LES TECHNOLOGIES DE LABORATOIRE - 2015, Volume 9, N°37

Article original

Reponses biochimique et physiologique de la Luzerne arborescente (Medicago

arborea) au stress salin
Biochemical and physiological response of the Tree Medic (Medicago arborea) to salt
stress
DADACH Mohamed1, BOUKHARI Sofiene1, MEHDADI Zoheir1, BENDIMRED Fatima Zohra1,
LATRECH Ali1, BOUKER Amar1.
1
Laboratoire de biodiversité végétale : valorisation et conservation, Faculté des
Sciences de la nature et de la vie, Université Djillali Liabès, Sidi Bel Abbès, 22000, Algérie

Email de correspondant : dadach_mohamed@yahoo.fr

Résumé : La présente étude montre l’effet du stress salin sur
quelques paramètres biochimiques et physiologique des
plantules de (Medicago arborea L.). Le matériel végétal
utilisé correspond à des plants de la luzerne arborescente âgés
de 75 jours obtenus à partir de la germination des graines
provenant de la station expérimentale de l’Institut National de
la Recherche Forestière de Djelfa (INRF) et qui ont été
irriguées alternativement avec la solution nutritive de
Hoagland et de l’eau distillé a raison de deux par semaine
durant 75 jours. Les plants utilisés sont arrosées par des
solutions salines de différentes concentrations (50, 100, 150 et
200 meq/L), préparées à base de chlorure de sodium et de
dichlorure de calcium NaCl+ CaCl2. En parallèle, un lot
témoin correspondant à des plants arrosés par de l’eau distillé.
Les résultats obtenus montrent que l’application de ces
traitements salins cause un stress aux plantules de Medicago
arborea L. qui s’exprime par l’accumulation de la proline
dans les feuilles qui croît significativement avec la
concentration du milieu en sels. La valeur minimale de l’ordre
de 13.14 µg/100mg de matériel végétal sec (MVS) est notée
chez les plantules témoin, arrosées par l’eau distillée. Une
teneur maximale de cet acide aminé est observée à 200 meq/L
avec un taux de 260.4 µg/100mg de (MVS).
Ce stress s’exprime aussi par la synthèse des sucres solubles
qui s’accumulent beaucoup plus dans les racines et les feuilles
des plantes traitées notamment par 200 meq/L avec des
valeurs moyennes respectivement de 17.53 mg/g de matériel
végétal frais (MVF) dans la partie souterraine et de 30.31
mg/g de (MVF) dans la partie foliaire. Il est à noter que les
feuilles accumulent beaucoup plus de sucres solubles que les
racines.
En revanche, chez les plantules expérimentées y compris le
témoin, aucune différence significative n’est observée pour la
teneur relative en eau (TRE) mesurée au niveau foliaire, ce
qui s’explique par l’adaptation osmotique de notre espèce à la
salinité et le rôle attribué aux osmo-régulateurs (proline et
sucres solubles) dans le maintien de la turgescence des
feuilles.
Mots-clés : Medicago arborea L. ; stress salin ; proline ;
sucres solubles ; teneur relative en eau.
Abstract: This study shows the effect of salt stress on some
biochemical and physiological parameters of (Medicago
arborea L.) seedlings. The vegetal material used is the plants
of tree Medic older to 75 days obtained from the germination
of seeds bring from the experimental station of the National
Institute of Forestry Research Djelfa (INRF) and were
irrigated alternately with Hoagland nutrient solution and
distilled water twice per week for 75 days. The plants used
are watered by salt solutions of different concentrations
(50,100, 150 and 200meq / L), prepared with NaCl + CaCl2.
In parallel, a control group corresponding to plants watered
by distilled water.
The results obtained show that the application of these salt
treatments causes stress to seedlings of M. arborea L.
expressed by the accumulation of proline in the leaves witch
increases significantly with the concentration of salts. The
minimum value it’s of 13.14 μg/100mg of dry plant material
(DPM) is observed in the control seedlings irrigated with
distilled water. A maximum purport of this amino acid is
observed at 200 meq / L with a rate of 260.4 μg/100mg
(DPM).
This stress is also expressed by the synthesis of soluble sugars
that accumulate more in roots and leaves treated by 200 meq
/ L, with mean values respectively of 17.53 mg / g of fresh
plant material (FPM) in the underground part and 30.31 mg /
g (FPM) in the leaf part. It should be noted that the leaves
accumulate much soluble sugars than roots.
On the other hand, no significant difference was observed for
the relative water content (RWC) measured at leaf of
seedlings, which is explained by the osmotic adaptation of our
species to salinity and the role attributed to the osmo-
regulators (soluble sugars and proline) in the maintenance of
turgor sheets.
Keywords: Medicago arborea L., salt stress, proline, soluble
sugars, relative water content.

