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Mcanismes daction des mdicaments - C. Loichot et M. Grima - Mise jour : septembre 2004
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Chapitre 1: MECANISMES DACTION DES MEDICAMENTS
comment caractriser la liaison mdicament-rcepteur ?
Objectifs:
Savoir dfinir un rcepteur et le caractriser.
Savoir dfinir et caractriser un agoniste et un antagoniste.
Etre capable de dcrire et interprter une courbe dose-rponse.
Utiliser la quantification de leffet pharmacologique pour comparer entre elles, les diffrentes
spcialits au sein dune mme famille thrapeutique.
Pour atteindre les objectifs, il est ncessaire de connatre, comprendre et matriser les
mots cls suivants : (mots cls souligns dans le texte)
activit intrinsque
affinit
agoniste
agoniste entier, agoniste partiel
antagoniste
antagoniste activit intrinsque ou agoniste partiel
antagoniste comptitif
antagoniste non comptitif
Bmax
DE 50
dpendance
dose-dpendant
dose-rponse
effet pharmacologique
effet thrapeutique
effets indsirables
efficacit
IC
50
, Ki
K
D
constante de dissociation
ligand
pharmacodpendance
puissance
rcepteur
slectivit
spcifique
tolrance
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Plan
Introduction
1. Quantification de la liaison au rcepteur
1.1. Diffrents types de rcepteurs
1.2. Donnes thoriques de la liaison au rcepteur
1.3. Approche exprimentale : caractrisation dun rcepteur par technique de liaison
spcifique au rcepteur (binding)
2. Approche exprimentale fonctionnelle : courbe dose-rponse
2.1. Pour un agoniste
- agoniste entier, agoniste partiel
- notion de puissance et defficacit
2.2. Pour un antagoniste
- comptitif
- non comptitif
- activit intrinsque
3. Slectivit
4. Variabilit de la rponse pharmacodynamique
4.1. Tolrance
4.2. Pharmacodpendance
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Introduction
Leffet dun mdicament est li linteraction du mdicament avec son site daction, qui est
gnralement un rcepteur mais qui peut aussi tre une enzyme, une protine de transport, un canal
ionique ou un lment non encore identifi. Linteraction entre le mdicament et son site daction
implique une reconnaissance mutuelle des 2 protagonistes, le mdicament doit avoir une certaine
affinit pour son site daction.
Les diffrentes cibles des mdicaments sont :
Des rcepteurs : ex : les antiscrtoires gastriques sont des antagonistes des rcepteurs
histaminiques H2,
Des enzymes : ex inhibition de lenzyme de conversion de langiotensine par les IEC,
inhibition de lHMGcoA rductase par les statines.
Des protines de transport : elles permettent le transport des ions et petites molcules
travers les membranes cellulaires (ex : transport du glucose, des ions Na
+
..). Ex : inhibition
de la Na
+
/K
+
ATPase par la digoxine, inhibition de la H
+
/K
+
ATPase (dite pompe protons)
par les inhibiteurs de la pompe protons tels que lomprazole.
Certains mdicaments agissent par interaction physicochimique : par exemple action
osmotique des laxatifs osmotiques
Des agents pathognes tels que les virus, les champignons, les bactries, parasites, les
mdicaments agissent sur des cibles spcifiques de ces agents tels que des enzymes, des
rcepteurs : ex les inhibiteurs de la transcriptase inverse du virus VIH.
Linteraction du mdicament avec son site daction va entraner, via des mcanismes de signalisation
intracellulaire, un effet pharmacologique quantifiable au niveau de la cellule, dun organe isol (ex :
contraction dartre isole, ) ou de lorganisme entier (ex : augmentation de la pression artrielle).
Cet effet pharmacologique est suivi gnralement dun effet thrapeutique. Il est important de bien
dissocier leffet pharmacologique de leffet thrapeutique. Par exemple, par dfinition, les
antiagrgants plaquettaires ont, in vitro, un effet pharmacologique correspondant linhibition de
lagrgation plaquettaire. Leffet thrapeutique qui rsulte de cet effet pharmacologique est de
diminuer le risque de thrombose et dembolie artrielles. La mise en vidence de leffet thrapeutique
est du ressort de la pharmacologie clinique (les essais cliniques).
