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Laura Melet Résumé. Une analyse de risque, comprenant une vérification de méthode, ainsi
Christine Chaigneau qu’une étude de la pertinence des alarmes morphologiques déclenchées par
Magali Lefevre-Pettazzoni l’automate, ont été réalisées pour l’automate d’hématologie Advia® 2120i (Sie-
mens). La répétabilité, la fidélité intermédiaire, la contamination, la linéarité,
Laboratoire de biologie médicale,
Groupe hospitalier public du Sud la comparaison inter-automate, la justesse et l’approche de l’incertitude sont
de l’Oise, France conformes aux résultats attendus (selon Ricos). Grâce à l’étude rétrospective
<magali.lefevre@ch-creil.fr> des alarmes morphologiques déclenchées par l’automate et en s’inspirant des
recommandations de l’ISLH, une nouvelle attitude concernant la relecture des
frottis sanguins au microscope a été instaurée. Une sous-estimation du chiffre
de plaquettes prélevées sur sang total citraté a également été constatée malgré
le facteur de correction de 1,1, par rapport à l’EDTA, nécessitant probablement
de redéfinir des valeurs normales spécifiques pour cet anticoagulant.
Mots clés : hématologie, Advia 2120® , analyse de risque, accréditation
Abstract. A risk analysis, with method validation, and a study of the rele-
vance of morphological alarms triggered by the automat have been made to
the automat Advia® 2120i (Siemens). The analytical performance of the sys-
tems: repeatability, fidelity, contamination, linearity, correlation, the accuracy
and approach to uncertainty, are compliant with the expected results (Ricos).
Thanks to the retrospective study of morphological alarms triggered by the auto-
mat and based on the recommendations of the ISLH, a new attitude about blood
smear was introduced. For platelets in citrate, a slight underestimation of the
number compared to those collected in EDTA was observed probably need to
redefine normal platelet values citrate.
Article reçu le 05 juillet 2013,
accepté le 18 juillet 2013 Key words: haematology, Advia 2120® , risk analysis, accreditation
Faisant suite à la loi Hôpital patient santé et territoire en 2016, 100 % en 2020. L’accréditation a pour objec-
(HPST) du 22 juillet 2009, l’ordonnance n◦ 2010-49 rela- tif de garantir la fiabilité des examens et la qualité de la
tive à la biologie médicale est parue le 13 janvier 2010, prestation médicale offerte par le laboratoire. Pour cela
et la loi en découlant le 31 mai 2013. Elle comprend deux chaque laboratoire doit répondre aux exigences de la norme
mesures phares pour la biologie médicale : la médicalisation NF EN ISO 15189 [1] celle-ci traitant des exigences du
de la biologie et l’accréditation des laboratoires d’analyse système de management et des exigences techniques. Elle
médicale, les laboratoires devront avoir fourni leur preuve impose notamment de vérifier que le matériel soit capable
doi:10.1684/abc.2013.0893
d’entrée effective dans la démarche d’accréditation pour le d’atteindre les performances requises, et qu’il soit conforme
31 mai 2013, et accrédité 50 % des examens par famille aux spécifications que le laboratoire s’est fixé se rapportant
aux analyses concernées (chapitre 5 : Pour chaque automate
ou technique utilisée une validation ou une vérification de
Tirés à part : M. Lefevre-Pettazzoni méthode doit être réalisée »).
Pour citer cet article : Melet L, Chaigneau C, Lefevre-Pettazzoni M. Étude des performances analytiques d’un automate d’hématologie (Advia® 2120 i Siemens) et apport
sur la pratique quotidienne. Ann Biol Clin 2013 ; 71(6) : 679-91 doi:10.1684/abc.2013.0893 679
Article original
Le Groupe hospitalier public du Sud de l’Oise (GHPSO complexité et densité nucléaire. La diffraction de la lumière
- fusion des centres hospitaliers de Creil et Senlis) pos- laser va se faire selon un petit angle (2-3◦ ) qui permet de
sède sur son site de Creil 450 lits en médecine chirurgie et mettre en évidence la taille de la cellule et selon un grand
obstétrique. Toutes les spécialités y sont représentées, avec angle (5-15◦ ) mettant en évidence la morphologie nucléaire.