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I. Introduction
La salinité est un facteur commun dans le stress
environnemental affectant sérieusement la
production végétale dans différentes régions, en
particulier dans des régions arides et semi-arides.
On l'estime que plus de 800 millions de hectares
de terre dans le monde sont affectés par la
salinité et la sodicité [45]. Les données actuelles
se résument dans le bassin méditerranéen à 16
millions d'hectares des sols salés, L’Algérie,
dont une grande partie des régions agricoles se
caractérise par un climat aride et semi aride, est
touchée par le processus de salinisation des sols,
Actuellement, près de 3,2 millions d’hectares
affectés [28]. Parmi les actions à entreprendre en
vue de valoriser et de développer ces régions, les
plantations à base d’espèces végétales adaptées,
capables de résister à la sécheresse et de tolérer
les sels constituent une priorité [15].
Dans ces sols, certaines espèces sont menacées
de disparaître [19], d’autres manifestent des
mécanismes d’adaptation [10] exprimés par des
modifications du métabolisme cellulaire [29]. En
effet, dans les milieux salés, les plantes ajustent
osmotiquement [26] leur contenu cellulaire en
synthétisant des acides aminés comme la proline
[7], et les sucre dans les racines, la tige et les
feuilles [49].
L’osmorégulation permet une protection des
membranes et des systèmes enzymatiques
surtout dans les organes jeunes et la proline
semble jouer un rôle dans le maintien des
pressions cytosolvacuole et de régulation du pH
[52].
L’accumulation de la proline est une des
stratégies adaptatives déclenchées par la plante
face aux contraintes de l’environnement [11].
Chez les halophytes, la proline est un marqueur
intéressant pour évaluer leur résistance au stress
salin [31]. Ces plantes possèdent en effet des
capacités pour maintenir un potentiel hydrique
interne bas sous la contrainte saline du milieu
[56] créant une pression de turgescence
II. Matériel et Méthodes
Matériel Végétal
9
suffisante 60] pour leur croissance sans affecter
leur métabolisme [57].
Pour les sucres solubles, L'augmentation de leurs
concentration sous stress salin a été rapporté
dans beaucoup d'études [65] [46]. Leur rôle en
termes de l'ajustement osmotique est, cependant,
toujours en débat. Dans beaucoup d'espèces, les
concentrations absolues de cette osmolyte sont
indifférentes dans l'ajustement osmotique [42].
Les sucres solubles sont également accumuler
dans les tissus et les cellules de la plante, en cas
du stress et qu’ils peuvent agir en tant que
facteur osmotique de conservation [38].
Des modifications des caractéristiques
hydriques, potentiel hydrique foliaire et teneur
relative en eau (TRE) d’une plante rendent
compte de statut hydrique et aussi de sa capacité
à incorporer l’eau particulièrement en situation
de stress [17].
M. arborea L. est une ligneuse vivace
importante, légumineuse qui peut atteindre entre
2-4 m de haut dans des conditions favorables.
Cet arbuste provient des îles Canaries le long de
l'Europe du Sud à l'Asie Mineure [66]. Elle
tolère la sécheresse, le froid et elle peut réduire
l'érosion des sols [5]. Cette vivace produit du
fourrage de bonne qualité et de grande quantité
pendant l'hiver dont son l'activité biologique est
élevée [8] [59]. Par ailleurs, la bonne qualité du
fourrage de l'espèce a été reconnue par les
anciens Grecs et Romains [40].
Dans le cadre de cette approche et afin
d’explorer l’effet de la salinité sur le
comportement physiologique (la teneur relative
en eau) et biochimique (teneur en proline et en
sucre soluble) de la plante, nous nous sommes
intéressées à cette arbuste, qui a un intérêt
stratégique, comme source d’aliment pour les
troupeaux, dans les zones aride et semi aride [54]
[3] et comme étant un objet d’une utilisation
importante au niveau de certaines régions ; de
mise en valeur et de restauration des parcours
steppiques [20].
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Les plants utilisés sont obtenus à partir de la
germination des graines provenant de la station
expérimentale INRF (Institut National de la
Recherche Forestière) de Djelfa.
Dispositif Expérimental
Les graines utilisées pour la germination ont été
préalablement désinfectées à l’eau de javel (5 %)
pendant 5 mn puis bien rincées à l’eau distillée.
Elles sont ensuite déposées sur deux couches de
papier filtre humide, dans deux boites de pétri
en verre de 19 cm de diamètre. Les graines sont
disposées dans une étuve à une température
optimale de 25 °C [18] et à l’obscurité. Le
papier filtre a été imbibé la première fois par 15
ml d’eau distillée, puis des quantités journalières
d’environ 5 ml pour maintenir l’humidité ont été
apportées pour permettre aux graines de germer.
Après quatre jours de germination, les plantules
formées portent deux feuilles cotylédonaires. Ces
plantules sont repiquées dans des pots rempoté
de 9 cm de diamètre et 8 cm de hauteur, à raison
de deux plantules par pot et remplis d’une mince
couche de gravier et du sable mélangé à du
terreau. Le gravier permet le drainage de l’eau.
Le sable et le terreau sont à des proportions
respectives 2 volumes / 1 volume [12].trois cents
soixante grammes de substrat par pot sont
retenus, Ceci permet de calculer la quantité de la
solution nutritive à apporter lors des arrosages.
Une irrigation à raison de deux fois par semaine
est opérée à la solution nutritive de Hoagland et
Arnon (1938) diluée à 1/1000 et à l’eau distillée,
apportée à 30% de la CR (capacité de rétention)
du substrat. A défaut d’une serre, la culture s’est
effectuée dans les conditions ambiantes du
laboratoire de biodiversité végétale :
conservation et valorisation, de la faculté des
sciences de la nature et de la vie de l’université
de Sidi Bel Abbès (photopériode entre 8 et 10
heures ; température diurne 16 et 25 °C).
Application du Stress
Les plants cultivés sont répartis en cinq lots à
raison de 20 plants par lot réparti en 5
traitements. Un lot considérait comme témoin
recevant de l’eau distillée. Les quatre lots restant
10
sont traités par des solutions salines à base de
chlorure de sodium et de dichlorure de calcium
NaCl et de CaCl2 présentant différentes
concentrations (50, 100, 150, 200 meq/ L).
Un premier stress salin est appliqué sur des
plants âgés d’environ 75 jours, un second stress
est appliqué trois jours après le premier stress.
Le matériel végétal (feuilles et racines) destiné
aux analyses biochimiques (dosage de la proline
et des sucres solubles) et physiologique (TRE)
est prélevé 4 jours après l’application du 2ème
stress.
Extraction et dosage de la proline
L’extraction de la proline s’est faite à l’éthanol
selon la méthode de l’AOAC (Association of
Official Analytical Chemists, 1955) modifiée par
Nguyen et Paquin (1971) utilisant
successivement de l’éthanol 95%, de l’éthanol
70% et du chloroforme à froid. 100 mg de
matériel végétal sec sont broyés dans 1.25 ml
d’éthanol 95 %, suivi de trois rinçages et lavages
avec 1.25 ml d’éthanol 70 % chaque fois. Des
surnageant combinés, environ 5 ml, sont prélevés
2.5 ml auxquels sont ajoutés 1 ml de
chloroforme et 1.5 ml d’eau distillée. Le
mélange ainsi obtenu est soumis à une agitation
rapide (10 secondes environ) au Vortex puis
gardé toute une nuit au froid à 0 °C.
La proline est dosée selon la méthode
colorimétrique de Bergman & Loxley (1970)
utilisant les solutions respectives de NaCl 5M, de
tampon phosphate et de ninhydrine. La densité
optique est lue, sur un spectrophotomètre à
absorption moléculaire, à une longueur d’onde
de 505 nm. Les résultats sont exprimés en
μg.100 mg-1 de matière végétale en référence à
une courbe-étalon obtenue à partir de solutions
pures de proline à concentrations croissantes
préparées dans les mêmes conditions que les
solutions à doser.
Extraction et dosage des sucres solubles
La méthode au phénol de Dubois et al. (1956) est
utilisée pour l’extraction et le dosage des sucres
solubles l’extraction consiste à faire une prise
de 100 mg de matière végétale fraiche est placée
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dans des tubes à essai à laquelle sont ajoutés 3
ml d’éthanol à 80%. L’échantillon est laissé à
une température ambiante pendant 48 h Au
moment du dosage, les tubes sont placés dans
une étuve à 80 °C pour faire évaporer l’alcool.
Dans chaque tube sont ajoutés 20 ml d’eau
distillée, c’est la solution à analyser. 1 ml de la
solution à doser est mis dans des tubes à essai
propres, dans chacun d’eux est ajouté 1 ml de
solution de phénol à 5 %. Les tubes sont
soigneusement agités puis auxquels nous y avons
additionné 5 ml d’acide sulfurique concentré, la
température du mélange atteint environ 110 °C.
Après une agitation rapide au Vortex, les tubes
sont maintenus pendant 45 mn à 5 °C. Après un
séjour de 30 mn à l’obscurité les lectures de
l’absorbance sont effectuées à une longueur
d’onde de 485 nm.
Les résultats des concentrations en sucres
solubles sont déduits à partir d’une courbe-étalon
de solutions de glucose à différentes
concentrations préparées dans les mêmes
conditions que les échantillons et exprimés en
μg.100 mg-1 de matière végétale.
Evaluation de la teneur relative en eau (TRE)
Le limbe de la feuille est sectionné à sa base et
immédiatement pesé, ce qui représente le poids
frais initial (Pt). La partie sectionnée est trempée
Résultats et discussion
Résultats
Les teneurs moyennes en proline évaluées dans
les feuilles des plantes de Medicago arborea L.
exposées aux différents traitements salins, sont
450
Teneur moyenne en proline
400
350
(µg/100mg de MVS)
300
250
200
150
100
50
0
Témoin
Figure 1 : Teneur moyenne en proline des feuilles de M. arborea L. soumis au stress salin.
dans un tube à essai contenant de l’eau distillée.
L’ensemble est maintenu à l’obscurité et à une
température de 4°C pendant 24 heures. Les
limbes sont récupérés et délicatement essuyés en
surface avec du papier Joseph et pesés à
nouveau, ce qui donne le poids en pleine
turgescence (Ppt). Le poids sec (PS) de la
matière végétale séchée de chaque limbe est
obtenu par passage à l’étuve à une température
de 80°C pendant 48 heures. La teneur relative en
eau est calculée par la formule proposée par
Weatherley et Barrs (1962) :
TRE (%) = x 100
Traitements statistiques
Les teneurs en proline, sucres solubles et les taux
relatifs en eau correspondent à des valeurs
moyennes obtenues sur cinq répétitions.
Les comparaisons entre les teneurs moyennes de
ces paramètres biochimiques et physiologiques
mesurés sur les plantules ayant subi les
traitements employés sont effectuées par
l’analyse de la variance à un seul facteur
(ANOVA I) en utilisant le logiciel Excel 2007 et
par le test de Tukey (comparaison des moyennes
deux à deux) en utilisant le logiciel XLSTAT
2012.
présentées dans le tableau 1 et illustrées par la
figure 1
50 100 150 200
Concentration saline meq/L
11
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L’accumulation de la proline est observée dans Cette variabilité dans l’accumulation de la

