L. : .............................................. 50
5. Phytochimie de la plante Capparis Spinosa L. : ............................................................... 51
6. Historique et usage traditionnelle de la plante Capparis Spinosa L. : ............................ 52
7. Importance économique du câprier dans le Maroc : ....................................................... 53
8. Importance économique du câprier dans la région Fés-Boulemane : ............................ 54
9. Les effets biologiques de la plante Capparis Spinosa L. : ................................................. 55
VII. Apithérapie : ............................................................................................................................ 57
1. Historique de l’apithérapie : .............................................................................................. 57
2. Les produits de la ruche : ................................................................................................... 57

05 juillet 2014 4
a. Le miel : ............................................................................................................................ 58
b. La cire :............................................................................................................................. 58
c. Le pollen : ......................................................................................................................... 59
d. La propolis : ..................................................................................................................... 60
d. La gelée royale ................................................................................................................. 60
e. Larves d’abeilles : ............................................................................................................ 61
f. Venin d’abeille : ............................................................................................................... 62
VIII. Le miel : ................................................................................................................................ 63
1. Définition : ........................................................................................................................... 63
2. Historique : .......................................................................................................................... 63
3. Composition de miel :.......................................................................................................... 64
a. Eau : .................................................................................................................................. 64
b. Les glucides : .................................................................................................................... 65
c. Acides organiques ............................................................................................................ 65
d. 5-hydroxy-2-méthylfurfural (HMF) .............................................................................. 65
e. Les sels minéraux : .......................................................................................................... 65
f. Les enzymes : ................................................................................................................... 66
g. Les pigments : .................................................................................................................. 66
h. Les vitamines : ................................................................................................................. 67
4. Les effets thérapeutiques de miel : ..................................................................................... 67
a. Action antioxydante ........................................................................................................ 67
b. Action anti-inflammatoire .............................................................................................. 67
c. Action immunostimulatrice ............................................................................................ 67
d. Action anticancéreuse ..................................................................................................... 68
e. Action antibactérienne .................................................................................................... 68
f. Action antivirale .............................................................................................................. 68
g. Action cicatrisante ........................................................................................................... 69
5. Production du miel au Maroc : .......................................................................................... 69
Matériel et Méthodes........................................................................................................................... 70
I. Caractérisation physicochimique du miel de la plante Capparis Spinosa L. : ...................... 71
1. Humidité ............................................................................................................................... 71
2. Cendres ................................................................................................................................. 71
3. Conductivité ......................................................................................................................... 71
4. Couleur ................................................................................................................................. 71
5. pH et acidité ......................................................................................................................... 71

05 juillet 2014 5
6. Proline .................................................................................................................................. 72
7. Diastase ................................................................................................................................. 73
8. Sucres.................................................................................................................................... 73
9. HMF...................................................................................................................................... 74
II. L’évaluation de l’activité antioxydante des extraits aqueux des feuilles, des fleurs, et des
graines de Capparis Spinosa L., et du miel monofloral du câprier : ............................................... 74
1. Echantillons : ....................................................................................................................... 74
2. Préparation de l’extrait aqueux : ....................................................................................... 74
3. Le test de piégeage des radicaux libres DPPH :................................................................ 75
a. Principe : .......................................................................................................................... 75
b. Procédure : ....................................................................................................................... 75
c. Calcul des résultats : ....................................................................................................... 75
4. Dosage des polyphénols totaux :......................................................................................... 76
a. Principe : .......................................................................................................................... 76
b. Procédure : ....................................................................................................................... 76
c. Calcul des résultats : ....................................................................................................... 76
5. Le dosage des flavonoïdes totaux : ..................................................................................... 77
a. Principe : .......................................................................................................................... 77
b. Procédure : ....................................................................................................................... 77
c. Calcul des résultats : ....................................................................................................... 78
Le pouvoir chélateur des ions de fer :........................................................................................ 78
a. Principe : .......................................................................................................................... 78
b. Procédure : ....................................................................................................................... 78
c. Calcul des résultats : ....................................................................................................... 79
III. Etude de l’effet hypoglycémiant de l’extrait aqueux des feuilles de la plante Capparis
Spinosa et le miel monofloral de Capparis Spinosa : ........................................................................ 79
1. Matériel végétal : ................................................................................................................. 79
2. Matériel animal : ................................................................................................................. 79
3. Procédure expérimentale : .................................................................................................. 79
4. Le dosage des paramètres plasmatiques : ......................................................................... 80
a. Le dosage de la glycémie : ............................................................................................... 80
b. Le dosage des triglycérides : ........................................................................................... 81
c. Le dosage de cholestérol : ............................................................................................... 81
d. Le dosage de la créatinine :............................................................................................. 81
e. Le dosage de l’urée : ........................................................................................................ 82
5. Analyse des résultats : ......................................................................................................... 82

05 juillet 2014 6
Résultats et Discussion ........................................................................................................................ 83
I. Résultats de la détermination des caractéristiques physicochimique du mile de câprier : .. 84
II. Résultats et discussion l’activité antioxydante des extraits aqueux des feuilles, des fleurs,
et des graines de Capparis Spinosa L., et du miel monofloral du câprier : ................................... 87
1. Résultats de l’évaluation de teneur en polyphénols total :............................................... 87
2. Résultats de l’évaluation de teneur en flavonoïdes : ........................................................ 87
3. Les résultats de l’effet chélateur : ...................................................................................... 89
4. Discussion des résultats : .................................................................................................... 89
III. Résultats et discussion l’effet hypoglycémiant et hypolipidémique des extraits aqueux des
feuilles de Capparis Spinosa L., et du miel monofloral du câprier :................................................ 90
1. Dosage de la glycémie : ....................................................................................................... 90
2. Dosage du cholestérol :........................................................................................................ 91
3. Le dosage des triglycérides : ............................................................................................... 92
4. Le dosage de la créatinine sanguine : ................................................................................ 92
5. Dosage des taux de l’urée dans le sang : ............................................................................ 93
6. Effet sur la prise pondérale : .............................................................................................. 94
7. Discussion des résultats : .................................................................................................... 94
Conclusion et perspectives .................................................................................................................. 96
Références Bibliographiques .............................................................................................................. 97

05 juillet 2014 7
Listes des figures
Figure 1 Origine des différents radicaux libres oxygénés et espèces réactives de l’oxygène
impliqué en biologie (Favier, 2003). ........................................................................................ 19
Figure 2 : Balance radicaux libres /antioxydants (Shimizu H., 2004). .................................... 19
Figure 3 Nombre de personnes atteintes de diabète par région de la FID, 2013 ..................... 25
Figure 4 les pronostics de la FID à propos du diabète d’ici 22 ans.......................................... 26
Figure 5 : Top 10 des pays / territoires en termes de nombre de personnes atteintes de diabète
(20-79 ans), 2013...................................................................................................................... 26
Figure 6 la prévalence de diabète chez les adultes selon l’âge au Maroc selon la FID. .......... 27
Figure 7 : reproduction de la tablette d’argile avec un praticien en action .............................. 31
Figure 8 : le signe de Yin et Yang ............................................................................................ 32
Figure 9 : un fragment de Papyrus Ebers ................................................................................. 33
Figure 10 De Historia Plantarum ............................................................................................ 34
Figure 11 De Materia Medica .................................................................................................. 34
Figure 12 Al Jami al fi adwiya al Mufradah ............................................................................ 35
Figure 13 : le livre « Herba » de Brunfels ................................................................................ 36
Figure 14 : Brunfels.................................................................................................................. 36
Figure 15 : le livre sur les plantes de Bock .............................................................................. 37
Figure 16 Classification des polyphénols avec exemples pour chaque classe. (Boros et al.,
2010)......................................................................................................................................... 39
Figure 17 Effets biologiques des polyphénols (Martin et Andriantsitohaina, 2002). .............. 40
Figure 18 Effets des polyphénols dans le maintien de l’intégrité de l’endothélium vasculaire.
Les symboles (–) représentent l’effet inhibiteur des polyphénols, et les symboles (+) montrent
l’amélioration de la vasodilatation endothéliale par les polyphénols (Martin et
Andriantsitohaina, 2002). ......................................................................................................... 40
Figure 19: Structures chimiques de quelques flavonoïdes (Scalbert et Williamson, 2000) ..... 43
Figure 20 : Piégeage des espèces réactives dérivées de l’oxygène (R•) par les flavonoïdes et la
formation d'une structure stable (Tiqwari, 2001) ..................................................................... 44
Figure 21 la distribution de câprier dans le monde basée sur Inocenio et al. ........................... 47
Figure 22 : les feuilles de Capparis Spinosa L. ....................................................................... 48
Figure 23 : la fleur de Capparis spinosa ................................................................................... 48
Figure 24 : les fruits de Capparis Spinosa L. (câpres) ............................................................. 49
Figure 25 : Localisation de l’aire de production du câprier dans la province de Fès ............... 54
Figure 26 quelques variétés de miel ......................................................................................... 58
Figure 27 la cire d’abeille......................................................................................................... 59
Figure 28 Variétés de pollen .................................................................................................... 59
Figure 29 la propolis ................................................................................................................ 60
Figure 30 : Des larves baignant dans la gelée royale ............................................................... 61
Figure 31 : Larves d’abeilles .................................................................................................... 61
Figure 32 : La thérapie en utilisant le venin d’abeille, Bee Venom Therapy ........................... 62

05 juillet 2014 8
Figure 33 l’extrait de Quran saint sur l’abeille et le miel ......................................................... 63
Figure 34 : Apiculture en Egypte. Env. 600 av. J.-C. .............................................................. 63
Figure 35 Composition générale moyenne du miel D’après Bruneau 2009 ............................ 64
Figure 36 la courbe d’étalonnage de la courbe gallique dans le dosage de Folin-Ciocalteu. .. 77
Figure 37 la droite d’étalonnage de la quercitine ..................................................................... 78
Figure 38 : prélèvement de sang veineux de l’oreille du lapin ................................................ 80
Figure 39 : des lapins de l’espèce Oryctolagus cuniculus ...................................................... 80
Figure 40 : % l’activité antioxydante l’activité antioxydante des extraits aqueux des feuilles,
des fleurs, et des graines de Capparis Spinosa L., et du miel monofloral du Capparis
Spinosa L. ................................................................................................................................. 88
Figure 41 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel
sur a glycémie des lapins maux normaux par un auto-analyseur (Accu Check) (* : P< 0,05 ;
** : P< 0,01 ; ***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student) Figure 42 :
Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel sur a
glycémie des lapins maux normaux par spectrophotométrie (* : P< 0,05 ; ** : P< 0,01 ;
***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student). .................................... 90
Figure 43 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel
sur les taux de cholestérol des lapins maux normaux par spectrophotométrie * : P< 0,05 ; ** :
P< 0,01 ; ***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student). .................... 91
Figure 44 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du
miel sur les taux de cholestérol des lapins maux normaux par spectrophotométrie (* : P< 0,05
; ** : P< 0,01 ; ***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student). ........... 92
Figure 45 Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel
sur les taux la créatinine sanguine des lapins maux normaux par spectrophotométrie (* : P<
0,05 ; ** : P< 0,01 ; ***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student). ... 92
Figure 46 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel
sur les taux de l’urée dans le sang des lapins maux normaux par spectrophotométrie. ........... 93
Figure 47 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel
sur le poids des lapins maux normaux (* : P< 0,05 ; ** : P< 0,01 ; ***p<0.001 par
comparaison aux valeurs témoins (test t de Student). .............................................................. 94

05 juillet 2014 9
Liste des tableaux

Tableau 1 Principaux antioxydants non enzymatiques et sources alimentaires associées .................... 22


Tableau 2 Caractéristiques morphologique de Capparis Spinosa (câprier) .......................................... 50
Tableau 3 Teneurs moyennes en minéraux du miel d’après Apimondia 2001...................................... 66
Tableau 4 Les caractéristiques physico-chimiques du miel de câprier (Capparis Spinosa L.) ............. 84
Tableau 5 Teneur en sels minéraux du miel Capparis Spinosa L. ........................................................ 85
Tableau 6 contenu de sucre du miel de Capparis Spinosa L................................................................. 86
Tableau 7 Taux de phénols d’extrait aqueux de différentes parties de la plante Capparis Spinosa et le
miel monofloral de la plante .................................................................................................................. 87
Tableau 8 Taux de Flavonoïdes d’extrait aqueux de différentes parties de la plante Capparis Spinosa
et le miel monofloral de la plante .......................................................................................................... 87
Tableau 9 Les IC 50 des échantillons .................................................................................................... 88

05 juillet 2014 10
Listes d’abréviations

AAO : Activité antioxydante EAG/g.MS : Equivalent d’acide gallique


par gramme de matière sèche
AAR : pouvoir anti-radicalaire en
pourcentage ER/g.MS: Equivalent de rutine par gramme
de matière sèche
ADN : Acide ribonucléique
ERN : Espèces réactives du Nitrogène
AGMI : Acide gras monoinsaturé
ERO : Espèces réactives de l’oxygène ou
AGPI : Acide gras poly-insaturé
oxygénées
Alcl3 : Trichlorure d’aluminium
FID : federaion internationale de diabéte
ANOVA: Analyse de variance
GOD : glucose oxydase .
AVC : Accidents vasculaires- cérébraux
GPx : Glutathion peroxydase
BHT : Butyl Hydroxyl Toluène
GSH: Reduced glutathione
CI50 : Concentration inhibitrice à 50%
GSH-Px: Glutathione peroxidise
COX : Cyclooxygenase
H2O2: Eau Oxygénée ou peroxyde
D.O : Densité optique d’hydrogene

DPPH : 1,1-diphényl-2-picryl-hydrazyl HbA1c : Hémoglobine glycosylée A1C

HDL: High density lipoprotein ou LDL: Low density lipoprotein ou


lipoprotéine de haute densité lipoprotéine de basse densité

HDL-C: High density lipoprotein LDL-C: Low density lipoprotein


cholesterol cholesterol

HPLC: High performance liquid LOX : Lipooxygénase


chromatography
LTB4 : Leukotriene B4

MCV : Maladies cardio-vasculaires


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

MD : Mediterranean diet Rf : Rapport frontal

MeOH :Méthanol RLs : Radicaux libres

NF- κB : Nuclear factor-kappa B ROS : Reactive oxygen species.

NO : Monoxyde d’azote SOD : Superoxyde dismutase

OMS : Organisation Mondiale de la Santé TC :Total cholesterol

ORL: oto-rhino-laryngologie TCA :Ttichloro-acetic acide

PAI-1 :Plasminogen activator inhibitor-1 TG :Triglyceride

PP : Polyphénol v/v :Rapport volume par volume

PPSE : physiologie pharmacologie et


environment

05 juillet 2014 12
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Résumé
Le but de notre travail est d’explorer l’activité antioxydante et hypoglycémiante de l’extrait
aqueux de la plante Capparis Spinosa L. et le miel monofloral de cette plante.

Pour évaluer l’activité antioxydante de cette plante et son miel monofloral, on a effectué des
dosages de polyphénols totaux et de flavonoïdes en utilisant comme références respectivement
l’acide gallique et la quercitine, ainsi des tests de l’activité anti-radicalaire DPPH et de l’effet
chélateur. L’analyse quantitative de l’extrait aqueux des différentes parties (feuilles, fleurs et
graines) de la plante du câprier et son miel monofloral a révélé les une quantité importante des
molécules de polyphénols et de flavonoïdes, avec une quantité plus importante des polyphénols
par rapport aux autres échantillons pour les feuilles de l’ordre de 0.52g/100g de plante, et une
meilleure quantité de des flavonoïdes pour les graines de l’ordre 1.91 g/100g. Le pouvoir
antioxydant est évalué ainsi in vitro par les tests DPPH et l’effet chélateur. D’après les résultats
obtenus, il ressort que les molécules dont l’extrait aqueux des différentes parties de la plante
Capparis Spinosa L. (feuilles, fleurs et graines) et son miel monofloral ont la capacité de piéger
les radical DPPH avec une meilleure IC50 des feuilles de l’ordre de 0.48 mg/ml et la plus faible
c’était du miel monofloral de câprier de l’ordre de 3.26 mg/ml. En revanche les résultats de
l’effet chélateur fut négatifs.

Dans le cadre de cette étude nous avons aussi exploré l’effet hypoglycémiant at
hypolipidémique de l’extrait aqueux des feuilles de la plante de câprier et son miel monofloral
par le biais d’une expérience que nous avons effectué durant 21 jours avec une traitement
quotidienne de l’extrait aqueux des feuilles et une solution diluée de miel de 10% tout en
administrant un régime hypercalorique aux lapins avec in accès libre à l’eau. Les résultats de
cette expériences indiquent que les groupes qui ont reçu l’extrait aqueux des feuilles de la plante
de câprier et son miel monofloral ont leurs taux de glycémie a diminué significativement, avec
une diminution des taux des triglycérides et de cholestérol sans aucun effet sur la prise
pondérale, nous avons aussi assisté a une diminution des taux de la créatinine sanguine et des
taux de l’urée sanguine ce qui suggère que les deux solutions ont un effet diurétique.

Mots clés : Capparis Spinosa, miel monofloral, activité antioxydante, activité


hypoglycémiante, polyphénols, flavonoïdes, DPPH, glycémie.

05 juillet 2014 13
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Abstract
The aim of our work is to explore the antioxidant and hypoglycemic activity of the aqueous
extract of the plant Capparis Spinosa L. and the monofloral honey of this plant.

To evaluate the antioxidant activity of this plant and its monofloral honey, assays were
performed of total polyphenols and flavonoids, we have used respectively as references the
Gallic acid and quercetin, and tests of the anti-radical activity DPPH and also the chelating
effect. Quantitative analysis of the aqueous extract of different parts (leaves, flowers and seeds)
of Capparis Spinosa L. and its monofloral honey revealed a significant amount of molecules of
polyphenols and flavonoids, with a greater amount of polyphenols compared to the other
samples for leafs equal to 0.52g/100g of plant, and an improved amount of flavonoids equal to
1.91 g/100 g of plant for the seeds. The antioxidant power is evaluated in vitro by DPPH test
and the chelating effect. From the results obtained, it appears that molecules with the aqueous
extract of different parts of the plant Capparis Spinosa L. (leaves, flowers and seeds) and its
monofloral honey have the ability to scavenge DPPH radical with higher IC50 leaves about
0.48mg/ml and the lowest was the monofloral honey about 3.26mg/ml. However the results of
the chelating effect was negative.

In this study we have also investigated the hypoglycemic effect at hypolipidemic aqueous
extract of leaves Capparis Spinosa L. and its monofloral honey through the experience that we
have done for 21 days with a daily treatment of aqueous extract leaves and a 10% dilute solution
of honey while we were administering rabbits a high caloric supply with free access to water.
The results of the experiments indicate that groups whose received the aqueous extract of leaves
the Capparis Spinosa L. and its monofloral honey had their blood glucose levels decreased
significantly, with a decrease of triglycerides and cholesterol in blood with no effect on weight
gain, we have also attended a decreased rate of blood creatinine and blood urea levels
suggesting that those two solutions have a diuretic effect.

Keywords: Capparis Spinosa, monofloral honey, antioxidant activity, hypoglycemic activity,


polyphenols, flavonoids, DPPH, glucose.

05 juillet 2014 14
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Introduction et problématique

La mortalité cardiovasculaire est considérée comme la première cause de décès dans le monde
(représentant 35% des causes de mortalité chez l’homme et 40% chez la femme) selon des
projections de l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS) de l’année 2014. Ceci est dû à
plusieurs facteurs notamment le stress oxydant, qui est ainsi responsable de pas mal de
pathologies tel que l’ostéoporose, les maladies inflammatoires, et les maladies
neurodégénératives...etc.

La prévalence du diabète aussi et particulièrement le diabète type 2 ne cesse pas d’augmenter,


les nombres indiquent selon l’OMS que le diabète est la deuxième cause de mortalité ; ainsi
c’est un facteur important de la première cause, en plus les nombres des malades va se doubler
d’ici quinzaine d’années. Pas mal de facteurs environnementaux interagissent dans l’expansion
de cette épidémie comme l’obésité, la sédentarité et le stress oxydant.

Pour ralentir l’accroissement des nombres des patients souffrant de ces maladies, pour
compléter la tache de médecine moderne et pour balancer les effets néfastes de médicaments,
plusieurs études fait appel à la médecine traditionnelle, et particulièrement la phytothérapie.

L’humanité a fait recours aux plantes depuis des milliers années, pour traiter et soigner
nombreuses maladies, puisque les plantes est une gigantesque réserve de molécules potentiels
qui ont des propriétés pharmacologiques et antibactériennes intéressantes, tout ça a contribué
de faire à la phytothérapie une médecine complémentaire et authentique.

Une composante de la médecine traditionnelle, aussi ancienne que la phytothérapie, il s’agit de


l’apithérapie, c’est à dire se soigner exclusivement des produits de la ruche, issu de l’abeille
l’un des deux créatures les plus mystérieuses. Depuis de la nuit des temps, ces produits ont été
bénéfiques pour la santé, la beauté et l’alimentation. Ils étaient souvent consacrés comme
sacrés.

05 juillet 2014 15
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Objectif du travail

Dans ce présent travail on a choisi de travailler sur la plante Capparis Spinosa connu au Maroc
et sur le miel monofloral de cette plante afin de viser les sous objectifs suivants :

➢ La préparation des extractions aqueuse des feuilles, des graines et des fleurs de la plante
Capparis Spinosa L.

➢ L’évaluation quantitative du teneur en polyphénols et en flavonoïdes de différentes


parties de la plante Capparis Spinosa et du miel monofloral de cette plante

➢ L’évaluation de l’activité antioxydante des différentes parties de la plante Capparis


Spinosa et du miel monofloral de cette plante par le test DPPH.

➢ Déterminer les caractéristiques physicochimiques du miel de câprier.

➢ L’évaluation de l’activité hypoglycémique des feuilles de la plante Capparis Spinosa et


du miel monofloral sur des lapins de la race « hollandais Oryctolagus cuniculus ».

05 juillet 2014 16
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Partie
Bibliographique

05 juillet 2014 17
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

I. Le stress oxydatif
1. Définition :
Le stress oxydatif apparaît donc quand un déséquilibre se forme dans la balance anti/pro
oxydants. C’est seulement à ce moment que les ERO vont exercer leur action délétère sur
l’organisme. Les radicaux libres sont responsables de dommages sur toutes les molécules
biologiques comme les lipides, les protéines, les acides nucléiques, ou les hydrates de carbone
(Favier, 2003).
Les mécanismes d’oxydation des composés insaturés biologiques (acides gras, caroténoïdes,
polyphénols…) sont souvent des réactions radicalaires avec l’oxygène moléculaire et
présentent trois phases principales (Huang et al, 2005).
Une phase d’initiation qui peut être due à l’intervention d’un radical hydroxyle HO qui
arrache un atome d’hydrogène en position
RH + HOO →RO + H2O
L’arrachement du proton est facilité tant par la chaleur (agitation moléculaire) que par les
rayonnements ou les catalyseurs (métaux tels que Cu, Fe, Co, Mn, Ni…).
Une phase de propagation : en présence d’oxygène, il se forme un radical peroxyde (ROO•)
qui déstabilise une deuxième molécule d’acide gras polyinsaturés AGPI et conduit à un
hydroperoxyde lipidique (ROOH) et à un nouveau radical, assurant ainsi la propagation du
processus : RO + O2 → ROOO
ROOO+ RH→ROOH + RO
Une phase de terminaison, où se recombinent différents radicaux formés pour aboutir à des
composés stables : RO + RO→RR
ROOO + RO→ROOR
ROOO + ROOO→ROOR + O2
Des sources importantes de radicaux libres sont les mécanismes de cycles redox que produit
dans l’organisme l'oxydation de molécules comme les quinones. Ce cycle redox à lieu soit
spontanément, soit surtout lors de l'oxydation de ces composés au niveau du cytochrome P450.
Les rayonnements sont capables de générer des radicaux libres et les particules inhalées
(amiante, silice) sont aussi des sources de radicaux libres (Favier, 2003).

