Le système CRISPR-Cas9 est composé d'un court ARNg non codant et d'une nucléase Cas9.

L'ARNg a
deux composants moléculaires : un ARN CRISPR spécifique à la cible (ARNcr) et un ARNcr trans-
activant auxiliaire (tracrARN). L'unité d'ARNg guide la protéine Cas9 vers un locus génomique
spécifique, où la nucléase Cas9 induit une cassure double brin au niveau de la séquence cible génomique
spécifique.
L'unité d'ARNg guide la protéine
Cas9 vers un locus génomique
spécifique, où la nucléase Cas9
induit une cassure double brin au
niveau de la séquence cible
génomique spécifique.
Après le clivage de l'ADN à l'aide de CRISPR-Cas9, la cassure double brin peut être réparée par l'un des deux
aspects de la machinerie naturelle de réparation de la cellule.

1.En l'absence de modèle de réparation, le processus de jonction d'extrémités non

homologues (NHEJ) aboutit à une population hétérogène de cellules avec différentes insertions ou délétions
(indels) autour de la cassure définie par l'ARNg. Ce processus peut être exploité pour générer des lignées
cellulaires avec des délétions aléatoires autour d’une séquence spécifique, produisant ainsi un knock-out
fonctionnel.

2.Alternativement, si un modèle de réparation est fourni, un changement de séquence défini par l'utilisateur peut
être introduit à un locus spécifique du génome via le mécanisme de réparation dirigée par homologie
(HDR) sans erreur . Ce processus peut être utilisé pour surexprimer un nouveau gène, créer des modèles
cellulaires pertinents pour une maladie ou marquer des gènes endogènes avec des fragments à déclarer.
B. Applications potentielles en édition génomique

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