tous les traitements salins (tab. 1 ; fig. 1). Sa proline dans les feuilles des plants soumis aux
quantité dans les feuilles est en fonction de la différents traitements salins a été confirmée par
concentration saline, c'est-à-dire plus la salinité l’analyse de la variance (P < 0.05) c'est-à-dire
dans le milieu de culture augmente plus il y a que la différence est significative.
une grande accumulation de proline. Pour les
plants témoin, la teneur en proline est la plus Le test de Tukey a fait ressortir des différences
faible (13.14 µg/100 mg) par rapport aux plants significatives entre les teneurs moyennes en
soumis aux différents traitements salins. Cette proline synthétisées chez les plants témoin et les
quantité vas presque tripler pour le traitement de plants soumis aux traitements salin de 150 et 200
50 meq/L (35.42 µg/100 mg) ; l’accumulation la meq/L d’une part et, entre les plants traitées par
plus importante de cet acide aminé est constaté 50 meq/L et 200 meq/L d’autre part.
pour le traitement de 200meq/L, elle est de 260.4
µg/100mg.

Tableau 1 : Teneurs moyennes en proline (µg/100mg de MVS) accumulée dans les feuilles de M.
arborea L.

Concentrations
salines Témoin 50 100 150 200
(meq/L)

Teneurs en 13.14 ± 9.32 35.42 ± 167.04 ± 188.74 ± 260.4 ±

proline 27.46 82.44 100.84 150.52

Les résultats représentés par le tab. 2 et illustrés moyennes en sucres solubles totaux déterminés
sur la fig. 2, correspondent aux concentrations dans les racines et les feuilles de M. arborea L.
45,00
40,00
Teneur en sucre soluble (mg/g de MVF)

35,00
30,00
25,00
20,00
Racines
15,00
10,00 Feuilles
5,00
0,00
Témoin 50 100 150 200

Concentrations salines meq/L

Figure 2 : Teneur moyennes en sucres solubles totaux des racines et des feuilles des plantes du M.
arborea L.soumises au stress salin.