notamment un hôpital de semaine d’onco-hématologie et Ce canal permet de calculer le nombre de GB, le pourcen-
un hôpital de jour. Le laboratoire du site de Creil réalise tage de PNB, le pourcentage de blastes, le pourcentage de
environ 250 numérations formules sanguins (NFS) par jour, cellules mononucléées (lymphocytes et monocytes) et celui
dont 25 % ont été revues au microscope en 2012. Dans le de cellules avec noyaux polylobés (PNN et PNE). Dans le
cadre de la mise en place de la démarche d’accréditation canal hémoglobine, il y a une réaction d’oxydoréduction
pour la portée hématocytologie « Numérations formules du fer héminique préalablement libéré des GR, qui ont
sanguines automatisées », une analyse de risque a été réa- été lysés puis combinaison avec un ion hydrogène et une
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lisée, comprenant une validation de méthode de l’Advia® molécule d’eau comme ligand axial, pour former le pro-
2120i (Siemens) selon le SH GTA 04 [2] avant mise en rou- duit de réaction (hydroxyferriporphyrine monohydrate). Le
tine. Une étude de la performance des alarmes qualitatives photomètre mesure l’absorbance de la solution à 546 nm
de l’automate l’Advia® 2120i (Siemens) a été également et fait correspondre la concentration en hémoglobine de
réalisée, alarmes desquelles découle la mise en relecture au l’échantillon. Dans le canal érythrocytes et plaquettes, la
microscope des frottis sanguins. L’apport de ce travail de sphérisation isovolumétrique permet d’appliquer la loi de
validation sur la pratique quotidienne au laboratoire a été Mie, qui étudie la diffraction de lumière pour les sphères
évalué. homogènes en petit angle et en grand angle. C’est une ana-
lyse en 2 dimensions qui permet d’analyser le volume et
l’indice de réfraction grâce à la mesure des 2 angles de
diffraction. Chaque angle correspondant respectivement au
Matériels et méthodes volume et au contenu des sphères homogènes : obtention
du nombre de plaquettes (volume entre 1-60 fL et indice
Description de l’instrument [3, 4] de réfraction entre 1,35 et 1,40) et de GR (volume entre
Les appareils Advia® 2120 et 2120i sont des automates 1-180 fL et indice de réfraction 1,38 et 1,44).
commercialisés par Siemens Healthcare Diagnostics. Ces Dans le canal réticulocytes, il y a une coloration des
automates permettent de réaliser les NFS et le dosage des acides ribonucléiques cytoplasmiques des réticulocytes,
réticulocytes, à une cadence de 120 NFS par heure. Il est puis mesure de la diffraction de la lumière et de l’absorption
couplé, au laboratoire site de Creil, à un autoslide réali- provoquée par chaque cellule (les réticulocytes colorés
sant les frottis sanguins colorés au May Grünwald Giemsa absorbent plus de lumière que les GR matures). Les signaux
(MGG). L’Advia® 2120i est un cymomètre de flux qui uti- recueillis permettent d’établir un cytogramme où est repré-
lise 5 canaux d’analyse : un canal pour l’hémoglobine (Hb), sentée en ordonnée la diffraction en fonction de la taille et
un pour les érythrocytes (GR) et plaquettes, deux pour les en abscisse l’absorption en fonction de la quantité d’ARN.
globules blancs (GB) : canal peroxydase et canal Baso, et Ce canal permet de mesurer la répartition de la population
un pour les réticulocytes. des réticulocytes en fonction de leur teneur en ARN, c’est-
Les GB sont analysés selon deux modes : par la méthode à-dire l’intensité de la coloration (L Retic %, M Retic %,
de la peroxydase et par la méthode de la densité nucléaire. H Retic %) ainsi que la teneur en hémoglobine des réticu-
La méthode peroxydasique est une technique colorimé- locytes (CHr). Ce paramètre est un outil précieux dans le
trique qui met en évidence l’activité peroxydasique dans suivi des traitements des insuffisants rénaux chroniques [5].