05 juillet 2014 18
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Figure 1 Origine des différents radicaux libres oxygénés et espèces réactives de


l’oxygène impliqué en biologie (Favier, 2003).

Figure 2 : Balance radicaux libres /antioxydants (Shimizu H., 2004).

05 juillet 2014 19
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

2. Les conséquences de stress oxydatif :


Les radicaux libres sont responsables de dommages sur toutes les molécules biologiques
comme les lipides, les protéines, les acides nucléiques, ou les hydrates de carbone (Favier,
2003).
Au niveau de l’ADN, les radicaux libres peuvent induire des effets oxydatifs et mutagènes ou
un arrêt des réplications. Ils agissent en provoquant des altérations de bases, des pontages ADN-
protéines ou des ruptures de brins (Shimizu H., 2004).
Les lipides sont une cible privilégiée des radicaux libres. Ceux-ci provoquent en effet
l’oxydation des acides gras poly-insaturés (AGPI) des phospholipides membranaires
(principaux constituants des membranes des cellules), mais aussi des organites cellulaires et des
noyaux. Ce phénomène est appelé peroxydation lipidique ou lipopéroxydation aboutissant à la
formation de LDL oxydées qui sont captées par des macrophages, formeront le dépôt lipidique
de la plaque d'athérome des maladies cardiovasculaires, l'attaque des phospholipides
membranaires modifiant la fluidité de la membrane et donc le fonctionnement de nombreux
récepteurs et transporteurs et la transduction des signaux (Favier, 2003).
Les radicaux libres peuvent aussi agir sur les macromolécules en provoquant des inactivations
enzymatiques, des fragmentations de ces molécules (collagène, protéoglycannes, acide
hyaluronique) et la formation de dimères ou d’agrégats protéiniques dans les membranes
cytoplasmiques (Shimizu H., 2004).
3. Implications pathologiques de stress oxydant :
En raison de leur réactivité élevée, les espèces réactives interagissent avec toute une série de
substrats biologiques conduisant à l’altération de l’homéostasie cellulaire de l’organisme. Le
dysfonctionnement des systèmes de régulation de l’oxygène et de ses métabolites est à l’origine
de phénomènes du stress oxydant dont l’importance dans de nombreuses pathologies comme
facteur déclenchant ou associé à des complications lors de leur évolution est maintenant
largement démontré. En fait, de nombreuses études, tant épidémiologiques que cliniques,
indiquent que le stress oxydant est potentiellement impliqué dans le développement de plus
d’une centaine de pathologies humaines différentes allant de l’athérosclérose au cancer tout en
passant par les maladies inflammatoires, cardiovasculaires, neurodégénératives et le
diabète(phénomène de glycos-oxydation est très important chez les diabétiques et contribue à
la fragilité de leurs parois vasculaires et de leur rétine) . Cataracte, sclérose latérale
amyotrophique, syndrome de détresse respiratoire aigu, oedème pulmonaire, vieillissement
accéléré, la maladie d'Alzheimer, les rhumatismes et les maladies cardiovasculaires, maladie

05 juillet 2014 20
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

de Parkinson, les inflammations gastro-intestinale, ulcères, les œdèmes et vieillissement


prématuré de la peau (Roberts et Sindhu, 2009).
4. Les antioxydants :
Un antioxydant est défini comme une substance qui, ajoutée à faible dose à un produit
naturellement oxydable à l’air, est capable de ralentir ou d’inhiber le phénomène d’oxydation.
Cette définition peut être élargie et le terme "antioxydant" englobe ainsi toutes les substances
qui protègent les systèmes biologiques contre les effets délétères potentiels des processus ou
réactions qui engendrent une oxydation excessive (Shimizu H,. 2004). Ils agissent en formant
des produits finis non radicaux, d’autres en interrompant la réaction en chaîne de peroxydation,
en réagissant rapidement avec un radical d’acide gras avant que celui-ci ne puisse réagir avec
un nouvel acide gras, tandis que d’autres antioxydants absorbent l’énergie excédentaire de
l’oxygène singlet pour la transformer en chaleur. En même temps, les antioxydants arrêtent la
réaction, la plupart du temps parce que la structure des antioxydants est relativement stable
(Haton, 2005).
a. Antioxydants endogènes :
Les défenses antioxydantes de l’organisme peuvent se diviser en systèmes antioxydants
Enzymatiques :

- Un système de défense primaire: composé d’enzymes et de substances anti oxydantes


➢ La superoxyde dismutase (SOD) : diminue la durée de vie de l’anion superoxyde O2·
➢ La catalase : transforme le peroxyde d’hydrogène (H2O2) en simple molécule d’eau
➢ La glutathion peroxydase (GPx) : détruit le peroxyde d’hydrogène et les peroxydesn
lipidiques
➢ Les molécules piégeurs : le glutathion (GSH), l’acide urique, les protéines à groupement
thiols, ubiquinone, …etc.
- Un système de défense secondaire : composé d’enzymes protéolytiques, des
phospholipases, des ADN endonuclease et ligase, des macroxyprotéinases.
b. Les antioxydants naturels :
Plusieurs substances peuvent agir en tant qu'antioxydants in vivo ont été proposé. Elles incluent
le bêta carotène, l'albumine, l'acide urique, les oestrogènes, les polyamines, les flavonoïdes,
l'acide ascorbique, les composés phénoliques, la vitamine E…etc.
(Koechlin-Ramonatxo, 2006). Elles peuvent stabiliser les membranes en diminuant leur
perméabilité et elles ont également une capacité de lier les acides gras libres.

05 juillet 2014 21
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Tableau 1 : Principaux antioxydants non enzymatiques et sources alimentaires associées


(Koechlin-Ramonatxo, 2006).

Principaux nutriments antioxydants Sources alimentaires


Vitamine C Agrume, melon, brocoli, fraise, kiwi, chou,
poivron
Vitamine E Huile de tournesol, de soja, de maïs, beurre, œufs,
noix
Β-carotène Légumes et fruits orangés, et vert foncés
Sélénium Poisson, œufs, viandes, céréales, volaille
Zinc Viande, pain complet, légumes verts, huîtres,
produits laitiers
Flavonoïdes Fruits, légumes, thé vert
Acides phénoliques Céréales complètes, baies, cerises
Tanins Lentilles, thé, raisins, vin
Métabolisme de cystéine, glutathion Caséine, Lactalbumine (petit-lait), produits laitiers
Brocoli, chou, œufs, poissons, viandes

05 juillet 2014 22
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

II. Le diabète :
1. La définition :
Selon l’OMS (OMS, 2006), le diabète est défini par :

- une glycémie à jeun ≥ 7 mmol/l (1,26 g/dl), après un jeûne de 8 heures et vérifiée à deux
reprises

- ou une glycémie 2 heures après une charge de 75 g de glucose ≥ 11,1 mmol/l (2 g/dl)

- ou une glycémie ≥ 11,1 mmol/l (2 g/dl), quelle que soit l’heure du prélèvement, en présence
de symptômes cliniques

Différents tests ont été analysés, afin de déterminer au mieux le statut glycémique des patients
(OMS, 2006) :

- La glycémie à jeun plasmatique reste à l’heure actuelle le gold standard.

- La glycémie post charge (2h après l’absorption de 75 g de glucose), ne doit pas être rejetée,
car elle permet de diagnostiquer 30% de diabétiques non établis par la glycémie à jeun. C’est
aussi un moyen de repérer l’intolérance au glucose.

- L’utilisation de l’hémoglobine glyquée comme méthode de dépistage, initialement non


recommandée en 2006, du fait de son manque de disponibilité dans les pays en voie de
développement et de l’influence de certains facteurs (anémie, hémoglobinopathies, urémie,
grossesse) sur son dosage, a récemment été réévaluée par l’OMS (OMS, 2011).

L’HbA1c peut être utilisée, du fait de la fiabilité et de la standardisation de sa mesure. Une


HbA1c ≥ 6,5% permet de poser le diagnostic de diabète. Cependant, des valeurs < 6,5%
n’excluent pas un diabète.

2. Classification de diabète :
a. Diabète type 1 « insulino-dépendant » :
Ce diabète correspond à une forme sévère de la maladie. Il est particulièrement représenté chez
les jeunes mais peut aussi apparaître chez des individus adultes non obèses.
Ce diabète se caractérise par l’absence d’insuline circulante ou insulinopénie, une concentration
plasmatique élevée en glucagon et une incapacité des cellules b pancréatiques à répondre aux
stimuli insulino-sécréteurs. Ceci entraîne des modifications d’ordre général. En effet, à cause

05 juillet 2014 23
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

de l’absence d’insuline, les trois principaux tissus cibles de l’insuline, qui sont le foie, les
muscles et le tissu adipeux, ne se chargent plus de l’absorption des nutriments et libèrent de
manière plus importante du glucose, des acides a-aminés et des acides gras dans la circulation
générale. De plus, les changements dans le métabolisme lipidique provoquent la synthèse et
l’accumulation de corps cétoniques. (LEROY J, 1999).
b. Diabète type 2 « non insulino-dépendant » :
Ce diabète est défini de manière différente par rapport au diabète de type 1. En effet, il s’agit
d’un groupe hétérogène, non pas fondé sur des caractéristiques propres mais sur l’absence des
caractéristiques du diabète de type 1 (OMS, 2006). C’est donc un diabète non acidocétosique.
Sa caractéristique principale est l’insulino-résistance des tissus cibles (diminution de l’action
inhibitrice de la production endogène et de l’action stimulatrice de l’utilisation périphérique du
glucose de l’insuline) (RIGALLEAU V, 2007) qui entraînent une hyperinsulinémie
réactionnelle. Il existe une adaptation physiologique de la sécrétion d’insuline par rapport à
l’insulino-sensibilité (RIGALLEAU V, 2007). L’insuline est effectivement produite par les
îlots endocrines du pancréas et dans certains cas (chez les sujets non obèses) la sécrétion de
cette hormone est même anormalement élevée. Par conséquent, le traitement de ce type de
diabète ne repose pas sur l’insulinothérapie. La prise en charge thérapeutique est constituée par
un traitement hygiénique (régime alimentaire spécifique) et par l’administration de sulfamides
hypoglycémiants. Néanmoins, dans les formes graves et compliquées secondairement
d’insulinopénie, une insulinothérapie peut être instaurée (OMS, 2006).
L’incidence de ce type de diabète est particulièrement élevée chez les adultes, notamment ceux
atteints d’obésité (85% des cas sont obèses).
c. Le diabète gestationnel :
Le diabète gestationnel se définit comme un trouble de la tolérance au glucose dont la sévérité
est variable. Ce trouble est diagnostiqué pour la première fois durant la grossesse, quel que soit
le terme et quelle que soit son évolution en post-partum. La prévalence européenne est estimée
entre 1 et 6% des grossesses (FENICHEL P, 1998).
Ce diabète est responsable d’une augmentation de morbidité maternelle et fœtale, mais celle-ci
peut être diminuée grâce à une prise en charge précoce d’où l’intérêt des dépistages.
Les femmes ayant présenté un diabète gestationnel ont un risque élevé de développer par la
suite un diabète non insulino-dépendant (ou diabète de type 2), et il a été montré que les risques
d’obésité voire d’intolérance au glucose ou de diabète sont accrus chez les enfants issus de ces
grossesses (FENICHEL P, 1998).

05 juillet 2014 24
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

d. Diabète secondaire :
Un diabète sucré peut être secondaire à une pancréatopathie (pancréatite chronique ou aiguë,
mucoviscidose, tumeur), à l’hémochromatose, à des cirrhoses, à diverses endocrinopathies
(phéochromocytomes, acromégalie, syndrome de Cushing, hyperthyroïdie, tumeurs endocrines
pancréatiques et digestives ou iatrogènes) (MAUGENDRE D et al, 2007).
Ce type de diabète peut être à l’origine d’une destruction des îlots pancréatiques et donc d’une
insulinopénie, d’une insulino-résistance ou d’une association des deux (MAUGENDRE D et
al, 2007).
3. Epidémiologie du diabète :
a. Données mondiales :
La majorité des 382 millions de personnes atteintes de diabète a entre 40 et 59 ans, et 80 %
d’entre elles vivent dans des pays à faible et moyen revenu. Tous les types de diabète sont en
progression, en particulier le diabète de type 2 : le nombre de personnes atteintes de diabète
aura pratiquement doublé d’ici à 2035. (FID, 2013). Cauchemar

Figure 3 Nombre de personnes atteintes de diabète par région de la FID, 2013

21 millions de cas supplémentaires d’hyperglycémie durant la grossesse contribueraient au


fardeau mondial du diabète. Cela équivaut à 17 % des enfants nés vivants en 2013 de femmes
qui présentaient une certaine forme d’hyperglycémie durant la grossesse. (FID, 2013).

05 juillet 2014 25
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Tant en termes humains que financiers, le fardeau du diabète est énorme puisqu’il provoquera
5,1 millions de morts et engloutira près de 548 milliards de dollars en dépenses de santé (11 %
des dépenses totales dans le monde entier) en 2013. (FID, 2013).

Figure 4 les pronostics de la FID à propos du diabète d’ici 22 ans

Figure 6 : Top 10 des pays / territoires en termes de nombre de personnes atteintes de


diabète (20-79 ans), 2013

Figure 5 : Top 10 des pays / territoires en termes de nombre de personnes atteintes de


diabète (20-79 ans), 2013

05 juillet 2014 26
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

b. Donnée nationales :
Tout d’abord concernant la prévalence de l’affection, les dernières estimations nationales
atteignent aujourd’hui 9% pour les personnes âgées de plus de 20 ans. Et si l’on considère les
tranches d’âge au-delà de 50 ans, la prévalence dépasse les 14%. Ainsi, aujourd’hui environ un
million et demi de personnes souffrent du diabète dans notre pays. (Ligue marocaine de la lutte
contre le diabète).

Figure 6 la prévalence de diabète chez les adultes selon l’âge au Maroc selon la FID.

4. Les complications du diabète :


Le diabète est une source de nombreuses compactions aiguës, mais essentiellement chroniques.
Les complications à long terme du diabète sont classiquement divisées en deux catégories : les
complications microangiopathiques : neuropathie, néphropathie et rétinopathie dont le facteur
de risque majeur est l’hyperglycémie, et les complications macroangiopathiques : maladies
cardiovasculaires dont les facteurs de risque sont l’hyperglycémie, l’insulinorésistance, des
carences en insuline, des acides gras libres dans le sang, l’hypertension, l’hyperlipidémie, et
l’inflammation. (King, 2008).
a. Complications microangiopathiques :
La rétinopathie est une complication fréquente qui touche plus de 50% des diabétiques après
15 ans d’évolution du diabète. Fortement lié à l’hyperglycémie et la durée du diabète, elle se
traduit par diverses lésions observables lors d’un examen du fond d’oeil : micro-anévrismes

05 juillet 2014 27
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

rétiniens, hémorragies rétiniennes punctiformes, exsudats et oedèmes rétiniens, et oedème


maculaire. Elle est responsable de cécité. (Monnier et Thuan, 2007)

La néphropathie touche préférentiellement les diabétiques de type 1 : 50% des malades en sont
atteints. Ses principaux facteurs d’apparition et de progression sont le mauvais équilibre
glycémique et l’hypertension, qui doit chez ces sujets rester en dessous de 130/80 mmHg. Elle
évolue en plusieurs étapes et débute par une micro-albuminurie anormale qui traduit des défauts
anatomiques et biochimiques au niveau des glomérules rénaux. Elle évolue avec la présence
d’hypertension en un syndrome oedémateux susceptible d’évoluer vers une insuffisance rénale.
Le patient est alors macroalbuminurique et les glomérules rénaux diminuent en nombre et en
capacité fonctionnelle. (Monnier et Thuan, 2007)

La neuropathie est la complication la plus fréquente et la plus précoce du diabète sucré. Il s’agit
d’une démyélisation segmentaire des axones et une atteinte des cellules de Schwann avec des
dépôts lipidiques. Sa manifestation la plus commune est la polynévrite : atteinte bilatérale et
symétrique au départ distale puis qui remonte progressivement au niveau proximal des
membres, quasi exclusivement les membres inférieurs. (Monnier et Thuan, 2007).
b. Complications macroangiopathiques :
Elles touchent toutes les artères de l’organisme mais se manifestent principalement au niveau
des artères coronaires et cérébrales, et des membres inférieurs. Les principaux facteurs de leur
apparition sont l’hyperglycémie, l’hypertension artérielle et la dyslipidémie (augmentation des
triglycérides, diminution du HDL cholestérol et présence de petits LDL denses très
athérogènes). Les lésions sont distales, souvent calcifiées et les dépôts lipidiques au niveau des
artères sont accompagnés de dépôts glycoprotéiques. Elles peuvent conduire à une insuffisance
coronaire susceptible d’entrainer un infarctus du myocarde, à une atteinte des troncs artériels
supra-aortiques responsables d’accidents vasculaires cérébraux, et à une artériopathie des
membres inférieurs pouvant conduire à des nécroses distales à l’origine d’amputations.
(Monnier et Thuan, 2007).

05 juillet 2014 28
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

III. Rappels sue la phytothérapie :


1. Définition :
Le mot "phytothérapie" est d’origine grecque "PHUTON" et "THERAPEUIEN" qui désigne
« soigner avec des plantes », c’est une sorte de pratique basé sur le savoir qui s’est accumulée
et s’est transmis au fil des générations, la phytothérapie se définie comme la médecine basée
principalement sur les extraits des plantes médicinales. (OLLIER C. Conseil en
phytothérapie, 2000).
2. Les plantes médicinales :
a. Définition :
Les plantes médicinales désignent les différents types de plantes qui sont utilisés en
herboristerie et certain nombre de ces plantes ont des activités médicinales. Elles sont
considérées comme étant riches en ressources de composés qui peuvent êtres utilises dans le
développement et la synthèse des médicaments. En addition ces plantes jouent un rôle crucial
dans le développement de la culture humaine dans le monde entier. (Bassam Abdul Rasool
Hassan, 2012).

La Pharmacopée Européenne définit les plantes médicinales comme « des drogues végétales
dont au moins une partie possède des propriétés médicamenteuses. Par extension, on appelle
souvent « plante médicinale » ou « plante » non seulement l’entité botanique mais aussi la
partie utilisée (feuille, fleur, racine, écorce, sommité fleurie…). (OLLIER C., 2000.), Ces
plantes médicinales peuvent également avoir des usages alimentaires, condimentaires ou
hygiéniques (Anses - Agence nationale de sécurité sanitaire de l’alimentation, de
l’environnement et du travail : http://www.afssaps.fr).

Les plantes médicinales ont un avenir promoteur, il existe environ un demi-million de plantes
médicinales dans le monde, la plupart d’eux leur propriétés médicinales ne sont pas investigués
encore, et ses activités médicinales peuvent être décisives pour les courantes ou les prochaines
études. (Bassam Abdul Rasool Hassan, 2012).

b. Les caractéristiques des plantes médicinales :


Les plantes médicinales possèdent des caractéristiques lorsqu’elles sont utilisées comme un
traitement :

05 juillet 2014 29
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

➢ Synergiques : tous les composés de plante médicinale interagissent simultanément,


alors leur utilisations peut compléter ou endommager les uns des autres, ou bien
neutraliser leur effets négatives possibles.
➢ Supportives de la médecine traditionnelle : pendant le traitement des cas complexes
comme les maladies de cancer, les composés de ces plates sont prouvés d’être très
efficaces.
➢ Préventives : il est prouvé que les composés des plantes médicinales ont le pouvoir de
prévenir l’apparition de certain maladies, ceci va réduire l’utilisation des remèdes
chimiques, et diminue l’utilisation de traitement synthétique. (Bassam Abdul Rasool
Hassan, 2012).

3. Histoire de la phytothérapie : (Milan Nagy, History Of Phytotherapy And


Pharmacognosy), (CAZAU-BEYRET Nelly, 2013).
a. L’antiquité :
La médecine basée sur les plantes était connue depuis 3000 années avant J-C, chez plusieurs
civilisations, tel que les Sumériens qui ont laissé comme héritage médical très important, le
plus large traité médical survivant de l’incendie de la grande bibliothèque d’Assurbanipal le
dernier grand roi d’Assyrie. Il est composé d’environ 40 tablettes écrites en cunéiforme étudié
par Le savant français R. Labat connu sous le nom de "Traite De Diagnostic Médical et
Pronostic" (Treatise of Medical Diagnosis and Prognosis), bien qu’il contient la plus vielle
copie qui remonte à 1600 années avant J-C dont le texte contient une amalgame de savoir
médical de Mésopotamie accumulé pendant plusieurs siècles.

Une autre importante collection concernant « la loi de Hammourabi » montre les capacités des
mésopotamiens, elle n’est pas trouvé gravée sur une tablette, mais découvrit sur une diorite
polie. L’un de ces textes recommande l’utilisation d’un pansement constitué essentiellement
de l’huile de sésame, qui agit comme un agent antibactérien. Autres textes référencent
l’utilisation de plusieurs plantes médicinales connues comme le pavot, belladone, mandragore,
herbe aux poules, réglisse, et menthe sont aussi décrits.

05 juillet 2014 30
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Figure 7 : reproduction de la tablette d’argile avec un praticien en action

La pharmacie chinoise, selon la légende, prend origine de "Shen Nung" (2700 J-C), un
empereur qui avait cherché et investigué la valeur médicinale de quelque centaines de plantes.
Il est réputé qu’il a testé ces plantes sur lui-même, et il a écrit le premier « Pen T-Sao », qui
contient les pratiques de la phytothérapie, enregistrant plus de 365 plantes. Ces plantes sont
regroupées selon les groupes suivants : 120 plantes empereurs d’une haute qualité de nourriture
qui ne sont pas toxiques et peuvent être consommés en large quantité pour maintenir une bonne
santé pour une longue période de vie. Le deuxième groupe contient 120 plantes ministères,
quelques-unes sont légèrement toxiques, elles ont un pouvoir thérapeutique pour guérir des
maladies. Et finalement le troisième groupe composé de 120 plantes serveurs qu’elles ont un
une action spécifique pour traiter les maladies et éliminer la stagnation, la plupart de ces plantes
sont toxiques pas destinée à être consommé quotidiennement pendant une période prolongée de
semaines et mois. Ancêtres

Cette médecine se basait sur le Taoïsme (« enseignement de la voie »), philosophie populaire
de l’extrême Orient à laquelle on doit le YIN et le YANG et la recherche d’une vie en harmonie
avec la nature. Un des principes appliqué était la thérapeutique des « signatures ». Les haricots
(en forme de rein) traitaient les dysfonctionnements des reins. Le safran (jaune) pouvait
améliorer l’ictère.

