MASSE MOLCULAIRE:

La MM dun AA varie entre 75 Da pour la glycine

et 204 Da pour le tryptophane. La MM moyenne
dun rsidu dAA est de 115 Daltons (Da).
Une protine forme de 50 AA on dit quelle est
compose de 50 rsidus dAA car il ya eu
formation de 49 liaisons peptidiques et
dpart de 49 molcules deau il ne reste que
des AA dshydrats : des rsidus.
Une protine de 50 rsidus aura une MM de 50
115 = 5750 Da ou 5,75 kDa.
La MM de la protine sera 5750g/mole

SOLUBILIT ET POINT DE FUSION:

La plupart de AA subissent facilement la
solvatation par les solvants polaires tels que leau

Solubles dans les solvants polaires et insolubles

dans les solvants apolaire ( Benzne, ther).
La solubilit est dpendante des proprits de la
chaine latrale : la solubilit diminue avec le
nombre datomes de carbone du radical mais
inversement augmente si ce radical R est porteur
de fonctions polaires (NH2, COOH) ou
hydrophiles (OH).
Le point de fusion est lev > 200c

PROPRITS CHIMIQUES LIES AU

GROUPEMENT CARBOXYLIQUE ( COOH ):

- 1 - ESTRIFICATION:
Par un alcool en prsence dun acide fort:
R-CH-COOH + R-OH

NH2
Acide amin

H+

R-CH-COOR + H2O

NH2
Alcool

Esther

- 2 - AMIDIFICATION:
Formation d'amide: elle rsulte avec une amine.
Cette raction est importante si lamine provient dun autre
AA
elle conduit la liaison peptidique.
R-CH-COOH + NH2-R
NH2
Acide amin

R-CH-CO-NH-R + H2O
NH2

Amine

Amide

- 3 DCARBOXYLATION:
Donne naissance une amine, possible par voie:

chimique: chauffage en prsence de Ba(OH)2.

enzymatique: par les dcarboxylases qui

fonctionnent avec le phosphate de pyridoxal.
Intrt: aboutit aux amines biologiques trs actives:

formation de corps proprits particulires:

exp: -histidine
histamine (choc allergique)
-tryptophane
5hydroxy tryptophane
srotonine
(action sur la tension artrielle).

dosage des AA par mesure du CO2 dgag.

R-CH-COOH
NH2

R-CH2-NH2 + CO2

- 4 - FORMATION DE SEL:
Action dune base sur COOH:

R-CH-COOH + KOH
NH2
Acide amin

R-CH-COOK + H2O
NH2

Base

Sel

PROPRITS CHIMIQUES LIES AU

GROUPEMENT AMINE ( NH2 ):

-1-

DSAMINATION:

Par lacide nitreux ( HNO2 ): formation dacide alcool avec

dgagement dazote
Le dosage des AA par la mthode de Van Slyke est fond sur
la mesure du N2 dgag.
R-CH-COOH + HNO2
NH2
Acide amin

R-CH-COOH + N2 + H2O
OH

Acide nitreux

Acide Alcool

-2-

ACTION DE LA NINHYDRINE:

Sert pour la dtection des AA. Cest un oxydant

puissant qui par une dsamination oxydative des
AA conduit laldhyde correspondant avec
libration dammoniac, de CO2 et formation de
Ninhydrine rduite ( HYDRINDANTINE).
O
OH
+

H2N

O
H

CH-R

+ R-C

OH
O
NINHYDRINE

OH
HOOC

AA

O
HYDRINDANTINE

+ NH2 +CO2
O

Aldhyde

DANS UN SECOND TEMPS LAMMONIAC RAGIT AVEC LHYDINDANTINE ET

UNE AUTRE MOLCULE DE NINHYDRINE POUR DONNER UN COMPOS BLEU
VIOLAC: POURPRE DE

RUHEMANN QUI ABSORBE 570 NM (RACTION

COLORIMTRIQUE EXTRMEMENT SENSIBLE POUR LE DOSAGE DES AA

O H

O
OH

N +
OH
H
OH H
O
ammoniac O
+

hydrindantine

ninhydrine

+ 3H2O

OH
O
Pourpre de Ruhemann

Les imino acides donnent un compos jaune dont le maximum dabsorption de

la solution se situe au voisinage de 440nm.