le cytoplasme de la cellule en fonction de la taille de la Les paramètres calculés à partir de ces canaux sont :
cellule. Cette méthode permet de mesurer le nombre de CCMH (g/dL) TGMH (pg) hématocrite (%) Chr (pg), les
GB, le pourcentage de polynucléaires neutrophiles (PNN), paramètres mesurés sont : globules rouges (T/L) hémo-
de polynucléaires éosinophiles (PNE), lymphocytes, mono- globine (g/L) VGM (fL) CHCM (g/dL) plaquettes (G/L)
cytes, des large unstained cells (LUC), qui sont des grandes globules blancs (G/L) polynucléaires neutrophiles (%)
cellules dépourvues d’activité peroxydasique et les érythro- polynucléaires éosinophiles (%) polynucléaires basophiles
blastes. Le canal Baso est la numération de référence pour (%) lymphocytes (%) monocytes (%) réticulocytes (%).
les GB. Le réactif Baso mis au contact de l’échantillon
sanguin dans une cuve chauffée à 33 ◦ C lyse les globules
Analyse de risque
rouges, les plaquettes et le cytoplasme des leucocytes, à
l’exception des polynucléaires basophiles (PNB) qui res- Une analyse de risque a été réalisée basée sur le SH Form 43
tent intacts. Les noyaux sont acheminés vers la cuve optique [6] et sur la méthode des 5M. Elle comprend la validation
où ils vont être classés en fonction de leur forme, de leur des méthodes. Pour effectuer la validation de méthodes :
Tableau 1. Correspondance entre les croix et le pourcentage de La présence de l’alarme Blast IG ou LUC est considérée
cellules détectées. comme vrai positif si sont détectées au moins 1 % de cellules
anormales sur un compte de 200 et comme faux positif si
Alarmes morphologiques + ++ +++ aucune cellule n’est détectée.
Blast 1,5 % 5% 10 %
L’alarme érythroblaste EB se déclenche lorsque les GB sont
Atyp 4,5 % 7,5 % 10 %
supérieurs à 3 G/L et un pourcentage d’érythroblastes supé-
IG 5% 7,5 % 10 %
rieur ou égal à 2 % soit 0,6 G/L ou dès que le nombre
d’érythroblastes est supérieur à 0,2 G/L. Sont considérés :
sans alarmes avec absence de cellules anormales sur le frot- - vrai positif : une présence d’érythroblaste au microscope
tis + total des alarmes avec absence de cellules anormales supérieure ou égale à 2 % avec l’alarme érythroblaste ;
sur le frottis)×100. - faux positif : un décompte au microscope inférieur à 2 %
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Tableau 2. Table de Rümke. Variation des valeurs relatives d’une population leucocytaire selon le nombre de cellules comptées.
citratés avec une correction de résultat de + 10 % (pour tenir Analyse de la performance des alarmes
compte de l’hémodilution liée au citrate). Pour vérifier que morphologiques déclenchées par l’automate
les résultats concordent et que le décompte des plaquettes Étude de l’alarme blaste
n’est pas influencé par le type d’anticoagulant choisi : 42
Quarante-huit cas sur les 319 formules étudiées ont une
patients ont été prélevés sur un tube EDTA et un tube citraté
alarme blaste (+, ++ ou +++) pour 1 300 NFS soit
dans le but de mesurer les plaquettes. La comparaison des
3,7 % des NFS et 15 % des causes de relecture de frot-
résultats est réalisée par les limites de suivi et par l’étude
tis annuelles. Quarante-deux cas d’alarmes Blast + sont
de l’équation de la droite de régression.
associés à l’alarme Atyp ce qui est cohérent car Atyp (+)
correspond à 1,5 % de LUC, et lorsque l’alarme blaste est
entre 1,5 et 4,5 %, celle-ci ne se déclenche que si Atyp (+).
Résultats
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Tableau 3. Maîtrise des risques de la numération formule sanguine (NFS) automatisée et manuelle.