05 juillet 2014 31
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Figure 8 : le signe de Yin et Yang

"Shen Nung" a possiblement examiné plusieurs plantes, écorces, et racines ramenées des
champs, marécages, et les forêts qui sont encore dans la pharmacie aujourd’hui, par exemple :
podophyllum, rhubarbe, ginseng, stramonium, l’écorce de cannelle, et éphédra.

Le plus important manuel clinique de la médecine traditionnelle chinoise est Le « Chang Hung
Lun » (traité sur le traitement des maladies aigues causées par le froid) écrit par Chang Chung-
Ching (142-220). La célébrité et la réputation de Chang Hung Lun aussi bien que son livre
compagnon « Chin Keui Yao Lueh » (Prescriptions de La Chambre Doré) est l’origine
historique les plus importantes classiques formules basée sur les plantes qui sont devenues la
base de l’herboristerie chinoise et japonaise-chinoise appelé « Kampo ».

En Egypte, les documents médicaux existant les plus complets sont « L’Ebers Papyrus » (1550
avant J-C), ancien « papier » décrivant l’usage des plantes dans la médecine. Retrouvé dans les
ruines du temple de Louxor, il fut écrit à Thèbes en -1600 av JC. Notre mot actuel « papier »
vient du latin « papyrus » et du grec « paporus » signifiant «roseau d’Egypte » dénommé plus
tard Cyperus papyrus par les botanistes. Il décrivait l’usage de plus de 500 plantes dans la
médecine et de 800 « recettes de médicaments ». Le pavot soulageait les maux de tête et les
végétaux pouvaient être utilisés lors d’incantations. Des modes d’administration ingénieux y
étaient aussi décrits comme les tisanes, les potions, les pommades et les collyres à instiller à
l’aide d’une plume de vautour.

Aussi « L’Edwin Smith Papyrus » (1600 avant J-C), qui contient les instructions chirurgicales
et les formules des cosmétiques. On croit qu’l est copié par un scribe d’un un autre document

05 juillet 2014 32
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

plus ancien qui remonte à plus de 3000 avant J-C, les plantes communément utilisés sont
compris, Senna ou alors Cassia Fostula, le thym, le genévrier, le cumin et ainsi le miel sont
tous pour consacrés la digestion, La racine de la grenade et la jusquiame noire pour les verts,
aussi bien que le lin, pomme de chêne, le pin, la manne, Myrica, Ammi, Alkanna, Aloés, le
Carvi, Papyrus et autres plantes.

Le Kahun Médicale Papyrus est le plus vieux (1900avant J-C) et traite la santé de la femme,
incluant les instructions de l’accouchement. Médecine égyptienne

Figure 9 : un fragment de Papyrus Ebers

En Grèce vers 400 ans avant J-C, l’un des plus connus des médecins de l’époque, Hippocrate,
il est considéré comme une école de la médecine rationnelle ou scientifique, il écrivait CORPUS
HIPPOCRATICUM : répertoire de 200 drogues. Il considérait que « la nature était le premier
médecin ».Et à l’origine d’une locution latine : « primum non nocere », « d’abord ne pas nuire
», concept encore d’actualité en médecine. Il contribua à la séparation de la médecine, de la
magie et de religion.

05 juillet 2014 33
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

"Dioscoride" lui succéda, et écrivit le « Traite De Matière Médicale », en cinq livres dans
lesquels il répertoriait près de 520 plantes médicinales classées selon leur propriétés, à l’origine
de la pharmacopée et utilisé jusqu’à la Renaissance comme étant la source autorisé de
l’information pharmacologique. Theophrastus écrivait aussi « De Historia Plantarum » et « De
Causis Plantarum », avec plusieurs types de plantes et la façon dont elles sont utilisées en
médecine, et comment les cultiver avec plusieurs observations

Figure 11 De Materia Medica Figure 10 De Historia Plantarum

Dans les années 150 après J-C, Galien, médecin d’origine Turque, pratiquait et enseignait la
médecine et la pharmacie en Rome, influença énormément la médecine de par ses découvertes
anatomiques et pharmaceutiques en composant la PHARMACOPEE GALENIQUE. Ouvrage
sur les médicaments et l’importance de leur mise en forme. On emploi encore aujourd’hui en
pharmacie le terme de forme galénique d’un médicament. Galien aurait mis au point une
thériaque (formule à base d’opium comptant 52 composants) pour soulager les migraines de
l’empereur romain Marc Aurèle.

b. Les moyens âges :


Dans les moyens âges, c'est-à-dire depuis l’antiquité jusqu’a la renaissance, plusieurs écoles de
médecines contribuait considérablement dans la progression de l’herboristerie peuvent être
notés.

05 juillet 2014 34
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

"Abdullah Ibn Ahmad Ibn al-Baytar" était le plus grand botaniste et pharmacien d’Espagne de
l'époque médiévale. Il erra à la recherche de plantes et d'herbes cueillies sur le littoral
méditerranéen, de l'Espagne à la Syrie, a décrit plus de 1400 médicaments médicaux et les a
comparés avec les dossiers de plus que 150 anciens et arabes auteurs. La collection des
médicaments simples composés par lui est le plus remarquable travail botanique en arabe.

Il s'agit d'un ouvrage encyclopédique sur ce sujet. Une de ses œuvres « AI-Mughani-fi al adwiya
al Mufradah » traite de la médecine. L'autre « Al Jami al fi adwiya al Mufradah » (Collection
de simples médicaments et de l'Alimentation) est un livre très précieux contenant des remèdes
simples concernant des matières animales, végétales et minéral qui étaient décrit ci-dessus.

Figure 12 Al Jami al fi adwiya al Mufradah

Il traite également de 200 plantes nouvelles qui ne sont pas connus à ce moment-là. Il s'agit d'un
recueil alphabétique des plantes médicinales de toute sorte, dont la plupart étaient originaires
de l'Espagne et l'Afrique du Nord, où il a passé sa vie en collectant eux. Lorsque cela est
possible, il donne le nom de la plane berbère, l'arabe, et parfois romain, de sorte que pour les
linguistes son travail est d'un intérêt particulier. Dans chaque article, il donne des informations
sur la préparation du médicament et son administration, du but et du dosage.

05 juillet 2014 35
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

c. La renaissance :
Le travail de Brunfels (1488-1534), un pasteur et naturaliste et un physicien à Berne, est
considéré comme la première œuvre originale en botanique. Son importance repose moins dans
son texte que dans ses gravures sur des bois élégantes. Le livre sur les plantes est classé par
ordre alphabétique et met l'accent sur les illustrations plus que des descriptions écrites.

Les botanistes mentionnent Brunfels comme le premier motivateur de "Jérôme Bock". En


raison de l'insistance de Brunfels, Bock a complété son livre sur les plantes. Le travail de Bock
était plus scientifique que de Brunfels et il est considéré comme l'un des piliers sur lesquels
repose l'étude botanique plus tard.

Figure 14 : Brunfels Figure 13 : le livre « Herba » de


Brunfels

Le but de Bock était non seulement d'identifier les plantes connues par "Dioscoride", mais aussi
pour afficher discuter leurs caractéristiques. Bien Bock (1498-1554) était un autodidacte, il
était le premier à créer un système de botanique qui classifie les plantes en trois catégories:
herbes, d'arbustes et d'arbres.

Il a ensuite subdivisé chaque groupe en fonction des caractéristiques ou des relations similaires.
Bien qu'il n'ait pas développé des concepts tels que «genre» ou «espèces», son travail était les
bases pour "Linnaeus".

05 juillet 2014 36
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Pour compenser le manque d’illustrations il s'est concentré sur l'écriture de telles descriptions
claires des plantes que même les profanes pourraient reconnaître ce qu'il essayait de représenter.
Ainsi, il a développé le prototype de la photographie moderne, la science de la description de
la plante. Cependant, Lorsque les éditions ultérieures étaient émises, l’éditeur décidé que les
illustrations doit être incluses pour rendre le livre plus utile.

Figure 15 : le livre sur les plantes de Bock

05 juillet 2014 37
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

IV. Les composés phénoliques :


1. Généralités :
Les composés phénoliques sont des métabolites secondaires végétaux. Ils peuvent être définis
comme des molécules indirectement essentielles à la vie des plantes (d’où la dénomination de
métabolites secondaires). Par opposition aux métabolites primaires qui alimentent les grandes
voies du métabolisme basal, mais ils sont essentiels dans l'interaction de la plante avec son
environnement.

Près de 8000 composés naturels appartiennent à cette famille; ils ont en commun un noyau
benzénique portant au moins un groupement hydroxyl. Selon le nombre d’unités phénoliques
présents, on les classe en composés phénoliques simples et polyphénols. Par abus, on les appelle
indifféremment composés phénoliques ou polyphénols et comprennent essentiellement les
phénols simples, les acides phénoliques, les stilbènes, les flavonoïdes, les tanins hydrolysables
et condensés, les coumarines, les lignanes, les lignines, et les xanthones (Stalikas, 2007).
D'un point de vue appliqué, ces molécules constituent la base des principes actifs que l'on trouve
chez les plantes médicinales, alliées à leur difficulté de production. Chez l'homme, ces
molécules traces jouent un rôle important en agissant directement sur la qualité nutritionnelle
des fruits et légumes et leur impact sur la santé des consommateurs (effet antioxydant, effet
protecteur contre contre l'apparition de certains cancers...) (Macheix et al, 2005).

2. Les principales classes des composés phénoliques :


La structure chimique est identique à tous les polyphénols : un ou plusieurs noyaux aromatiques
hydroxylés. Les polyphénols sont classés en différents groupes en fonction du nombre de
noyaux aromatiques qui les composent et des éléments qui les relient. On distingue les phénols
simples (parmi eux les acides phénoliques), les flavonoïdes, les lignanes et les stilbènes
(Boros,2010). En plus de cette diversité, les phénols sont présents naturellement sous forme
conjuguée : avec des sucres, des acides organiques, entre eux.
➢ Les phénols simples (C6): un seul noyau phénol comme pour les acides phénoliques
(C6–C1).
➢ Les flavonoïdes (C6-C3–C6): 2 noyaux aromatiques reliés par un hétérocycle
oxygéné.
➢ Les tanins hydrolysable et non-hydrolysable.
➢ Les stilbènes (C6–C2–C6).
➢ Les lignanes, les lignines et les coumestanes : 2 unités de phénylpropane

05 juillet 2014 38
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

➢ Autres phytoestrogènes
➢ Les saponines (triterpenoïdes)
➢ Les phytostérols et les phytostanols ( Paraskevi, Moutsatsou, 2007). Bien qu'ils ne
soient pas des polyphénols, on ajoute ordinairement à cette liste les isothiocyanates,
qui dérivent de l'hydrolyse des glucosinolates (Dacosta, 2003).

Figure 16 Classification des polyphénols avec exemples pour chaque classe. (Boros et
al., 2010)

3. Les effets biologiques des composés polyphénoliques :


Les composés polyphénoliques sont d’ailleurs de plus en plus utilisés en thérapeutique (Crozier,
et al., 2010). De nombreux travaux suggèrent que les polyphénols participent à la prévention
des maladies cardio-vasculaires (Manach, et al., 2005). Leur consommation se traduit par une
augmentation transitoire de la capacité antioxydante du plasma dans les heures qui suivent le
repas.
Parvenus au niveau des artères, ils préviennent l'oxydation des lipoprotéines de faible densité
(Low Density Lipoproteins ou LDL) qui est l'un des facteurs clé du processus
physiopathologique de l’athérosclérose .En inhibant l’oxydation des LDLs, ils limitent leur
incrustation dans les parois des artères qui contribuent à l’épaississement des parois et à réduire
le flux de sang qui parvient au niveau des tissus.

05 juillet 2014 39
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Les polyphénols agiraient aussi en inhibant l’agrégation plaquettaire impliqué dans le


phénomène de thrombose qui peut conduire à l’occlusion des artères (Manach, et al., 2005). Ils
sont regroupés dans la catégorie de veinotoniques et des vasculo-protecteur (Ghosh, et al.,
2009).
Un certain nombre de molécules polyphénoliques sont également en étude clinique comme des
antiagrégants plaquettaires ou hypotenseurs sans résultats probant (Martin et Andriantsitohaina,
2002).

Figure 18 Effets des polyphénols dans le maintien de l’intégrité de l’endothélium


vasculaire. Les symboles (–) représentent l’effet inhibiteur des polyphénols, et les
symboles (+) montrent l’amélioration de la vasodilatation endothéliale par les
polyphénols (Martin et Andriantsitohaina, 2002).

Figure 17 Effets biologiques des polyphénols (Martin et Andriantsitohaina, 2002).

05 juillet 2014 40
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Les polyphénols sont associés à de nombreux processus physiologiques dans la qualité


alimentaire, impliqués lorsque la plante est soumise à des blessures mécaniques. La capacité
d’une espèce végétale à résister à l’attaque des insectes et des microorganismes est souvent
corrélée avec la teneur en composés phénoliques (Bahorun, 1997).

05 juillet 2014 41
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

V. Les flavonoïdes :
L'expression flavonoïde a été introduite en 1952 par Geissman et Hinreiner pour désigner les
pigments ayant un squelette (C6-C3-C6), provenant du mot latin flavus qui signifie jaune
(Bouakaz,2006).Occupant une place prépondérante dans le groupe des phénols, les flavonoïdes
sont des métabolites secondaires ubiquistes des plantes. On estime que 2 % environ du carbone
organique photo-synthétisé par les plantes, soit quelques 109 tonnes par an, est converti en
flavonoïdes (Lhuillier, 2007). Les plus couramment vendus ou utilisés en tant que compléments
alimentaires. la vanilline et l’acide vanillique, le resveratrol, l’acide ellagique, les curcumine,
stilbène, epigallocatechine gallate et la quercitine (Ferguson, 2001).
4. Classification des flavonoïdes :
Les flavonoïdes présentent un squelette de base à 15 atomes de carbone, fait de deux cycles
benzéniques C6 reliés par une chaîne en C3 (Milane, 2004). Le pont à 3 carbones entre les deux
phényles forme généralement un troisième cycle pyrone. La distinction des sous-classes se fait
sur la conformation de cette structure centrale.

Tous les flavonoïdes ont une origine biosynthétique commune et de ce fait possèdent le même
élément structural de base. Ils peuvent être regroupés en différentes classes selon le degré
d’oxydation du noyau pyranique central, le noyau B relié à l’hétérocycle C dans Les positions
2, 3(figure 6).Dans la position 2 : le flavonoïde est appelé Flavane. Si la position 4 de la flavane
porte un groupement carbonyl la flavane est appelé Flavanone. Si la liaison C2-C3 dans le
squelette de la flavanone est insaturée le composé est nommé Flavone. Si le squelette est
substitué en position 3 par un groupement hydroxyle il est désigné par le nom de Flavonol.
Dans la position 3 : le flavonoïde est désigné par le terme Isoflavane (Bouakaz, 2006).

Figure 6 Structure de base des flavonoïdes (Dacosta, 2003).

05 juillet 2014 42
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Figure 19: Structures chimiques de quelques flavonoïdes (Scalbert et Williamson,


2000)
5. Effets biologiques des flavonoïdes :
a. Effet antioxydant :
Les flavonoïdes sont des composés avec une activité antioxydante prononcée (Hodek, et al.,
2002). Les flavonoïdes expriment les propriétés antioxydantes par : Le piégeage direct des
espèces réactives de l’oxygène (ERO), cette capacité peut être expliquée par leur propriété de
donation d’un atome d'hydrogène à partir de leur groupement hydroxyle selon la réaction
représentée suivante :
FLOH + R• ―> FLO• + RH (réaction de piégeage)
Cette réaction de piégeage donne une molécule stable (RH) et un radical flavoxyle (FLO•) ce
dernier va subir un changement de structure par résonance ; redistribution des électrons
impaires sur le noyau aromatique pour donner des molécules de faible réactivité par rapport aux

05 juillet 2014 43
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

R•; en outre les radicaux flavoxyles peuvent interagir entre eux pour former des composés non
réactifs. (Amić et al, 2003)
FLO• + R• ―> FLO-R (réaction de couplage radical-radical)
FLO• + FLO• ―> FLO-OFL (réaction de couplage radical-radical)

Figure 20 : Piégeage des espèces réactives dérivées de l’oxygène (R•) par les flavonoïdes et
la formation d'une structure stable (Tiqwari, 2001)

Ainsi la capacité antioxydante s’exprime par La suppression de la formation des ERO par
l’inhibition de quelques enzymes ou par chélation des ions métalliques, impliqués dans leur
production, La protection des systèmes de défense antioxydants de l’organisme (Malešev et
Kuntić, 2007).
b. Effet antibactérien :
Les polyphénols notamment les flavonoïdes et les tannins sont reconnus par leur toxicité vis- à
-vis des microorganismes. Le mécanisme de toxicité peut être lié à l'inhibition des enzymes
hydrolytiques (les protéases et les carbohydrolases) ou d'autres interactions pour inactiver les
adhesines microbiens, les protéines de transport et d'enveloppe cellulaire (Cowan, 1999).

c. Effet anticancéreux :
Depuis longtemps, on associe le cancer et le type d'alimentation, de nombreux chercheurs ont
étudié le rôle des nutriments dans le développement des cancers. Plus récemment des recherches
expérimentales suggèrent que les flavonoïdes sont parmi les substances susceptibles de retarder
voire d'empêcher l'apparition de certains cancers, tout en réduisant d'une manière spécifique les
risques d'en avoir chez les sujets humains (Decloitre, 1993 ; Hertog, 1996) Des études montrent
que certains flavonoïdes particulièrement ; lutéoline, quercétine, kaempférol, apigénine,

05 juillet 2014 44
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

taxifoline inhibent d'une façon marquée la lipogenèse des cellules cancéreuses, d'autres
flavonoïdes sont plutôt capables d'induire l'apoptose. Certains flavanols (épigallocatéchine-3-
gallate) représentent des effets cytotoxiques sur les cellules cancéreuses de prostate, ces effets
sont corrélés avec leur capacité à inhiber les enzymes clés lipogéniques i.e. FAS (Fatty Acid
Synthase) (Brusselmans et al, 2005).

d. Effet anti-inflammatoires :
De nombreuses études semblent indiquer que les flavonoïdes possèdent des propriétés anti-
inflammatoires et qu'ils sont capables de moduler le fonctionnement du système immunitaire
par inhibition de l'activité des enzymes qui peuvent être responsables des inflammations, ils
peuvent aussi moduler l'adhésion des monocytes durant l'inflammation athérosclérosique en
inhibant l'expression des médiateurs inflammatoires (Gonzàlez-Gallego et al, 2007) d'autres
flavonoïdes sont capables d'inhiber l'histamine (Kim et al, 2004).
Les flavones et les flavonols sous forme glycosylée ou libre comme la quercétine, kaempférol,
myrecétine ont une activité inhibitrice de COX (Cyclooxygénase) (Tapas et al, 2008).
e. Effet antiviral :
L'activité antivirale des flavonoïdes contre HIV peut être liée directement par leurs effets sur
les enzymes responsables de son réplication (HIV-1 reverse transcriptase ou HIV 1 integrase)
par railleurs d'autres flavonoïdes montraient une activité antivirale contre le virus d'influenza,
HIV-1, HIV-2 (Bylka et al, 2004). Quercétine, apigénine, catéchine et hesperédine sont parmi
les flavonoïdes caractérisés par leurs propriétés antivirales contre onze types de virus. Les
flavonoïdes aglycones pourvus d’un groupement hydroxyle libre en C3 ont montré une bonne
activité antivirale, les flavanes sont généralement plus efficaces que les flavones et les
flavanones contre HIV-1 et HIV-2 (Tapas et al, 2008).
f. Effet cardiovasculaires :
De nombreux travaux publiés suggèrent que les flavonoïdes participent à la prévention des
maladies cardiovasculaires, leur consommation se traduit par une augmentation transitoire de
la capacité antioxydante du plasma dans les heures qui suivent le repas. Parvenus au niveau des
artères, ils préviennent l'oxydation des lipoprotéines de faible densité (Low Density
Lipoproteins ou LDL), qui est l'un des facteurs clé du processus physiopathologique de
l'athérosclérose (épaississement des artères qui contribue à réduire le flux sanguin et peut
conduire à l'asphyxie des tissus irrigués). En inhibant l'oxydation des LDLs, ils limitent leur
incrustation dans les parois des artères qui contribue à l'épaississement des parois et à réduire

05 juillet 2014 45
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

le flux de sang qui parvient au niveau des tissus. Les flavonoïdes agiraient aussi en inhibant
l'agrégation plaquettaire impliquée dans le phénomène de thrombose qui peut conduire à
l'occlusion des artères (Scalbert, et al., 2005).
g. Autres effets biologiques :
Les flavonoïdes pourraient aussi exercer des effets protecteurs contre les maladies
hormonodépendantes telle que l'ostéoporose en modulant la réponse aux oestrogènes
endogènes. Certains polyphénols et plus particulièrement les isoflavones du soja très étudiées
aujourd'hui, ont une affinité remarquable pour les récepteurs des oestrogènes et sont qualifiés
pour cela de phyto-oestrogènes. Les fruits et légumes contiennent aussi des polyphénols tels la
quercétine de l'oignon ou le kaempferol de la chicorée qui possèdent également des propriétés
pseudo-oestrogéniques ou inhibent la perte osseuse chez la rate ovariectomisée (Saleh, 2011).

05 juillet 2014 46
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

VI. La plante Capparis Spinosa L. :


1. Généralités :
Le câprier ou bien Capparis Spinosa est une plante arbuste communément appelée en arabe "
kabbar ‫" الكبار‬, Caper (anglais), Alcaparro (espagnol), et Gollaro (Pakistan). Il appartient à la
famille de Capparidacée et au genre Capparis qui comprend plus de 250 espèces (Nizar Tlili,
et al., 2011).

Cette plante est très répandue dans le bassin méditerranéen (figure 1), et dans les milieux sec
le long du littoral d’Europe, d’Afrique du nord sur le partout du bassin méditerranéen jusqu’au
sud de l’Asie et dans Australie. Au Maroc elle se trouve spontanément dans plusieurs régions,
mais elle est cultivée traditionnellement dans trois régions principales : Taounate, Safi et
Taroudant, désormais le Maroc est considéré comme étant le premier producteur et exportateur
de câprier dans le bassin méditerranéen et dans le monde. Il est cultivé surtout pour ses fruites
appelés câpres, utilisées dans la cuisine méditerranéenne, pour des raisons pharmacologiques
et médicales, ainsi dans la fabrication des cosmétiques. (Câprier importance économique
conduite technique, octobre 1997).

Figure 21 la distribution de câprier dans le monde basée sur Inocenio et al.

