PHARMACOPÉE EUROPÉENNE 10.3 2.2.2.

Degré de coloration des liquides

01/2021:20202 de sodium R à 300 g/L. Faites bouillir doucement pendant

10 min, laissez refroidir, puis ajoutez 60 mL d’acide sulfurique
dilué R et 2 g d’iodure de potassium R. Fermez la fiole et
dissolvez le précipité en agitant doucement. Titrez l’iode libéré
par le thiosulfate de sodium 0,1 M jusqu’à coloration rose, en
présence de 0,5 mL de solution d’amidon R ajouté en fin de
2.2.2. DEGRÉ DE COLORATION DES titrage.
LIQUIDES(1) 1 mL de thiosulfate de sodium 0,1 M correspond à 23,79 mg de
CoCl2,6H2O.
◊Une solution est dite incolore si elle a l’aspect de l’eau R ou du
solvant utilisé dans la préparation de la solution à examiner, Solution bleue. Dissolvez 63 g de sulfate de cuivre
ou si elle n’est pas plus colorée que la solution témoin B9. pentahydraté R dans 900 mL environ d’un mélange de 25 mL
d’acide chlorhydrique R et de 975 mL d’eau R, puis complétez à
Indiquez le procédé utilisé (procédé I, procédé II ou
1000,0 mL avec le même mélange. Titrez et ajustez la solution
procédé III) avec les résultats.
à 62,4 mg de CuSO4,5H2O par millilitre, par addition du
même mélange acide.
MÉTHODES VISUELLES
Titrage. Dans une fiole conique de 250 mL à bouchon rodé,
Pour apprécier le degré de coloration des liquides dans les introduisez 10,0 mL de la solution, 50 mL d’eau R, 12 mL
teintes brun-jaune-rouge, utilisez l’un des 2 procédés ci-après, d’acide acétique dilué R et 3 g d’iodure de potassium R. Titrez
précisé dans la monographie. l’iode libéré par le thiosulfate de sodium 0,1 M jusqu’à faible
coloration brun clair en présence de 0,5 mL de solution
PROCÉDÉ I d’amidon R ajouté en fin de titrage.
Dans des tubes à essai identiques, de verre neutre, incolore 1 mL de thiosulfate de sodium 0,1 M correspond à 24,97 mg
et transparent, d’un diamètre extérieur de 12 mm, comparez de CuSO4,5H2O.
2,0 mL du liquide à examiner à 2,0 mL d’eau R, de solvant
utilisé dans la préparation de la solution à examiner, ou de la Solutions étalons
solution témoin (voir tableaux des solutions témoins) prescrite
dans la monographie. Appréciez les nuances à la lumière A partir des 3 solutions primaires, préparez 5 solutions étalons
diffuse du jour par examen horizontal sur fond blanc. comme suit.
PROCÉDÉ II
Dans des tubes à essai identiques, de verre neutre, incolore et Tableau 2.2.2.-1
transparent, d’un diamètre intérieur de 15-25 mm et à fond
Volumes en millilitres
plat, comparez le liquide à examiner à l’eau R, au solvant
utilisé dans la préparation de la solution à examiner ou à la Solution étalon Solution Solution
Acide
Solution chlorhydrique à
solution témoin (voir tableaux des solutions témoins) prescrite jaune rouge bleue
dans la monographie, l’épaisseur de la couche étant de 40 mm. 10 g/L de HCl
Appréciez les nuances à la lumière diffuse du jour par examen B (brun) 3,0 3,0 2,4 1,6
dans l’axe du tube sur fond blanc. JB (jaune-brun) 2,4 1,0 0,4 6,2
PRÉPARATION DES SOLUTIONS TÉMOINS J (jaune) 2,4 0,6 0,0 7,0
Solutions primaires JV (jaune-vert) 9,6 0,2 0,2 0,0
Solution jaune. Dissolvez 46 g de chlorure ferrique R R (rouge) 1,0 2,0 0,0 7,0
dans 900 mL environ d’un mélange de 25 mL d’acide
chlorhydrique R et de 975 mL d’eau R, puis complétez à Solutions témoins utilisées dans les Procédés I et II
1000,0 mL avec le même mélange. Titrez et ajustez la solution
à 45,0 mg de FeCl3,6H2O par millilitre, par addition du même A partir de ces 5 solutions étalons, préparez les solutions
mélange acide. Conservez à l’abri de la lumière. témoins suivantes.
Titrage. Dans une fiole conique de 250 mL à bouchon rodé,
introduisez 10,0 mL de la solution, 15 mL d’eau R, 5 mL Tableau 2.2.2.-2. - Solutions témoins B
d’acide chlorhydrique R et 4 g d’iodure de potassium R. Fermez
la fiole, laissez reposer à l’obscurité pendant 15 min, puis Volumes en millilitres
ajoutez 100 mL d’eau R. Titrez l’iode libéré par le thiosulfate de Solution témoin Acide chlorhydrique
sodium 0,1 M en présence de 0,5 mL de solution d’amidon R Solution étalon B à 10 g/L de HCl
ajouté en fin de titrage. B1 75,0 25,0
1 mL de thiosulfate de sodium 0,1 M correspond à 27,03 mg B2 50,0 50,0
de FeCl3,6H2O.
B3 37,5 62,5
Solution rouge. Dissolvez 60 g de chlorure de cobalt R
B4 25,0 75,0
dans 900 mL environ d’un mélange de 25 mL d’acide
chlorhydrique R et de 975 mL d’eau R, puis complétez à B5 12,5 87,5
1000,0 mL avec le même mélange. Titrez et ajustez la solution
B6 5,0 95,0
à 59,5 mg de CoCl2,6H2O par millilitre, par addition du même
mélange acide. B7 2,5 97,5