-3-

RACTION DE

SANGER:

Action du 1fluoro2,4dinitro benzne (FDNB) qui ragit

facilement avec une fonction amine pour former par
substitution nuclophile un driv N2,4Dinitro-phnyl:
compos jaune facile identifier par chromatographie et
doser par spectrophotomtrie 360nm.
NO2

NO2
F +

NO2

H2N-R

NaHCO3

NH-R
NO2

FDNB

Driv N 2,4dinitrophnil

Nb: le NaHCO3 permet de neutraliser lacid due au HF form

+ HF

-4-

RACTION DEDMAN:

Action du phenylisothiocyante (PITC): ragit avec la

fonction amine en milieu alcalin pour donner un driv N
phenlthiocarbamyl qui en milieu acide se cyclise en
donnant une phenylthiohydantoine facile identifier .
Cette raction fondamentale trouver son application dans
lanalyse par rcurrence des squences peptidiques .

R
OHC6H5 N = C = S + H2N-CH-COOH
R - CH - COOH
PITC

HN NH C6H5
H

R C ------ CO

S
(H+)

HN

N- C6H5
C
S

Phenyl-thiohydantoine

Driv N-Phnyl
Thiocarbamyl

-5- LA DANSYLATION :
Le Chlorure de Dancyl ragit trs facilement avec des
fonctions amines des AA pour donner des drivs
sulfonamides trs fluorescents donc facilement dlectables
mme dinfimes quantit AA.
Cette raction est 100 fois plus sensible que la raction de
Sanger .
CH3
CH3
CH3
CH3
N
N
- HCL
O S O
CL

Chlorure de dansyl

H
N-H
+ H-C-R
COOH

AA

O S 0
NH
R CH
COOH
Dansyl aminoacide

REMARQUE
Lintrt fondamental de ces quatre dernires
ractions rside en leur trs large utilisation dans
la dtermination de la structure primaire des
protines.

-6 - ACTION DE LA FLUORESCAMINE :
Elle ragit rapidement avec les AA permettant
lobtention de drivs extrmement fluorescents qui
permettent la dtection avec une grande sensibilit de
quantits de lordre de nanomole (n.mol).
Ces proprits chimiques sont trs utilises pour:
- les dosages des AA
- lanalyse squentielles des peptides
- la rvlation des AA en Chromatographie sur
couche mince .

O + R NH2

R-N

H2O

PH= 8-9

OH

O
fluorescamine

COOH
Compos trs fluorescent

Dtermination de la structure primaire des

protines .
Recherche des acides amins dans les liquides
biologiques (urine, sang)

Les nombreuses mthodes sont essentiellement :

o Les mthodes Chromatographiques
o Les mthodes Electrophortiques
o Dosage spcifique

LES MTHODES CHROMATOGRAPHIQUES :

Chromatographie sur papier .

Chromatographe sur couche mince .
Chromatographie en phrase gazeuse .
Chromatographie sur Echangeur dions .

CHROMATOGRAPHE SUR ECHANGEUR DIONS :

Excellent procd , permet des valuations quantitatives avec
de lordre de + ou - 3 % derreur .
Dans cette Mthode une colonne de chromatographie est
remplie dune rsine synthtique contenant des groupements
chargs .
Il existe deux classes de rsines changeuses dions:
- les changeuses de cations
- les changeuses danions .
Les acides amins sont habituellement spars sur une colonne
changeuse de cations .

PRINCIPE :
Premire tape :
filtration du mlange dAA analyser travers une rsine
constitue par des groupements sulfoniques (SO3-)
changeuse de cations on lui ajoute une solution acide (PH
= 2 ou 3) tous les AA sont sous formes de cations(charge + )
et donc se fixent sur la rsine
Nb: les AA basiques sont solidement lis et les AA acides le
sont moins.
Par augmentation du PH des tampons filtrs travers la
colonne la charge + des AA est progressivement neutralise
quand PH > Phi et leurs liaisons avec les groupements SO3- sont
rompus donc on lue le mlange (cest le faire migrer le long de la
colonne en faisant varier le PH et ainsi faire varier les charges des
AA et donc leur vitesse de migration)

Deuxime tape:
Analyse quantitative:
aprs addition de ninhydrine lfluent le mlange
circule travers un bain marie bouillant ou la raction
colore se dveloppe
La lecture se fait 570 nm et 440 nm pour les imino
acides
les mesures sont inscrites en continue sur enregistreur
( les AA sont identifis par la position de leur pic
dabsorption et leur quantit est donne par la surface
de ce pic).

LES MTHODES LCTROPHORTIQUES:

Les AA en milieu aqueux sont sous formes dions. Dans un
champs lectrique, ils subiront un dplacement qui
dpendra de leur charge nette au PH considr.
On dpose un mlange dAA sur une feuille de papier
pralablement imprgne dun tampon et lon tablisse un
champ lectrique continu de haut voltage.
En raison de leur valeurs diffrentes de Phi, les AA migrent
dans des directions des vitesse diffrentes
Les AA neutres ne migrent pas.