05 juillet 2014 47
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

2. Classification de la plante Capparis Spinosa L. :


Division : Magnoliophyta

Classe : Magnoliopsida

Sous-classe : Dilleniidae

Ordre : Capparales

Famille : Capparidaceae

Genre : Capparis

Espèce : Capparis spinosa

3. La description botanique de la plante Capparis Spinosa L. :


C’est un arbuste qui mesure de 30 à 100 cm à l’âge adulte en hauteur, et de 1 à 1.5 cm de
largeur, il porte des tiges flexueuses, épineuses, avec une couleur verte ou rougeâtre selon les
variétés. Les feuilles sont alternes, ovales à arrondies, qui mesure 2.5 cm de longueur, pétiolés,
lisses, verte et souvent un peu rougeâtre.

Figure 22 : les feuilles de Capparis Spinosa L. Figure 23 : la fleur de Capparis spinosa

05 juillet 2014 48
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Figure 24 : les fruits de Capparis Spinosa L. (câpres)

Les fleurs sont axillaires, solitaires, de 5 à 7 cm de diamètre, composés de quatre sépales vertes
et quatre pétales blancs veinés de rose et de nombreuses étamines très longues groupés en
touffes, et d’un étrange pistil très long qui sort de la fleur , elle fane après 24 heures qu’il fleurit.
(Satyanarayana et al., 2008), (Câprier importance économique conduite technique, octobre
1997).

Les fruits sont ovoïdes, de 2 à 4 cm de long, avec un mince péricarpe, vertes en grossissement
et rougeâtres lorsqu’ils deviennent mûrs, ainsi ils s’ouvrent à la fin de maturité. Ils contiennent
jusqu'à 400 graines par fruit au maximum pour les grands fruits, et au minimum 130 graines
pour les petits fruits , les graines ont un diamètre de 3 à 4 mm , noires , matée et lisses. Les
racines sont un peu ramifiés et très profonds. (Satyanarayana et al., 2008) , (Câprier importance
économique conduite technique, octobre 1997).

Capparis Spinosa et Capparis Ovata sont les deux espèces les plus cultivées en méditerranée,
l’espèce Capparis Spinosa comprenne les variétés suivantes : Spinosa, Inermes, Parviflora,
Aegyptia, Aravensis, Pubescence. (Câprier importance économique conduite technique, octobre
1997).

05 juillet 2014 49
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Tableau 2 Caractéristiques morphologique de Capparis Spinosa (câprier)

Paramètres Moyennes Maximum Minimum


Nombre de rameaux par plantes 26 1 47
Longueur des rameux (cm) 94.4 62.1 111.7
Nombre de fruit par plante 35 8 80
Surface foliaire (cm²) 6.3 0.4 16.6
Biomasse : partie aérienne (g) 211 135 285
Biomasse : partie souterraine (g) 398 177 598
Longueur de la racine principale (cm) 62 43 8
Nombre de racine secondaires 116 17 230
Surface occupée par la racine latérale (m²) 3.4 0.7 5.3

4. Conditions écologiques de la plante Capparis Spinosa L. :


Capparis Spinosa se poussent spontanément dans les fissures, les crevasses des roches, les
murs de pierre, et les montagnes, elle grandit à différentes sols comme les alfisols , les
regosols, et les lithosols, elle préfère les sols légers, pauvre en nutriment, bien drainé, avec un
ph neutre à alcalin , de 6.1 à 8.5 . (Câprier importance économique conduite technique,
octobre 1997).

C’est une plante xérophyte qui présente des caractéristiques morphologiques et


physiologiques qui lui permet de tolérer des conditions climatiques des zones arides et semi-
arides, elle pousse largement et immédiatement après la pluie (Avril-May), et disparaissent
dans le début de la saison froide (septembre-octobre).Le câprier est productif à une pluviosité
annuelle de 200 à 500 mm, et survive facilement à une température d’été plus haute que 40°C
et une température près de 4°C, en effet il développe des mécanismes qui réduit les effets des
radiations et des températures extrêmes et ne semble pas montrer aucun stress hydrique ou
une phénomène de photo-inhibition, il est tolérant a la salinité, et ainsi au vent. (Janick J et al,
2006), (Pugnaire FI et al, 1991), (A Guide to Medicinal Plants in North Africa , 2005).

Benefices

Le câprier est très bon écologiquement pour les sols, il restitue annuellement au sol 211 g de
matière organique, ce qui permet améliorer la fertilité et la structure des sols, ainsi

05 juillet 2014 50
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

l’enveloppe végétative de câprier couvert les surfaces de sols, ce qui permet de conserver les
réserves en eau du sol. (Câprier importance économique conduite technique, octobre 1997).

5. Phytochimie de la plante Capparis Spinosa L. :


Nombreuses études phytochimiques ont montré la richesse de différentes parties câprier en
molécules actifs.

Le câprier contient un arsenal de flavonoïdes, en effet les bourgeons floraux renferment la


quercétine, la rutine, la quercétine-3-rutinosides, la quercétine-7-O-glucorhamnoside, le
kaempférole-3-rutinosides, le kaempférole 3-O- rhamnosyl-rutinoside (Inocencio et al, 2000,
Bonina et al, 2002 ; Satyanarayana et al., 2008). Ainsi la partie aérienne de la plante contient
la quercétine 3-O-glucoside, la quercétine 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside, la quercetine 3-O-
[6’’’-α-L-rhamnosyl-6’’-β-D-glucosyl]-β-D-glucoside et la quercétine-7-O-D-
glucopyranoside-β-L-rhamnopyranoside (Satyanarayana et al., 2008).

Le câprier est également riche en acides hydroxycinnamiques y compris l’acide caféique,


l’acide férulique, acide p-coumarique et l’acide cinnamique (Panicoa et al, 2005 ;
Satyanarayana et al., 2008). Des composés homologues aux composés polyphénoliques en
particulier : le cappaprenole-12, le cappaprenole-13 et le cappaprenole-14 ont été isolés de la
plante (Satyanarayana et al., 2008).

Les alcaloïdes sont aussi présents dans le câprier, ils sont distribués principalement dans les
racines et les graines (Panicoa et al, 2005 ; Satyanarayana et al., 2008). La teneur élevée en
alcaloïdes a été trouvée dans les racines de la plante où la stachydrine représente 87,43 % des
alcaloïdes totaux. Trois alcaloïdes spermidines (la capparispine, la capparispine26-O-β-D-
glucoside et la cadabicine 26-O-β-D-glucoside hydrochloride) ont été identifiés dans les racines
de la plante (Fu et al., 2008). La cadadicine, un nouvel alcaloïde a été isolé du câprier
(Satyanarayana et al., 2008).

Romeo et ses collaborateurs (2007) ont identifiés environs 145 composés volatiles dans le
câprier. Les aldéhydes (22.2%) et les esters (21%) représentent les classes chimiques les plus
abondantes dans la plante. Les feuilles du câprier renferment principalement les
isothiocyanates, les n-alkanes, les terpenoїdes, les phenyl propanoїdes, les aldéhydes, et les
acides gras. Les composés volatils des fruits mûrs et des racines de la plante sont présentés

05 juillet 2014 51
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

principalement par le méthyle isothiocyanate, l’isopropyle isothiocyanate et le sec-butyl


isothiocyanate (Satyanarayana et al., 2008).

Le glucocapperine (90%) représente le glucosinolate majeure des bourgeons floraux du câprier


(Panicoa et al, 2005). D’autres glucosinolates comme la sinigrine, la glucoiberine et la
glucocleomine ont été également isolées à partir des graines et des feuilles de la plante. En
outre, les mêmes auteurs ont rapporté que les indoles glucosinates comme le glucobrassicine,
le neoglucobrassicine et le 4-methoxyglucobrassicine sont présents dans les racines de la plante
(Satyanarayana et al., 2008).

Des triterpenoїdes (α-amyrin), des stérols, des saponines et des faibles quantités de la vitamine
E, de β-carotène et de la vitamine C ont été détectées dans la plante (Tesoriere et al, 2007 ;
Satyanarayana et al., 2008).

En plus, les câpres contiennent quelques composés minéraux tels que le sodium, le potassium
et le phosphore (Giuffrida et al., 2002 ; Özcan et Aydın, 2004). Les grains du câprier
contiennent aussi des protéines, huile, des lipides et des fibres (Jiang et al, 2007).

6. Historique et usage traditionnelle de la plante Capparis Spinosa L. :


Les racines, les feuilles, bourgeons, fruits, écorce, et graines de câprier sont utilisés par nos
ancêtres pour des raisons médicales, pour traiter certaines maladies comme le rhumatisme,
maux d’estomac, maux de tête, douleur dentaire. (Driss Lamnauer et Kamal Batanouny, 2005).

Jadis, les racines sont consommées par les anciens égyptiens et les arabes pour le traitement des
maladies des reins, des maladies de foie, maux d’estomac et les piqures du scorpion. Les feuilles
sont utilisées par des anciens arabes pour traiter les maladies de la peau, les maux d’oreilles et
tuer les vers dans l’oreille. (Driss Lamnauer et Kamal Batanouny, 2005).

Les anciens arabes utilisent ainsi les bourgeons contre les maux de la rate, les romains anciens
utilisent cette partie de la plante pour traiter la paralysie. Les fleurs peuvent servir comme un
stimulant de l’augmentation d’érection et ainsi pour calmer les douleurs. (Driss Lamnauer et
Kamal Batanouny, 2005).

Les anciens grecs utilisent les fruits pour traiter les convulsions, les graines servent comme
médication pour des problèmes de gencive par des anciens arabes, et pour accélérer la

05 juillet 2014 52
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

menstruation par les anciens égyptiens et les anciens grecques. (Driss Lamnauer et Kamal
Batanouny, 2005).

En médecine traditionnelle, les racines sont utilisées comme diurétique, astringent et tonique.
L’écorce des racines qui a un gout amer, est utilisée comme un appétitif, astringent, diurétique,
anti-diarrhéique, et pour traiter les hémorroïdes et maladies de rate.il est aussi utilisé pour la
goutte et rhumatisme comme un expectorant, et pour les maladies de la poitrine. (Driss
Lamnauer et Kamal Batanouny, 2005).

Des fruits séchés et en poudre combiné avec le miel est utilisé dans les rhumes, les rhumatismes,
la goutte, la sciatique et les maux de dos. En décoction, il est dit qu’il est efficace contre la
douleur gastrique. Appliqué sur tout le corps cette décoction est dite d'être bon dans l'épilepsie.

Les graines sont utilisées dans la stérilité féminine et de la dysménorrhée. Les graines écrasées
sont utilisés pour traiter les ulcères, les écrouelles, et ganglions. Les graines sont utilisées dans
un mélange d'épices appelé "Ras El Hanout". Dans le Sahara, la vapeur de la décoction de la
plante est utilisée pour nettoyer les yeux. (Driss Lamnauer et Kamal Batanouny, 2005).

7. Importance économique du câprier dans le Maroc :


La culture et l’exploitation de câprier joue un rôle socio-économique très important dans les
populations rurales dans certains régions comme Fès, Taounate, Karia, Safi et Marrakech
puisqu’il a l’avantage d’être peu exigeante en eau et investissement et d’être capable de
s’adapter aux conditions des zones arides et semi-arides. (Câprier importance économique
conduite technique, octobre 1997).

1 kilo de câpre est venté de 12Dh à 35dh dans quelques régions, Plus de 98% de la production
nationale est destinée à l’exportation vers l’Europe, l’Amérique du Nord, l’Amérique du Sud et
le Japon. Le marché européen absorbe à lui seul 80% de la production nationale. Les
exportations réalisées en 2003 (11 000 tonnes) ont généré 260 millions de Dirhams, soit 12%
de la valeur des exportations des produits agro-alimentaires d’origine végétale. L’exportation
se fait sur 38 pays à travers le monde mais les principaux clients du Maroc sont la France,
l’Espagne et l’Italie La production de câpres durant la campagne 2011/12 est de 31700T en
hausse de plus de 50% par rapport à la campagne précédente. (Câprier importance économique
conduite technique, octobre 1997). Câprier

05 juillet 2014 53
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Depuis 2009, les exportations (en valeur) de câpres sont en forte augmentation avec un pic en
2012 de 388 millions DH. Durant la dernière campane les exportations de câpres ont connu une
hausse de 22 % en valeur.

8. Importance économique du câprier dans la région Fés-Boulemane :


Bien que la superficie de câprier soit répartie sur 9 communes, le câprier se concentre dans 3
communes (Louadaine, Oulad Mimoun et Laâjajra) qui représentent 75% de la superficie totale.
La carte ci-dessous présente l’aire de production des câpres de Fès. (Ministère de l’agriculture
et de la pèche maritime, 2010).

La superficie productrice de câpres avoisine les 15.000 ha. Avec une densité en moyenne
estimée à 300 pieds /ha, et une production moyenne de 5 kg/pied, la production annuelle totale
peut être estimée à 22. 500T/an. En considérant un prix de vente moyen actuelle de 7Dh, la
filière générerait un chiffre d’affaires de l’ordre de 157,5 millions de dirhams. 56,25 millions
de dirhams serait absorbés par la main d’oeuvre de récolte si toutefois elle est suffisante.
(Ministère de l’agriculture et de la pèche maritime, 2010).

Figure 25 : Localisation de l’aire de production du câprier dans la province de Fès

05 juillet 2014 54
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

9. Les effets biologiques de la plante Capparis Spinosa L. :

a. Effet anti-inflammatoire :
Satyanarayana et ses collaborateurs (2008) ont rapporté que le câprier possède un effet anti-
inflammatoire, du fait que, le capparénole-13 isolé à partir du câprier a inhibé considérablement
l’œdème de l’oreille des rats induit par la carragénane. Trombetta et ses collaborateurs (2005)
ont rapporté que l’extrait méthanolique des bourgeons floraux présente un effet
antihistaminique et antiallergique.
b. Effet antioxydant :
Les substances naturelles extraites du câprier sont également d’importants agents antioxydants.
En effet, l’extrait méthanolique des bourgeons floraux cru de la plante a montré une activité
antioxydante dans divers modèles in vitro, d’où il est suggéré leur utilisation potentielle dans
les conditions pathologiques du stress oxydant (Tesoriere et al., 2007). En outre, le même extrait
in vitro, a montré une forte activité antioxydante et un grand pouvoir antiradicalaire et même
une application locale de cet extrait protège la peau contre les érythèmes provoqués par les
rayons UV (Bonina et al., 2002).
c. Effet anti-hépatotoxique :
L’extrait aqueux de la partie aérienne de la plante est utilisé pour le traitement des douleurs
hépatiques (Handa et al., 1986). En effet, cet extrait est largement utilisé pour déterminer
l’activité antihépatotoxique de différents constituants de la plante. L’acide benzoïque p-méthyl,
isolé de la fraction méthanolique de l’extrait aqueux a montré une activité anti-hépatotoxique
significative (Gadgoli et Mishra, 1999).
d. Effet hypoglycémiant :
L’extrait aqueux de la plante a révélé, in vivo, une activité anti-hyperglycémiante sans affecter
la concentration sanguine de l’insuline. En effet, l’administration orale de l’extrait aqueux de
la plante, 20 mg/kg pendant 14 jours, a produit une diminution significative du taux de glucose
sanguin chez les rats diabétiques. Le taux du glucose sanguin a été presque normalisé après 2
semaines d’administration orale et d’une façon quotidienne de 20 mg/kg de l'extrait aqueux de
câprier. En plus, ce traitement provoque ainsi une dimunition de taux plasmatique des

05 juillet 2014 55
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

triglycérides après 1 à 2 semaines et du cholestérol après 4 à 7 jours (Eddouks et al, 2005 ;


Lemhadri et al., 2007).

e. Autre effets biologiques :


Le câprier est doué de plusieurs activités biologiques. Il est connu comme un agent analgésique,
antirhumatismale, comme il est impliqué dans le traitement de la goutte. Panicoa et ses
collaborateurs (2005) ont montré que l’extrait méthanolique des bourgeons floraux du câprier
représente un effet protecteur sur les chondrocytes via leur activité inhibitrice sur la production
des prostaglandines, le monoxyde d’azote et des espèces réactives de l’oxygène qui provoquent
la biodégradation du cartilage.

05 juillet 2014 56
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

VII. Apithérapie :
« Api » vient du latin « apis », abeille. « Thérapie » vient du grec ancien (therapeia), cure,
soin. Les abeilles soignent ! L’apithérapie est donc l’action des abeilles pour stimuler nos forces
vitales, soulager nos maux et nous aider à guérir. (Catherine Ballot-Flurin, 2010).

1. Historique de l’apithérapie :
Une peinture rupestre de la grotte de l’araignée de Bicorp, remonte depuis 7 000 à 10 000
années, représente un cueilleur de miel entouré de butineuses : nos ancêtres connaissaient l’art
du rayon de miel, la force du venin, les vertus puissantes des trésors de la ruche.
Le Rig Veda, fondement des philosophies indo-européennes au 6éme siècle avant J.-C., la
réalisation de soi est comparée à celle de l’insecte qui devient une abeille. Le miel est depuis
toujours symbole de richesse, amour et douceur. Il y a 6 000 ans, le miel est utilisé par les
Sumériens pour traiter les infections. Le papyrus de Smith rédigé en Égypte au 17éme avant J.-
C., est considéré comme le plus ancien document de littérature médicale. Il décrit en détail les
résultats obtenus sur 48 cas (plaies béantes, ulcères de la bouche, infections des yeux) en
utilisant le miel, la cire d’abeilles et la propolis, qu’ils appellent cire noire. Hippocrate, père de
la médecine, 460 ans avant J.-C. en Grèce, cite 800 fois le miel comme médicament, utilisé seul
ou avec des plantes1. Galien, médecin grec de l’Antiquité, père de la pharmacie, propose de
nombreuses préparations à base de miel ou de cire d’abeilles. Charlemagne fut soigné de sa
goutte par des piqûres d’abeilles. (Confédération suisse, 2006).
2. Les produits de la ruche :
Les abeilles sont les bienfaitrices de l’homme par leur travail de pollinisation, nécessaire à la
conservation de la biodiversité, mais aussi par la richesse des aliments qu’elles lui fournissent,
véritables trésors de la nature. Les produits de la ruche sont les suivants :

➢ Le miel.
➢ La cire.
➢ La propolis.
➢ Le pollen et pain d’abeilles.

05 juillet 2014 57
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

➢ La gelée royale.
➢ Les larves.
➢ Le venin d’abeille

a. Le miel :
Véritable nectar des abeilles, possède des vertus reconnues depuis des millénaires. On a même
retrouvé de petits pots de miel parfaitement conservés dans les tombes égyptiennes. Le miel est
principalement composé de sucre naturel (66 à 80 %), dont le fructose et le glucose sont
assimilables par l’organisme. Son pouvoir sucrant équivaut à celui du sucre tout en étant moins
calorique (300 Kcal/100 g contre 400). Il contient des vitamines des groupes B et C, différentes
enzymes digestives, un faible taux de sels minéraux et surtout de l’acide formique qui lui
/confère son action bactéricide. Au-delà de son aspect gustatif, il constitue un allié
thérapeutique dans de multiples affections : respiratoires, gastro-intestinales, cutanées,
inflammatoires, immunodépressives, stress, infection des plaies, états grippaux. (Dominique
Hunka Gely, 2008).

Figure 26 quelques variétés de miel

b. La cire :
La cire provient des 8 glandes cirières, développées entre le 13ème et le 18ème jour de
vie post-larvaire. A sa sortie, elle se présente sous forme de lamelles transparentes de 1,5 mm
sur 1 mm environ. Une fois solidifiées, les écailles sont détachées par l’ouvrière cirière avec les
brosses de la 3ème paire de pattes (Bruneau 2009 ; Marchenay et Bérard 2007). L’ouvrière
48 les apporte à ses mandibules et les triture en y incorporant des substances glandulaires, en
particuliers des glandes mandibulaires (Hooper 1998 ; Jean-Prost 2005).

05 juillet 2014 58
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Figure 27 la cire d’abeille

La cire devient blanche puis se teint avec le temps du fait du contact avec les miels, les pollens
et la propolis. Il faudrait 1.250.000 écailles pour produire 1 kg de cire (Marchenay et Bérard
2007).
c. Le pollen :
Le pollen frais provient de la fine poudre des étamines des fleurs, récoltée par les abeilles qui
en font de petites pelotes. Riche en protéines (22 % dont 15 % d’acides aminés) et en glucides
(10 à 25 %), il est source de vitamines des groupes B, D, E, C, de provitamine A, d’oligo-
éléments tels chrome, zinc, manganèse et surtout sélenium (1 cuillère à soupe de 12,5 g couvre
trois à six fois les besoins journaliers). Il est également bien pourvu en minéraux (fer, calcium,
potassium, cuivre, magnésium, sodium), en phytohormones, en flavonoïdes antioxydants et en
ferments lactobacilles. Ses propriétés en font un produit de santé par excellence : revitalisant
pour les sujets fragiles, rééquilibrant pour la sphère digestive et la flore intestinale, antioxydant
et oxygénant cellulaire. Il a en outre une action protectrice au niveau cardio-vasculaire.
(Dominique Hunka Gely, 2008).

Figure 28 Variétés de pollen

05 juillet 2014 59
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

d. La propolis :
Avec la propolis, les abeilles ont su se doter d’un moyen de défense efficace, élaborée à partir
des substances résineuses des végétaux (bourgeons, pommes de pin, écorces). Elles l’utilisent
pour colmater et isoler leur ruche, la protégeant ainsi des éventuels agresseurs extérieurs
(insectes, reptiles…). Cette partie résineuse, riche en huiles essentielles (10 à 15 %) et en
différents flavonoïdes, constitue un antibiotique naturel (antiseptique à large spectre)
permettant d’accroître les défenses de l’organisme. Elle a également des propriétés
cicatrisantes, régénératrices, anti-inflammatoires, antalgiques, antioxydantes.
Traditionnellement reconnue pour son efficacité dans les infections ORL, elle a de nombreux
autres domaines d’application : gynécologique, dermatologique, gastroentérologique.
(Dominique Hunka Gely, 2008)

Figure 29 la propolis

d. La gelée royale
La gelée royale concoctée par les abeilles ouvrières, qui sert à nourrir les larves les trois
premiers jours puis uniquement la future reine qui en fera son seul aliment tout au long de sa
vie. Sa composition complexe (acides aminés, enzymes, vitamines du groupe B, minéraux) en
font un aliment d’exception très revitalisant et nutritif. La gelée royale est le tonifiant idéal du
matin (de préférence à jeun) pour petits et grands, en cure de trois à neuf semaines et à raison
d’une petite dose (grosse comme un pois) à laisser fondre sous la langue. Elle améliore l’état
général tant sur les plans physiologique que neuropsychique. Elle est le remède idéal contre les
baisses de tonus : enfants en période de croissance, étudiants, sportifs, adultes ayant un rythme

05 juillet 2014 60
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

intense, personnes âgées, état de convalescence. La gelée royale craint la chaleur et la lumière,
elle doit donc être conservée au frais. (Dominique Hunka Gely, 2008).