Titrage. Dans une fiole conique de 250 mL à bouchon rodé, B8 1,5 98,5
introduisez 5,0 mL de la solution, 5 mL de solution diluée de B9 1,0 99,0
peroxyde d’hydrogène R et 10 mL de solution d’hydroxyde
(1) Ce chapitre a fait l’objet du processus d’harmonisation des pharmacopées. Voir chapitre 5.8. Harmonisation des pharmacopées.

Les Prescriptions Générales (1) s’appliquent à toutes les monographies et autres textes 5041
2.2.2. Degré de coloration des liquides PHARMACOPÉE EUROPÉENNE 10.3

Tableau 2.2.2.-3. - Solutions témoins JB MÉTHODE INSTRUMENTALE – PROCÉDÉ III

Volumes en millilitres PRINCIPE
Solution témoin La couleur observée d’un objet dépend en premier lieu
Acide chlorhydrique
Solution étalon JB à 10 g/L de HCl de ses propriétés d’absorption de la lumière. Cependant,
JB1 100,0 0,0
la perception des couleurs peut être affectée par divers
paramètres : caractéristiques de la source lumineuse, énergie
JB2 75,0 25,0 spectrale de l’illuminant, sensibilité visuelle de l’observateur,
JB3 50,0 50,0
différences de taille, différences de fond, différences
directionnelles. La teinte, la clarté (ou luminosité) et la
JB4 25,0 75,0 saturation sont 3 attributs de la couleur. La réalisation de
JB5 12,5 87,5
mesures instrumentales dans des conditions définies permet
une expression numérique de la couleur. Toutes les mesures
JB6 5,0 95,0 instrumentales de coloration reposent sur le fait que la
JB7 2,5 97,5
détection de la couleur par l’oeil humain fait appel à 3 types
de récepteurs différents.
Les méthodes instrumentales de mesure de la couleur
Tableau 2.2.2.-4. - Solutions témoins J fournissent des données plus objectives que l’observation
Volumes en millilitres visuelle subjective des couleurs par un petit nombre
d’individus. Sous réserve d’un entretien et d’un étalonnage
Solution témoin Acide chlorhydrique
Solution étalon J adéquats, ces méthodes peuvent fournir des mesures
à 10 g/L de HCl exactes, fidèles et reproductibles, sans dérive temporelle. De
J1 100,0 0,0 nombreuses expériences d’égalisation de la couleur, conduites
J2 75,0 25,0 sur des sujets humains possédant une vision normale des
couleurs, ont permis d’établir des coefficients de distribution
J3 50,0 50,0 (facteurs de pondération) pour chaque longueur d’onde dans
J4 25,0 75,0 le spectre visible, et ainsi de déterminer la quantité relative
de stimulation produite par la lumière sur chaque type de
J5 12,5 87,5 récepteur à cette longueur d’onde.
J6 5,0 95,0 La Commission Internationale de l’Eclairage (CIE) a développé
2,5 97,5
des modèles qui tiennent compte de la source lumineuse et
J7
de l’angle de vision de la cible (champ de vision). Dans un
essai visuel de détermination de la coloration d’une solution,
Tableau 2.2.2.-5. - Solutions témoins JV certaines exigences impliquent l’utilisation d’un angle de
Volumes en millilitres
vision de 2° et de la lumière du jour diffuse (illuminant C). La
sensibilité moyenne de l’oeil humain peut être définie par les
Solution témoin Acide chlorhydrique coefficients de distribution xλ , yλ et zλ (figure 2.2.2.-1).
Solution étalon JV à 10 g/L de HCl
JV1 25,0 75,0

