Institut des Sciences Vétérinaires, Cours de bio-informatique

Université de Blida 1 2020/2021

Cours 6

Transgenèse

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Qu'est-ce qu'un organisme transgénique?
Un organisme transgénique contient de l'ADN recombinant intégré
de manière stable dans toutes ses cellules.

En d'autres termes

Plante Animal Micro-organisme

« Nouveau morceau » d'ADN

Plante Animal Autre

Gène inséré Transgène Génie génétique

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 Nouveau morceau
d'ADN

Gène

Protéine

Organisme transgénique Nouvelle fonction

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 Organismes transgéniques

= ou =

Organismes Génétiquement
Modifiés (OGM)

2 techniques de biologie moléculaire:

Construction génétique = Transgenèse

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Les deux principales caractéristiques de la transgenèse en comparaison
de la sélection génétique classique :

Une source de gènes étendue.

Le transfert d'un gène précis.

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 Introduire un nouveau caractère:

C'est un cas où le transfert de gènes s’accompagne d'un transfert de caractère.

Inactiver un caractère:

Agir sur l'expression d'un gène déjà présent. La stratégie antisens est la voie la
plus couramment utilisée.

Elle consiste à bloquer l'expression d'un gène cible. Une copie «inversée» de ce gène
est introduite, d'où le nom de la technique. Les ARN messagers (ARNm) produits
par la copie originelle du gène et par celle introduite sont complémentaires. Ils
s'hybrident donc et forment une molécule d'ARN double brin. Cette molécule
aberrante est dégradée. Ainsi l'expression du gène est bloquée et le caractère ne
s'exprime plus.

6
Comment crée-t-on des plantes transgéniques?

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Etape1: Identifier, isoler, intégrer et multiplier un gène
d'intérêt :
Identification d’un caractère (plante, animal,
micro-organisme…)

Enzymes de Isolement du gène

restriction d’intérêt

Gène Intégré dans une construction

marqueur génétique associant un gène marquer

Plasmide Multiplication de la construction

génétique (clonage)
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9
Etape 2: Transférer le gène

Deux méthodes :

1. Transformation biologique:

Cette technique utilise une bactérie du sol, Agrobacterium, qui a la

propriété de réaliser naturellement la transformation génétique d'une
plante, afin de la parasiter. Ainsi, une construction génétique introduite
dans la bactérie (rendue avirulente au préalable) sera transférée dans la
plante et intégrée à son génome. C'est la technique la plus couramment
utilisée.

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2. Le transfert direct:

Une projection d'ADN dans les cellules de la plante par l'utilisation d'un
canon à particules qui projette dans les cellules des microparticules
enrobées d'ADN (biolistique).

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Etape 3: Régénérer et évaluer les plantes transformées

Après sélection des cellules transformées, il faut régénérer les

nouvelles plantes transgéniques.

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Etape 4: Incorporer dans une variété commerciale

Les plantes transformées obtenues sont soumises à des croisements

contrôlés pour étudier les modalités de transmission du nouveau
caractère à la descendance.

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14
Comment crée-t-on des animaux transgéniques?

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2 méthodes sont utilisées chez animaux:

Micro-injection de l’ADN dans les embryons.

Vecteurs viraux (rétroviraux).

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 Isolement du gène pour la
protéine ATIII

Zygote et gène ATIII injecté Le lait de la

chèvre
contient la
protéine
ATIII

Gène ATIII incorporé

au génome du zygote

Embryon transgénique L'ATIII est

prête à être
administrée
Implantation dans la aux patients.
mère porteuse

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Comment crée-t-on des micro-organismes
transgéniques?

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 Ex. production d'insuline humaine par une bactérie :

On prélève le gène de l'insuline humaine et on l'introduit dans le plasmide

d'une bactérie.

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 On extrait les plasmides
de bactéries

Une enzyme de
restriction ouvre les
plasmides

On extrait ou on On mélange des copies

synthétise le du gène et des
gène à greffer. plasmides. Une enzyme
(ligase) fusionne les
brins d'ADN

Les plasmides sont

réintroduits dans des
bactéries
Le gène est
reproduit quand la
bactérie se reproduit 20