12
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La teneur moyenne en sucres devient plus
importante au fur et à mesure que la
concentration saline augmente dans le milieu de
culture et dans les racines et dans les feuilles. En
effet, nous constatons que dans les racines, la
teneur moyenne en sucres solubles est de
1.71mg/g chez les plants témoin, cette teneur
augmente progressivement chez les plants traités
par 50 et 100 meq/L avec des valeurs respectives
de 2.71 et 6.30 mg/g, puis atteint des valeurs
maximales de 16.44 et 17.53 mg/g chez les
plants traités par des solutions salines
respectivement de 150 et 200 meq/L.
Les sucres solubles évoluent de la même manière
dans les feuilles. La teneur la plus faible est
notée chez le témoin 4.98 mg/g , celle-ci
commence à devenir progressivement importante
à partir de 50meq/L pour atteindre une teneur de
8.01mg/g. Pour la concentration saline de
100meq/L, la teneur en sucres est de 14.26mg/g
qui devient encore plus importante pour les
traitements salins de 150 et 200meq/L avec des
valeurs respectives de 28.60 et 30.31mg/g (tab.
7). Cette variabilité dans l’accumulation des
sucres soluble dans les racines et les feuilles des
plants soumis aux différents traitements salins a
été confirmée par l’analyse de la variance (P <
0.05) c'est-à-dire que la différence est
significative pour les deux organes.
Tableau 2 : Teneurs moyennes en sucres solubles (mg/g de MVF) accumulées dans les racines et les
feuilles de M. arborea L.
Concentration Témoin 50
meq/L
Racines 1.71± 0.41 2.71± 0.99 6.30± 2.74
Feuilles 4.98± 2.23 8.01± 5.39 14.26± 5.82
Pour apprécier l’état hydrique des plantes
expérimentées sous stress salin, nous avons suivi
les variations de la teneur relative en eau des
13
- Le test de Tukey a fait ressortir des différences
significatives entre les teneurs moyennes en
sucres solubles des racines chez les plants
témoin et les plants soumis aux traitements salins
de 150 et 200 meq/L, entre les plants traitées par
50 meq/L et celles soumis aux traitements salins
de 150 meq/L et 200 meq/L, cette différence est
aussi significative entre les traitements 100
meq/L et le 200 meq/L.
- Et pour les feuilles la différence est
significative entre les traitements suivants :
 le témoin avec les concentrations salines
(150 et 200) meq/L
 le traitement salin de 50 meq/L avec celle
de (150 et 200) meq/L
 le traitement salin de 100 meq/L avec celle
de (150 et 200) meq/L.
- Alors que pour le traitement deux à deux
(racines – feuilles) a démontré que la différence
est significative entre les concentrations de (150
et 200) meq/L.
Par ailleurs, nos résultats montrent que les
teneurs des sucres solubles sont plus importants
dans les feuilles que dans les racines.
100 150 200
16.44± 3.01 17.53± 6.04
28.60± 9.64 30.31± 5.68
feuilles du même ordre, récoltées de la plante
après 10 semaines de croissance et une semaine
de stress.
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100

moyenne en eau (%)

80
Teneur relative

60

40

20

0
T 50 100 150 200
concentration saline meq/L

Figure 3 : Teneur relative moyenne en eau (%) des feuilles de M. arborea L. soumis à différents
traitements salins.
La figure 3 montre une légère fluctuation dans la TRE est notée chez les plantes traitées par
teneur relative en eau (TRE) chez les plantes 150meq/L et de 200meq/L (tab. 3).
soumises aux différents traitements salins. Cette -Le test de Tukey a fait ressortir des différences
fluctuation n’a pas été confirmée par le test de non significatives entre toutes les valeurs de
l’analyse de la variance (P > 0.05). Par rapport TRE des feuilles chez les plants stressé.
aux plants témoin, la TRE a diminué d’environ
3% pour les plantes stressées à 50meq/L et de
11.5 % pour les plantes ayant subit un stress de
100meq/L. Par contre, une recrudescence de la

Tableau 3 : Teneur moyenne relative en eau (%) dans les les feuilles des plantes de Medicago
arborea L.