JV2 15,0 85,0

JV3 8,5 91,5

JV4 5,0 95,0

JV5 3,0 97,0

JV6 1,5 98,5

JV7 0,75 99,25

Tableau 2.2.2.-6. - Solutions témoins R

Volumes en millilitres
Solution témoin Acide chlorhydrique
Solution étalon R à 10 g/L de HCl
R1 100,0 0,0

R2 75,0 25,0

R3 50,0 50,0

R4 37,5 62,5

R5 25,0 75,0

R6 12,5 87,5

R7 5,0 95,0

Conservation
Pour le Procédé I, les solutions témoins peuvent être
conservées dans des tubes à essai scellés, de verre neutre,
incolore et transparent, d’un diamètre extérieur de 12 mm, à
Figure 2.2.2.-1. – Sensibilité moyenne de l’oeil humain
l’abri de la lumière.
représentée par les coefficients de distribution, Observateur de
Pour le Procédé II, préparez les solutions témoins Référence 2° CIE (D = coefficient de distribution ; λ = longueur
immédiatement avant l’emploi, à partir des solutions étalons.◊ d’onde en nanomètres)

5042 Voir la section d’information sur les monographies générales (pages de garde)
PHARMACOPÉE EUROPÉENNE 10.3 2.2.2. Degré de coloration des liquides