Figure 30 : Des larves baignant dans la gelée royale

e. Larves d’abeilles :
Avant de devenir une abeille aux ailes doubles, butinant de fleur en fleur, l’abeille est passée
par trois autres formes :
• un œuf blanc allongé, gros comme une tête d’épingle, qui éclot au bout de trois jours ;
• une larve blanche immobile qui grossit et se fait gaver de pollen et de miel dans son nid de
cire ;
• puis une nymphe secrète derrière son rideau jaune.
On peut consommer les larves entières ou broyées. C’est un aliment riche en protéines et en
vitamines A et D, avec une activité enzymatique élevée, comme la gelée royale. On y trouve
aussi des lipides, des minéraux et des vitamines, ainsi que d’autres substances non encore
identifiées. Les larves facilitent la croissance et la convalescence, elles sont toniques, et
stimulent la libido et l’appétit. (Catherine Ballot-Flurin, 2010).

Figure 31 : Larves d’abeilles

05 juillet 2014 61
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

f. Venin d’abeille :
Le venin est secrété par les abeilles, reines et ouvrières, grâce à une glande de leur abdomen. Il
est stocké dans des « réservoirs » à la base de l’abdomen reliés à un dard à la structure très
élaborée. La reine s’en sert pour se débarrasser de ses rivales ; les ouvrières l’utilisent pour
défendre la ruche contre des agresseurs, des gourmands ou des envahisseurs, comme les souris.
Le dard de l’abeille ouvrière a des barbes et s’arrache après la piqûre, lorsque l’abeille s’envole,
causant sa mort ; celui de la reine, lisse, ne s’accroche pas. (Catherine Ballot-Flurin, 2010).

Figure 32 : La thérapie en utilisant le venin d’abeille, Bee Venom Therapy

Le venin par la mellitine et l’apamine qu’il contient active la circulation du sang, régule la
pression artérielle, assouplit les capillaires, favorise la fluidité du sang et augmente la
production de globules rouges. Il a une action anti inflammatoire, principalement due à la
mellitine, car il stimule la fabrication naturelle de cortisol, principal constituant de la cortisone
(l’hormone la plus active des glandes surrénales). (Catherine Ballot-Flurin, 2010).
D’autre part, certains constituants du venin interviennent dans la réduction de la perception de
la douleur, un peu comme l’aspirine. Le venin diminue la douleur par son action sur l’ensemble
du système nerveux central et les fibres motrices. Il peut donc traiter les inflammations des
articulations, des muscles et des tendons. Le venin d’abeilles est réputé en particulier pour
soulager les douleurs rhumatismales (Docteur Forestier). Le venin est bactéricide,
bactériostatique, antifongique et antibiotique et Il active le système immunitaire. (Catherine
Ballot-Flurin, 2010).

05 juillet 2014 62
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

VIII. Le miel :
1. Définition :
Le miel est la substance naturelle sucrée produite par les abeilles « Apis mellifera » à partir du
nectar, de sécrétions de plantes ou d’excrétions d’insectes butineurs, que les abeilles butinent,
transforment en les combinant avec les substances spécifiques qu’elles sécrètent, déposent,
déshydratent, emmagasinent et laissent affiner et mûrir dans les rayons de la ruche (Codex
Stan12-1981.) (Oudjet kahina ,2012).

2. Historique :
3000 ans avant Jesus-Christ déjà, la fiancée du roi sumérien Schu-Schin comparait son fiance
a l’exquise douceur du miel. De nombreuses peintures murales témoignent aujourd’hui encore
de l’importance du miel dans l’Ancienne Egypte. En Israel, dans le pays ou le lait et le miel
coulent à flots, le miel occupe une place importante. Dans l’ancien Testament, il n’est
mentionné pas moins de 54 fois. Chez les Grecs, la production de miel est évoquée pour la
première fois par Aristote et nombre de poètes rendent hommage au miel. Succédant aux Grecs,
les Romains reprennent les louanges que leurs prédécesseurs rendaient au miel. Le poète Virgile
décrit dans son épopée sur l’agriculture, “Les Géorgiques”, la production de miel par les
abeilles. Le miel est aussi mentionné dans les Ecritures saintes indoues. (Confederation suisse
, 2006).

Figure 34 : Apiculture en Egypte. Env. 600 av. Figure 33 l’extrait de Quran saint sur
J.-C. l’abeille et le miel

05 juillet 2014 63
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Les cultures arabe et byzantine du Moyen-âge, qui louaient elles aussi les vertus du miel, le
miel et l’abeille sont mentionnées dans un extrait de Sourat « Al-Nahl » dans le Saint Quran,
ces cultures ont sauvé et transmis les connaissances sur le miel jusqu’au Haut Moyen-âge. Dans
les royaumes chrétiens de la même époque, le miel n’était pas moins vénère. L’importance du
miel en tant que remède a traversé les siècles jusqu'à nos jours. Tous les grands médecins de
l’Antiquité, d’Hippocrate à Galien – et même jusqu'à Paracelse - utilisaient le miel dans un
grand nombre de leurs recettes médicinales. (Confédération suisse, 2006)

3. Composition de miel :
A l’heure actuelle, tous les constituants n’ont pas encore été identifiés. On y retrouve en
majorité des sucres simples (ou oses) et de l’eau .La teneur en eau change en fonction des fleurs
butinées, de la saison, du nombre d’ouvrières et de la méthode d’extraction.
Elle peut varier de 14 à 25% avec un optimum de 17% qui assure une extraction plus aisée, un
meilleur conditionnement en évitant une fermentation précoce et néfaste pour le produit.

Figure 35 Composition générale moyenne du miel D’après Bruneau 2009

a. Eau :
La teneur en eau varie entre 14 et 25% selon les miels. L’humidité du miel favorisant sa
fermentation, nous verrons que pour qu’un miel de fleurs se conserve plus de 2 ans, il ne faut
pas que sa teneur en eau dépasse 18%. (LEQUET Laudine, 2010).

05 juillet 2014 64
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

b. Les glucides :
Une quinzaine de sucres ont été identifiés. Ils représentent de 95 à 99 % de la matière sèche
mais ne sont pas tous présents dans tous les miels :
- Fructose, glucose
- Maltose, saccharose
- Iso-maltose, maltotriose, turanose, nigériose, kojibiose, leucrose, mélézitose, erlose, kestose
raffinose, dextrantriose…
Le fructose et le glucose proviennent de l’hydrolyse du saccharose. Cette hydrolyse se fait soit
par le biais de l’acidité du miel, soit par une enzyme, l’invertase, produite par l’abeille. Les
sucres proviennent du nectar ou du miellat (Domerego et al. 2009).
c. Acides organiques
Le miel a un pH d’environ 3,9 dû aux acides qu’il contient (0,57% de la matière sèche)
(Tomczak 2010) :
- Acide gluconique (0,43% de la matière sèche)
- Acides citrique, lactique, succinique, formique, oxalique
- Acides combinés sous forme de lactones
La transformation du glucose en acide gluconique (par la glucose-oxydase) serait imputable à
l’action de Gluconobacter pendant la maturation du miel. Ils proviennent du nectar ou miellat,
ou des sécrétions de l’abeille (Domerego et al. 2009).
d. 5-hydroxy-2-méthylfurfural (HMF)
L’HMF est un composé organique dérivé de la déshydratation du fructose. Ni les nectars ou
miellats, ni les miels frais n’en contiennent.
Cette molécule apparait au cours du processus de vieillissement naturel du miel. Ce processus
est accéléré si les miels sont chauffés ou s’ils sont très acides. L’analyse de la quantité d’HMF
est donc une excellente méthode pour apprécier la qualité d’un miel : son vieillissement et son
chauffage (BOGDANOV S. et al. 1997 et DESCHAMPS V. 1998).
e. Les sels minéraux :
Parmi les 0,26% de minéraux qui composent en moyenne les miels, le potassium en représente
environ la moitié (Bruneau 2009) (tableau 3). Plus de 30 oligoéléments ont été décelés. La
teneur en minéraux des miels est fortement corrélée à l’origine géobotanique du nectar (Stocker
et al. 2005). En règle générale, les miels de miellat contiennent deux fois plus de minéraux que
les miels de nectar (Bruneau 2009). Plus un miel est foncé, plus il est riche en minéraux (Huchet

05 juillet 2014 65
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

et al. 1996). La teneur et la nature des minéraux dépendent du type de sol (Domerego et al.
2009).
Tableau 3 Teneurs moyennes en minéraux du miel d’après Apimondia 2001

Elément Teneur moyenne (µg/g) Elément Teneur moyenne (µg/g)


(symbole) (symbole)
Potassium (K) 100-2000 Silicium (Si) 0.5-9
Calcium (Ca) 25-145 Bore (B) 0.55-3.1
Phosphore (P) 12-90 Fer (Fe) 0.2-1.7
Souffre (S) 7-67 Zinc (Zn) 0.05-0.82
Magnésium (Mg) 4-55 Cuivre (Cu) 0.08-0.72
Manganèse (Mn) 0.2-10 Baryum (Ba) 0.04-0.4

f. Les enzymes :
Les enzymes proviennent soit de la salive de l’abeille, soit du nectar (Domerego et al.
2009). On retrouve en très grande proportion :
➢ Apportées par la salive :
- Invertase : catalyse l’hydrolyse du saccharose en fructose et glucose
- Amylase : catalyse l’hydrolyse de l’amidon en molécules de glucose
- Glucose-oxydase : catalyse l’oxydation du glucose en acide gluconique, ce qui produit du
peroxyde d’hydrogène
➢ Apportées par le nectar :
- Catalase : catalyse la dégradation du peroxyde d’hydrogène
- Phosphatases acides
Ces enzymes sont dénaturées par chauffage (Apimondia 2001).
g. Les pigments :
Les caroténoïdes et les flavonoïdes sont principalement responsables de la coloration du miel.
Les flavonoïdes, qui appartiennent aux groupes des polyphénols, possèdent des propriétés
antioxydantes très intéressantes, car ils participent à la neutralisation des radicaux libres. La
quantité et le type de flavonoïdes varient selon la source florale. En règle générale, plus les
miels sont foncés (comme ceux issus du tournesol, du sarrasin et de miellat), plus ils en sont
riches. La pinocembrine, la pinobanskine, la chrysine, la galangine, la quercetine, la lutéoline
et le kaempférol font partie des flavonoïdes contenus dans le miel. (Frédéric BONTÉ, 2013).

05 juillet 2014 66
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

h. Les vitamines :
Les vitamines sont majoritairement apportées via les grains de pollen. Les vitamines
liposolubles A, D, E et K sont présentes de façon virtuelle. Elles ne sont quasiment pas détectées
par nos méthodes de dosage actuelles. Les vitamines hydrosolubles sont composées
essentiellement par les vitamines du groupe B : B1, B2, B3, B5, B6, B8 et B9. La vitamine C
peut également être retrouvée de façon occasionnelle, notamment dans le miel de menthe
(Domerego et al. 2009 ; Apimondia 2001).
4. Les effets thérapeutiques de miel :
a. Action antioxydante
Les enzymes, les acides organiques, les peptides mais surtout les composés phénoliques, les
pigments flavonoïdes et caroténoïdes jouent le rôle d’antioxydants. Bien qu’il existe de grandes
disparités de composition entre les divers miels, des miels d’origine florale identique (et quel
que soit l’origine géographique) auront sensiblement des propriétés antioxydantes similaires
(Al-Mammary et al. 2002 - Blasa et al. 2006 - Hegazi et al. 2009) dans Tomczak 2010 ; Van
Den Berg et al. (2008)).
b. Action anti-inflammatoire
Les propriétés anti-inflammatoires du miel viennent de ses propriétés antioxydantes. Dans le
cas où un stimulus inflammatoire persiste, l’activité de phagocytose provoque la libération de
radicaux libres, qui stimulent la production de cytokines ce qui amplifie la réponse
inflammatoire. En neutralisant les radicaux libres, le miel joue un rôle antiinflammatoire
((Schreck et al. 1991 - Molan 2009) in Tomczak 2010 ; Van Den Berg et al. (2008).
c. Action immunostimulatrice
L’effet immunostimulant a été montré chez des rats après injection intrapéritonéale d’une
solution contenant 105 UFC/mL d’une souche de Staphylococcus aureus isolée de mammite
clinique chez les bovins. Les rats ayant reçu du miel de fenouil en voie orale ou intrapéritonéale
ont montré à l’autopsie des parenchymes pulmonaire et hépatique avec peu ou pas de lésions
contrairement aux parenchymes témoins (p<0,01) qui présentaient une bronchopneumonie
suppurative typique et une dégénérescence nécrotique sévère du foie. Les tissus lymphatiques
des organes des rats traités se trouvèrent également stimulés (Sayed et al. 2009). Attia et al.
(2008) ont également montré que des administrations orales de miel (10 ; 100 ou 1000 mg/100g
de poids vif) chez des souris ont induit une augmentation des cellules de la moelle osseuse et
des macrophages péritonéaux. Les capacités de phagocytose des macrophages et les fonctions
des lymphocytes B et T ont également été augmentées.

05 juillet 2014 67
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

d. Action anticancéreuse
Chez des souris et des rats, l’administration orale et quotidienne de miel durant les 10 jours
avant l’inoculation de cellules cancéreuses de carcinome mammaire et colique a permis
d’inhiber la formation de métastases (p<0,05) Ŕ avec des doses de 2 g/kg pour les souris et 1
g/kg pour les rats (Orsolić et al. 2003). Chez la souris, une administration orale de miel (10 ;
100 ou 1000 mg/100g de poids vif) a montré une action préventive in-vitro et in-vivo sur le
développement de la tumeur « Ehrlich ascites tumor », injectée en intra-péritonéal. La
prolifération tumorale et la viabilité des cellules tumorales ont été inhibées (Attia et al. 2008).
e. Action antibactérienne
L’action antibactérienne du miel est déterminée par plusieurs facteurs. L’activité est plus
importante quand le miel est administré de façon topique, directement sur les zones
contaminées. Le miel est bactériostatique et bactéricide. Dans ce cas, tous les facteurs
antibactériens entrent en jeu (Tomczak 2010 ; Cooper 2007 ; Apimondia 2001 ; Whadan
1998) :
➢ L’effet osmotique :
Le miel est une solution sursaturée de sucres, il est hypertonique. L’hypertonicité provoque la
lyse des membranes bactériennes et inhibe la croissance des bactéries avant d’induire leur mort.
➢ Le pH faible :
Le pH du miel varie de 3,2 à 4,5 en moyenne. Certains miels originaires du Pakistan ont des pH
alcalins allant jusqu’à 6,3. Un pH acide est un milieu défavorable au développement de la
plupart des germes.
➢ Le peroxyde d’hydrogène :
La présence de peroxyde d’hydrogène (aux propriétés antiseptiques) est attribuable au système
glucose oxydase/catalase. Le glucose oxydé produit du peroxyde et la catalase scinde le
peroxyde en eau et dioxygène.
➢ Les facteurs « non peroxyde » :
Les facteurs « non peroxydes » sont nombreux et ne sont pas tous identifiés. On retrouve le
méthylglyoxal, la bee-defensin 1, la pinocembime, l’acide syringique, l’acide 2-
hydroxyphényl-propionique, le 1,4-dihydroxybenzène, des flavonoïdes et autres composés
polyphénoliques.
f. Action antivirale
In-vitro, Zeina et al. (1996) ont montré une action du miel sur le virus de la rubéole. De même,
in-vivo, le miel utilisé dans l’étude de Al-Waili (2004) a révélé une activité antivirale supérieure

05 juillet 2014 68
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

à celle de l’acyclovir® sur des lésions dues au virus de l’herpès simplex labial et génital (types
1 et 2) chez l’homme.
g. Action cicatrisante
Beaucoup étudiée au CHU de Limoge, à Cremona en Italie et à Cuba, l’action cicatrisante du
miel a été démontrée à nombreuses reprises. Il a également des propriétés nettoyantes et
désinfectantes (Apimondia 2001). Son action énergétique est favorable aux cellules jeunes et
favorise leur multiplication. Il peut être utilisé dans le cadre des brûlures et des plaies nécrosées,
en applications locales ou par voie orale, et montre de formidables capacités cicatricielles
(Iftikhar et al. 2010).
5. Production du miel au Maroc :
L'apiculture marocaine demeure traditionnelle à 80 %, pour 440.000 ruches, mais l'apiculture
moderne progresse d'année en année. Cependant, on comprendra l'intérêt de développer
l'apiculture moderne quand on sait que sur les 2.400 tonnes de miel produit au Maroc en 2004,
1.600 tonnes étaient issues des 90.000 ruches modernes (30 à 40 kg par ruche), les 350.000
ruches traditionnelles n'en produisant que la moitié (3 à 6 kg par ruche). En 2009, Le secteur
traditionnel comptait emploie 25.000 apiculteurs. Dans l’activité moderne, ils étaient 9.000
apiculteurs exploitant 110.000 ruches.
Les marocains ont longtemps traité le miel comme un alicament et même s'il est utilisé comme
édulcorant et fait partie intégrante de la cuisine marocaine, au total ils s'en nourrissent assez
peu, 200 g en moyenne par personne et par an contre 1,300 kg pour un allemand. La première
région apicole marocaine est de loin celle du Gharb, dans le Nord-Ouest du pays, où prédomine
40 à 60 % de la production nationale de miel du pays, 15% des apiculteurs modernes et 91%
des ruches modernes. Vient ensuite la région de Loukos, qui produit environ 10% du miel du
pays. Les deux régions sont avantagées par le climat et la diversité de la flore mellifère.
L'apiculture des régions désertiques du sud est plus difficile. Le reste de la production se répartit
principalement entre les régions d'Essaouira (29298 ruches en 2006), du Sous ou Souss, de
Massa (oued Oulghas, dont la région de Tiznit), de Tadla, et des zones du sud saharien à oasis
du Draa ou Daraa, en particulier autour de Ouarzazate et du Tafilalet.
Des importations ont souvent lieu pour satisfaire en particulier les besoins du mois de ramadan,
en provenance de pays européens (Espagne) ou encore d’Argentine ou de Taiwan. Leur quantité
se situe autour de 1000 tonnes. (La Coopérative ALMADANIA pour la Production Agricole
Ksar Laachouria) .

05 juillet 2014 69
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Matériel et
Méthodes

05 juillet 2014 70
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

I. Caractérisation physicochimique du miel de la plante Capparis Spinosa L. :


1. Humidité
L’humidité des échantillons a été déterminée en mesurant l’indice de réfraction à 20°C suivant
la technique développée par le comité international du miel (Bogdanov, 2002). Les résultats ont
été exprimés par pourcentage d’humidité.

2. Cendres
Les capsules en porcelaine ont été mises dans l’étuve à 500°C, puis dans un dessiccateur jusqu’à
poids constant et enfin pesées. 5 g de miel ont été ajoutés. Les capsules ont été mises, d’abord
à 105°C pendant une nuit, puis déplacées à 500°C pendant 4 heures. Après refroidissement dans
le dessiccateur, elles ont été pesées. La proportion des cendres (g/100g) a été calculée suivant
la formule :

𝑊𝑎 = ((𝑚1 − 𝑚2)/𝑚0) ∗ 100

m0 = le poids du miel,
m1 = le poids de la capsule plus les cendres,
m2 = le poids de la capsule.
3. Conductivité
La conductivité électrique a été mesurée dans une solution 20% de miel dans de l’eau ultra-
pure décarbonisée, à 20°C, en utilisant un conductivimètre, selon la technique développée par
le comité international du miel (Bogdanov, 2002). Les résultats ont été exprimés en
milliSiemens par centimètre (mS/cm).

4. Couleur
La couleur a été déterminée dans une solution aqueuse du miel (10g dans 20ml d’eau distillée),
par lecture de l’absorbance au spectrophotomètre à 635nm. Les résultats ont été calculés suivant
la formule :

𝑚𝑚 𝑃𝑓𝑢𝑛𝑑 = −38.7 + 371.39 𝑥 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑒.

5. pH et acidité
Le pH a été mesuré dans une solution 10% de miel dans de l’eau ultra-pure décarbonisée.
L’acidité libre a été obtenue par titration d’une solution de miel (1g dans 25ml d’eau ultra-pure

05 juillet 2014 71
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

décarbonisée) avec une solution d’hydroxyde de sodium 0.05M jusqu’au point d’équivalence
pHe=8,3.

Quant à l’acidité lactique, 1ml de la solution de soude 0.05M a été ajouté, suivi d’une titration
avec une solution d’acide chloridrique 0.05M pour revenir au point d’équivalence.

L’acidité est exprimée en milliéquivalents d’hydroxyle de sodium nécessaires pour neutraliser


1 kg de miel.

𝐴𝑐𝑖𝑑𝑖𝑡é 𝑙𝑖𝑏𝑟𝑒 = 𝑉 𝑥 𝑁 𝑥 (1000/𝑀)


𝐴𝑐𝑖𝑑𝑖𝑡é 𝑙𝑎𝑐𝑡𝑖𝑞𝑢𝑒 = [(1 − 𝑉) – (0.05 𝑥 𝑉´)] 𝑥 𝑁 𝑥 (1000/𝑀)
𝐴𝑐𝑖𝑑𝑖𝑡é 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒 = 𝐴𝑐𝑖𝑑𝑖𝑡é 𝑙𝑖𝑏𝑟𝑒 + 𝐴𝑐𝑖𝑑𝑖𝑡é 𝑙𝑎𝑐𝑡𝑖𝑞𝑢𝑒.

V : Volume de titration par NaOH,


V’ : Volume de titration par HCl,
M : Masse du miel,
N : Molarité de la solution de titration.
6. Proline
Selon la technique développée par le comité international du miel en 2002, le dosage du contenu
du miel en proline a été déterminé selon le principe de réaction de cette dernière avec la
ninhydrine, plus précisément, selon l’intensité de la coloration du composé formé.

Dans un tube en vert, 0,5 ml d’une solution 5% de miel ont été mélangés avec 1ml d’acide
formique (98 à 100%) et 1ml de ninhydrine (3% dans l’éthylène glycol monomethyléther). Le
contenu a été agité pendant 15 min, puis mit dans le bain mari bouillonnant pendant 15 autres
minutes et enfin dans un autre bain mari à 70°C pendant 10 min. Ensuite, 5 ml d’une solution
2-propanol 50% ont été ajoutés, le tube fermé et placé dans la glace. 45min après, l’absorbance
a été lue à 510 nm. Même chose a été réalisée pour le control négatif (eau seulement) et pour le
standard de proline (0.8mg dans 25ml d’eau distillée).

Le contenu en proline a été calculé selon la formule :

Proline (mg/kg)= (Ae/As)*(Ps/Pe)*80


Ae: absorbance de l’échantillon,
As: absorbance du standard,
Pe : poids de l’échantillon,

05 juillet 2014 72
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Ps : poids du standard.
7. Diastase
Une solution standard d’amidon est capable de développer, avec l’iodine, une couleur bleue
d’intensité dépendante de la quantité d’enzyme présente dans le miel. La diminution de la
couleur est mesurée à intervalle régulier. Ceci pour déterminer le temps nécessaire pour que
l’absorbance diminue à 0,235 (Bogdanov, 2002).