Concentration Témoin 50 100 150 200

meq/L
TRE (%) 88 ± 3,32 85,14 ± 7,28 76,58 ± 8,44 81,06 ± 7,82 80,48 ±5,51

Discussion
Les métabolites de stress, la proline et les sucres
solubles, sont accumulés naturellement dans les
feuilles d’un certain nombre d’espèces [63]. À
l’échelle cellulaire, leur accumulation dans le
cytosol est accompagnée d’une baisse de la
concentration de solutés moins compatibles (les
sels) et d’une augmentation du volume d’eau du
cytosol assurant le maintien de l’équilibre
osmotique [55]. La proline fonctionnerait
comme stabilisateur des membranes par
interaction avec les phospholipides car, si la
14
concentration en sels excède le niveau de
tolérance de la plante, des perturbations
fonctionnelles apparaissent au niveau de la
photosynthèse, par effet du sel dans le stroma
des chloroplastes qui perturbe le transport des
électrons; la glycolyse et le cycle de Krebs sont
eux aussi affectés [27].
Les résultats auxquels nous avons aboutis
montrent que la quantité de proline accumulée
dans les feuilles de M - arborea L. est
proportionnelle à la teneur en sel présente dans le
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milieu de culture. En effet, de nombreux travaux
rapportent que la proline s’accumule dans la
plante lorsque cette dernière se trouve en
conditions défavorables [62] [44], ce qui traduit
le caractère de la résistance aux stress [9].
L’arrêt de stress permet un retour progressif aux
teneurs initiales [64].
Cette variation dans l’accumulation de la proline
observée sur M. arborea L., confirmée par
l’analyse de la variance et le test de tuckey, serait
due à une compartimentation de cet acide aminé,
d’où l’expression de sites de résistance de la
plante à la contrainte saline [11].
L’accumulation de la proline dans les feuilles
peut résulter de la forte accumulation des sels
dans ces dernières. Ould El Hadj-Khelil (2001)
rapporte que les feuilles basales les plus âgées
participent à la séquestration du Na+ en excès,
ceci s’opère au bénéfice des feuilles jeunes en
croissance, qui semblent alors se trouver
protégées du Na+ en excès. Huber, (1974), a
montré que le sel inhibe le catabolisme de l’acide
aminé au niveau de la proline déshydrogénase,
enzyme impliquée dans la dégradation de la
proline. Elle pourrait aussi correspondre à la
stimulation de sa synthèse. En effet, Hu et al.,
(1992) affirment que chez Vigna aconitifolia, un
gène codant pour la pyrroline-5-carboxylate
synthétase est fortement exprimé au niveau des
feuilles et des racines des plantes traitées à 200
mM de NaCl.
Cette accumulation de la proline serait
provoquée par la synthèse accrue à partir du
glutamate et de l’ornithine [29]. En comparant
avec la majorité d’autres acides aminés, la
synthèse de la proline a un avantage métabolique
en tant que produit terminal d’une voie
relativement courte et hautement régulée. Sous
conditions de stress, le métabolisme des acides
aminés est largement altéré et la synthèse des
protéines augmente comme une conséquence de
ces conditions métaboliques, la synthèse de la
proline peut être promue par une augmentation
des concentrations des métabolites accompagnée
d’une production de précurseurs de proline et
peut être la principale cause de l’accumulation
de la proline dans les tissus des plantes exposées
à des conditions de stress [61]. En plus, la
15
biosynthèse de la proline peut être associée à la
régulation du pH cytosolique ou la production de
NADPH pour la stimulation de la voie des
pentoses-phosphates [41].
Aussi, nos résultats montrent que la quantité de
proline accumulée chez le M. arborea L. est
assez élevée par rapport aux résultats obtenue
dans certaines études comme celle de
Benhassaini et al. (2012), où la teneur la plus
élevé est de 600µg/g , observé chez la
concentration de 400meq/L , ce qui laisse penser
que cet osmolyte compte parmi les paramètres
biochimiques les plus efficaces permettant la
résistance de cette plante aux conditions
environnementales extrêmes et s’exprimant de
manière plus marquée dans les feuilles. Il
migrerait depuis les différents organes vers ces
feuilles dans un but de protection et
d’augmentation de l’efficacité photosynthétique
car certains travaux rapportent que la proline
serait synthétisée dans les feuilles et transportée
vers les sites de résistance aux agressions [39]
[67] et d’autres signalent que la proline migre
vers les feuilles et s’y localise sous contrainte
saline ; tel est le cas pour la vigne [37], le sorgho
[70].
En ce qui concerne les sucres solubles, plusieurs
travaux se sont intéressés à l’étude de leur
accumulation chez plusieurs espèces soumises au
stress. Des corrélations significatives et
négatives ont été établies, en conditions salines,
entre la production de la biomasse sèche
aérienne et les teneurs des feuilles en sucres
solubles totaux de certaines espèces comme le
tournesol [23]. Alors que chez d’autres espèces
comme le blé, l’orge et le triticale ainsi que le
cotonnier et le soja [58], c’est plutôt le
phénomène inverse qui a été observé. Les
variétés présumées plus tolérantes de ces espèces
semblent accumuler des quantités plus élevées de
sucres solubles.
Les résultats des dosages des sucres solubles,
nous ont permis également de noter des valeurs
élevées au niveau des différents organes étudiés,
avec une augmentation de la teneur en fonction
que la concentration saline augmente, ces ré
résultats sont en conformités avec celle de El
Midaoui et al., (2007) qui ont trouvé que chez le
LES TECHNOLOGIES DE LABORATOIRE - 2015, Volume 9, N°37
tournesol, sous l'action de la contrainte saline, les
augmentations de teneurs en sucres solubles
enregistrées par rapport au témoin ont été de
l'ordre de 15, 31 et 59% à des concentrations
respectives de 50, 75 et 100 mM NaCl.
Une étude a été faite au Maroc sur des agrumes
afin de sélectionner les génotypes les plus
tolérants à la salinité. Des plants de citrange
Carrizo et de deux hybrides, H1 et H2, issus du
croisement Poncirus trifoliata x Citrus sunki
Hort, âgés de 18 mois, ont été irrigués par une
solution nutritive additionnée de 25, 35, et 70
mM de NaCl durant deux mois alors que les
plants témoins recevaient la solution nutritive
sans NaCl. Après traitement, les teneurs en
proline et en sucres solubles ont été mesurées
dans les feuilles des porte-greffes traités.
L'accumulation de proline a été indépendante de
la présence de NaCl dans la solution d'irrigation
mais elle a varié en fonction du porte-greffe. En
revanche, NaCl a fortement stimulé
l'accumulation des sucres solubles chez les trois
porte-greffes et cette accumulation a été très
importante chez le portegreffe H1 [47].
Une étude a porté sur l'analyse des effets du
chlorure de sodium et d'une contrainte hydrique
chez 2 sous-espèces d'Acacia nilotica (ssp.
cupressiformis et ssp. Tomentosa) Après un mois
de stress salin (0, 75, 100 et 200 mM en NaCl),
l’analyse de la teneur en sucres solubles révèle
une accumulation de ces derniers pour le
maintien de la turgescence des cellules par
diminution du potentiel osmotique 48].
Notre étude aussi a put démontrer que
l’accumulation des sucres solubles sont plus
remarquable chez les feuilles que chez les
racines en cas de stress, ces résultats sont en
convergences avec le travail de Mouri et al.
(2012), sur la variation saisonnière de la teneur
en proline et en sucres solubles chez l’oyat
(Ammophila arenaria (L.) (Link) provenant du
milieu naturel de la côte ouest de l’Algérie, où ils
ont trouvés que l’accumulation des sucres
solubles en cas de stress est plus importante chez
les feuilles âgées par apport à d’autres organes.
Selon Wang et al. (2011) les sucres solubles sont
les osmolytes organique principaux dans les
feuilles.
16
Les différences observées entre les quantités des
sucres soulèvent la question de l’importance des
processus métaboliques impliqués dans la
synthèse, la dégradation, le transport et le
stockage des sucres et leur dérégulation en cas de
stress environnemental; l’importance
quantitative des sucres suggère aussi leur
implication dans le processus d’endurcissement
des plantes [4]. Des études menées sur de très
nombreuses plantes naturelles et cultivées
soumises à différents stress hydriques et salins
telles que celles de Adda et al. (2005) effectuées
sur le blé ont révélé des accumulations plus ou
moins importantes de carbohydrates en réponse à
différents degrés de stress et que l’ajustement
osmotique s’explique principalement par une
importante accumulation des sucres au niveau
des différents organes. Ces teneurs pourraient
être attribuées aux besoins accentués en
carbohydrates et en composés azotés dont la
proline, qui représente l’un des composés les
plus facilement mobilisables [72].
L’eau est une ressource indispensable pour les
végétaux. Sa présence est une condition
incontournable pour que toute plante puisse se
développer et assurer ses fonctions
physiologiques vitales. Cependant, cette
ressource n’est pas toujours facile d’accès dans
le sol, suivant le milieu naturel. Ainsi les plantes
présentes sur des surfaces sèches ou salées vont
se retrouver exposées à un stress hydrique
important, contre lequel elles devront lutter pour
survivre. Dans le cas d’un stress salin, une
double problématique se pose à l’organisme
végétal: D’un coté, l’absorption de sel dans les
tissus menace le bon fonctionnement
physiologique des cellules. D’un autre côté, la
présence de sel, en abaissant le potentiel
hydrique du sol, menace l’approvisionnement en
eau de la plante. Ce fait a été bien établi chez les
plantes de résistances différentes [33].
La teneur relative en eau dans les feuilles est un
bon indicateur de l’état hydrique, elle diminue
légèrement chez les plantes stressées à la salinité.
La différence non significative du TRE de M.
arborea L. du à l’absorption d’eau qui est
maintenue à un niveau suffisant pour éviter la
déshydratation des tissus de la plante et pouvoir
LES TECHNOLOGIES DE LABORATOIRE - 2015, Volume 9, N°37

ainsi diluer les sels introduits dans les cellules.
Ces constatations sont en accord avec plusieurs
travaux antérieurs [30] [25], et en diminuant la
transpiration [50].
Nos résultats peuvent aussi s’expliquer par le
phénomène d’ajustement osmotique, caractérisé
par la diminution non significative du potentiel
hydrique, permettant ainsi de maintenir les
mouvements d’eau vers les feuilles et par
conséquent leur turgescence ces résultats sont en
conformités avec les travaux de Monneveux,
(1989). En effet, lors d’un stress salin, il y’a
accumulation au niveau cellulaire
d’osmoprotecteurs qui sont des composés
fortement solubles, neutres, incluant des
métabolites secondaires tels que la glycine
bétaine, des polyols tels que le mannitol ou
autres composés tels que les sucres (Hu, 2000)
[35]. L’analyse de la teneur relative en eau,
permet de décrire d’une manière globale le statut
hydrique de la plante et d’évaluer l’aptitude à
réaliser une bonne osmorégulation et de
maintenir une turgescence cellulaire 22].
Le TRE est parfaitement relié à l’accumulation
de la proline dans les feuilles, la baisse du
potentiel osmotique par l’accumulation des
osmolyte dans la réponse au stress prouve la
capacité de la cellule à maintenir son turgéssence
en cas de diminution du potentiel hydrique [71]
[2].