Tableau 3. (Suite)
Tableau 3. (Suite)
57 0,9 58 0,95
Hb CV Ricos CV Ricos
115 1,26 Conforme 118 0,96 Conforme
(g/L) minimal : 1,6 acceptable 1,4
164 0,92 170 1,11
85 4,06 84 4,26
Plq CV Ricos CV Ricos
241 1,78 Conforme 247 4,44 Conforme
(G/L) minimal : 5,1 acceptable 4,6
489 0,92 503 3,50
74,2 0,22 71,6 0,58
VGM CV Ricos CV Ricos
80,3 0,20 Conforme 79,3 0,54 Conforme
(fL) minimal : 0,7 acceptable 0,7
89,5 0,14 89,3 0,4
30,9 0,13 31,2 0,99
CHCM CV Ricos CV Ricos
32 0,16 Conforme 32,5 0,65 Conforme
(x10 g/L) acceptable : 0,6 minimal 1,3
33,3 0 33,9 0,54
165 2,25 178 4,91
Réticulocytes Conforme Conforme sur 2
CV Ricos CV Ricos
(G/L) 140 3,1 sur 2 niveaux 162 4,98 niveaux
minimal : 6,2 minimal 8,3
(bas et moyen) (bas et moyen)
27 11,80 30 17,88
1,62 2,09 2 4,54
PNN CV Ricos CV Ricos
3,84 2,62 Conforme 3,75 5,01 Conforme
acceptable : 6 acceptable 8,1
11,38 2,13 11,38 2,13
1,21 2,35 1,15 4,38
Lymphocytes CV Ricos CV Ricos
2,17 2,45 Conforme 2,07 4,11 Conforme
minimal : 5,9 acceptable 5,2
2,85 4,02 2,74 3,8
0,26 7,9 0,27 11,07
Monocytes CV Ricos CV Ricos
0,57 5,21 Conforme 0,59 12,43 Conforme
minimal : 10 minimal 13,4
1,2 5,47 1,4 7,56
0,07 15,56 0,06 16,98
Conforme Conforme sur 2
PNE CV Ricos CV Ricos
0,13 9,91 sur 2 niveaux 0,13 11,74 niveaux
minimal : 11,8 minimal 15,8
(moyen et haut) (moyen et haut)
0,37 6,63 0,31 8,44
moyenne (soit 0,025 à 225,6 G/L). Les étiologies des jours consécutifs, 2 patients 2 jours différents. Nous obte-
vrais positifs pour l’alarme Blast sont présentées dans le nons en moyenne : 0,11 G/L de blastes avec une anémie
tableau 6. réfractaire avec excès de blastes (Areb) acutisée, une leu-
cémie aiguë myéloide (LAM) en stade terminal et un patient
Faux négatifs de l’alarme blaste Blast pancytopénique suivi pour une pneumopathie bilatérale et
En ce qui concerne les blastes observés au microscope une insuffisance rénale chronique. Les autres avaient au
mais sans alarme Blast déclenchée par l’Advia® : 16 échan- moins 5 G/L de GB et étaient hospitalisés pour : syn-
tillons sanguins sont concernés avec en moyenne 2 % de drome infectieux sur hépatopopathie, cirrhose alcoolique et
blastes : 7 dossiers ont moins de 3 G/L de GB : 1 patient 5 décompensation œdomato ascitique, insuffisance cardiaque
et séjour en réanimation suivie d’une candidose dissémi- trophiles se retrouvent au niveau de la zone des LUC), des
née et surinfection bactérienne et d’un décès 15 jours plus syndromes lymphoprolifératifs ont également été observés.
tard, d’un patient suivi pour thrombocytémie essentielle, Pour les faux négatifs, la majorité des alarmes est avec une
d’un suivi de cancer du sein adénocarcino mucineux et ils intensité d’une croix (41 cas sur 46 faux positifs soit 89 %
avaient tous des cellules immatures circulantes. Pour tous des faux positifs), et dans 51 % des cas de déclenchement
les cas de faux négatifs, les cellules immatures ont été détec- d’alarme toute intensité confondue, et dans 2/3 des cas si
tées au microscope car d’autres alarmes étaient déclenchées l’on considère l’intensité (+) (tableau 7). Si l’on considère
nécessitant donc de faire un frottis sanguin et une formule l’alarme Atyp (++) et (+++) elles ne présentent de faux
manuelle. positifs que dans 23 % des cas (5 cas sur 21).
La sensibilité de cette alarme Atyp est de 83 %, la spécificité
Pour l’alarme atypique Atyp de 83 % et l’efficacité de 83 %.
