Les protéines membranaires

Présenté par :
 Guers amina
 Cherifi sihem
 Hadreb Maya yasmine

L3 biochimie année: 2022/2023

1-Oganisation des membranes biologiques :
Il existe plusieurs membranes biologiques tels que la membrane plasmique,
membrane nucléaire, membrane mitochondriale, membrane lysosomiale ainsi de
suite.

A-Membrane plasmique :
Structure dynamique qui permet le passage de certaines substances chimiques tout
en assurant la stabilité du milieu intracellulaire.

B- Aspect au microscope photonique :

La membrane plasmique apparait comme une zone dense qui sépare le milieu
intracellulaire (cytoplasme) du milieu extracellulaire.

C-Aspect au microscope électronique a transmission  :

 Cette observation nécessite un procédé de préparation de l’échantillon.
 La membrane plasmique est constituée de 3 feuillets (2 feuillets sombres et
un feuillet clair).
 L’épaisseur du feuillet dense externe est due à un revêtement fibreux appelé
Glycocalyx ou Cell coat (ensemble de glycolipides et glycopeptides). Ce
dernier est responsable de l’asymétrie de la membrane plasmique.

 Les membranes biologiques sont doté d’une structure

tristratifiè d’où la notion d’unité membranaires.

D-Composition chimique :
D’après l’analyse chimique effectuer par électrophorèse ou chromatographie, la
membrane plasmique contient : 52% de Lipides.
40% de Protéines.
8% de Glucides.

E-Analyse chimique :
But : Déterminer les différentes protéines de la membrane plasmique.
On trouve :1-protéine bande III (transport membranaires notamment l’échange des
anions).
2-Spectrine (stabilité mécanique).
3-Glycophorine (stabilité et maintien des propriétés mécaniques).

2- Structure des protéines membranaires.

 Les protéines membranaires constituent 50% de poids sec de la membrane et
assurent une grande partie des fonctions de la cellule ; selon la façon dont elles se
dispose on distingue :

 A-Des protéines intrinsèques :

1-Protéines transmembranaires : Séquence d’environ 20 acides aminées
dans une configuration en hélice α ou cylindre β qui est rare ; peut traverser une
ou plusieurs fois la membrane.
2-Protéines ancrées : Ces protéines sont associées à des lipides
membranaires par des liaisons covalentes ; dans le feuillet interne soit à l’aide
des :
 Acide gras : acide myristique ou acide palmitique qui se lié à un ou
plusieurs acides aminés donnant des protéines Acylées .
 Alcool gras : l’isoprène se fixe généralement sur les résidus de cystéine
près de l’extrémité C terminale, la protéine dans ce cas est dite protéines
Prénylées.
Dans le feuillet externe c’est par une GPI glycosylphosphatidylinositol qui se fixe sur
le groupement carbonyle du coté C terminale de la protéine par des liaisons amide ;
elles sont des protéines Glypiées.

 Des protéines extrinsèque ou périphérique :

Elles se trouvent du coté extracellulaire ou cytosolique ; elles sont liées par des
liaisons faibles avec :
-La tête polaire des lipides membranaire.
-La région polaire des protéines intrinsèque.
Ces protéines peuvent être Glycosylées.

Propriétés des protéines membranaires.

 Les protéines membranaires sont asymétriques :

La partie Glycosylées et le pont disulfure sont du coté extracellulaire.

 Les protéines membranaires sont mobiles :

 Diffusion latéral.
 Diffusion par rotation.
Mais pas de flip-flop !
3-roles et procèdes d’isolement :
L'extraction des protéines membranaires est une étape prérequis pour leur étude en
solution, notamment leur caractérisation structurale par radiocristallographie, qui
implique de les maintenir en solution dans un état topologique identique à celui
qu'elles adoptent dans les membranes.

1-Choc osmotique : Cette méthode très douce peut être suffisante pour la lyse des
cellules en suspension sans utilisation de détergent. Souvent associée à une
fragmentation mécanique, cette méthode repose sur le passage d'un milieu à forte
pression osmotique à un milieu à faible pression osmotique. Elle convient bien aux
applications où le lysat doit ensuite être fractionné en composants subcellulaires.
2-Ultrasonication : Les cellules sont lysées par des ondes sonores à haute
fréquence produites par une sonde plongée dans l'échantillon. Ces ondes sonores
créent une zone de basse pression qui rompt les membranes cellulaires.
3-Marquage a la surface de la cellule : utilisant un kit qui implique le marquage de
protéines de surface cellulaire par la sulfo-NHS-biotine. Après marquage, les cellules
sont lysées et le lysat cellulaire est déposé sur une phase solide conjuguée à
l’avidine. Les protéines membranaires plasmiques biotinyléessont éluées en utilisant
un tampon d’élution dénaturant. En théorie, cette approche devrait produire des
protéines membranaires plasmiques.

Rôle des protéines membranaire :

1. Transport des substances : tels que
Les canaux ioniques :  sont des pores dans la membrane cellulaire qui permettent
le passage des ions par un transport passif

Les récepteurs canaux : sont des récepteurs pour neurotransmetteurs rapides comme
l'acétylcholine

2. Activité enzymatique :
Tel que le récepteur de l’insuline.
Ce récepteur est constitué de 4 peptides glycosylés reliés par des ponts
disulfures. Ils forment une glycoprotéine. On distingue deux paires de sous-
unités, deux sous-unités transmembranaires β ont une activité enzymatique
de protéine kinase, et deux sous-unités α sont à la surface de la membrane
cellulaire

3. La reconnaissance intercellulaire : telle que les molécules de CMH.