Année 2015-2016

20 novembre 2015
Master 1 – Chim 402

Fonctionnalisations organiques
(durée 1h00)

Toutes les réponses doivent être justifiées.

L’usage du crayon à papier est interdit.
Une présentation et une rédaction correctes ne sont pas une option !
Le barème est donné à titre indicatif.

Question de cours (4,5 pts)

En vous basant sur la définition et les principes énoncés par K. B. Sharplesse en 2001 :

- donner trois critères permettant de caractériser une réaction de chimie « Click »

- donner, pour chacun de ces trois critères, un exemple de réaction qui l’exemplifie

Exercice 1 : chimie click et conjugaison ( 7 pts)

La subtilisine (SBL) est une protéase à sérine qui catalyse l’hydrolyse des protéines de
façon non spécifique. Afin d’utiliser cette propriété, nous souhaitons fixer cette enzyme
sur de la silice via une stratégie de conjugaison par cycloaddition azoture-alcyne.
Pour cela, une subtilisine mutante, comportant un seul résidu cystéine a pu être purifié
en assez grande quantité est à pu être propargylée au niveau de la fonction thiol de cette
cystéine :

Cl

5% DMF, 37 °C, 30 min

tampon phosphate, 50 mM
pH 8
conversion > 95 %

1. La silice a été modifiée selon le schéma réactionnel suivant :

OH
HO OH MeO NaN 3, 2
Si O CuSO4 5H2O 2,5 mol%
Me 3SiO OSiMe3 CH 3ReO 3 0,5 mol% ascorbate de
MeO OMe 3 H 2O 5 mol%
HO SiO2 OH + sodium 30 mol%
pyridine 1 mol%
4 5 6
HO OH
Toluène, reflux, 12 h CH2Cl2, 25 °C tBuOH : H 2O
OH 1:1
1
Donner la structure des composés 4 et 5.

2. Expliquez la cascade réactionnelle menant du composé 5 au composé 6 ?

3. Lorsque l’azoture de sodium réagit sur 5, de quelle type de réaction s’agit-il ?
Quelle est la régiosélectivité de cette réaction ?
4. Quel est la structure du produit final 6 ? Quelle est la régiosélectivité du lien
formé et pourquoi ?
5. Rappeler l’utilité de l’ascorbate de sodium dans cette réaction de cycloaddition.
6. La présence de sels de cuivre peut conduire à la dénaturation de la structure de la
protéine. Comment éviter d’utiliser des sels de cuivre dans une stratégie de
cycloaddition azoture-alcyne ? Donner une structure de l’alcyne à utiliser.

Exercice 2 : stratégie de synthèse peptidique ( 8,5 pts)

On se propose de synthétiser les peptides A et B :

On dispose des acides aminés glycine et L-valine ainsi que des analogues N-protégés par
les groupements Fmoc et Boc.

Les réactifs suivants sont utilisés dans les étapes de protection, de déprotection et de
couplage peptidique :

1. Pourquoi la glycine ne peut être utilisée directement sur la Fmoc-L-valine ? Pour

justifier votre réponse, vous préciserez les différents produits qui pourraient se
former dans ces conditions.
2. Proposer un schéma synthétique, en un minimum d’étapes, qui permettent de
créer un lien peptide au départ de la Fmoc-L-valine et de la glycine. Vous
préciserez les réactifs utilisées lors de toutes les réactions de protection,
déprotection et couplage. Forme-t-on le peptide A ou le peptide B ?
3. On peut préparer ce même peptide à partir de la Boc-L-valine. Quels sont les
avantages et/ou inconvénients d’utilisation de ce composé à la place de la Fmoc-
L-valine ?
4. En tenant compte des questions précédentes, proposer un schéma synthétique
permettant de préparer le peptide non formé dans les questions précédentes.