Conclusion

Les résultats obtenus montrent que l’exposition
de M. arborea L. au stress salin provoque une
accumulation de proline et de sucres solubles.
Pour la proline, les teneurs en cet acide aminé
augmentent dans le tissu foliaire au fur et à
mesure que la concentration saline augmente.
C’est aussi le cas pour les sucres soluble dont
leurs teneurs croient en fonction de l’ampleur du
traitement salin appliqué et de l’organe. En effet,
les feuilles accumulent plus de sucres solubles
que les racines. Cette variation est probablement
liée au rôle que jouent ces deux paramètres
biochimiques à l’échelle cellulaire ainsi que son
implication dans l’ajustement osmotique. Tandis
teneur relative en eau (TRE) est indifférente vis-
à-vis du stress, dans la mesure où ce paramètre
est plus ou moins stable chez l’ensemble des
plants expérimentés. Ceci montre les possibilités
d’adaptabilité de M. arborea L. à la salinité et
son introduction dans les zones steppiques pour
la réhabilitation des parcours dégradés. Dans ce
contexte, il serait souhaitable d’étudier le
comportement de cette espèce dans les
conditions naturelles. Concernant les marqueurs
de stress analysés, nos résultats doivent être
complétés par des études plus élargies sur les
sites de synthèse de ces marqueurs, les modalités
et la dynamique de leur transport, les sites exacts
de leur accumulation et les niveaux les plus
optimums permettant à cette espèce la meilleure
adaptation et enfin le déterminisme génétique
régulant les différentes voies de synthèse et les
facteurs conditionnant leur transport, leur
utilisation et leur accumulation.

