Module de Biotechnologie

Végétale

Enseigné par :
Pr. Essalmani Haiat:
Biotechnologie végétale moderne
&
Pr. Chibi Fatiha:
Biotechnologie végétale classique
 I. Définitions de la Biotechnologie:
1.Définition issues de la génie génétique:

Utilisation des techniques de l’ADN recombinant pour :

- La production de protéines recombinantes
- L’amélioration de certains caractères : organismes génétiquement
modifiés .

2.Définitions issues du génie des procédés :

Production industrielle de biens et de services par des procédés faisant
appel à des organismes biologiques, et fondée sur des expertises dans les
domaines de la microbiologie, la biochimie et l’ingénierie chimique

- Utilisation des techniques de fermentation.

Exemple 1: La fermentation alcoolique des sucres (en absence d’oxygène)
sous l'influence des levures donne de l'alcool.
Exemple 2: La fermentation lactique du lait (en absence d’oxygène) par des
lactobacilles et des streptocoques donne du yahourt
3.Définitions synthétiques

- Mise en œuvre de matériel biologique pour une production de biens et de

services

- Utilisation contrôlée à grande échelle de matériel biologique, éventuellement

génétiquement modifié

- La biotechnologie est une technologie basée sur la biologie, plus

particulièrement dans le contexte de l’agriculture, de la science des aliments et
de la médecine….
 4.Définition de la Biotechnologie végétale:

Les biotechnologies végétales sont des technologies qui recouvrent

toutes les interventions en laboratoire sur les organes, les tissus,
les cellules ou l’ADN des végétaux.

- soit pour mieux maîtriser ou accélérer leur production,

- soit pour améliorer leurs caractéristiques, au service de la

recherche, de l’agriculture ou de productions industrielles…..
II- Les deux subdivisons dans la biotechnologie

1. Les biotechnologies modernes, basées sur la manipulation du DNA :

- Les techniques de génie génétique : Ensemble des techniques qui permettent

d'isoler un fragment d'acide nucléique dans un organisme donné, de le multiplier
(clonage) et de le réintroduire dans le génome d'un autre organisme.

- Les techniques de clonage des gènes et leur identification. Le clonage d'un gène
s'effectue en plusieurs étapes comprenant la purification du gène d'intérêt d’un
organisme donné suivie de son transfert dans une hôte capable alors de produire
de grande quantité de la protéine recombinante.

- Les nanotechnologies en générale : l’ensemble des études et des procédés de

fabrication et de manipulation de structures (physiques, chimiques ou
biologiques), de dispositifs et de systèmes matériels à l’échelle du nanomètre
(nm), ce qui est l’ordre de grandeur de la distance entre deux atomes.

- La génomique (déchiffrage des génomes)

- La protéomique (technologie des protéines)

 II- Les deux subdivisons dans la biotechnologie

2. Les biotechnologies classiques :

-Les techniques de fermentation (obtention divers produits alimentaires,

énergétiques, etc)

-Les techniques de sélection des souches (obtention des souches plus

performantes, par exemple qui peuvent dégrader des polluants etc..)

- Les techniques de génies enzymatiques (bioconversion: conversion de matières

organiques, telles que les déchets végétaux ou animaux, en produits utilisables
ou en sources d'énergie par des processus ou des agents biologiques, tels que
certains micro-organismes)

- Les techniques de sélection variétale à travers le transfert des caractères

par des croisements dirigés ou la multiplication par vitro-plants ou culture de
tissu (culture in vitro, micro propagation, bouturage, etc.)
 III. Quelles sont les techniques utilisées en
biotechnologie ?
1. La transformation génétique : transfert de l’ADN recombinant dans
les cellules ou transgenèse . Ces cellules sont des OGM: organisme
génétiquement modifié obtenu par recombinaison génétique.
2. Les techniques de recombinaison génétique de l’acide nucléique:
impliquant la formation de nouvelles combinaisons de matériel génétique
grâce à l’insertion de molécules d’acide nucléique produites par quelques
moyens que ce soit:
2.1. Les techniques impliquant l’incorporation directe ou par
transgénèse dans un organisme de matériel préparé à
l’extérieur : ADN recombinant
2.2. Les techniques de fusion cellulaires ou d’hybridation dans
lesquelles les cellules résultants de la fusion présentent de
nouvelles combinaisons de matériel génétique héréditaire (la
fusion de deux ou plusieurs cellules au moyen de méthodes ne
survenant pas de façon naturelle )
III. Quelles sont les techniques utilisées en
biotechnologie ?

2.1. Emploi de l'ADN recombinant: ADN chimérique ou

transgène

Le terme recombinant désigne de façon générale ce qui est obtenu par

génie génétique.