Compte au protocole, 2ml d’extrait de miel (1g de miel dans 1,5 ml d’eau, 500 µl de tampon
acétate pH 5,3, 300 µl de sodium chloride et terminer au trait 5 ml avec l’eau) et 2 ml de
solution d’amidon (2g d’amidon dans 90 ml d’eau distillée, faire bouillir pendant 3 min et
terminer au trait 100 ml avec l’eau) ont été mis dans le bain mari à 40°C. Après 15 min, 1 ml
de la solution d’amidon a été ajouté à celle de l’extrait et le chronomètre lancé. 2 min passées,
100 µl du mélange ont été prélevés et ajoutés à 1 ml de la solution d’iodine (4g d’iodine
potassium dans 400 µl d’iodine stock et remplir au trait 100 ml avec l’eau distillée) et à 4 ml
d’eau distillée. L’absorbance a été lue à 660 nm. Pour le control négatif, la solution d’amidon
a été ajoutée à 2 ml d’eau distillée.

L’activité de la diastase a été calculée selon la formule suivante :

𝐷𝑁 = 300/𝑇𝑥

Tx : le temps qu’a fallu à la réaction pour que l’absorbance de la couleur bleue diminue à 0.235
approximativement.

8. Sucres
Cette méthode consiste à déterminer le contenu du miel en fructose et glucose par
chromatographie liquide haute performance à détection par indice de réfraction (RI-HPLC).

A 500mg de miel, 4 ml d’eau distillée ont été ajoutés, ainsi que 2,5 ml de méthanol avant de
compléter, avec de l’eau, au trait 10ml du tube. Après homogénéisation, la solution a été filtrée
à travers un filtre de 0,45 µm et mise dans un tube Evans. La phase mobile est une solution
dégazée d’acétonitrile-eau (80 :20 v/v) qui traverse une colonne 4.6 mm de diamètre, contenant
un gel de silice à particules de taille 5-7 µm, à température 30°C. Le volume injecté est de 20µl,
le flow est de 1 ml/min et le temps d’analyse est de 20min.

05 juillet 2014 73
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Les sucres ont été identifiés et quantifiés en comparant leurs temps de rétention et leurs airs
sous la courbe avec ceux des standards (fructose et glucose). Les résultats ont été exprimés en
g/kg. Evaluation flavonoïdes

9. HMF
L’hydroxyméthylfurfural (HMF) a été déterminé dans une solution aqueuse de miel (1g dans
5ml d’eau milliQ), filtrée à travers un filtre de 0.45µm. Utilisant une chromatographie liquide
haute performance (HPLC), équipée d’une colonne phase inverse C18 et d’un détecteur à UV.
La phase mobile est une solution méthanol-eau (90 :10 v/v) préalablement dégazée et le
standard est une solution de 5-hydroxymethyl-furan-2-carbaldehyde à 1, 2, 5, et 10 mg/L dans
de l’eau milliQ. Le flow est de 1ml/minute, la quantité injectée est de 20µL et la détection se
fait à 285nm.

Le contenu en HMF est calculé en comparant les airs sous la courbe de l’échantillon avec ceux
du standard, tenant compte de la dilution. Les résultats sont exprimés en mg/kg.

II. L’évaluation de l’activité antioxydante des extraits aqueux des feuilles, des fleurs,
et des graines de Capparis Spinosa L., et du miel monofloral du câprier :
1. Echantillons :
Les échantillons des feuilles et des fleurs de Cappris Spinosa sont récoltés de la région de
Taounate « Douar Wlad Hssan », les graines sont récupères des câpres sèches de la région
« Wlad Jamaa ».

Le miel monofloral de Cappris Spinosa a été acheté au sein d’une association marocaine (béta
Miel) de la région de Sefrou - Fés-Boulmane.

2. Préparation de l’extrait aqueux :


Nous avons pesé 10g de chaque échantillon de la plante Capparis Spinosa (graines, feuilles et
fleures), puis on a ajouté 100 ml de l’eau froide, et les amené à une ébullition à reflux pendant
une 15 minutes. Après filtration des échantillons on a centrifugé les échantillons pendant 10
minutes à une vitesse de 4000 tours, enfin on récupère le surnageant dans des flacons.

Nous avons aussi préparé une solution aqueuse de miel on ajoutant 1g de miel à 1 ml d’eau.

05 juillet 2014 74
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

3. Le test de piégeage des radicaux libres DPPH :


Le test DPPH, qui utilise une réaction d'oxydoréduction avec le 2,2-diphényl-1-pikrylhydrazyl
radicale, a été utilisé pour déterminer la capacité antioxydante des extraits.

a. Principe :
Le radical a une couleur violette en raison de l'électron non apparié d'azote et, après réaction
avec l'atome d'oxygène d'un piégeur de radicaux de la réduction de DPPH-H (2,2- diphényl-1-
picrylhydrazin) est formé, qui est jaune (Villano, et al.,2007). Le changement de couleur peut
être suivie par spectrophotométrie à 517nm et de cette façon le potentiel antioxydant d'une
substance ou un extrait de plante peut être déterminée (Cristina, P., 2009; Molyneux, P., 2004).

b. Procédure :
Selon la méthode décrite par Leandro Moreira et al. 2008, avec quelques modifications, nous
avons estimé La capacité antioxydante des extraits de la plante et la solution de miel à piéger
le radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl.On a mélangé 25 µl de chaque solution avec une
solution de DPPH à 0,004% (P/V) dans d’eau et avec 125 µl de l’eau dans des tubes
d’eppendorf. La lecture de l’absorbance a été réalisée après 1h d’incubation en comparaison
avec celle de contrôle négatif (25µl de DPPH d’eau + 125 µl de l’eau) et celle de control positif
représentée par une substance antioxydante de référence qui dans notre étude le BHT (Butyl
hydroxy toluène) mesurée dans les mêmes conditions du celle des extraits aqueux de la plante
et du miel. On a préparé une gamme de dilution allant de 1 à 1/512 avec deux répétitions.

c. Calcul des résultats :


Les résultats sont exprimés comme étant le pourcentage de L’activité anti radicalaire estimée
en pourcentage grâce à la formule suivante :

%𝑨𝑨𝑹 = 𝑫. 𝑶 𝒄𝒐𝒏𝒕𝒓ô𝒍𝒆 – 𝑫. 𝑶 é𝒄𝒉𝒂𝒏𝒕𝒊𝒍𝒍𝒐𝒏/ 𝑫. 𝑶 𝒄𝒐𝒏𝒕𝒓ô𝒍𝒆 𝒙𝟏𝟎𝟎

%AAR : pouvoir anti-radicalaire en pourcentage.

D.O contrôle : absorbance de contrôle négative.

D.O échantillon : absorbance de l’échantillon.

La réalisation de la cinétique de cette activité a permis de déterminer les concentrations qui


correspondent à 50 % d’inhibition (IC50); la valeur de IC50 la plus faible correspond à
l’efficacité de l’extrait la plus élevée. La valeur de IC50 est exprimée en μg. ml-1.

05 juillet 2014 75
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

4. Dosage des polyphénols totaux :


Le dosage des polyphénols totaux par la méthode utilisant le réactif de Folin-Ciocalteu a été
décrit en 1965 par Singleton et Rossi. Depuis, son utilisation s'est largement répandue pour
caractériser les extraits végétaux d'origines plus diverses.
a. Principe :
Le réactif de Folin Ciocalteu est un acide de couleur jaune constitué par un mélange d'acide
phosphotungstique (H3PW12O40) et d'acide phosphomolybdique (H3PMo12O40). Il est réduit lors
de l'oxydation des phénols, en un mélange d'oxydes bleus de tungstène et de molybdène
(Ribéreau , 1968). La coloration produite, dont l'absorption maximum à 765nm est
proportionnelle à la quantité de polyphénols présents dans les extraits végétaux (Boizot et
Charpentier, 2006 ; Ghazi et Sahraoui, 2005).
b. Procédure :
Nous avons mélangé 100 µl de l’échantillon avec 500 µl du réactif de Folin-Ciocalteu (0,2N)
et 400 µl de carbonate de sodium (1,5g dans 20 ml d’eau distillée). La lecture de l’absorbance
est réalisée après 2 heures d’incubation.

c. Calcul des résultats :


Pour calculer la teneur en polyphénols, on utilise la courbe d’étalonnage de l’acide gallique que
nous avons établie dans les mêmes conditions que les échantillons. La teneur des composés
phénoliques est exprimée en équivalents de mg d’acide gallique (GAE) / g d’échantillon en
calculant les valeurs à partir de cette courbe :

05 juillet 2014 76
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

0,7 Droite d'étalonnage de l'acide galique


y = 2,3655x + 0,0735
0,6 R² = 0,9992

0,5

0,4

0,3 Series1
Absorbance (nm)

Linear (Series1)
0,2

0,1

0
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3

concentration (mg/ml)

Figure 36 la courbe d’étalonnage de la courbe gallique dans le dosage de Folin-Ciocalteu.

5. Le dosage des flavonoïdes totaux :


a. Principe :
Le chlorure d’aluminium (AlCl3) forme un complexe très stable avec les groupements
hydroxydes OH des phénols. Ce complexe jaune absorbe la lumière visible à une longueur
d’onde 415 nm.

b. Procédure :
La teneur en flavonoïdes est déterminée selon la méthode de Ahn et al, 2007. Nous avons

mélangé 200 µl de l’échantillon et 200 µl Al2Cl3 (4g dans 20 ml d’eau distillée) puis nous

avons incubé ce mélange une heure à l’obscurité à 420 nm l’absorbance a été lue.

05 juillet 2014 77
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

c. Calcul des résultats :


Pour calculer la teneur en polyphénols, on utilise la courbe d’étalonnage de l’acide gallique que

nous avons établie dans les mêmes conditions que les échantillons. La teneur en flavonoïdes

totaux des différents échantillons est exprimée en équivalents de mg de quercitine (mg QE) par

gramme d’échantillons en calculant les valeurs à partir de cette courbe :

Droite d'étalonnage de la quercitine


3,5
y = 12,727x + 0,0653
3 R² = 0,9996

2,5
Absorbance (nm)

2
Series1
1,5 Linear (Series1)

0,5

0
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3
concentration (mg/ml)

Figure 37 la droite d’étalonnage de la quercitine

Le pouvoir chélateur des ions de fer :


a. Principe :
Après contact de la Ferrozine avec le fer, elle va se fixer avec les ions de Fer qui donne un

composé de couleur rosâtre. En présence d’une substance antioxydante, elle chélate le fer et la

couleur va se disparaître.

b. Procédure :
Selon par la méthode décrite par Wang et al., 2004 on a évalué Le pouvoir chélateur des ions
de fer d’un échantillon.

Nous avons mélangé 100µl de l’extrait ont été avec 925 µl d’eau distillée puis 25 µl de FeCl2
plus 25 µl de ferrozine. . Le mélange a été agité et après 10 minutes, la lecture de l’absorbance

05 juillet 2014 78
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

s’est faite à 562 nm. Les résultats ont été comparés à ceux du control négatif (100 µl d’eau
distillée) et ceux de l’EDTA.

c. Calcul des résultats :


Pour calculer Le pourcentage d'inhibition de la formation du complexe ferrozine-Fe2+ a été
calculé nous avons utilisé la formule donnée ci-dessous :

𝐸𝑓𝑓𝑒𝑡 𝑐ℎé𝑙𝑎𝑡𝑎𝑛𝑡 𝑙𝑒𝑠 𝑚é𝑡𝑎𝑢𝑥 (%) = [(𝐴 𝐶𝑜𝑛𝑡𝑟ô𝑙𝑒 − 𝐴 𝐸𝑐ℎ𝑎𝑛𝑡𝑖𝑙𝑙𝑜𝑛 ) / 𝐴 𝐶𝑜𝑛𝑡𝑟ô𝑙𝑒 ] × 100

A. Contrôle : absorbance du control négatif.


A. Echantillon : absorbance de l’échantillon.

III. Etude de l’effet hypoglycémiant de l’extrait aqueux des feuilles de la plante Capparis
Spinosa et le miel monofloral de Capparis Spinosa :
1. Matériel végétal :
Nous avons pesé 10g des feuilles de la plante Capparis Spinosa, puis nous avons ajouté 100
ml de l’eau froide, et les amené à une ébullition à reflux pendant une 15 minutes. Après
filtration des échantillons on a centrifugé les échantillons pendant 10 minutes à une vitesse de
4000 tours, enfin on récupère le surnageant dans des flacons. On l’a conservé dans le
réfrigérateur jusqu’au moment du gavage.

Nous avons préparé aussi la solution aqueuse diluée de miel 10%, conservé dans un bécher dans le
réfrigérateur jusqu’au moment du gavage.

2. Matériel animal :
Nous avons réalisé notre expérience sur un groupe de 6 lapins maux de l’espèce Oryctolagus
cuniculus, ils pèsent entre 900g à 1500g, nous avons les placé dans des cages dans
l’animalerie du laboratoire PPSE. Nous avons administré au ce groupe de lapin une
alimentation hypercalorique, composé de graines de tournesol, d’orge, et des graines de maïs.

3. Procédure expérimentale :
Notre procédure a but de administre l’extrait aqueux et la solution diluée de miel, pour ça on
a procédé des étapes suivantes :

• pendant une durée de 10 jours On met les lapins dans les cages pour s’adapter, on a
commencé à gaver les animaux avec de l’eau distillée en fonction de leur poids de (1ml
pour 100g de Poids corporel) pendant les 2 dernier jours de cette durée.

05 juillet 2014 79
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

• Nous avons soumis à l’aide d’une sonde chaque groupe de lapins (N=2) lapins à un
traitement subchronique sous forme d’administration orale répétée quotidiennement
pendant 23 jours à une dose de 1g/kg/j selon la répartition suivante :

➢ Un groupe reçoit la solution du miel (1g/10ml de l’eau distillée)

➢ Un groupe reçoit la solution du l’extrait aqueux des feuilles de la plante Capparis


Spinosa.
➢ L’autre groupe reçoit de l’eau distillé

Nous avons effectué les prélèvements sanguine chez l’animal mis à jeun, le sang est prélevé du
sinus rétro-orbital par ponction à l’aide d’une seringue héparinée. Ensuite Le sang est recueilli
et est centrifugé à 4500 tours par minute pendant 15 minutes, enfin nous avons recueilli le
plasma qui va être stocké à -20°C et qui va servir pour dosage des paramètres sanguines au j0,
j14, j23.

Figure 38 : prélèvement de sang Figure 39 : des lapins de l’espèce


veineux de l’oreille du lapin Oryctolagus cuniculus

4. Le dosage des paramètres plasmatiques :


a. Le dosage de la glycémie :
La glycémie a été mesurée via des bandelettes d’un analyseur automatique (Accu Chek) qui
disposent d’une cellule de réaction dans laquelle nous avons déposé la goutte de sang
veineux de l’oreille de lapin à jeun.

05 juillet 2014 80
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

On aussi mesuré la glycémie dans le plasma à l’aide d’une méthode enzymatique Le glucose
est déterminé après une oxydation enzymatique en présence de glucose oxydase (GOD).Le
peroxyde d’hydrogène forme catalyse par la peroxydase, va réagir avec le phénol et le 4-
aminophenazon et engendre un quinoneimine rouge-violet dont l’intensité de la coloration
mesurée 500 nm est proportionnelle à la concentration glucose.
Voici les réactions mis en jeu :
𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑒 + 𝑂2 + 𝐻2𝑂 𝑎𝑐𝑖𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑛𝑖𝑞𝑢𝑒 + 𝐻2𝑂2
2 𝐻2𝑂2 + 4 − 𝑎𝑚𝑖𝑛𝑜𝑝ℎ𝑒𝑛𝑎𝑧𝑜𝑛𝑒 + 𝑝ℎ𝑒𝑛𝑜𝑙 𝑞𝑢𝑖𝑛𝑜𝑛𝑒𝑖𝑚𝑖𝑛𝑒 + 4𝐻2𝑂.

b. Le dosage des triglycérides :


Les triglycérides sont dosés par méthode enzymatique, Les molécules de triglycérides sont
hydrolysées par la lipase pour former du glycérol et des acides gras. Le glycérol diffuse vers la
couche de réactif, où il est phosphorylé par la glycérol kinase en présence d’adénosine
triphosphate (ATP). En présence de L-α-glycérol-phosphate oxydase, le L-α- glycérophosphate
est oxydé en dihydroxyacétone phosphate et en peroxyde d’hydrogène. La réaction finale est
l’oxydation d’un chromogène par le peroxyde d’hydrogène, catalysée par la peroxydase, pour
produire un colorant. La densité du colorant ainsi formé, proportionnelle à la concentration des
triglycérides présents dans l’échantillon, est mesurée par spectrophotomètre à 510 nm.
c. Le dosage de cholestérol :
Le cholestérol total est dosé par méthode enzymatique, Les molécules de cholestérol estérifié
sont hydrolysées par la cholestérol estérase pour le cholestérol libre. Par la suite il subit une
oxydation par la cholestérol oxydase avec formation du peroxyde d’hydrogène. La réaction
finale est l’oxydation d’un chromogène par le peroxyde d’hydrogène, catalysée par la
peroxydase, pour produire un colorant. La densité du colorant ainsi formé, proportionnelle à la
concentration de cholestérol présent dans l’échantillon, est mesurée par spectrophotométrie de
à 510 nm.
d. Le dosage de la créatinine :
Le principe du test est basé sur la réaction de la créatinine en contact avec du picrate de sodium,
telle que décrite par Jaffé. La créatinine forme en milieu alcalin un complexe coloré avec de
l’acide picrique. Les temps écoulés entre chaque mesure permettent d’éviter des interférences
avec d’autres constituants. La vitesse de formation de cette complexe at donc l’augmentation
de l’absorbance à 500 nm est proportionnelle à la concentration en créatinine.

05 juillet 2014 81
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

e. Le dosage de l’urée :
Méthode enzymatique et colorimétrique basée sur l’action spécifique de l’uréase qui hydrolyse
l’urée en ions ammonium et carbonate. Les ions ammonium forment ensuite avec le chlore et
le salicylate un complexe colore bleu-vert. L'intensité de coloration, proportionnelle à la
concentration en urée dans l’échantillon, est mesurée à 600 nm.
5. Analyse des résultats :
Les courbes et les histogrammes sont tracés par le Microsoft Excel 2007, Les résultats des tests
effectués sont exprimés en moyenne ± écart-type SD. Les valeurs d’IC50 (concentration
inhibitrice à 50%) sont calculées par la méthode de régression linéaire à partir de la courbe [%
inhibition = f (concentration)]. La différence entre le contrôle et les différents tests, est
déterminée par le test de. Les valeurs de p≤0.05 sont considérées statistiquement significat

05 juillet 2014 82
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Résultats et
Discussion

05 juillet 2014 83
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

I. Résultats de la détermination des caractéristiques physicochimique du mile de


câprier :

Tableau 4 Les caractéristiques physico-chimiques du miel de câprier (Capparis Spinosa L.)

pH 3.750.02

Acidité libre 31.380.59 mEq/kg

Acidité lactonique 7.470.51 mEq/kg

Acidité totale 38.850.75 mEq/kg

Colour pfund 82.404.58mm

Humidité 18.500.09 %

Cendres 0.3150.013 g/100g

Conductivité électrique 484.333.57 µs / cm

HMF 24.951.26 mg/kg

Diastase 3.650.38 unités de Schade

Proline 1083.349.49 mg/kg

Visuellement, notre miel n’a montré des signes de fermentation ou de granulation avant le
début des tests physico-chimiques. Les résultats trouvés pour chaque test sont résumés dans le
tableau 4.

L’humidité du miel dépend des conditions environnementales et de la manipulation par les


apiculteurs. Elle peut varier d’une année à une autre (Acquarone et al., 2007). Pour le miel de
câprier, l’humidité était comprise entre 18.500.09 % permise par les régulations
internationales de qualité (EU, 2001 ; Codex Alimentarius, 2001). L’humidité élevée permet
la fermentation indésirable du miel par les levures osmo-tolérantes et ainsi la formation
d’alcool éthylique et de dioxyde de carbone. En outre, l’alcool éthylique peut à son tour
s’oxyder en acide acétique et en eau donnant un gout amer au miel (Chirifie et al., 2006).

05 juillet 2014 84
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Les valeurs de conductivité électrique de miel du câprier est de 484.333.57 µs / cm (Tableau


4), respectant la norme permise (≤ 800 µS/cm). Elles correspondent aux valeurs trouvées par
Alvarez-Suarez et al, 2010. Une conductivité élevée, ceci peut être dû à la richesse de la
plante en sels minéraux. , ainsi ce ceci peut orienter nous dans la distinction entre un mile de
nectar et un miellat et un indice important de la possible pollution de l’environnement, le
potassium est le plus dominat dans le miel de câprier par rapport aux autres sels minéraux.
(Bogdanov et al, 2004).

Tableau 5 Teneur en sels minéraux du miel Capparis Spinosa L.

Potassium 1016.136.28 mg / kg

Sodium 131.1513.25 mg / kg

Calcium 26.003.69o mg / kg

Magnesium 28.071.02 mg / kg

Le miel de câprier à un caractère acide, la valeur de pH est 3.750.02, ce qui confirme son
origine nectarien (comprise entre 3.5 et 4.5) (Tableau 2). Cette valeur étaient similaire à ceux
trouvés dans des miels algériens, brasiliens, espagnols et turques (Azeredo et al., 2003 ;
Ouchemoukh et al., 2007). Le pH acide inhibe la croissance des microorganismes, d’où son
importance lors de l’extraction et le stockage du miel (Terrab et al., 2002). L’acidité libre du
miel peut être expliquée par la présence d’acides organiques en équilibre avec les lactones, les
esters et quelques ions inorganiques tel le phosphate. Une valeur d’acidité élevée témoigne de
la fermentation des sucres en acides organiques.

La couleur permet la classification des différents miels, ceux dont le mmPfund est compris entre
9 et 16 mm sont classés comme « extra-blancs », ceux entre 17 et 34 mm comme « blancs »,
ceux entre 35 et 50 mm comme «ambres très claires », ceux entre 51 et 85 mm comme « ambres
clairs », ceux entre 86 et 114 mm comme « ambres » et enfin ceux dépassant les 114 mm comme
« ambres foncés » (NC 371-04). En se basant sur cette classification, le miel de câprier a une
valeur 82.404.58mm c’est à dire il a une couleur ambre. La couleur du miel dépond de divers
facteurs, dont le contenu en minéraux. Selon Gomes et al., 2010, les miels blancs ou peu colorés
ont un faible contenu en cendres au contraire de ceux très colorés.

05 juillet 2014 85
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Ceci correspond aux résultats trouvés, les miels de couleur ambre ont le contenu en cendre le
plus élevé. En outre, le contenu en cendre de miel de câprier est 0.3150.013 g/100g, elle ne
dépasse 0,6% confirmant l’origine « nectar » du miel de câprier. (EU, 2001 ; Gomes et al.,
2010).

L’hydroxyméthylfurfural est étudié pour déterminer la qualité du miel. Le miel de câprier a


une valeur de 24.951.26 mg/kg , qui respecte les normes (≤ 40 mg/kg).. Or plusieurs facteurs
influencent le niveau d’HMF, tel l’âge du miel, la température, les conditions de stockage, le
pH et l’origine florale (Fallico et al., 2006).