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- myélémie de régénération 6 4 10
- autres 2
du prélèvement (caillots, microcaillots) et à la formation du Cela permet donc de ne plus recompter les plaquettes en cel-
personnel pour les techniques automatisées et manuelles lule (sachant qu’en 2012, nous avions 60 dossiers avec des
(formules), des commentaires standardisés ont été mis en plaquettes inférieures à 10 G/L ayant nécessité un comptage
place pour les anomalies morphologiques et les anomalies en cellule). La linéarité basse des réticulocytes est relative-
quantitatives. La validation de méthode, bien que longue, ment haute de l’ordre de 20 G/L mais en % ceci correspond
doit se faire avant passage en routine. L’apport de cette à une valeur de 0,79 %. En deçà de ces valeurs, les réti-
validation est clairement démontré dans notre travail. Lors culocytes seront comptés en manuel au bleu de crésyl. Le
de l’installation de l’automate au laboratoire qui est un pourcentage de patients concernés par an par ce décompte
automate reconditionné, les tests fournisseurs étaient tous manuel est de 11 %, soit 1 130 par an sur 9 914 demandes de
conformes selon les critères fournisseurs (répétabilité sur 5 réticulocytes. La justesse initiale est correcte excepté pour
passages. . .). Cependant la vérification de méthode a mis l’hémoglobine : calibration Setpoint Optipoint et réglage
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en évidence un problème de répétabilité et de fidélité inter- du laser ont été effectués : le biais sur l’hémoglobine a pu
médiaire sur le paramètre réticulocyte et un problème de être rapidement corrigé. Les résultats de contrôles internes
justesse sur l’hémoglobine ayant nécessité un réglage du externalisés CIL ont eux aussi été suivis au long cours
laser. La méthode d’analyse des numérations et formules et ont montré les corrections attendues. La vérification de
sanguines par l’automate Advia® 2120 i est globalement l’absence de contamination inter-échantillon nous permet
satisfaisante pour la vérification initiale pour les paramètres de passer de manière aléatoire sur un même automate les
mesurés selon le SH GTA 04 [2]. En effet, les objectifs de patients pancytopéniques et hyper leucocytaires, les bébés
répétabilité, de fidélité intermédiaire sont atteints hormis avec une hémoglobine élevée et les patients anémiques,
pour les PNB, ce qui peut être expliqué car c’est un évè- les thrombocytoses, et les thrombopéniques sévères. Une
nement rare, de plus il est sans incidence clinique sur les approche de l’incertitude de mesure a été réalisée, basée
résultats patients. Pour les réticulocytes, la répétabilité, la sur les références internationales ; elle n’est pas exploitée
fidélité intermédiaire qui étaient validés sur 2 niveaux sur en routine sur les comptes rendus mais permet d’ajuster
3 ont été suivis par les CIL suite au réglage du laser et l’attitude thérapeutique d’un médecin lorsque les résultats
étaient par la suite conformes. L’organisation du labora- sont à la limite de la valeur pathologique. Un suivi au long
toire est telle que les NFS sont passées de manière aléatoire cours de l’incertitude de manière annuelle est réalisé.
l’un ou l’autre des Advia® . Cette organisation est vali- Concernant l’analyse des alarmes morphologiques, il nous
dée par la comparaison inter automate qui est correcte. Un a paru important d’évaluer la performance des alarmes
contrôle de suivi de comparaison est réalisé de manière morphologiques déclenchées par l’automate puisqu’elle
journalière selon les normes de suivi déterminées lors de conditionne notre attitude de relecture au microscope : notre
la vérification initiale sur une NFS patient. Les données taux de relecture étant élevé (25 % des NFS en 2012). Pour
sont exploitées sous la forme du graphe de Levey Jen- l’alarme Blast, il a été montré que cette alarme est d’autant
nings. Ainsi la vérification initiale nous permet par la suite plus performante lorsque le chiffre de GB est élevé, supé-
d’exploiter les résultats de corrélations au long court selon rieur à 5 G/L, et que ce sont des blastes myéloïdes. Elle a
les critères d’acceptations basés sur les performances des une pauvre spécificité chez l’enfant de moins de 24 mois.
