Module d’Enzymologie FSTT- 2020-2021

Travaux Dirigés N 6
SOLUTION

Exercice N°1:

On dispose d'une molécule M dont on veut préciser le rôle dans une réaction catalysée
par une enzyme : Substrat + M ------> produit(s)

On mesure la vitesse initiale de cette réaction (exprimée en nM.min-1) pour différentes

concentrations de S, en présence ou non de la molécule M (à la concentration indiquée
dans le tableau suivant

[molécule M] (mM)
[S0] (µM)
0 1 2,84
1 3,8 2,7 1,7
2 6 4,2 2,6
5 9 6,2 4,1
10 10,5 7,7 4,8

1/S 1V ss inhibiteur 1V inhi M1 1/V Inhib M2

1 0.26 0.38 0.58
0.5 0.16 0.24 0.38
0.2 0.11 0.16 0.24
0.1 0.095 0.13 0.21

1. Tracer les courbes de doubles inverses pour les différentes concentrations

de la molécule M ?

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2. Quels sont les valeurs de Vmax, VMapp et KMapp pour les 3 courbes ?
Vmax = 16.66 nMmin-1
I = 1 mM VMapp = 9.52 nMmin-1
I = 2.84 mM VMapp = 6.3 nMmin-1
KM = KMapp = 2.38 2uM
3. De quel type d'inhibition s’agit-il ?
Inhibition non competitive , car KM est constant et le Vmax diminue
4. Calculer KI correspondant

VMapp .[I0]
---------------------
VM - VMapp
KI = 9.52 10-9 x 1 10-3 / (16.66- 9.52 ) 10-9= 1.33 10-3 M