UNIVERSITY ABDOU MOUMOUNI OF NIAMEY

FACULTY OF SCIENCES AND TECHNICS

DEPARTEMENT OF BIOLOGIE
WEST AFRICAN CENTER FOR SUSTAINABLE RURAL
TRANSFORMATION

Thème
ÉTAT DES LIEUX DE LA CUTRE IN VITRO DE
MANIHOT ESCULENTA:(Problèmes, causes,
conséquences, défis et perspectives avec
étude de cas).

Présenté par:
 IDRISSA DJABIRI Roukiyatou
 GADO KARIMOU Mahamadou
 KONATE ISSOUF
 COULIBALY Modibo
 TAHIROU MOUSSA HAMA

Chargé du cours:
Dr MAHAMADOU ADAMOU Nassirou
Academic year 2022-2023

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Table of Contents
Introduction générale..................................................................................................................................1
I. LES PROBLEMES LIES A LA CULTURE IN VITRO DU MANIOC............................................................1
1.1. Les Contaminations microbiennes...............................................................................................1
1.2. Les maladies : la mosaïque Africaine...........................................................................................2
1.3. Type de multiplication inefficace.................................................................................................2
1.4. Les Difficultés d’acclimatation des plantules...............................................................................2
II. Les Causes de la culture in-vitro du manioc.........................................................................................2
2.1. L’amélioration génétique.............................................................................................................2
2.2. La conservation de la diversité génétique...................................................................................2
2.3. Production de plants sains...........................................................................................................3
III. Conséquences de la culture in vitro du manioc...............................................................................3
3.1. Conséquence des attaques bactériennes : chutes de rendement en tubercules.........................3
3.2. Des pertes de récolte...................................................................................................................3
IV. LES DEFIS DE LA CULTURE IN VITRO DU MANIOC............................................................................3
4.1. Le défis de contamination............................................................................................................3
4.2. Le défis de l’acclimatation des plants..........................................................................................3
V. LES PESPECTIVES..................................................................................................................................4
5.1. L’utilisation des organismes génétiquement modifiés (OGM) du manioc comme perspective a
la production du manioc..........................................................................................................................4
5.2. Les combinaisons hormonales sur l’organogenèse in vitro pour maximiser la croissance..........4
VI. VI Étude de cas (Hubert et al. 2022)................................................................................................4
6.1. Matériel végétal...........................................................................................................................4
6.2. Méthodes....................................................................................................................................4
6.2.3. Aseptisation.........................................................................................................................4
6.2.2. Production d’explants..........................................................................................................5
6.2.3. Condition de culture............................................................................................................5
6.3 RESULTAT.....................................................................................................................................5
VII. Conclusion :.....................................................................................................................................6
REFERENCES................................................................................................................................................6

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Introduction générale
Le manioc (Manihot esculenta), est une culture pérenne, une plante herbacée à
racines tubéreuses, amylacées et à tige noueuse. Il s’adapte à un large éventail de
milieux et présente une bonne résistance à la sécheresse et à l’acidité des sols. Le
manioc fait partir des aliments de premier rang pour les populations en Afrique de
l’Ouest et est consommé sous plusieurs formes : gari, tapioca, pilée et bien d'autres
pâtes, tandis que les feuilles sont consommées comme légume, ou servent
d'emballage (Kouadio et al., 2023) .Il se cultive dans toutes les régions du Bénin en
l’occurrence dans les régions centrales et celles du Sud (MEPN, 2008). La
production mondiale de manioc, en 2019, dépassait 303 millions de tonnes et le
Nigeria était le premier producteur avec plus de 59 millions de tonnes (FAO,
2021). L'Afrique représentait plus de 63 % de la production mondiale, suivie de
l'Asie avec 28 % (LavagnedOrtigue,FAO 2021).

Malgré cette importance, la culture du manioc reste confronter à d’énormes

problèmes défavorables à une production suffisante pour satisfaire les besoins.
C’est dans cette optique que rémunérions différents problèmes lies a la culture in
vitro du manioc, les causes et dégager quelques défis et perspectives de celui-ci.