Pour toutes les couleurs, la quantité de stimulation de chaque Dans la méthode spectrophotométrique, les valeurs de la
type de récepteur est définie par l’ensemble des valeurs du transmittance sont obtenues à des longueurs d’onde discrètes
tristimulus XYZ. couvrant l’ensemble du spectre visible. Elles sont ensuite
La relation entre les coefficients de distribution et les valeurs utilisées pour calculer les valeurs du tristimulus à l’aide des
du tristimulus (X, Y et Z) est fournie par les équations facteurs de pondération xλ , yλ et zλ pour l’Observateur de
intégrales suivantes : Référence 2° CIE et l’illuminant C de la CIE (voir la publication
en vigueur de la Commission Internationale de l’Eclairage).
¥
X = k ò fλ xλ Sλdλ MÉTHODE SPECTROPHOTOMÉTRIQUE
0 Utilisez un spectrophotomètre approprié suivant les
instructions du fabricant et déterminez la transmittance T
¥
sur des longueurs d’onde couvrant, au minimum, la gamme
Y = k ò fλ yλ Sλdλ 400-700 nm, selon un pas inférieur ou égal à 10 nm. Exprimez
0 le résultat en pourcentage. Calculez les valeurs du tristimulus
¥ X, Y et Z, et les coordonnées trichromatiques L*, a* et b*.
Z = k ò fλ zλ Sλdλ
DÉTERMINATION DE LA COLORATION
0
Etalonnez l’instrument conformément aux indications du
¥ fabricant. Effectuez des essais de contrôle des performances du
k = 100 / ò yλ Sλdλ système avant chaque mesure ou à intervalles réguliers, selon
0
l’utilisation de l’appareil. Utilisez à cet effet des matériaux de
référence certifiés, pour l’intervalle de mesure considéré.
k = constante de normalisation Utilisez l’appareil suivant les instructions du fabricant et
caractérisant la stimulation d’un effectuez l’essai dans les mêmes conditions (longueur du trajet
type de récepteur et l’éclairage utilisé, dans la cuve, température, par exemple) pour la solution à
Sλ = distribution de puissance spectrale examiner et pour la/les solution(s) témoin(s).
relative de l’illuminant, Pour les mesures de transmittance, utilisez l’eau R comme
xλ , yλ et zλ = coefficients de distribution pour référence et attribuez-lui une transmittance de 100,0 pour cent
l’Observateur de Référence 2° CIE, à toutes les longueurs d’onde du spectre visible. Les facteurs
de pondération xλ , yλ et zλ pour l’illuminant C de la CIE sont
fλ = transmittance Tλ spectrale du
matériau, utilisés pour calculer les valeurs de tristimulus correspondant
aux coordonnées L* = 100, a* = 0 et b* = 0.
λ = longueur d’onde, en nanomètres.
Les mesures de référence peuvent être effectuées en utilisant
Pour le calcul pratique des valeurs du tristimulus, la somme les coordonnées colorimétriques de l’eau R ou de solutions
suivante permet d’obtenir une approximation de l’intégration : témoins de pharmacopée récemment préparées, ou en utilisant
les coordonnées colorimétriques enregistrées dans la base de
X = k å TλxλSλΔλ données du fabricant de l’instrument, sous réserve que ces
λ dernières aient été obtenues dans les mêmes conditions d’essai.
Y = k å Tλyλ SλΔλ Si la solution à examiner présente un trouble ou une
λ nébulosité, elle est filtrée ou centrifugée. Toute nébulosité ou
trouble observé dans une solution à examiner qui n’a pas été
Z = k å TλzλSλΔλ filtrée ou centrifugée avant l’essai est signalé dans les résultats.
λ
Il convient d’éviter la formation de bulles d’air ou, le cas
100 échéant, de les éliminer.
k=
å Sλy λΔλ La méthode instrumentale permet de comparer 2 solutions
λ en termes de coloration ou de différence de coloration,
Les valeurs du tristimulus peuvent servir à calculer les ou d’évaluer un écart par rapport à une coloration définie.
coordonnées colorimétriques dans l’espace de couleur Calculez l’écart de coloration ΔE*tr entre la solution à
CIE Lab : L*(clarté ou luminosité), a*(rouge-vert) et examiner t et une solution témoin r à l’aide de l’équation
b*(jaune-bleu), définies par : suivante :

L* = 116f (Y / Yn) - 16
a* = 500[f (X / Xn) - f (Y / Yn)]
b* = 200[f (Y / Yn) - f (Z / Zn)]
Xn, Yn et Zn sont les valeurs du tristimulus de l’eau R et
f (X / X n) = (X / X n)1 /3
si X / X n > (6 / 29) ,3
sinon f (X / X n) = 841 / 108(X / X n) + 4 / 29,
f (Y / Yn) = (Y / Yn)1 /3 si (Y / Yn) > (6 / 29)3,
sinon f (Y / Yn) = 841 / 108(Y / Yn) + 4 / 29,
f (Z / Z n) = (Z / Z n)1 /3 si (Z / Z n) > (6 / 29)3,
sinon f (Z / Z n) = 841 / 108(Z / Z n) + 4 / 29.
2 2 2
ΔE *tr = (ΔL* ) + (Δa*) + (Δb* )
où ΔL*, Δa* et Δb* sont les écarts entre les coordonnées
trichromatiques des 2 solutions.
Outre les coordonnées trichromatiques dans l’espace CIE Lab,
les coordonnées trichromatiques CIE LCh peuvent aussi être
utilisées.
Evaluation de la position au sein de l’espace colorimétrique
L*a*b*. Des instruments peuvent fournir des informations
sur la position réelle de la solution à examiner au sein de
l’espace colorimétrique L*a*b*. En utilisant des algorithmes
appropriés, une correspondance peut être établie par rapport
à des solutions témoins de pharmacopée (avec des indications
comme « la solution à examiner est égale à la solution témoin
XY », « la solution à examiner est proche de la solution XY »
ou « la solution à examiner se situe entre les solutions témoins
XY et XZ »).

Les Prescriptions Générales (1) s’appliquent à toutes les monographies et autres textes 5043