L'ADN recombinant est un fragment de matériel génétique d'un

organisme qui est introduit artificiellement dans l'ADN d'un autre
organisme, généralement une bactérie ou un virus dans lequel il va
s'intégrer

l'ADN recombinant =ADN d’un donneur + ADN d’un vecteur

 Principe de la technologie de l’ADN recombinant
ORGANISME VECTEUR
DONNEUR :
I) Obtention de l’ADN recombinant

(fragment d'ADN
Extraction d'un capable de
fragment d'ADN réplication
d'intérêt: exemple autonome)
protéine X

Insertion du fragment
d'intérêt dans le vecteur

Obtention d'un ADN Recombinant

l’ADN recombinant
II) Utilisation de

Expression et purification de la protéine X, étude du niveau

d’expression et des fonctions de cette protéine...
 Manipulation de l’ADN plasmidique in vitro
- Les enzymes de restriction permettent d’ouvrir
les plasmides,
- La ligase permet de reconstituer la liaison
phospho-diester et donc de refermer le plasmide.

Un ADN exogène…pouvant provenir d’un organisme

différent…peut donc être inséré dans le plasmide : on
obtient un plasmide recombinant.
Il y a les plasmides d’expression Ou de clonage moléculaire (séquençage
etc….)
Quelques types d’utilisations possibles de l’ADN recombinant
Quelles sont les techniques utilisées en
biotechnologie ?
2.2. Fusion cellulaire ou hybridation somatique:

La fusion cellulaire ou hybridation cellulaire est la formation in vitro

d'une seule cellule hybride par l'union de deux cellules provenant de
différentes espèces.

Dans la cellule hybride, les noyaux donneurs peuvent rester séparés ou

peuvent fusionner, mais durant les divisions cellulaires ultérieures, un
seul fuseau mitotique se forme de sorte que chacune des cellules filles
aura un seul noyau

Exple:
-Hybrides à croissance rapide, capables de fixer l'azote
-Hybrides résistants aux pathologies,
-Hybrides aux herbicides chimiques
-Hybrides résistants aux conditions climatiques.
b
Fusion cellulaire : Hybridation somatique

L'hybridation somatique . Idéal pour transférer des caractères à hérédité

cytoplasmique
Quelles sont les techniques utilisées en
biotechnologie ?
3. Procédés biotechnologiques:

Production à grande échelle d’un "produit d’intérêt" qui est susceptible

d’être commercialisé
Exemple de produits biotechnologiques : antibiotiques, insuline, ADN
recombinant et les anticorps monoclonaux, substances de défenses
naturelles, biopesticides….

Pour la mise en œuvre de grandes quantités il faut:

- commencer par une étude au laboratoire afin de s’assurer de
l’obtention réelle du produit d’intérêt.

- quitter ce laboratoire pour réaliser la production dans des

installations industrielles spécialisées.
IV. Quelles sont les domaines d’applications des biotechnologies ?

- Application de la science et de l’ingénierie au organismes vivants –sous leur

forme naturelle ou modifié- pour des applications dans la médecine,
l’agriculture, l’industrie et la protection de l’environnement….

- Ensemble de techniques biologiques utilisant des éléments du vivant, visant

l’obtention de produits utiles à l’humanité.
- Eléments du vivant:
* cellules vivantes
* leurs molécules
- Produits utiles :
*Obtenir des produits d’ intérêt ,
* Améliorer des espèces végétales et animales
* Développer des microorganismes destinés à des usages
spécifiques
 IV. Les différents domaines d’application de la biotechnologie

Les biotechnologies représentent une composante, potentiellement

importante de croissance pour:

✓ Biotechnologie jaune
- Protection de l’environnement
-Traitement et élimination de pollution.

✓ Biotechnologie verte
Utilisation des plantes et des cellules pour la production et la transformation
des produits alimentaires, des biomatériaux et de l’énergie (huile des graines de
Jatropha curcas ).

Utilisation de l’ingénierie génétique végétale pour procurer aux plantes des

propriétés de résistance à la sécheresse , pesticide…

✓ Biotechnologie bleue
Développent des produits en liaison avec la biodiversité marine : santé,
cosmétique, aquaculture, agro-alimentaire.
 IV. Les différents domaines d’application de la
biotechnologie
✓ Biotechnologie blanche
Applications industrielles, par l’emploi de systèmes biologiques comme alternative
aux procédés chimiques classiques: carburants, construction, textile...
Utilisation des systèmes biologiques comme biocatalyse et fermentation pour
produire des produits chimiques (parfum, acides aminées , vitamines…)

