LES ÉTAPES DE LA TRANSGÉNÈSE

Etape 1 : Identifier, isoler, intégrer et multiplier un gène d’intérêt

La première étape est le choix d’un caractère que l’on veut introduire dans la plante, comme par
exemple des caractères de qualité nutritionnelle, la résistance à certains insectes, à certaines
maladies, à des herbicides, etc. Ensuite, il faut procéder à l’identification et au clonage du ou des
gènes à l’origine du caractère recherché. Puis, il est intégré dans une construction génique associant
souvent un gène marqueur. Ce gène marqueur permet de sélectionner les cellules qui ont intégré le
gène d’intérêt. La construction est ensuite multipliée (clonée) afin de disposer d’une quantité
suffisante d’ADN pour son introduction dans les cellules végétales que l’on veut transformer.

Etape 2 : Transférer le gène

La transformation biologique. Cette technique utilise une bactérie du sol, Agrobacterium, qui a la
propriété de réaliser naturellement la transformation génétique d’une plante, afin de la parasiter..
Cette technique est la plus couramment utilisée.

Etape 3 : Régénérer et évaluer les plantes transformées

La régénération in vitro des cellules transformées est une étape difficile à maîtriser. Aussi, le
génotype, le type de tissus et les conditions de culture sont choisis en fonction de leur aptitude à la
régénération.

Etape 4 : Incorporer dans une variété commerciale.

La transformation et la régénération étant des opérations délicates, le génotype de la plante choisie

est celui facilitant ces étapes. C’est pourquoi les plantes retenues sont ensuite soumises à une
succession de rétrocroisements afin d’introduire le gène dans le matériel élite et d’obtenir de
nouvelles variétés commerciales exprimant ce caractère.
•Comment ce fait la
transgénèse ?
la transgenèse est de transférer un gène de
n'importe quelle espèce dans n'importe
quelle autre espèce en s'affranchissant de la
repror
transgène, composé de séquences génétiques
issues de plusieurs organismes.
• transgénèse chez les
végétaux :
L'introduction de gènes dans les explants
s'effectue, le plus souvent, à l'aide de l'une
des deux méthodes suivantes :

Transfert indirect à l'aide d'une bactérie

Les gènes d'intérêt sont transférés par l'action
d'une bactérie, Agrobacterium tumefaciens,
qui les transporte vers l'ADN des cellules des
explants. Cette bactérie du sol a la capacité
naturelle de transférer une partie de son ADN
aux cellules des plantes1 2. La bactérie est
mise en contact avec les explants pour
transférer le gène d'intérêt. Cette méthode
est la plus courante pour réaliser la
transgénèse chez les végétaux.
•Transfert direct à l'aide d'un canon à
particules :
Les gènes d'intérêt sont préalablement fixés
sur des microbilles de métaux inertes, comme
l'or ou le platine. Par la suite, les microbilles
sont projetées à haute vitesse sur les explants
à l'aide d'un canon à particules.
•La transgénèse chez les animaux :
La première transgénèse animale a été
réalisée il y a environ une vingtaine
d'années1.

Comme la transgénèse animale est beaucoup

plus coûteuse et complexe que la transgénèse
végétale, les avancées dans ce domaine sont
plus lentes1 2.

Une fois les gènes d'intérêt isolés et

multipliés, ceux-ci peuvent être introduits
dans l'ADN d'un animal par différentes
méthodes, dont :

la micro-injection;
l'infection virale;
la transfection de cellules somatiques
embryonnaires;
le transfert de gène localisé.
La technique la plus utilisée pour effectuer la
transgénèse animale est la micro-injection.

La micro-injection
La technique la plus utilisée et celle qui
obtient le plus de succès est la micro-injection
d'ADN dans le noyau d'un ovule fraîchement
fécondé (embryon)3 4. La micro-injection est
une technique mécanique qui requiert
l'utilisation de micro-instruments pour
introduire le gène d'intérêt. Une fois
modifiées génétiquement, les cellules de
l'embryon GM poursuivent leur
développement jusqu'à la formation complète
de l'animal transgénique.
La transgénèse animale est une manipulation
différente du clonage qui permet de
reproduire, à partir d'une seule cellule,
plusieurs copies exactes du même animal

Les bénéfices :
•la transgenèse permet d'introduire un
caractère intéressant unique, et ce, en une
seule étape. Les techniques traditionnelles
donnent des individus ayant hérité de plus
d'un caractère, et ce, après plusieurs
générations de croisements.
Possibilités de croisements très diverses : les
méthodes classiques ne permettent
d'échanger des gènes qu'à l'intérieur d'une
espèce ou tout du moins entre espèces
relativement proches. La transgenèse, en
revanche, permet l'introduction dans un
organisme receveur d'un gène provenant de
n'importe quel organisme donneur, voire d'un
gène artificiel.

Les inconvénients :
Il est nécessaire d'identifier et de cloner la
séquence des gènes intéressants, puis de
synthétiser in vitro ces gènes avant
d'effectuer la transgénèse.
La transgenèse ne permet l'introduction que
d'un petit nombre de gènes (variable suivant
les espèces et les techniques utilisées).