QCM 7 - Soient deux protéines Pe et Pf qui, lors de leur analyse en électrophorèse en

condition dénaturante puis dénaturante et réductrice, donnent les profils ci-

dessous :

Conditions dénaturantes conditions dénaturante et réductrices

A Les protéines Pe et Pf peuvent avoir le même poids moléculaire.
B La protéine Pf peut être monomérique.
C La protéine Pe peut être tétramérique.
D La protéine Pf possède au moins 2 cystéines.
E Si le poids moléculaire de Pe est de 600 kDa alors elle contient 30 chaînes
polypeptidiques.
F Toutes les propositions précédentes sont fausses.

Réponses : ACDE
A. Vrai.
Dans les conditions dénaturantes :
- Pe : 3 tailles de monomères 100, 80 et 40 KDa
- Pf : 1 taille de monomère 40 KDa.
Il faut combiner les monomères pour arriver au même PM.
Le PM minimum de Pe est 220 KDa et les PM possibles pour Pf sont des multiples de 40.
240 KDa ? impossible pour Pe
280 KDa ? impossible pour Pe
320 KDa ? possible
B. Faux : Dans les conditions DR, Pf a 2 tailles de chaines 40 et 20 KDa. Donc Pf a 2 types de
monomères de 40 KDa :
- Monomère à 1 chaine de 40 KDa
- Monomère à 2 chaines de 20 KDa.
Pf est au moins dimérique.
C. Vrai : Pe peut par exemple avoir 2 monomères de 100, 1
C C
monomère de 80 et 1 monomère de 40KDa
D. Vrai : Selon l’item B, Pf a au moins 2 monomères dont un avec 20 20 40
deux chaines. Donc Pf a au moins 1 pont disulfure et au moins 40 40
2 cystéines.
E. Vrai.
En condition dénaturante et réductrice, Pe : 1 seule taille de chaine = 20 kDa. Chaque
monomère n’a que des chaines de 20 kDa
- Monomère de 100 kDa : 5 chaines
- Monomère de 80 kDa : 4 chaines
- Monomère de 40 kDa : 2 chaines
Donc le PM est un multiple de 20
Si Pe a un PM de 600 kDa, alors elle a 30 chaines car 30x20 = 600 kDa
QCM 8 – Une protéine a un poids moléculaire de 600 kDa. En électrophorèse
dénaturante non réductrice on retrouve deux bandes à 150 kDa et 50 kDa et en
présence additionnelle d’un agent réducteur, on retrouve 3 bandes à 150 kDa, 100
kDa, et 25 kDa.
A Elle possède 5 sous-unités.
B Elle possède au maximum 6 chaines polypeptidiques.
C En conditions dénaturantes, sa structure quaternaire peut être détruite.
D L’ajout de SDS permet d’en séparer toutes les chaines peptidiques constitutives.
E Il peut s’agir d’une hétéroprotéine.
F Toutes les propositions précédentes sont fausses.

Réponses : CE
A. Faux :
PM total = 600 kDa
Condition dénaturante : 2 types de monomères = 150 kDa et 50 kDa
600 = 3x 150 + 3x50  6 monomères
600 = 2x 150 + 6x50  8 monomères
La protéine a au moins 6 monomères.
B. Faux :
Condition DR : 3 types de chaines = 150, 100, 25
1 monomère de 50 kDa = 2 chaines de 25
1 monomère de 150 kDa = 1 chaine (150) ou 3 chaines (100 + 2 x 25). Au moins 2 types de
monomères de 150 kDa

La protéine peut posséder plus de 6 chaines

Exemple :
150 150
100
25 25 25 25 25 25 25 25

150 150 150 50 50 50

Elle possède 11 chaines ici.
C. Vrai. Le SDS casse la structure quaternaire, il sépare les monomères.
D. Faux : le SDS sépare les monomères.
E. Vrai.
PM = 600 kDa
La protéine a au minimum 3 monomères :
- 1 monomère de 150 composé d’une chaine de 150
- 1 monomère de 150 composé d’une chaine de 100 et de deux chaines de 25
- 1 monomère de 50 composé de deux chaines de 25
Donc les acides aminés représentent au minimum 150 + 150 + 50 = 350 kDa
Le reste peut être d’une autre nature (sucres, lipides ….)
Elle peut être une hétéroprotéine.