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V3 - 31/05/11

Urée-Indole/Bouillon 356-3713
356-3714

DOMAINE D’APPLICATION
Milieu utilisé comme test biochimique lors de Un premier tube peut, pour une souche
l’identification des entérobactéries. donnée, être utilisé pour la mise en évidence de
l’uréase et pour la production d’indole;
PRESENTATION
• Prêt à l’emploi Un second tube est, pour cette même souche,
Coffret : 1 ml x 50 ampoules code 356-3713 réservé à la recherche de la T.D.A.
Coffret : 10 ml x 10 ampoules code 356-3714
Ensemencer chaque tube abondamment à
CONSERVATION/VALIDITE/LOT partir d’une culture prélevée sur milieu gélosé
• Prêt à l’emploi : à + 2 - 8 °C. (exemple : une colonie entière prélevée sur
• La date de péremption et le numéro de lot milieu d’isolement).
sont indiqués sur le conditionnement. Incuber à l’étuve ou, mieux, au bain-marie à
37 °C ± 1 °C.
FORMULE THEORIQUE
L-Tryptophane 0,3 g LECTURE ET INTERPRETATION
KH2P04 0,1 g La bactérie possède une uréase : le milieu
K2HP04 0,1 g devient alcalin par formation de carbonate
NaCl 0,5 g d’ammonium et vire au rouge violacé :
Urée 2,0 g - en 5 à 10 minutes pour Proteus morganii et
Alcool à 95° 1,0 ml Yersinia enterocolitica,
Rouge de phénol à 1 % 0,25 ml - en 2 à 4 heures pour les autres Proteus,
Eau distillée 100 ml - en 12 à 18 heures pour les Klebsiella et
pH (25°C) final = 6,8 ± 0,2 quelques Citrobacter.

AUTRE(S) PRODUIT(S) NECESSAIRE(S) Pas d’uréase : la couleur du milieu demeure


(NON FOURNI(S)) inchangée.
• Réactifs de Kovacs (code 355-5313)
• Perchlorure de Fer Recherche de la production d’indole :
Après 24 heures d’incubation, verser 4 à 5
MATERIEL NECESSAIRE NON FOURNI gouttes de réactifs de Kovacs dans le tube de
(liste non exhaustive) milieu Urée-Indole ensemencé : la présence de
• Pipettes stériles (0,1 ml,…) l’indole est révélée par l’apparition d’une
• Tubes à hémolyses coloration rouge en surface.
• Etuve ou enceinte thermostatée avec une
précision de ± 1 °C Recherche de la T.D.A. :
• Tout matériel courant d’un laboratoire Après 24 heures d’incubation, verser dans un
tube de milieu Urée-Indole ensemencé et
PROTOCOLE réservé à cet effet du perchlorure de fer officinal
• Ensemencement et incubation dilué au 1/3 (100 µl pour 500 µl de milieu) :
Le milieu Urée-Indole permet de rechercher : - coloration brun-rouge: T.D.A. +
- coloration jaune orangé : T.D.A. –
• l’URÉASE
• la production d’INDOLE A partir des résultats obtenus, l’identification
• la TRYPTOPHANE-DESAMINASE (T.D.A.) peut être réalisée à l’aide du tableau I .

Distribuer stérilement de 0,25 à 0,50 ml de


milieu Urée-Indole dans des tubes à hémolyse, (Voir page suivante).
chacun d’eux devant servir à l’étude de
souches différentes et/ou à la réalisation de
différents tests :

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Urée-Indole/Bouillon

PRECAUTIONS D’EMPLOI
Uréase T.D.A Indole Respecter les Bonnes Pratiques de
Laboratoire.
Salmonella SE I en
- - -
général PERFORMANCES/CONTROLE QUALITE DU
S.typhi - - - TEST
Les performances culturales sont contrôlées à
S.paratyphi A - - - l’aide des souches suivantes :
S.arizona SE III - - -

Citrobacter + - - MICRO- Caractères observés


ORGANISMES en 24h à 37 °C
Edwardsiella - - +
Uréase T.D.A. Indole
Escherichia coli - - +
Escherichia coli
Alkalescens - - + - - +
ATCC 25922
S.dysenteria - - d Klebsiella
pneumoniae + - -
S.boydii, flexneri - - d
ATCC 13883
S.sonnei - - - Salmonella
Typhimurium - - -
Proteus vulgaris + + + ATCC 14028
Proteus mirabilis + + - Proteus vulgaris
+ + +
ATCC 13315
Proteus rettgeri + + +
Proteus mirabilis
Proteus morganii + + + + + -
ATCC 25933
Providencia - + +
Levinea - - + CONTROLE QUALITE DU FABRICANT
Tous les produits fabriqués et commercialisés
Y.enterocolitica + - d par la société Bio-Rad sont placés sous un
Y.pseudotuberculosis + - - système d'assurance qualité de la réception
des matières premières jusqu'à la
K.pneumomiae + lent - -
commercialisation des produits finis.
K.oxytoca + lent - + Chaque lot du produit fini fait l'objet d'un
contrôle de qualité et il n'est commercialisé que
E.aerogenes - - -
s'il est conforme aux critères d'acceptation.
K.ozonae d - -
La documentation relative à la production et au
K.rhinoscleromatis - - -
contrôle de chaque lot est conservée.
E.cloacae - - -
MOTS CLES
E.agglomerans - - -
Urée Indole / Entérobactéries / Test
Hafnia alvei - - - biochimique / Identification / Milieu.
Serratia marcescens - - -
et liquefaciens
V. parahaemolyticus - - +

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