✓ Biotechnologie rouges
Domaine de la santé, en particulier l’industrie pharmaceutique dont une grande
partie de la recherche actuelle repose sur les biotechnologies.
Production de médicament, comme insuline humaine utilisée pour soigner le:
- diabète : insuline
- Production de vaccin: vaccin du choléra
- Thérapie cellulaire: consiste à greffer des cellules afin de restaurer la fonction
d'un tissu ou d'un organe. L'objectif est de soigner durablement le patient grâce
à une injection unique de cellules thérapeutique
- Thérapie génique : La thérapie génique consiste à introduire du matériel
génétique dans des cellules pour soigner une maladie
 Applications en biopharmacie: Production de
médicaments
✓ Dans de nombreux cas, les médicaments administrés pour le
traitement d'une maladie sont simplement des protéines humaines.
✓ Par exemple, le diabète résulte d’une incapacité des cellules
pancréatiques à produire une protéine appelée insuline, régule le taux
de glycémie.
✓ On traite de nombreux diabétiques en leur injectant de l'insuline
obtenue d'autres sources.
✓ Par exemple, on prélevait généralement de l'insuline chez les vaches et
les porcs, qui fabriquent leur propre insuline.
✓ Toutefois, comme l'insuline de ces animaux a une structure légèrement
différente de l'insuline humaine, son injection suscitait parfois une
réaction allergique chez les patients.
✓ On évite ce problème lorsqu'on utilise des bactéries transgéniques
contenant le gène de l'insuline humaine, puisque l'insuline qu'elles
produisent est identique à celle présente naturellement chez les
humains.
Microorganismes transgéniques : Création d'une
bactérie transgénique qui produit de l'insuline humaine
 Applications en Biotechnologie environnementale (jaune) :
Biorestauration
✓ Chaque organisme vivant, depuis les animaux jusqu'aux plantes en
passant par les bactéries, ingère des nutriments pour vivre et produit
par la suite des déchets.

✓ Différents organismes ont besoin de types différents de nutriments,

que les processus métaboliques vitaux décomposent de manière
particulière, après quoi les organismes les excrètent.

✓ Certaines bactéries se développent grâce à des composantes chimiques

de déchets, et leur métabolisme convertit ces matières
dangereuses ou toxiques en produits inoffensifs.

✓ Par exemple, certains microorganismes se nourrissent de matières

toxiques ou dangereuses comme les hydrocarbures (pétrole), le
chlorure de méthylène, une variété de détergents, le soufre et le
biphényle polychloré .

✓ On appelle biorestauration l'utilisation d'organismes vivants pour

dégrader les déchets.
 Applications en Biotechnologie environnementale : Biorestauration
✓ La grande majorité des applications de la biotechnologie
environnementale utilisent des microorganismes d'origine naturelle pour
décomposer et filtrer les déchets avant qu'ils ne s'introduisent dans
l'environnement.
✓ Toutefois, on étudie et met à l'essai certains systèmes plus
perfectionnés utilisant des microorganismes transgéniques pour traiter
les déchets et prévenir la pollution afin d'enlever des matières
difficiles à décomposer .
✓ Par exemple, on a mis au point des bactéries transgéniques
Pseudomonas capables de décomposer des composés polyhalogénés
(Fluor, chlore, brome…), qui constituent une grande catégorie de
polluants, en des produits inoffensifs.
✓ On a également mis au point des bactéries capables de convertir des
ions de métaux lourds toxiques en des formes d'éléments moins
toxiques plus faciles à isoler et à enlever de l'environnement. Par
exemple, les chercheurs ont signalé la mise au point de E. Coli
transgénique capable de nettoyer les milieux pollués par le mercure
(Hg2+)
Applications en Biotechnologie blanche: industrielle
Applications en Biotechnologie végétale
- Des plantes transgéniques obtenus par différentes techniques de
transgenèse: Agrobacterium tumefaciens , biolistique, électroporation,
microinjection, lipofection.
- Les plantes transgéniques peuvent servir à diverses applications. sont
présentées sous quatre catégories :

✓ Qualités du produit: - Riz riche en provitamine A (bêta-carotène)

✓ Accroissement du rendement.
✓ Production de plantes résistantes aux parasites et aux maladies.
✓ Production de médicaments :pommes de terre transgéniques porteuses
d’un vaccin contre le choléra (toxine cholérique B (TCB), protéine
inoffensive qui suscite une réponse immunitaire contre la
maladie chez les souris et les êtres humains
 Innovations en biotechnologie végétale:

La biotechnologie végétale aide les agriculteurs à offrir des aliments sûrs,

nutritifs et à prix abordable.
Les scientifiques cherchent à utiliser la biotechnologie végétale de façon à ce
que, dans l’avenir :

Il y aura des aliments dotés de propriétés de lutte contre les maladies chez
l’homme, comme :
- du maïs et du soja à teneur accrue en vitamines C et E
- des tomates ayant 10 fois le taux normal d’acide folique, une vitamine B
essentielle à la formation de cellules saines.

On pourra produire des aliments à conservation prolongée et plus goûteux,

comme :
-des poivrons et des pois plus sucrés
-des fraises à texture et à saveur améliorées, dotées d’une conservation
prolongée
-des pommes, tomates, bananes, melons et pommes de terre à brunissement
réduit et à meilleure durée de conservation à l’étalage (Exposition de
marchandises qu'on veut vendre).