Fiche de TD N° 3 “Cinétique enzymatique à un Substrat”

Exercice N° 1 :
On étudie la cinétique de la carboxypeptidase, à différentes concentrations en substrats.
Les résultats sont donnés dans le tableau suivant  :
concentration en substrat 0.0713 0.0521 0.0384 0.0285 0.0125
Vitesse de la réaction 166 142.6 111 111 66
Calculer la vitesse maximale et la constante de Mickaelis ?

Exercice N° 2:
La pyruvate déshydrogénase catalyse la décarboxylation oxydative du pyruvate pour
donner l’Acétyl CoA. Cette réaction est inhibée par le diacétyl.
Le tableau donne les vitesses initiales de la réaction que l’on a mesurées à différentes
concentrations de pyruvate et en présence ou en absence de diacétyl :

[pyruvate] (µM)
25 50 100 200 400
[diacétyl]= 0 0.03 0.038 0.044 0.048 0.5
[diacétyl]= 0.5 mM 0.02 0.029 0.0375 0.044 0.048
Déterminer les vitesses maximales (en M/min) et les constantes de Mickaélis en absence
ou en présence d’inhibiteur ? Déduire le type d’inhibition et la constante d’inhibition ?

Exercice N° 3 :
La désoxyadénosine kinase catalyse le transfert du groupe phosphoryle de l’ATP sur la
désoxyadénosine. Cette réaction est inhibée par le dATP  :
[désoxyadénosine] (mM)
0.15 0.25 0.35 0.5 1
[dATP]= 0 2.65 3.9 4.8 5.9 8
[dATP]= 0.05 1.3 1.9 2.4 3 4
mM
- Déterminer le Km de la désoxyadénosine ?
- Déterminer le type d’inhibition et la constante d’inhibition ?

Exercice N° 4 :
On mesure la vitesse initiale de l’activité d’une enzyme en absence et en présence d’un
inhibiteur. Les résultats sont donnés dans le tableau ci-dessous :
 [S] (mM) Sans Inhibiteur [I] = 10 μM
2 8,08 6,06
4 14,06 8.95
8 20,00 10.59
12 25,80 12.34
20 32,00 13.71

Déterminer les paramètres cinétiques Vm et Km de l’enzyme en absence et en présence

d’un inhibiteur ? De quel type d’inhibition s’agit-il ?

Exercice N° 5 :
La S-adénosylhomocystéine (SAH) est inhibée par l’adénine et ses dérivés. Le tableau
donne les vitesses de l’hydrolyse du SAH en µmoles/min/mg :

[adénine] µM
0 1 3 10 20
[SAH] = 1 µM 0,3 0,25 0,19 0,1 0,061
[SAH] = 3 µM 0,41 0,38 0,32 0,22 0,15
[SAH] = 10 µM 0,47 0,46 0,43 0,36 0,29

En utilisant la représentation de Dixon déterminer le type d’inhibition de l’adénine et la

constante d’inhibition correspondante ?

Exercice N° 6:
La déshydrogénase kinase est inhibée par le dCTP. Pour étudier cette inhibition on a
mesuré les vitesses initiales de la réaction à deux concentrations de substrats (ATP) et à
différentes concentrations d’inhibiteur. Les vitesses sont exprimées dans le tableau en
nanomoles de produits formé en 10 min.

[dCTP] (µM)
0,05 0,1 0,25 0,5 1 1,5
[ATP]= 0,5 3.4 3 2.3 1.6 1 0.73
mM
[ATPl]= 2 mM 5.2 4.9 4.3 3.6 2.7 2.2

En utilisant la représentation de Dixon déterminer le type d’inhibition du dCTP et la

constante d’inhibition correspondante ?