systèmes de notre laboratoire. Concernant la linéarité, les L’intensité de l’alarme est bien corrélée avec le pourcentage
spécifications fournisseurs ont nécessité d’être vérifiées : microscope ((+) = 3 %, (++) = 8,5 % et (+++) = 33,8 %). La
les linéarités basses sont excellentes pour les leucocytes : littérature donne des résultats équivalents pour la sensibilité
les leucocytes inférieurs à 0,08 G/L sont rendus < 0,08 G/L, et meilleure pour la spécificité (sensibilité : 94,8 % et spé-
la linéarité basse est conforme aux valeurs cliniques atten- cificité : 93,5 %) [13], de ce fait les patients avec l’alarme
dues notamment les sorties d’aplasie. Au laboratoire, les Blast + isolée et déjà relus au microscope dans le mois
formules sanguines dont les GB sont inférieurs à 0,5 G/L qui précède sans variation quantitative, ne sont plus relus.
ne sont pas rendues pour les patients sous chimiothérapie Cependant les enfants de moins de 24 mois sont toujours
du fait de la rareté des évènements comptabilisés, seuls les relus au microscope car l’alarme Blast est souvent associée
PNN sont validés (du décompte sur automate). La linéarité à d’autres alarmes (EB, Atyp, IG). Concernant l’alarme aty-
basse des plaquettes est très satisfaisante permettant non pique, notre travail a montré que cette alarme apparaît dans
seulement de valider les seuils transfusionnels (50 G/L avec plus de 50 % des cas comme un faux positif à l’intensité (+).
une incertitude de 17,5 % soit 50+/- 8,75 G/L, le seuil étant Elle est également retrouvée dans les syndromes lympho-
donc de 41 à 59 G/L), mais aussi permettant le suivi des prolifératifs, les lymphomes leucémisés, les plasmocytoses
purpuras thrombopéniques auto-immuns de manière fiable sanguines, les syndromes mononucléosiques. De ce fait
dans les valeurs basses. La linéarité répond aux besoins les patients connus dans le mois précédent sans variation
du laboratoire et a permis de valider les plaquettes jusqu’à quantitative ne seront plus relus au microscope, ce qui est
3 G/L et les résultats inférieurs à 3 G/L sont rendus < 3 G/L. recommandé dans l’ISH [14]. La littérature [13] donne des
résultats comparables pour la sensibilité et meilleure pour mis d’ajuster les critères de relecture de lame en fonction
la spécificité avec un autre automate (Se : 80,6 % et Sp : de notre recrutement afin d’optimiser le temps de relecture
92,2 %). Concernant l’alarme myélémie, la présence est au microscope. D’autres études restent à réaliser notam-
bien corrélée avec les décomptes de granuleux immatures ment pour déterminer les valeurs normales des plaquettes
excepté dans les cas de PNN hypo segmentés. La littéra- sur citrate et l’éventuel facteur de correction à apporter.
ture donne des résultats différents sur d’autres automates
(Se : 85 % et Sp : 90,7 %) [13]. Concernant l’alarme éry- Liens d’intérêts : aucun.
throblaste, la détection est mauvaise, les enfants de moins
de 24 mois sont relus systématiquement au microscope. La
littérature [15] donne un résultat pour la sensibilité équi- Références
valent (77,3 %) mais moins bon pour la spécificité (74,6 %). 1. Norme NF EN ISO 15189 : 2007 Laboratoires d’analyses de biologie
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Concernant l’alarme agrégats plaquettaires, la spécificité médicale – Exigences particulières concernant la qualité et la compétence.
est très bonne (Sp = 96 %), cependant un certain nombre Afnor, 2007.
d’amas ne sont pas détectés par l’automate et ne le sont 2. Cofrac SH GTA 04 (guide technique d’accréditation de vérification
qu’au microscope (Se = 74 %). Ainsi pour toute thrombo- (portée A) /validation (portée B) des méthodes en biologie médicale SH
GTA 04 révision 00 – avril 2011.
pénie sans antériorité de vérification de moins d’un mois, ou
grande variation du chiffre plaquettaire, il n’est pas possible 3. Guide de l’opérateur du système d’hématologie Advia (R) 2120 :
Méthode NG V1.00.00, Copyright ©2003.
de se passer d’une vérification microscopique du frottis à
la recherche à l’objectif 10 puis 50, d’amas plaquettaires. 4. Harris N, Kunicka J, Kratzl A. The Advia® 2120 hematology system :
flow cytometry–based analysis of blood and body fluids in the routine
La conduite à tenir n’a donc pas été modifiée par rapport hematology laboratory. Laboratory Hematology 2005 ; 11 : 47-61.
