Applications des techniques de clonage et

de transgenèse en Biotechnologie Animale

Applications des techniques
de transgenèse:
La transgénèse est une technique servant à introduire un gène étranger (transgène)
dans le génome d'un organisme, en vue d'obtenir un organisme génétiquement
modifié.
Stratégie servant initialement aux chercheurs pour étudier la fonction des gènes,
cette approche est également utilisée par les industries pharmaceutique et agro-
alimentaire.
La transgenèse comporte plusieurs étapes:

1. L'identification du « gène d'intérêt »

2. La construction du transgène
3. Dans certains cas, l'insertion du transgène se fait par l'intermédiaire d'un
vecteur (virus, plasmide…)
4. La transformation de l'organisme cible, par intégration de l'ADN de
l'organisme d'origine, support de l'information génétique, dans les cellules de
l'organisme cible.
5. La sélection des cellules transformées
Les applications:
La lutte contre les maladies

Des vaches exprimant dans leur lait des gènes antibactériens ont été obtenues.
Ces gènes sont ceux codant pour la lysostaphine , la lactoferrine humaine et le
lysozyme humain. Ces protéines réduisent plus ou moins intensivement la
fréquence des mammites(la présence dans le lait de cellules inflammatoires
(leucocytes) et éventuellement de bactéries). Elles pourraient également
protéger les consommateurs humains et animaux contre des infections du tractus
digestif.
Fabrication des vaccins

Le vaccin d'Oxford-AstraZeneca est basé sur la

transgénèse:
Utilise comme vecteur viral un adénovirus (famille
de virus très courants responsables notamment
de rhumes). Le vecteur adénovirus est incapable de
réplication car certains de ses gènes essentiels ont été
supprimés et remplacés par un gène codant
la protéine S des spicules S de SARS-CoV-2.
Lors de la vaccination, le virus modifié pénètre dans
les cellules, libère ses gènes qui sont transportés vers
le noyau, la machinerie cellulaire transcrit en acide
ribonucléique messager (ARN messager) puis traduit
en protéines, dont la protéine S, éduquant le système
immunitaire à la reconnaître.
Produire une protéine recombinante

L’hormone de croissance:
Parmi les exemples connus des
protéines recombinantes est l'hormone
de croissance. L'hormone de croissance
est une substance chimique naturelle
que sécrète l'hypophyse. Elle règle la
croissance et le développement normal
chez les enfants. L'hormone de
croissance recombinante humaine
(rHGH) est produite à partir de cellules
modifiées par génie génétique afin de
produire cette hormone. Un déficit en
hormones de croissance entraîne une
maladie appelée le nanisme
hypophysaire.
Modification des composants naturels du lait

La composition du lait des animaux domestiques, tel qu’il nous est prodigué par la
nature, n’est pas idéale dans tous les cas pour la consommationn humaine. La
sélection génétique va permettre de bénéficier de meilleurs allèles mais
évidemment pas de modifier fondamentalement la composition du lait. Il est bien
connu qu’une proportion importante de l’humanité ne tolère pas le lactose et qu’un
certain nombre de personnes présentent des allergies à la B-lactoglobuline et à
certaines caséines. La composition du lait des ruminants domestiques n’est par
ailleurs pas optimum pour la transformation du lait par l’industrie laitière. Des
projets visant à optimiser la composition des laits sont ainsi en cours de réalisation.
 Applications des techniques de
clonage:
Le terme clonage est l'opération faisant appel au génie génétique et permettant la production d'un

clone. À partir de cellules isolées, il s'agit d'obtenir une lignée (plusieurs cellules similaires

appelées clones) dérivant d'un seul ancêtre. La spécificité de ce processus est le fait d'avoir un

patrimoine génétique rigoureusement identique. Autrement dit le clonage permet d'obtenir un

grand nombre de copies absolument identiques soit d'une cellule et l'on parle alors de clonage

cellulaire soit d'un fragment d'ADN et l'on parle alors de clonage moléculaire.
Les étapes résumant le clonage:

 Isolement de l’ADN à partir de cellules humaines/ou autre

source et amplification de cet ADN par la PCR (polymerase
chain reaction).
 Action des enzymes de restriction.
 Action de la ligase.
 Transformation du l’ADN recombinant dans les cellules hôtes.
 Identification des clones positifs.
Les applications:
Fabrication de l’insuline humaine

L'insuline est une hormone peptidique constituée de 2 chaines (A) et (B) reliées par des ponts disulfures et

formées à partir de la préproinsuline par clivage d'une partie de la chaîne peptidique.

L’insuline est utilisée pour le traitement des diabètes insulino-dépendants, elle fut tout d'abord extraites du

bœuf (3 acides aminés différents avec l'insuline humaine) puis du porc (un seul acide aminé différent).

Cependant, du fait de ces différences, ces insulines exogènes étaient immunogénes. Le génie génétique a

permis de produire de l'insuline humaine à partir de bactéries génétiquement modifiées.

La fabrication est passée par ces étapes:

 Isolement du gène de l'insuline

 Insertion dans le vecteur (plasmide)
 Le plasmide ainsi modifié est introduit dans une bactérie (E.coli)
 Sélection des clones
 Vérification de la production de proinsuiline
 Les clones sélectionnés sont mis à cultiver à grande échelle. Le produit obtenu
est purifié puis convertie en insuline par un mélange de trypsine et de
carboxypeptidase B.
Le vaccin de l’hépatite B recombiné

Traitement de la variole et de l'hépatite : Il est possible de faire produire une grande

quantité de protéines animales a une cellule animale en augmentant le nombre de
copies du gène correspondant. Les virus d'animaux peuvent aussi être utilisés pour
créer des vaccins. Ainsi, le virus de la vaccine a été modifié afin de pouvoir y
introduire les gènes de protéines d'autres virus pathogènes, comme l'hépatite virale.
Dans ce cas, le virus recombinant permet la production de protéines du second
virus dans les cellules infecté. Les individus vaccinés par ce virus ont été
simultanément immunisés contre la variole et l'hépatite.