REFERENCES

[1] Adda A., Sahnoune M., Kaid
Harche M. and Merah O., 2005.
Impact of water deficit intensity on
durum whent seminal roots. Plant
biology and pathology. Science
direct. C.R. Biologies. 328, pp:918–
927.
[2] Albouchi A., Bejaoui Z. and El
Aouni M.H., 2003. Influence of
moderate or severe water stress on
the growth of Casuarina glauca
Sieb. seedlings. Sécheresse 14. pp.
137-142.
[3] Amato G, Stringi L, and
Giambalvo D. 2004. Productivity
and canopy modification of
Medicago arborea as affected by
defoliation management and
genotype in a Mediterranean
17
environment. Grass Forage Science
59. pp:20–28.
[4] Aminata Ould Al Hadj K., 2001.
Contribution à l’étude des réponses
métaboliques de la tomates à la
salinité. Thèse Doc. Univ. Rennes
(France). 118p.
[5] Andreu V., Rubio J.L. and Cerni
L., 1994. Use of a shrub (Medicago
arborea L.) to control water erosion
LES TECHNOLOGIES DE LABORATOIRE - 2015, Volume 9, N°37
on steep slopes. Soil Use Manag.10.
pp:95-99.
[6] AOAC, 1955. Association of
official analytical chemists, official
methods of analysis. Published by
the AOAC., Po.box 540,
Washington.
[7] Ashraf M. and T.McNeilly.,
2004.Salinity tolerance in Brassica
oil seeds. Reviews in Plant Sciences
23. no. 2, pp:157-174.
[8] Ayat N., 1985. Contribution a
1'etude de la luzerne arborescens
Medicago arborea L.) DEA,
Agronomie, Mediterraneenne,
ENSA Montpellier. 58p
[9] Baba Sidi-Kaci S., 2010. Effet
du stress salin sur quelques
paramètres phoenologiques
(biométrie, anatomie) et
nutritionnels de l’Atriplex en vue
d’une valorisation agronomique.
Mémoire de magister Univ. Kasdi
Merbah - Ouargla
[10] Batanouny K.H., 1993. Eco
physiology of halophytes and their
traditional use in the Arab world.
Advanced Course on halophyte
utilisation in Agriculture, 12
Sept.,Agadir, Marocco.
[11] Belkhodja M. and
M.Benkablia.,2000.Proline response
of faba bean (Vicia faba L.)under
salt stress. Egypt. J.of Agric.Res. 78.
no.1, pp:185-195.
[12] Belkhodja M., Djerroudi Z.O.,
Bissati S. and Hadjadj S., 2010.
Effet du Stress Salin sur
l’accumulation de Proline Chez
Deux Espèces d’Atriplex Halimus
L. et Atriplex Canescens (Pursh)
Nutt. European Journal of Scientific
Research. 41. no. 2, pp.248-259.
[13] Belkhodja, M., and Benkablia
M., 2000. Proline of Faba bean
(Vicia faba) under salt stress. Egypt.
J. Agric. Res. 78, no. 1, pp:185–195.
[14] Benhassaini H., Fetati A.,
Hocine A.K. and Belkhodja M.,
2012. Effect of salt stress on growth
and accumulation of proline and
soluble sugars on plantlets of
Pistacia atlantica Desf. subsp.
REFERENCES
atlantica used as rootstocks.
Biotechnol. Agron. Soc. Environ.
16. pp:159-165.
[15] Benmqhioul B., Daguin F. and
Aid-Harche M., 2009. Effet du
stress salin sur la germination et la
pistacher (Pistacia vera L.). C. R.
Biologies: pp.1-7.
[16] Bergman, I., and R. Loxley.
1970. New spectrophotometric
method for the determination of
prolinein tissue hydrolysates.
Analytical Chemistry 42, no. 7
pp:702–706.
[17] Bouchoukh I., 2010.
Comportement écophysiologique de
deux Chénopodiacées des genres
Atriplex et Spinacia soumises au
stress salin. Mémoire de magister
Univ. Mentouri – Constantine :
112p.
[18] Boukafha R. and Bouchergui
F., 2012. Effets de la salinité et de la
température sur la germination des
graines de Medicago arborea L.
Mémoire de Master II Univ. Djillali
Liabes de Sidi Bel Abbes : 71p.
[19] Chamard P., 1993.
Environnement et développement.
Références particulières aux états
sahéliens membres du
CCILS.Rev.Sécheresse, 4. pp :172-
328.
[20] Chouaki S., Bessedik F.,
Chebouti A., maamri F., oumata S.,
kheldoun S., hamana M. F.,
douzene M., bellah F. and kheldoun
A., 2006. Deuxième rapport
national sur l’état des ressources
phytogénétiques. 92p.
[21] Dubois M., Gilles K. A.,
Hamilton J. K., Rebers P. A. and
Smith F., 1956. Colorimetric
method for determination of sugars
and related substances, Anal. Chem.
28. 350p.
[22] El djaafari S., 2000. Durum
wheat breeding for abiotic stresses
resistance: Definin physiological
traits and criteria. Option
Mediterranean, (40). 256p.
[23] El Midaoui, M., Benbella, M.,
Aït Houssa, A. Ibriz, M. et
18
Talouizte, A., 2007. Contribution à
l’étude de quelques mécanismes
d’adaptation à la salinité chez le
tournesol cultivé (Helianthus
annuus L.) Revue HTE no.136,
mars 2007, pp 29-34.
[24] El Midaoui, M., Talouizte, A.,
Benbella, M., et Bervillé, A., 1999.
Response of sunflower (Helianthus
annuuus L.) to nitrogen and
potassium deficiency. Helia 22, no.
30, pp:139-148.
[25] Fricke W. and Peters W. S.,
2002. The biohysics of leaf growth
in salt sressed barley. A study at the
cell level. Plant Physiol 129. 388p.
[26] Goldhirs A.G., Hankamer B.
and Lirs S.H.,1990.Hydroxyproline
and proline content and cell wall of
Sunflower,Peanut and Cotton under
salt stress.Plant Sci.69. pp:27-32.
[27] Guillaume C., 2006.
Arabidopsis thaliana et
Thellungiella halophila, plantes
modèles dans l’étude du stress salin.
Spectrosciences. article 23.
[28] Hamdy A., 1999. Saline
irrigation and management for a
sustainable use. In: Advanced Short
Course on Saline Irrigation.
Proceeding, Agadir: pp.152-227.
[29] Hare P.D and Cress W.A.,
1997. Metabolic implications of
stress induced proline accumulation
in plants. Plant Growth
Regulation,(21), pp.79-102.
[30] Hasegawa P. M., Bressan R.
A., Zhu J. K. and Bohnert H. J.,
2000. Plant cellular and molecular
responses to high salinity. Edit.
Plant Mol Biol. 51. 499p.
[31] Heyser JW, D. DeBruin,
M.Kincaid, Johnson R.Y.,
Rodriguez M.M. and Robinson N.J.,
1989.Characterisation of L[ 513C] –
proline biosynthesis in halophytic
and no halophytic suspension
cultures by 13 CNMR. J.Plant
Physiol.135. pp:459-446.
[32] Hoagland D.R. and Arnon D.I.,
1938. The water-culture method for
growing plants without soil. Calif.
Agric. Exp. Sta. Cir.347: pp.1-39.
LES TECHNOLOGIES DE LABORATOIRE - 2015, Volume 9, N°37
[33] Hoffman G.J. and Phene C.J.,
1971. Effect of constant salinity
levels on water use efficiency of
bean and cotton. Trans ASAE 14.
pp :1103-1106.
[34] Hu C.A., Delauney A.J. and
Verma D.P., 1992. A bifunctional
enzyme (delta 1-pyrroline-5-
carboxylate synthetase) catalyzes
the first two steps in proline
biosynthesis in plant. Proceeding of
the National Academy of Sciences of
the United States of America 89, no.
19, pp:9354-9358.
[35] Hu W. Y., 2000. Carbohydrate
deposition and partitionning in
elongating leaves of Weat under
saline soil conditions. Australian
Journal of Plant physiology 27.
370p
[36] Huber W., 1974. Influence of
NaCl and abscisic acid treatment on
praline metabolism and some
further enzymes of amino acid
metabolism in seedlings of
Pennisetum thyhoides. Planta 121.
pp:379-394.
[37] Imamul Huq, S.M., and F.
Larher. 1984. Effect of maintaining
a constant Na: Ca ratio on the
growth, ion balance and organic
solute status of NaCl treated
cowpea. Vigna sinensis L. Plant