Comme l’HMF, l’activité diastase témoigne de la fraicheur du miel (Fallico et al., 2006), selon
la norme elle doit être au minimum 8 DN (Codex Alimentarius, 2001). Les valeurs de DA dans
le de miel de câprier est de 3.650.38 unités de Schad.

La proline est un amino acide libre abondant dans le miel et un caractère de fraicheur de ce
dernier. Pour tous les échantillons, le taux de proline respecte les normes (≥ 0,05 mg/Kg), il
est de 1083.349.49 mg/kg ce qui indique la richesse de miel de câprier en proline.

Le miel de câprier présente des taux de fructose plus élevés que ceux de glucose, témoignant
de leur origine « nectar ». Le contenu en fructose est de 392.5313.20 g/100g et le ratio de
Fru/glu est 1.340.01ce qui confirme son origine nectarien. La proportion fructose-glucose
dépend en grande partie de la source du nectar (Anklam, 1998) et elle a un impact sur la
saveur du miel, étant donné que le fructose est beaucoup plus doux que le glucose.

Tableau 6 contenu de sucre du miel de Capparis Spinosa L.

Fructose 392.5313.20 g/100g

Glucose 292.1412.26 g/100g

Glu/Fru 1.340.01

Maltose 43.562.00 g/100g

Melizitose 6.620.91 g/100g

05 juillet 2014 86
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

II. Résultats et discussion l’activité antioxydante des extraits aqueux des feuilles, des
fleurs, et des graines de Capparis Spinosa L., et du miel monofloral du câprier :
Dans le but d’explorer les l’activité antioxydante des différentes parties de la plante Capparis
Spinosa L et le miel monofloral de cette plante, un dosage des polyphénols totaux et des
flavonoïdes et des tests de l’activité anti-radicalaire et de l’effet chélateur ont été effectué.
La raison principale pour le choix de ces substances réside dans le fait que la majorité des
propriétés antioxydantes des plantes leur sont attribués. L’acide gallique a été utilisé comme
standard pour les polyphénols. Le dosage des flavonoïdes a été réalisé en utilisant comme
standard la quercitine. Les résultats sont représentés dans le tableau 5, 6 et 7 et les gammes
d’étalonnages dans les figures 37 et 38.
1. Résultats de l’évaluation de teneur en polyphénols total :

Tableau 7 Taux de phénols d’extrait aqueux de différentes parties de la plante Capparis


Spinosa et le miel monofloral de la plante

Echantillons Les feuilles Fleurs Graines Miel

Phénols g/100g 0.45±0.052 0.52±0.055 1.91±0.016 0.37±0.016

Selon les résultats illustrés ci-dessus dans le tableau 1, on distingue que les graines de la

plante Capparis Spinosa (1,91 g/100 g) vient en première position, suivie par fleurs (0.52

g/100 g), feuilles (0.45 g/100 g), et enfin le miel qui a le plus faible teneur en polyphénols

(0.37 g/100 g) par rapport au extraits aqueux de différentes parties la plante Capparis

Spinosa.

2. Résultats de l’évaluation de teneur en flavonoïdes :


Tableau 8 Taux de Flavonoïdes d’extrait aqueux de différentes parties de la plante Capparis
Spinosa et le miel monofloral de la plante

Echantillons Les feuilles Fleurs Graines Miel

Flavonoïdes g/100g 0.52±002 0.20±0.020 0.17±0.063 0.41±0.014

05 juillet 2014 87
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Les résultats sur le tableau 6 indiquent que les feuilles de la plante Capparis Spinosa, fleurs,
graines, et le miel monofloral de la plante présentent les teneurs en flavonoïdes qui sont
respectivement de 0.52 g/100 g, 0.20 g/100 g, 0.17 g/100 g, 0.41 g/100 g. flavonoïdes

1. Résultat du test de piégeage des radicaux libres DPPH :

100
% Activité DPPH
90

80

70

60

50

40 Feuilles

30 Graines

Fleurs
20
miel
10

0
0 5 10 15 20 25 30

Figure 40 : % l’activité antioxydante l’activité antioxydante des extraits aqueux des feuilles, des
fleurs, et des graines de Capparis Spinosa L., et du miel monofloral du Capparis Spinosa L.

Tableau 9 Les IC 50 des échantillons

Echantillons E.A. feuillies E.A. graine E.A fleurs Miel

IC50 0.48±0.025 1.86±0.023 1.64±0.0342 3.26±0.0738

En comparaison avec un contrôle positif qui est le BHT, chaque échantillon a un effet inhibiteur
significatif sur le piégeage des radicaux libres, les extraits montre une activité importante plus
que celle du miel monofloral de cette plante. (Figure 18).

05 juillet 2014 88
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

D’après les résultats de % d’Activité DPPH des extraits aqueux présenté dans les résultats
dessous on distingue que les feuillies de la plante Capparis Spinosa posséder la meilleure
activité DDPH IC50 de 0.48 ± 0.025 mg/ml, suivie par fleurs avec une activité de 1.64 ± 0.324
mg/ml, et graines qui a 1.86 ± 0.0.23 mg/ml d’activité comparant le avec le miel qui a la faible
activité IC50 de 3.26 ± 0.0.738 mg/ml.

3. Les résultats de l’effet chélateur :


Tous les échantillons soit des extraits aqueux des différentes parties de la plante Capparis
Spinosa L. ou le miel de câprier ont donné un résultat négatif durant le test de l’effet chélateur.

4. Discussion des résultats :


Les résultats du dosage des polyphénols totaux et des flavonoïdes assurent que la plante
Capparis Spinosa L. possédant une quantité importante de ces substances, ce qui signifie une
activité antioxydante très bonne, notant que les feuilles de cette plante possèdent une quantité
plus grande de flavonoïdes en comparaison avec les fleurs et les grandes qui ont un teneur de
flavonoïdes faible, tandis que les graines ont la meilleure quantité de phénols par rapport aux
autres parties de la plante.

En comparant les résultats de ce travail avec celle d’autres études comme celle de Sabah
Boumerfeg et al, 2012 et A. Meddour et al, 2011 montrent un meilleur résultat, ceci est dû peut
être que l’extraction méthanolique ou méthanolique est plus fiable que l’extrait aqueux.

Le miel monofloral de la plante étudiée a aussi une quantité importante de polyphénols et de


flavonoïdes presque semblable au celles de extraits aqueux de la plante Capparis Spinosa L.,
ces résultats sont similaires a celle trouvés dans avec l’étude de Meda et al 2005, de frankel et
al 1998 sur le miel d’eucalyptus et ferreira et al, 2009 sur des miels portugais et ambres.
On peut en déduire aussi qu’il existe une corrélation entre la teneur en polyphénols et
flavonoïdes, et le piégeage des radicaux libres par les extraits des différentes partîtes de la plante
Capparis Spinosa L. et le miel monofloral de cette plante. Câprier

05 juillet 2014 89
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

III. Résultats et discussion l’effet hypoglycémiant et hypolipidémique des extraits aqueux


des feuilles de Capparis Spinosa L., et du miel monofloral du câprier :
1. Dosage de la glycémie :
Après l’expérience réalisé durant 21 jours sur les lapins maux de groupe de 3 (Gr1 : extrait
aqueux des feuilles, Gr2 : miel monofloral ; Gr : eau distillée) on a obtenus les résultats
suivantes :

2.0 * *
* * Contrôle
* Capparis spinosa
1.5
Glycémie (mg/dl)

* * *
** *
* * * * Miel
*

* * * *
** *
1.0

0.5

0.0
J1

J7

3
J1

J1

J2

J2

Temps (jours)

Figure 41 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel


sur a glycémie des lapins maux normaux par un auto-analyseur (Accu Check) (* : P< 0,05 ; **
: P< 0,01 ; ***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student)

2.0
Contrôle

* Capparis spinosa
1.5
Glycémie(g/l)

Miel
*
* *
1.0
* *
*

0.5

0.0
J1

3
J1

J2

Temps (jours)

Figure 42 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel


sur a glycémie des lapins maux normaux par spectrophotométrie (* : P< 0,05 ; ** : P< 0,01 ;
***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student).

05 juillet 2014 90
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

On constate d’après les résultats obtenus, que les deux groupes qui ont reçu l’extrait aqueux des
feuilles de la plante Capparis Spinosa et le miel monofloral de cette plante que la glycémie a
diminuée significativement durant les 21 jours par rapport au groupe control.

2. Dosage du cholestérol :

1.5
Contrôle
Capparis spinosa
Cholestérol(g/l)

Mie l
1.0 * *

* *
0.5
*
*

0.0
J1

3
J1

J2

Temps (jours)

Figure 43 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel


sur les taux de cholestérol des lapins maux normaux par spectrophotométrie * : P< 0,05 ; ** :
P< 0,01 ; ***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student).
Durant 21 jours on remarque que les taux de cholestérol des lapins qu’ont les administré
l’extrait aqueux des feuilles et le miel monofloral a diminué pendant le 11éme jour et le 23éme
par rapport aux lapins control, avec une diminution plus importante chez le groupe qui a reçu
l’extrait aqueux pendant 23éme jour.

05 juillet 2014 91
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

3. Le dosage des triglycérides :

1.5
* Contrôle
* Capparis spinosa
Triglycéride (g/l)

*
Mie l
1.0 *
*
* *

0.5 *
*

0.0
J1

3
J1

J2
Temps (jours)

Figure 44 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel


sur les taux de cholestérol des lapins maux normaux par spectrophotométrie (* : P< 0,05 ; ** :
P< 0,01 ; ***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student).
Une diminution significative des taux des triglycérides est notée chez les groupes qui ont reçu
l’extrait aqueux des feuilles et le miel monofloral par rapport au groupe control durant le 11émé
jour et le 23éme jour.
4. Le dosage de la créatinine sanguine :

15
* Contrôle
Capparis spinosa
Créatinine (mg/l)

* Miel
10 * *

* *
*
*
5 *

0
J1

3
J1

J2

Temps (jours)

Figure 45 Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel


sur les taux la créatinine sanguine des lapins maux normaux par spectrophotométrie (* : P<
0,05 ; ** : P< 0,01 ; ***p<0.001 par comparaison aux valeurs témoins (test t de Student).

05 juillet 2014 92
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Les groupes qui ont reçu l’extrait aqueux des feuilles et le miel monofloral de câprier ont des
taux de créatinine sanguine diminuée lors de cette expérience pendant le 11éme jour e le 23émé
jour par rapport au groupe control.

5. Dosage des taux de l’urée dans le sang :

0.8
Contrôle
Capparis spinosa
0.6 *
*
Mie l
Urée(mg/l)

*
*

0.4
* * *
* * *
0.2

0.0
J1

3
J1

J2
Te mps (jours)

Figure 46 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel


sur les taux de l’urée dans le sang des lapins maux normaux par spectrophotométrie.
Les taux d’urée dans le sang ont diminuée significativement chez les groupes qui ont reçu le
l’extrait aqueux des feuilles de Capparis Spinosa et le miel monofloral de la plante en
comparaison avec le groupe control, avec une diminution plus importante de l’urée sanguin
cher le groupe qui a reçu le miel pendant le 11éme jour.

05 juillet 2014 93
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

6. Effet sur la prise pondérale :


* *
2.0 * * Contrôle
Capparis spinosa
1.5
Mie l
Poids(kg)

*
*
1.0 *

0.5

0.0
t

t
en

en
m

m
te

te
ai

ai
tr

tr
nt

ès
pr
va

A
A

Figure 47 : Activité subchronique de l’administration de l’extrait aqueux de feuilles et du miel


sur le poids des lapins maux normaux (* : P< 0,05 ; ** : P< 0,01 ; ***p<0.001 par
comparaison aux valeurs témoins (test t de Student). être
Les résultats obtenus sur la prise pondérale des lapins maux qui ont reçu l’extrait aqueux des
feuillies et le miel monofloral de câprier indiquent qui n’y a aucune amélioration de poids après
21éme jour de traitement, par rapport au groupe contrôle qui rapporte une augmentation de poids
après la durée de traitement.

7. Discussion des résultats :


Dans notre étude nous avons évalué l’effet d’une dose quotidienne administré pendant une 21
jours de l’extrait aqueux des feuilles de la plante Capparis Spinosa L. et du miel monofloral de
cette plante sur les taux de la glycémie, triglycérides, cholestérol, créatinine sanguine, taux urée
sanguins, et la prise pondérale des lapins maux tout en administrant pendant cette durée une
alimentation hypercalorique (graines de tournesol, d’orge, et de maïs).

Les résultats indiquent qu’il y a une diminution significative des taux de glucose sanguin des
groupes de lapins lesquels nous avons administré l’extrait aqueux des feuilles de Capparis
Spinosa L. Ces résultats sont similaires aux celles confirmés par certains études telle que l’étude
de Hassan Fallah Huseini et al, 2013 qui indiquent que l’extrait méthanolique de Capparis
Spinosa L. induit une diminution de la glycémie chez des patients diabétiques ce qui confirme
l’utilisation de la médecine traditionnelle de cette plante pour le traitement du diabète.

Notre étude aussi a démontré que l’extrait aqueux des feuilles de la plante Capparis Spinosa L.
une diminution des taux des triglycérides et de cholestérol chez les lapins, ces résultats semblent

05 juillet 2014 94
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

d’accord avec celle obtenu de l’étude mené par M. Eddouks et al, 2005 travaillant sur des rats
diabétiques qui présentent des taux des triglycérides et de cholestérol élevé, qui assure que la
plante Capparis Spinosa L. possède un pouvoir hypolipidémique.

Les études n’ont pas démontré jusqu’à maintenant quelles sont les mécanismes exacts dont
lesquels la plante de Câprier induit un effet hypoglycémiant et hypolipidémique, Dans une
étude, il a été signalé que câpres avait une activité hypoglycémique sans effet sur la sécrétion
d'insuline chez les rats diabétiques Afifi-Yazar FU et al, 2011.

Cependant, les propriétés antioxydantes de la plante du Câprier est dû à la présence de des


teneur appréciables de composés phénoliques, tocophérols, caroténoïdes et de la vitamine C
peuvent expliquer les effets de caprier sur les patients diabétiques (Yang YU et al, 2006)
(Yang T et al, 2010) (Calis et al., 2002)., Capparis Spinosa L. contient également des
composés tel que la rutine et la lectine (Ramezani Z, 2008), (Lam SK, 2009) avec des effets
favorables sur le glucose et le métabolisme d'insuline. Nombreux composés bioactifs tels que
les saccharides, les glycosides, alcaloïdes, les terpènes, les huiles volatiles, les acides gras, les
stéroïdes et plusieurs minéraux sont présents dans Capparis Spinosa L. peut influencer
directement ou indirectement la glycémie ou le métabolisme d'insuline. (Rajesh PP e al, 2009)
(Anila et Vijayalakshmi, 2002)

Le miel monofloral de la plante étudiée a aussi d’effet de diminuer les taux de la glycémie,
triglycérides et de des taux de cholestérol des lapins normaux, ce ci indique que cette variété de
miel a de molécules particulières par rapport aux autres variétés de miel capable d’induire une
telles actions.

L’extrait aqueux des feuilles de la plante de câprier et le miel monofloral de câprier ont induit
une diminution des taux de la créatinine sanguine et des taux de l’urée sanguine, ça peut être
attribuée a un effet diurétique exercé sur des lapins durant le traitement.

05 juillet 2014 95
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Conclusion et perspectives

Notre étude s’inscrit dans le cadre de l’exploration des effets pharmacologiques de la plante de
Câprier (Capparis Spinosa) et du le miel monofloral de câprier, nous avons choisi d’étudier
l’activité antioxydante en évaluant le teneur en flavonoïdes et des polyphénols totaux et en
réalisant des tests de DPPH et de l’effet chélateur. On aussi explorer le pouvoir hypoglycémiant
et hypolipidémique de l’extrait aqueux et du miel sur des lapins pendant une durée de 21 jour,
ainsi nous avons effectué des dosages de la créatine sanguine et de l’urée sanguine.

D’après les résultats de notre étude nous avons constaté que la plante de Capparis Spinosa ainsi
que le miel monofloral de cette plante possèdent une activité antioxydante impressionnante,
ceci nous a conduit de confirmer que cette plante et son miel monofloral disposent des
molécules qui jouent un rôle primordial dans la prévention et le traitement des maladies
cardiovasculaires et ses complications graves qui menacent la santé publique, et constituent la
première cause de décès à travers le monde en luttant contre le stress oxydatif.

Nous avons démontré aussi via cette étude que l’administration quotidienne des groupes des
lapins normaux pendant 21 jours de l’extrait aqueux des feuilles et le miel monofloral de câprier

05 juillet 2014 96
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

induit une action hypoglycémiante et hypolipidémique significative, ce qui supporte


l’utilisation de la médecine traditionnelle particulièrement marocaine la plante de câprier pour
traiter le diabète type 2.

Finalement, le mécanise de l’activité hypoglycémiante de la plante de câprier et les molécules


impliqués restent indéterminés, ceci nécessite des études sur le mode d’action et les sites action
de ces molécules ainsi de révéler plus d’effet pharmacologique de cette plante sans oublier que
l’utilisation at l’administration de miel en parallèle peut avoir un effet synergique intéressant.

Références
Bibliographiques
A Guide (Anses - Agence nationale de sécurité sanitaire de l’alimentation, de l’environnement
et du travail : http://www.afssaps.fr/Activites/Pharmacopee/Qu-est-ce-que-la
Pharmacopeefrancaise/(offset)/1 - octobre 2008 to Medicinal Plants in North Africa 2005.
A. Meddour, M. Yahia, N. Benkiki, A. Ayachi, étude de l'activité antioxydante et
antibactérienne des extraits d'un ensemble des parties de la fleur du Capparis Spinosa L.,
Lebanese Science Journal, Vol. 14, No. 1, 2013.

Abdelly,C.(2008).Phenolic composition of Cynara cardunculus L.organs, and their biological


activities.Comptes Rendus Biologies, 331: 372-379.
Acquarone, C., Buera, P., Elizalde, B., 2007. Pattern of pH and electrical conductivity upon
honey dilution as a complementary tool for discriminating geographical origin of honeys. Food
Chemistry 101, 695–703.

Afifi-Yazar FU, Kasabri V, Abu-Dahab R. Medicinal plants from Jordan in the treatment of
diabetes: traditional uses vs. in vitro and in vivo evaluations — part 2. Planta Medica
2011;77(11):1210—20.

05 juillet 2014 97
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Ahn, M.-R., Kumazawa, S., Usui, Y., Nakamura, J., Matuska, M., Zhu, F., Nakayama, T. 2007.
Antioxidant activity and constituents of propolis collected in various areas of China. Food
Chemistry 101, 1383–1392.

Al-Waili NS. (2004) An alternative treatment for pityriasis versicolor, tinea cruris, tinea
corporis and tinea faciei with topical application of honey, olive oil and beeswax mixture: an
open pilot study Complement Ther Med. 12(1):45-47.

Amić D., Davidović-Amić D., Bešlo D. et Trinajstić N. 2003. Structure–Radical scavenging


activity relashionships of flavonoids. CROATICA CHEMICA ACTA CCACAA., 76 (1) : 55-61.
Anses - Agence nationale de sécurité sanitaire de l’alimentation, de l’environnement et du
travail : http://www.afssaps.fr.
Apimondia - standing commission of apitherapy (2001) Traité d’Apithérapie, La médecine
par les abeilles [cédérom] v.1.01 PC-Mac Produit par Api-Ar International SA Ŕ Brussels.
2001 ISBN : 2-9600270-0-0.
ATLAS du DIABÈTE de la FID 6e édition ; p 11, 12 ; 2013.
Attia WY., Gabrys MS., El-Shaikh KA., Othman GA. (2008) The anti-tumor effect of bee
honey in Ehrlich ascite tumor model of mice is coincided with stimulation of the immune
cells Egypt J. Immunol. 15(2):169-83.

Azeredo, L.C., Azeredo, M.A., De Souza, R.M., Dutra, V.M.L., 2003. Protein contents and
physicochemical properties in honey samples of Apis mellifera of different floral origins.
Food Chemistry 80, 249–254.

Bahorun, T.(1997). Substances Naturelles actives.La flore Mauricienne .une source


d’approvisionnement potentielle. Food and Agricultural Research council Mauritias,p83- 94.
Bassam Abdul Rasool Hassan , Medicinal Plants (Importance and Uses) ; 2012.
Bassam Abdul Rasool Hassan, Medicinal Plants (Importance and Uses), Pharmaceut Anal Acta,
2012).
BOGDANOV S., MARTIN P., LÜLLMANN C. (1997) Harmonised methods of the
European Honey Commission. Apidologie, Extra issue, 1-59.
Bogdanov, S; Haldimann, M; Luginbühl, W; Gallmann, P. 2007. Minerals in honey:
environmental, geographical and botanical aspects. Journal of Apicultural Research and Bee
World 46, 269-275.

05 juillet 2014 98
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Bonina F, Puglia C, Ventura D, Aquino R, Tortora S, Sacchi A, Saija A, Tomaino A, Pellegrino


ML, De Capraris P (2002). In vitro antioxidant and in vivo photoprotective effects of a
lyophilized extract of Capparis spinosa L. buds. Journal of Cosmetic Science, 53, 321-335.
Boros, B., Jakabova, S., Dornyei, A., Horvath, G., Pluhare, Z., Kilar, F., Felingera, A.
(2010).Determination of polyphenolic compounds by liquid chromatography–mass
spectrometry in Thymus species. Journal of Chromatography A, 1217: 7972–7980.
Bouakaz, I., (2006).Etude phytochimique de la plante Genista Microcephala. Mémoire de
magister. Batna.
Bruneau E. (2009) Chapitre IX : Les produits de la ruche in Clément H. et al. Le Traité
Rustica de l’apiculture Editions Rustica, Paris, 354-387.
Bruneton, J.(2009). Pharmacognosie-Phytochimie,plantes médicinales, (4e éd),revue
etaugmentée, Tec & Doc - Éditions médicales internationales,Paris, p 1288 .
Bruneton,J.(1999).Pharmacognosie,Phytochimie,Plantesmédicinales,(3èmeéd.).Editions Tec
& Doc Lavoisier, p 1120.
Brusselmans K., Vrolix R., Verhoeven G. et Swinnen J. V. 2005. Induction of cancer cell
apoptosis by flavonoids is associated with their ability to inhibit fatty acid synthase activity.
Journal of biological chemistry., 280 (7) : 5636-5645.
Burton, G. W., Ingold, K. U.(1986).Vitamin E: Application of the principles of physical
organic Chemistry to the exploration of its structure and function. Accounts of Chemical
Research, 19 : 194-201.
Bylka W., Mathawska I. et Pilewski N. A. 2004. Natural flavonoid as antimicrobial agents.
Journal of the American Nutraceutical Association., 7 (2) : 24-26.85
Câprier importance économique et conduite technique, Bulletin de transfert de technologie en
agriculture, N°37, octobre 1997.
Catherine Ballot-Flurin, Les bienfaits de l’apithérapie tirage n° 36268 , 2010.
CAZAU-BEYRET Nelly, prise en charge des douleurs articulaires par aromathérapie et
phytothérapie, 2013.
Chang, C-L.,Wang, G-J., Zhang,L-J., Tsai,W-J., Chen, R-Y., Wua,Y-C.,Kuo ,YH.(
2009).Cardiovascular protective flavonolignans and flavonoidsfrom Calamus
quiquesetinervius. Phytochemistry, 10 : 1–9.
Chirife, J., Zamora, M.C., Motto, A., 2006. The correlation between water activity and %
moisture in honey: fundamental aspects and application to Argentine honeys. Journal of Food
Engineering 72, 287–292.