I. LES PROBLEMES LIES A LA CULTURE IN VITRO DU MANIOC

La culture in vitro des de Manihot esculenta, également connu sous le nom de
manioc, peut présenter divers défis dans les zones production. Voici quelques
problèmes courants qui peuvent survenir

1.1. Les Contaminations microbiennes

Les différentes maladies se transmettent par les insectes et se manifestent à travers
les organes de la plante entre le limbe, déformations des feuilles, une réduction de
l’appareil végétatif, un court-noué conduisant parfois à un rabougrissement de la
plante (Massala et al., 1988) ,ainsi une bactérienne appelée Xanthomonas

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manihotis a été étudiée en République Populaire du Congo et en République
Centrafricaine par Daniel et al.,( 1981) qui fait de grand dégâts sur le manioc.
1.2. Les maladies : la mosaïque Africaine
Plusieurs cultivars de manioc sont très sensibles à la Mosaïque africaine, elle est
une source malheureuse de contamination (Massala et al., 1988)
1.3. Type de multiplication inefficace

La multiplication des plantules in vitro peut être inefficace si les conditions de

culture ne sont pas optimales en termes de nutriments, de pH, d'humidité relative,
et de luminosité. Cela constitue l’un des problèmes majeurs du Cameroun qui ne
dispose pas d’institution spécialisée dans la multiplication des semences de plante
pour satisfaire les besoins des paysans(Zok et al., 1998).

Plusieurs études ont également été mené au Congo en vue de réduire, tant peu que
soit, le gap de ces besoins en boutures à travers la multiplication et dissémination
des variétés améliorées de manioc dans le pays(Mahungu et al., 2014)

1.4. Les Difficultés d’acclimatation des plantules

Une fois que les plantules ont été multipliées in vitro, l’acclimatation au milieu
extérieur, peut être délicat et nécessite un ajustement progressif aux conditions
naturelles (Gado et al.,2022)

II. Les Causes de la culture in-vitro du manioc

Il existe diverses raisons qui peuvent justifier la culture in vitro du manioc :
2.1. L’amélioration génétique
La culture in vitro permet de développer et de multiplier des variétés de manioc
améliorées, notamment celles résistantes aux maladies ou adaptées à des conditions
de croissance spécifiques .Novak & Brunner, (1992) ont évalué le traitement
mutagène des semences, les grains, les tubercules, les pousses, les boutures et les
cultures de tissus (matériel in vitro) dans le but de les améliorer.
2.2. La conservation de la diversité génétique
La culture in vitro peut servir à préserver la diversité génétique des variétés de
manioc pour une utilisation future, notamment dans la sélection de nouvelles
variétés. Pour contribuer à l’enrichissement des banques de gènes mondiales en
matériel végétal Charrier et al.,( 1994) ,ont collecter quelques espèces de plante

2
tropicale comme le manioc destiné a trois de conservation notamment la
conservation in situ
2.3. Production de plants sains
La culture in vitro aide à produire des plants spécifiquement anti parasites et
pathogènes, contribuant ainsi à l'amélioration de la santé des cultures. Plusieurs
variétés de manioc ont été régénérées et maintenu grâce à la culture in vitro après
avoir être infectées par des maladies virales en RD Congo (Mahungu et al., 2014).
Les techniques de culture in vitro assurent la multiplication abondante de matériel
sain(Engelman, 2009)

III. Conséquences de la culture in vitro du manioc

3.1. Conséquence des attaques bactériennes : chutes de rendement en tubercules
Les évaluations effectuées par Daniel et al.,( 1981) au Nigeria et en Colombie ont
révélé des chutes de rendement en tubercules variant de 8 à 60 p. 100 provoquées
par Xanthomonas manihotis.
Même avec sa forte adaptabilité écologiques le manioc n’est pas très résistant face
maladies tel que la mosaïque ; striure brune, aux ravageurs (termites, l’acarien vert,
de la cochenille farineuse, du criquet, de la mouche blanche, des thrips et des
punaises) qui baissent fortement la production et le rendement (Ntawuruhunga et
al., 2002 ; Papy et Willy, 2012 ; Mahungu et al., 2014).
3.2. Des pertes de récolte
Selon Massala et al.,( 1988), la mosaïque Africaine du manioc était à la base de la
perte de 90 % des récoltes .

IV. LES DEFIS DE LA CULTURE IN VITRO DU MANIOC

4.1. Le défis de contamination
Il faut maintenir un environnement stérile pour éviter la contamination bactérienne,
qui peut compromettre la qualité des plants produits(Daniel et al., 1981)
4.2. Le défis de l’acclimatation des plants
Les dispositions de l’acclimatation des plants cultivés in vitro doivent être
davantage maitriser avant d'être transplantés sur le terrain, car ce processus peut
être délicat (Gado et al., 2022).
L’aspect d’améliorer la qualité de la fertilité des sols reste jusque-là un défi majeur
(Konan et al., 2020).