Physiol. 113. pp:163–176.
[38] Khedr A.H.A., 2003. Proline
induces the expression of salt-
stress-responsive proteins and may
improve the adaptation of
Pancratium maritinum L. to salt
stress. J. Exp. Bot.,54. pp:2553-
2562.
[39] Le Saint A.M., 1969.
Observations physiologiques sur le
gel et l’endurcissement chez le chou
de Milan. Thèse Doct. Es Sciences,
Paris, série A, N° (4669).
[40] Lesins K. A. and Lesins I.,
1979: Genus Medicago
(Leguminosae), a taxogenetic study.
Plant ecology. 50. No. 2, pp:228-
229.
[41] Lutts, S., J.M. Kinet, and J.
Bouharmont. 1996. Effects of
REFERENCES
various salts and mannitol on ion
and proline accumulation in relation
to osmotic adjustment in Rice callus
cultures. J. Plant physiol. 149.
pp:186–195.
[42] Martínez-Ballesta M. C.,
Martínez V. and Carvajal M., 2004
Osmotic adjustment, water relations
and gas exchange in pepper plants
grown under NaCl or KCl, Environ
Exp Bot. 52. 161p.
[43] Monneveux P., 1989. Les
céréales à paille : présentation
générale in Amélioration des
espèces végétales cultivées. Edit.
INRA. Paris, pp. 13- 21.
[44] Mouri C., Benhassaini H.,
Bendimered F.Z. et Belkhodja M.,
2012. Variation saisonnière de la
teneur en proline et en sucres
solubles chez l’oyat (Ammophila
arenaria (L.) Link) provenant du
milieu naturel de la côte ouest de
l’Algérie. Acta Botanica Gallica
159. no. 1, pp:127-135
[45] Munns R., 2005. Genes and
salt tolerance: bringing them
together. New Phytology, 167:
pp:645–663.
[46] Muscolo A., Panuccio M.R.
and Sidari M., 2003 Effects of
salinity on growth, carbohydrate
metabolism and nutritive properties
of kikuyu grass (Pennisetum
clandestinum Hochst), Plant Sci,
164. 1103p.
[47] Mustapha Aїt Haddou, M.,
Bousrhal, A., Benyahia, H. et
Benazzouz, A. K., 2002. Effet du
stress salin sur l'accumulation de la
proline et des sucres solubles dans
les feuilles de trois portegreffes
d'agrumes. Fruit. 57, no. 5-6,
pp:335-340.
[48] Nabil, M. et Coudret, A., 1995.
Etudes des mécanismes de tolérance
au chlorure de sodium et à une
contrainte hydrique chez Acacia
nilotica ssp. cupressiformis et ssp.
tomentosa. Thèse de doctorat.
Université de Clermont-Ferrand 2,
Clermont-Ferrand, France. 198 p.
19
[49] Nayer M. et Reza H., 2008.
Drought-induced Accumulation of
Soluble Sugars and Proline in Two
Maize Varieties. World Applied
Sciences Journal 3 no. 3: pp:448-
453.
[50] Ngasamy P., 2006. World
salinization with emphasis on
Australia .Journa of Experimental
Botany. 57. pp :1017, 1023.
[51] Nguyen, S. and R. Paquin.
1971. Méthodes d’extraction et de
purification des acides aminées
libres et des proteines des tissus
végétaux J. Chromatography 61. pp
: 349–351.
[52] Ottow E., Brinker M., Fritz E.,
Teichmann T., Kaiser W., Brosche
M., Kangasjarvi J., Jiang X. and
Polle A., 2005. Populus euphratica
Displays Apoplastic Sodium
Accumulation, Osmotic Adjustment
by Decreases in Calcium and
Soluble Carbohydrates, and
Develops Leaf Succulence under
Salt Stress 1. Plant Physiology 139,
pp :1762–1772.
[53] Ould El Hadj-Khelil A., 2001.
Contribution à l’étude de réponses
métaboliques de la tomate à la
salinité. Thèse de doctorat en
Science de la Vie et de
l’Environnement, université de
Rennes-I : pp.34-44.
[54] Papanastasis V.P., Platis P.D.,
and DINI-Papanastasiou O., 1998.
Effects of age and frequency of
cutting on productivity of
Mediterranean deciduous fodder
tree and shrub plantations. Forest
Ecology Management 110. pp :
283–292.
[55] Patel, J.A. and Vora A.B.,
1985. Free proline accumulation in
drought stressed plants. Plant and
soil 84. pp:427–429.
[56] Pujol, J.A., Calvo J.F. and
Ramirez Diaz L.,2001.Seed
germination, growth and osmotic
adjustment in response to nacl in a
rare succulent halophyte from south
eastern spain. Journal: Wetlands 21,
no.2, pp: 256-264
LES TECHNOLOGIES DE LABORATOIRE - 2015, Volume 9, N°37
[57] Quian YL., Wilhelm S.J. and
Marcum K.B., 2001.Comparative
Responses of Two Kentucky
Bluegrass Cultivars to Salinity
Stress. Crop Science 41,pp.1895-
1900.
[58] Rathert, G., 1984. Sucrose and
Starch content of plant parts as a
possible indicators for salt
tolerance. Aust. J. Plant Physiol. 11.
pp: 491–495.
[59] Rochon J. J. and Goby J. P.,
1987. Quelques observations sur la
production fourragere d'un jeune
plantation de luzernes arborscentes
dans la plaine du Rousillon. — FAO
Bull. No (5), subnetwork on
Mediterranean pastures, 5th
meeting, Montepellier.
[60] Rontein D.,Bass G. and
Hanson A.D., 2002 .Metabolic
engineering of osmoprotectants
accumulation in plants.
Metab.Engineer 4, pp :357-384.
[61] Silveira, P., Meloar B. and
Viegras R.A., 2002. Effets salinité
induits sur l’assimilation d’azote
liée à la croissance aux usines de
doliques de Chine. Exp. Bot. 46
pp:171–179.
[62] Sivaramakrishnan S., pattel V.,
flower G. and Peacok J., 1988.
Proline accumulation and nitrate
reductase activity in sorghum lines
REFERENCES
during mid sean drough stress.
Plant physiol. 74. pp : 418-426.
[63] Smirnoff N. and Stewart G.R.,
1985. Stress metabolites and their
role in coastal plants. Plant Ecology.
Spinger Neth. (eds.), 62. No. 1–3,
pp: 273–278.
[64] Tahri E.H., Belabed A. et
Sadki K., 1998. Effet d’un stress
osmotique sur l’accumulation de
proline, de chlorophylle et des
ARNm codant pour la glutamine
synthétase chez trois variétés de blé
dur (Triticum durum). Bulletin de
l'Institut Scientifique, Rabat, 21,
pp :81-87.
[65]Tattini M., Gucci R., Romani
A., Baldi A. and Everard D., 1996.
Changes in non-structural
carbohydrates in olive (Olea
europaea leaves during root zone
salinity stress, Physiol. Plant, 98.
117p.
[66] Travlos I.S.et Economou G.,
2006. Optimization of seed
germinationand seedling emergence
of Medicago arborea L.
International Journal of Botany 2:
415–420.
[67] Vezina, L. and R. Paquin.
1982. Effects des basses
températuressur la distribution de la
proline dans les plants de Luzerne.
20
Medicago mediapers. Physiol. Vég.
20 :101–109.
[68] Wang Y. and Nil N., 2000.
Changes in chlorophyll, ribulose
biphosphate carboxylase–
oxygenase, glycine betaine content,
photosynthesis and transpiration in
Amaranthus tricolor leaves during
salt stress. J. Hortic. Sci.
Biotechnol. 75. pp:623–627
[69] Weatherley P.E. et Barrs H.D.,
1962. Are-examination of the
relative turgidity technique
forestimating water deficits in
leaves. Aust. J. Sci.15 : 412p.
[70] Weimberg, R., Lerner H.R. and
Poljakooff–Mayber A., 1986.
Changes in growth and water-
soluble solute concentrations in
Sorghum bicolor stressed with
sodium and potassium salts.
Physiol. plant 62. pp:472–480.
[71] Yancey P.H., 1982. Living
with water stress: evolution of
osmolyte systems. Science 217.
pp:1214-1222.
[72] Zerrad, W., Maataoui B.S.,
Hilali S., El Antri S. and Hamyene
A., 2008. Etude comparative des
mécanismes biochimiques de
résistance au stress hydrique de
deux variétés de blé dur. Lebanese
science Journal 9, no. 2: pp:1–10.