05 juillet 2014 99
Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Codex Alimentarius Commission Standards, 2001. CODEX STAN 12-1981, Rev.1 (1987),
Rev.2.

Cooper R. (2007) Honey in wound care: antibacterial properties. GMS Krankenhaushyg


Interdiszip. 2(2):Doc51

Cowan M. M. 1999. Plant products as antimicrobial agents. Clinical microbioloy reviews., 12


(4) : 564-570.
Dacosta, E. (2003).Les phytonutriments bioactifs.Yves Dacosta (éd). Paris, p317.
Das, Manika., Das, Dipak. K.(2010). Resveratrol and cardiovascular health.Molecular
Aspects of Medicine, 31: 503–512.
Decloitre F. 1993. Impact des facteurs alimentaires sur les mécanismes de la cancérogénèse
bases d'une prévention des cancers par l'alimentation. Cahiers de Nutrition et de diététique., 28
(2) : 85-95.
Definition and Diagnosis of Diabetes Mellitus and Intermediate Hyperglycemia. Report of
WHO/IDF Consultation, 2006; 46p.
Depeint F., Gee J. M., Williamson G. et Johson I. T. 2002. Evidence for consistent patterns
between flavonoid structures and cellular activities. Proceeding of the Nutrition Society., 61 :
97-103.
DESCHAMPS V.C. (1998) Production et commercialisation du miel. Thèse de doctorat
vétérinaire, Université Paul Sabatier, Toulouse, 118 p.
Domerego R., Imbert G., Blanchard C. (2009) Les remèdes de la ruche Editions Alpens,
Monaco, 95p.
Dominique Hunka Gely, Les vertus des produits de la ruche, Encyclopédie de revitalisation
naturelle, Daniel Kieffer, éditions Sully, 2008.
Driss Lamnauer, Kamal Batanouny, Capparis spinosa L., A Guide to Medicinal Plants in
North Africa, 2005, 71-74.
Eddouks M, Lemhadri A, Michel J-B (2005). Hypolipidemic activity of aqueous extract of
Capparis spinosa L. in normal and diabetic rats. Journal of Ethnopharmacology, 98, 345-350.
EU, 2001. Council Directive 2001/110 relating to honey. Official Journal of the European
Communities

Falleh, H., Ksouri, R., Chaieb, K., Karray-Bouraoui, N., Trabelsi, N., Boulaaba, M.,

05 juillet 2014 100


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Fallico, B., Arena, E., Verzera, A., Zappalà, M., 2006. The European Food Legislation and its
impact on honey sector. Accreditation and Quality Assurance 11, 49–54.

Favier, A.(2003). Le stress oxydant Intérêt conceptuel et expérimental dans la compréhension


des mécanismes des maladies et potentiel thérapeutique. L’actualité Chimique, p108-115.
FENICHEL P., HIERONIMUS S., GILLET J.Y., HARTER M.: Diabète et grossesse, In :
Encyclopédie Médico-Chirurgicale : Endocrino-Nutrition, Paris : Editions scientifiques et
médicales Elsevier Masson SAS, 1998, 10-366-G-10, 7p.
Ferguson, L.R.(2001).Role of plant polyphenols in genomic stability.Mutation Research, 475
: 89–111.
Fraga,C.G.,Galleano, M.,Verstraeten, S.V.,Oteiza, P.I.(2010).Basicbiochemical mechanisms
behind the health benefits of polyphenols.Molecular Aspects of Medicine, 31 435–445.
FRANKEL S., ROBINSON GE., BERANBAUM MR. Antioxydant activity and Ghisalberti
EL (1997) Propolis: A review. Bee World, 60, 59-84. Giurgea R, Toma V, Poprescu H,
Polinnicencu C (1981). Effects of standardized Propolis extract on certain blood constituents
in chickens. Clujul medical, 54, 151-4.

Frédéric BONTÉ et Alexis DESMOULIÈRE, Le miel : origine et composition Actualités


pharmaceutiques, n° 531, décembre 2013.
Fu XP, Wu T, Abdurahim M, Su Z, Hou XL, Aisa HA, Wu H (2008). New spermidine alkaloids
from Capparis spinosa roots. Phytochemistry Letters, 1, 59-62.
Gadgoli C, Mishra SH (1999). Antihepatotoxic activity of p-methoxy benzoic acid from
Capparis spinosa. Journal of Ethnopharmacology, 66, 187–192.
Ghosh, D., Scheepens, A. (2009).Vascular action of polyphenols. Molecular Nutrition & Food
Research,53 : 322 – 331.
Giuffrida D, Salvo F, Ziino M, Toscano G, Dugo G (2002). Initial investigation on some
chemical constituents of capers (Capparis spinosa L.) from the Island of Salina. Italian Journal
of Food Science, 14, 25-33.
Gomes, S., Dias, L.G., Moreira, L.L., Rodrigues, P., Estevinho, L., 2010. Physicochemical,
microbiological and antimicrobial properties of commercial honeys from Portugal. Food and
Chemical Toxicology 48, 544–548.

Gomez-Caravaca, A.M., Gomez-Romero, M., Arraez-Roman,D., Segura-Carretero,


A.,Fernandez-Gutierrez, A.(2006) Advances in the analysis of phenolic compounds in

05 juillet 2014 101


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

products derived from bees. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 41: 1220-
1234.
González-Gallego J., Sánchez-Campos S. et Tuñón M. J. 2007. Anti-inflammatory
propreties of dietary flavonoids. Nutriciın hospitalaria, 22 (3) : 287-293.
Hakim, I.A.,Alsaif, M.A., Alduwaihy, M. (2003).Tea consumption and the prevalence of
coronary heart disease in Saudi adults: results from a Saudi national study. Preventive
Medicine Journal, 36: 64–70.
Handa SS, Sharma A, Chakraborti KK (1986). Natural products and plants as liver protecting
drugs. Fitoterapia, 57, 307-349.
Hassan Fallah Huseini, Shirin Hasani-Rnjbar,,∗, Neda Nayebi, Ramin Heshmat, Farahnaz
Khaliqi Sigaroodi, Maryam Ahvazi, Behroz Abbasi Alaei , Saeed Kianbakhta , Capparis
spinosa L. (Caper) fruit extract in treatment of type 2 diabetic patients: A randomized double-
blind placebo-controlled clinical trial, Complementary Therapies in Medicine (2013) 21,
447—452.

Haton C., (2005).Effets des rayonnements ionisants sur la structure de la fonction de la cellule
épithéliale intestinale. Thèse de doctorat de l’université de Paris VI, France, pp : 43.
Hertog M. G. 1996. Epidemiological evidence on potential health propreties of flavonoids.
Proceeding of the nutrition society., 55 (1B) : 385-397.
Hodek, P.,Trefil, P.,Stiborova, M.(2002).Flavonoids-potent and versatile biologically active
compounds interacting with cytochromes P450.Chemico-Biological Interactions,139:1-21.
Hodgson, J. M.,Croft, K.D. (2010).Tea flavonoids and cardiovascular health.Molecular
Aspects of Medicine, 31: 495–502.
Hodgson, J. M.,Croft, K.D. (2010).Tea flavonoids and cardiovascular health.Molecular
Aspects of Medicine, 31: 495–502.
Iftikhar F., Arshad M., Rasheed F., Amraiz D., Anwar P. gulfraz M. (2010) Effects of acacia
honey on wound healing in various rat models Phytother. Res. 24(4):583-6.

Janick J, Paull RE. The encyclopedia of fruits and nuts. Edited by Janick J, Purdue University,
USA , and Paull RE., University of Hawaii at Manoa, USA; 2006. pp. 228-231.
Jennifer LECAQUE , Place du pharmacien d’officine dans les campagnes de dépistage du
diabète de type 2 et dans l’éducation thérapeutique du patient diabétique ; 2011.

05 juillet 2014 102


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Jiang H-E, Li X, Ferguson DK, Wang Y-F, Liu C-J, Li C-S (2007). The discovery of Capparis
spinosa L. (Capparidaceae) in the Yanghai Tombs (2800 years b.p.), NW China, and its
medicinal implications. Journal of Ethnopharmacology, 113, 409-420.
Kim H. P., Son K. H., Chang H. W. et Kang S. S. 2004. Anti-inflammatory plant flavonoids
and cellular action mecanisms. Journal of Pharmacological Sciences., 96 (3) : 229-245.
King GL. The role of inflammatory cytokines in diabetes and its complications. J Periodontol.
2008;79:1527-34.
Koechlin-Ramonatxo,C. (2006).Oxygène, stress oxydant et supplémentations antioxydantes
ou un aspect différent de la nutrition dans les maladies respiratoires Nutritionclinique et
métabolisme,20 : 165–177.
Kolb H, Oschilewski M, Schwab E, Greulich B, Roos P, Kiesel U. Suppression of low-dose
streptozotocin-induced diabetes by immunomodulatory lectins. Diabetes Research
1986;3(4):183—6.

L’Année Agricole Septembre 2013, Ministère de l’Agriculture et de la Pêche Maritime, Note


stratégique n°94.
La Coopérative ALMADANIA pour la Production Agricole Ksar Laachouria, Jorf,
Province Errachidia http://www.oasisalmadania.com/activites.php?filiere=b
La Coopérative ALMADANIA pour la Production Agricole Ksar Laachouria

Lahouel, M., Boulkour, S., Segueni, N., Fillastre, J.P.(2004).Effet protecteur des flavonoïdes
contre la toxicité de la vinblastine,du cyclophosphamide et du paracétamol par inhibition de la
peroxydation lipidique et augmentation du glutathion hépatique. Pathologie Biologie, 52 : 314–
322.
Lam SK, Han QF. Isolation and characterization of a lectin with potentially exploitable
activities from caper (Capparis spinosa) seeds. Bioscience Reports 2009;29(5):293—9.

Lee-Huang, S., Zhang, L., Huang, PL., Chang, YT., Huang, PL.(2003).Anti-HIV activity
of olive leaf extract(OLE) and modulation of host cell gene expressionby HIV-1 infection and
OLE treatment. Biochemistry and Biophyspc Research Commun, 307: 1029-1037.
Lemhadri A, Eddouks M, Sulpice T, Burcelin R (2007). Anti-hyperglycaemic and Anti obesity
Effects of Capparis spinosa and Chamaemelum nobile Aqueous Extracts in HFD Mice.
American Journal of Pharmacology and Toxicology, 2, 106-110.
LEROY J. : Diabète sucré, In : Encyclopédie vétérinaire, Paris, Editions scientifiques et
médicales Elsevier SAS, 1999, Endocrinologie : 0900.

05 juillet 2014 103


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Lhuillier, A.(2007).Contribution à l’étude phytochimique de quatre plantes malgaches Agauria


salicifolia Hook.f ex Oliver,Agauria polyphyllaBaker (Ericaceae), Tambourissatrichophylla
Baker ( Monimiaceae) et Embelia concinna Baker(Myrsinaceae).Thèse de doctorat.
Ligue marocaine de la lutte contre le diabète/ http://www.lmlcd.com
M. Eddouks , A. Lemhadri , J.-B. Michel, Hypolipidemic activity of aqueous extract of
Capparis Spinosa L. in normal and diabetic rats, Journal of Ethnopharmacology 98 (2005)
345–350.

Macheix J J., Fleuriet A. et Jay–Allemand C. 2005. Les composés phénoliques des végétaux
: un exemple de métabolites secondaires d'importance économique. Ed Presses
polytechnologiques et universitaires romandes. p4-5.
Malešev D. et Kuntić V. 2007. Investigation of metal-flavonoid chelates and the determination
of flavonoids via metal-flavonoid complexing reactions. Journal of the serbian chemical
society., 72 (10) : 921-939.
Manach, C., Mazur, A., Scalbert, A. (2005). Polyphenols and prevention of cardiovascular
diseases. Current Opinion in Lipidology, 16 : 1–8.
Martin, S., Andriantsitohaina, R.(2002).Mécanismes de la protection cardiaque et vasculaire
des polyphénols au niveau de l’endothélium. Annales de cardiologie et d’angéiologie.
Martin, S., Andriantsitohaina, R.(2002).Mécanismes de la protection cardiaque et vasculaire
des polyphénols au niveau de l’endothélium. Annales de cardiologie et d’angéiologie,
MAUGENDRE D., YAOUANQ J., GUILHEM I., CAMPION L., LORCY Y., LEGUERRIER
A.M., ALLANNIC H. : Etiologie et physiopathologie des diabètes secondaires, In :
Encyclopédie Médico-Chirugicale : Endocrinologie-Nutrition, Paris : Editions scientifiques et
médicales Elsevier Masson SAS, 2007, 10-366-D-20, 6 p.
Meda, A., Lamizn, C.E.,Romito, M., Milligo, J., Nacoulma, O.G 2005. Determination of the
total phenolic , flavinoid and proline contents in Burkina Fsan Honey, as well as their radical
scavening activity, Food Chemistry 91 , 571-577.

Milan Nagy, History Of Phytotherapy And Pharmacognosy, 2012.


Milane, H. (2004).La quercétine et ses dérivés: molécules à caractère prooxydant oucapteurs
de radicaux libres ;études et applications thérapeutiques. Thèse de Doctorat.Strasbourg.
Ministère de l’agriculture et de la pèche maritime, Réalisation d’une étude sur l’identification
et le développement des produits de terroir dans la région de Fès-Boulemane ,2010.

05 juillet 2014 104


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Monnier L, Thuan JF. Diabète sucré de type 1 de l’enfant et de l’adulte. Diabète sucré de type
2 de l’adulte. Complications du diabète. Rev Prat. 2007;57:653-64.
Mulvihill, E. E.,Huff, M.W.(2010).Antiatherogenic properties of flavonoids: Implications for
cardiovascular health. Canadian Journal of Cardiology, 26 : 17-21.
Nizar Tlili ,Walid Elfalleh , Ezzeddine Saadaoui , Abdelhamid Khaldi , Saida Triki , Nizar
Nasri , The caper (Capparis L.): Ethnopharmacology, phytochemical and pharmacological
properties, Fitoterapia 82 (2011) 93–101.
OLLIER C. Conseil en phytothérapie, Pro-officina, éditions Groupe liaisons SA, Rueil
Malmaison, 2000.
Ouchemoukh, S., Louaileche, H., Schweizer, P., 2007. Physicochemical characteristics and
pollen spectrum of some Algerian honey. Food Control 18, 52–58.

Özcan M, Aydın C (2004). Physico-mechanical Properties and Chemical Analysis of Raw and
Brined Caperberries. Biosystems Engineering, 89, 521–524.
Panicoa AM ,Cardile TV, Garufi F, Puglia C, Bonina F, Ronsisvalle G (2005). Protective effect
of Capparis spinosa on chondrocytes. Life sciences, 77, 2479-2488.
Perez-Vizcaino, F., Duarte, J. (2010).Flavonols and cardiovascular disease.Molecular
Aspects of Medicine, 31: 478–494.
Peters, U, Poole, C, Arab, L. (2001). Does tea affect cardiovascular disease? A metaanalysis.
American Journal of Epidemiology, 154 : 495–503.
Potapovich, A. I.,Lulli, D.,Fidanza, P.,Kostyuk, V. A.,De Luca, C.,Pastore, S., Korkina,
L.G.(2011). Plant polyphenols differentially modulate inflammatory responses of human
keratinocytes by interfering with activation of transcription factors NFκB and AhR and EGFR–
ERK pathway.Toxicology and Applied Pharmacology,255 : 138–149.
Pugnaire FI, Esteban E. Nutritional adaptations of caper shrub (Capparis ovata Desf) to
environmental stress. J Plant Nutr 1991;12:151–61.
Rajesh PP, Selvamani S, Latha A, Saraswathy V, KannanR. A review on chemical and
medicobiological applications of Capparidaceae family. Pharmacognosy Reviews 2009;3:
378—87.

Ramezani Z, Aghel N, Keyghobadi H. Rutin from different parts of Capparis spinosa


growing wild in Khuzestan/Iran. Pakistan Journal of Biological Sciences 2008;11(5):768—
72.

05 juillet 2014 105


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Rapport d’un groupe d’étude de l’OMS : La prévention du diabète sucré, Genève, Organisation
Mondiale de la Santé, 1994. OMS, série de rapport technique N°844.
RIGALLEAU V., BEYLOT M., NORMAND S., PACHIAUDI C., LAVILLE M.,
PETITBOIS C., DELERIS G., BAILLET L., GIN H. : Mechanism of increased plasma glucose
levels after oral glucose ingestion in normal-weight middle-aged subjects, Ann. Nutr. Metab.,
2003, 47, 186-193.
Roberts, CK. ,Sindhu, K.K.(2009).Oxidative stress and metabolic syndrome. Life Sciences,
84 : 705–712.
Saadaoui E, Khaldi A, Khouja ML, El-Gazzah M. Etude de la variabilité morphologique du
câprier (Capparis spp.) en Tunisie. Revue des régions arides, 2; 2007. p. 523–7.
Sabah Boumerfeg, Djamila Ameni, Moufida Adjadj, Meriem Djarmouni, Seddik Khennouf3,
Lekhmici Arrar and Abderrahmane Baghiani, Antihymolytic and Antioxidant Effects of
Medicinal Plant, Capparis Spinosa L. Journal of Life Sciences 6 (2012) 637-643.

Saleh, N.K., Saleh, H.A.(2011).Olive Oil effectively mitigatesOvariectomy induced


Osteoporosis In Rats. BMC Complementary and Alternative Medicine, p 11-10.
Satyanarayana T, Mathews AA, Vijetha P (2008). phytochemical and pharmacological
Review of Some Indian Capparis Species. Pharmacognosy Reviews, 2, 36-45.
Sayed SM. et al. (2009) Immune defense of rats immunized with fennel honey, propolis and
bee venom against induced staphylococcal infection J. Med. Food. 12(3):569-575.

Scalbert, A.,Williamson,G. (2000).Dietary intake and bioavailability of polyphenols. Journal


of Nutrition, 130 : 2073-2085.
Shimizu, H.(2004).Relationship between plasma glutathione levels and cardiovascular disease
in a defined population :the Hisayama study, Stroke,35 (9) : 2072-2077.
Stalikas, C. D. (2007). Extraction, separation, and detection methods for phenolic acids and
flavonoids Review. J. Sep. Sci. 30, 3268 – 3295
Stanley MPP, Kamalakkannan N. Rutin improves glucose homeostasis in streptozotocin
diabetic tissues by altering glycolytic and gluconeogenic enzymes. Journal of Biochemical
and Molecular Toxicology 2006;20(2):96—102.

Stocker A., Schramel P., kettrup A., Bengsch E. (2005) Trace and minerals elements in royal
jelly and homeostatic effects J. Trace Elem. Med. Biol. 19(2-3):183-189.
Tapas A. R., Sakarkar D. M. et Kakde R. B. 2008. Flavonoids as nutraceuticals. Topical
journal of pharmaceutical research., 7 (3) : 1089-1099.

05 juillet 2014 106


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Terrab, A., Diez, M.J., Heredia, F.J., 2002. Characterization of Moroccan unifloral honeys by
their physicochemical characteristics. Food Chemistry 79, 373–379.

Tesoriere L, Butera D, Gentile C, Livrea MA (2007). Bioactive components of caper (Capparis


spinosa L.) from Sicily and Antioxidant Effects in a Red Meat Simulated Gastric Digestion.
Journal of Agricultural and Food Chemistry , 55, 8465–8471.
Tesoriere L, Butera D, Gentile C, Livrea MA (2007). Bioactive components of caper (Capparis
spinosa L.) from Sicily and Antioxidant Effects in a Red Meat Simulated Gastric Digestion.
Journal of Agricultural and Food Chemistry , 55, 8465–8471.
Tesoriere L, Butera D, Gentile C, Livrea MA (2007). Bioactive components of caper (Capparis
spinosa L.) from Sicily and Antioxidant Effects in a Red Meat Simulated Gastric Digestion.
Journal of Agricultural and Food Chemistry , 55, 8465–8471.
Tlili N, Khaldi A, Triki S, Munné-Bosch S. Phenolic compounds and vitamin antioxidants of
caper (Capparis spinosa). Plant Foods for Human Nutrition 2010;65(3):260—5.

TOMCZAK C. (2010) Utilisation du miel dans le traitement des plaies. Revue


bibliographique. Thèse de doctorat vétérinaire, Université Claude Bernard, Lyon.
Triggiani V, Resta F, Guastamacchia E, Sabbà C, Licchelli B, Ghiyasaldin S, et al. Role of
antioxidants, essential fatty acids,carnitine, vitamins, phytochemicals and trace elements in
the treatment of diabetes mellitus and its chronic complications. Endocrine, Metabolic &
Immune Disorders — Drug Targets 2006;6(1):77—93.

Trombetta D, Occhiuto F, Perri D, Puglia C, Santagati NA, Pasquale AD, Saija A, Bonina F
(2005). Antiallergic and antihistaminic effect of two extracts of Capparis spinosa L. flowering
buds. Phytotherapy Research, 19, 29–33.
Use of Glycated Haemoglobin (HbA1c) in the Diagnosis of Diabetes Mellitus: a systematic
review. Report of a WHO Consultation, 2011; 25p.
Van den Berg AJ. , Van den Worm E., Van Ufford HC., Halkes SB., Hoekstra MJ.,
Beukelman CJ. (2008) An in vitro examination of the antioxidant and anti-inflammatory
properties of buckwheat honey J. Wound Care. 17(4):172-174.

Whadan HAL. (1998) Causes of antimicrobial activity of honey Infection 26(1):26-31.

Xiuzhen, H.,Tao, S.,Hongxiang, L.(2007).Dietary Polyphenols and Their Biological


Significance. International Journal of Molecular Sciences, 8 : 950-988.

05 juillet 2014 107


Master SANBIOL
Maser SANBIOL Laboratoire PPSE

Yang YU, Gao H, Tang Z, Song X, Lijun WU. Several phenolic acids from the fruit of
Capparis spinosa. Asian Journal of Traditional Medicines 2006;1:3—4.

Zeina B., Othman O., al-Assad S. (1996) Effect of honey versus thyme on Rubella virus
survival in vitro J. Altern. Complement Med. 2(3):345-348.

Zhou, H-Y.,Hong, J-L.,Shu, P.,Juan Ni, Y.,Qin, M. J.(2009). A new dicoumarin and
anticoagulant activity from Viola yedoensis Makino. Fitoterapia, 80 : 283–285.
Zohary M. The species of Capparis in the Mediterranean and the near Eastern countries. Bull
Res Counc Isr 1960;8:49–64.

05 juillet 2014 108

Vous aimerez peut-être aussi