à la pratique antérieure à notre étude. En 2012, le taux de
5. Fishbane S, Shapiro W, Dutka P, Valenzuela OF, Fubert J. A rando-
relecture de lame était de 25 %, ce qui est élevé, nous avons mized trial of iron deficiency testing strategies inhemodialysis patients.
donc mis en place ces nouvelles conduites de relecture de Kidney Int 2001 ; 60 : 2406-11.
lame pour abaisser ce pourcentage. 6. Cofrac SH FORM 43 : fiche type quantitatif - Vérification (portée A)
Pour ce qui concerne la numération des plaquettes sur /Validation (portée B) d’une méthode de biologie médicale. Révision :
citrate, il a été montré que les résultats sont bien corrélés #00-04/2011.
en proportion avec un biais négatif par rapport à l’EDTA, 7. http://www.westgard.com/biodatabase1.htm.
même en appliquant le facteur correctif de +10 % lié à la 8. Cofrac SH GTA 14 : guide technique d’accréditation pour l’évaluation
dilution sur citrate, ce qui est retrouvé dans la littérature des incertitudes de mesure en biologie médicale SH GTA 14 Révision 00.
[16]. Une des conditions requises pour cette numération est 9. Geneviève F, Godon A, Macchi L, Zandecki M. Anomalies et erreurs
que le tube soit correctement rempli, à plus de 80-90 % du de détermination de l’hémogramme avec les automates d’hématologie
volume selon les mêmes critères que pour l’hémostase. Une cellulaire : partie 1 : les plaquettes sanguines. Ann Biol Clin 2010 ; 68 : 93-
407.
plus large étude semble nécessaire afin de déterminer des
valeurs normales sur citrate pour la numération plaquettaire. 10. Geneviève F, Godon A, Marteau-Tessier A, Zandecki M. Anoma-
lies et erreurs de détermination de l’hémogramme avec les automates
d’hématologie cellulaire : Partie 2 : numération et formule leucocytaire.
Ann Biol Clin 2012 ; 70 : 141-54.
Conclusion
11. Geneviève F, Godon A, Marteau-Tessier A, Zandecki M. Synthèse
Anomalies et erreurs de détermination de l’hémogramme avec les auto-
L’apport de la validation de méthode est clairement démon- mates d’hématologie cellulaire Partie 3. Hémoglobine, hématies, indices
tré dans notre travail pour la pratique quotidienne : elle érythrocytaires, réticulocytes. Ann Biol Clin 2012 ; 70 : 155-68.
permet de réaliser ou réajuster les réglages avant passage 12. Vassault A, Grafmeyer D, de Graeve J, Cohen R, Beaudonnet A,
en routine, de déterminer les limites de suivi utiles pour Bienvenu J. Quality specifications and allowable limits for validation of
les comparaisons inter automates journalières, de détermi- methods used in clinical biochemistry. Ann Biol Clin 1999 ; 57 : 685-95.
ner des seuils de linéarité au-deçà desquels les résultats ne 13. Amouroux I, Balay M, Marfaing-Koka A. Evaluation de l’analyseur
sont plus fiables, et enfin elle permet de réduire le travail d’hématologie Beckman Coulter LH 750 : performances analytiques,
règles de décision. Ann Biol Clin 2003 ; 61 : 576-84.
inutile (réduction du comptage des plaquettes en cellule
et des réticulocytes en manuel, réduction du nombre de 14. http://www.islh.org/web/consensus_rules.php.
frottis) et d’avoir une approche de l’incertitude de mesure 15. Kratz A, Maloum K, O’Malley C, Zini G, Rocco V, Zelmanovic
autour des résultats seuils (seuil transfusionnel pour les pla- D, Kling G. Enumeration of nucleated red blood cells with the Advia®
2120 hematology system : an international multicenter clinical trial. Lab
quettes, l’hémoglobine). La validation au long cours est Hematol 2006 ; 12 : 63-70.
réalisée avec les CIL mensuels comparée aux CV Ricos
16. Védy S, Boom B, Perez P, Schillinger S, Ragot C, Bakkouch S, et al.
et la détermination annuelle de l’incertitude de mesure via Numération automatique des plaquettes sur citrate de sodium : le résultat
les EEQ. L’étude des alarmes morphologiques nous a per- est-il exact ? Ann Biol Clin 2011 ; 69 : 453-8.