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V. LES PESPECTIVES
5.1. L’utilisation des organismes génétiquement modifiés (OGM) du manioc comme
perspective a la production du manioc
L’utilisation des variétés génétiquement modifiées peuvent répondre à certains
défis du manioc tels que l’amélioration de la valeur nutritive, c’est le cas de test
d’une variété de manioc transgénique enrichie en vitamine B6 réussi avec succès
par Teresa F. (2016) en chine,(Journal109_article5_article5.Pdf, n.d.)
5.2. Les combinaisons hormonales sur l’organogenèse in vitro pour maximiser la
croissance
Cacai et al., (2012),ont réalisé un taux élevé de calogènes entre ANA (acide
naphtalène α-acétique) ; (BAP) (benzylaminopurine) ; kinétine dans les milieux de
base MS (Murashige et Skoog) sur certaines variétés du manioc au Benin, cette
technique a donné un résultat satisfaisant sur l’améliorer de la croissance
végétative.

 Evaluer l’effet de la qualité du substrat, précisément du sol et des

phytohormones sur l’acclimatation du manioc (Gado et al., 2022).
 L’amélioration de l’organogenèse (Cacai et al., 2012). Amélioration des
variétés plus résistantes contre les maladies et ravageurs (Kouadio et
al,2023).
 Vulgarisation en milieu paysan des variétés plus productives mises au point
(N’zué et al., 2013).

VI. VI Étude de cas (Hubert et al. 2022)

1. Matériel végétal
Le matériel végétal a été constitué de boutures de manioc de la variété TMS
96/1762 âgées de 2 mois.
2. Méthodes
6.2.3. Aseptisation
Le lavage de matériel :10 minutes (eau de robinet), 2 heures (courant d’eau
distillée), aseptisation : 5 mn de trempage dans du Tween 20 à 1% et dans
l’hypochlorite de sodium 30% pendant 45 minutes. Ensuite, trois rinçages
successifs de 5, 10 et de 15 minutes à l’eau distillée stérile ont été faits sous une

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hotte à flux laminaire horizontale (MECAPLEX) près d’une flamme d’un bec
bunsen.
6.2.2. Production d’explants
Après aseptisation, des fragments de 1,5 cm ont été prélevés sur le matériel
végétal reçu sous la forme de bouture. Ils ont servi d’explants pour la culture in
vitro.
6.2.3. Condition de culture
 Le milieu: Murashige et Skoog (MS) (1962)

 Composition: 20 g.l-1 de saccharose, 8 g.l-1 d’agar et 5 ml.l-1 du complexe

vitaminique de Morel et Wetmore (1951).

 Le pH: 5,6.

 Le milieu de culture : des tubes de culture de diamètre 25 mm et de

hauteur 115 mm (SCHOTT) à raison d’environ 10 ml par tube.

 Stérilisation : 121 °C pendant 20 minutes, sous une pression de 1,6 Kg.cm-2.

Les ensemencements ont été faits sous une hotte à flux laminaire
horizontale (MECAPLEX) près d’une flamme d’un bec bunsen.

 Élimination de cellule morte avant la mise en culture à l’aide d’un scalpel

stérile.
 Les cultures ont été entreposées dans une chambre de culture où régissent
les conditions suivantes : température: 26 ± 1 °C; éclairement lumière
fluorescence (OSRAM) 80 mol.m-2. s-1; photopériode: 16/8.
6.3 RESULTAT
La prolifération des bourgeons sur les microboutures a été obtenue après 28 jours
de culture. Les bourgeons se sont formés principalement au niveau du nœud de la
micro bouture, au voisinage axillaire préexistant.

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VII. Conclusion :
Le manioc (Manihot esculenta Crantz) est un arbuste pérenne dont la culture est
très importante pour les populations tropicales et subtropicales d’Afrique et
d’Amérique latine (Vernier et al., 2018). Elle contribue également à la sécurité
alimentaire et aux revenus des populations de ces régions (Tize et al., 2021).
Cependant la culture in vitro des explants de cet arbuste dépend du milieu et de
la variété (Gado et al., 2022). La culture in vitro du manioc fait aussi face à divers
défis tels que des défis de contamination, d’acclimatation des plant…etc.
Malgré tout, pour contribuer à la sécurité alimentaire et au développement
économique l’une des alternatives reste la méthode in vitro de propagation des
variétés résistantes ou tolérantes à des contraintes majeures (FAO, 2018).

REFERENCES
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