La caractrisation pharmacodynamique dun nouveau mdicament est ltude de leffet de ce
mdicament sur lorganisme. Ltude pharmacodynamique pr-clinique (tapes 1 et 2 du tableau
suivant) comprend gnralement :
- ltude de laffinit de cette substance pour son site daction (analyse de la liaison ligand-
rcepteur)
- ltude qualitative et quantitative de leffet pharmacologique (tude fonctionnelle, courbe dose-
rponse)
- ltude de la slectivit de la molcule
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Techniques dexploration
Mdicament
Rcepteur Relation structure-activit, biologie molculaire,
quantification de la liaison au rcepteur
1
2 Effet pharmacologique
(cellule, organe isol, in vivo)
Courbe dose-rponse : tude fonctionnelle
3 Effet thrapeutique Essais cliniques
1. Quantification de la liaison au rcepteur
1.1. Diffrents types de rcepteurs
Les rcepteurs sont des protines membranaires ou intracellulaires capables de reconnatre et de fixer
de faon spcifique des mdiateurs (ou ligands) endognes ou exognes. La fixation du mdiateur
dclenche une rponse biologique obtenue par lintermdiaire dun amplificateur et dun effecteur (
ex : protines G).
La dnomination des rcepteurs se fait partir de leur ligand usuel : ex : les rcepteurs bta-
adrnergiques, rcepteurs dopaminergiques
Les rcepteurs sont localiss :
- dans la membrane plasmique : ce sont des rcepteurs transmembranaires qui sont classs en :
- Rcepteurs activit de canal ionique : ce sont des rcepteurs polymriques dont les
sous-units subissent un changement conformationnel lors de la fixation de lagoniste, ce
qui permet le passage dions. Ex : le rcepteur nicotinique lactylcholine.
- Rcepteurs monomriques 7 domaines transmembranaires : ils sont coupls aux
protines G. Leur stimulation induit une interaction du rcepteur avec une protine G, ce
qui induit ensuite une production de second messagers (AMPc, Ca
++
). Le premier
rcepteur de cette famille qui a t dcrit est celui de la rhodopsine. Les nombreux
rcepteurs (rcepteurs adrnergqiues, dopaminergiques) qui appartiennent cette famille
semblent driver dun rcepteur ancestral commun.
- Rcepteur-enzymes : ils associent sur une mme protine de la membrane plasmique une
fonction rceptrice (liaison du mdiateur) et une fonction enzymatique. La fixation du
mdiateur sur le rcepteur module lactivit enzymatique.
Rcepteur-enzymes activit guanylyl cyclase produisant du GMPc,
ex : rcepteur lANP (atrial natriurtique peptide)
Rcepteur activit tyrosine kinase, ex : rcepteur de linsuline.
- dans le noyau cellulaire ou migrent du cytosol vers le noyau de la cellule : ce sont des
rcepteurs nuclaires : ex : rcepteurs des hormones thyrodiennes, des hormones strodiennes.
Ils se fixent aprs activation par leur ligand sur lADN et induisent des modifications de la
transcription de certains facteurs, par exemple la stimulation de la synthse de protines.
1.2. Donnes thoriques de la liaison au rcepteur
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La liaison du ligand au rcepteur est une liaison spcifique qui dclenche un effet biologique ou au
contraire bloque cet effet. Cette liaison est saturable alors quune liaison avec une site non spcifique
tel quune liaison lalbumine plasmatique ne dclenche pas deffet biologique et nest pas saturable.
La liaison ligand-rcepteur est une raction rversible, ltude de cette liaison utilise un modle dit loi
daction de masse, modle propos au dbut du XX
sicle :
k
1
[L] +[R] [LR]
k-
1
avec k
1
: constante cintique dassociation en M
-1
x min
-1
k-
1
: constante cintique de dissociation en M
-1
x min
-1
[L] : concentration de ligand libre en mol/l
[R]
: concentration de rcepteur libre en mol/l
[LR] : concentration de complexe ligand-rcepteur en mol/l
K
D
ou K
A
(ou K
B
) = k
-1
/k
1
= [L] x[R]
[LR]
Selon la nomenclature actuelle la constante de dissociation lquilibre K
D
est nomme K
A
pour les
agonistes et K
B
pour les antagonistes.
K
D
caractrise la liaison du ligand avec son rcepteur, cest la concentration de ligand ncessaire
pour obtenir la moiti de loccupation des rcepteurs.
La thorie de loccupation des rcepteurs, thorie du dbut du XX
c
i
f
i
q
u
e
d
u
r
a
d
i
o
l
i
g
a
n
d
(
%
)
lC
50
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Leffet pharmacologique est mesur pour des doses croissantes de la substance tudier, cet effet
pharmacologique peut tre mesur sur des modles in vivo (chez lHomme ou chez lanimal) ou bien
sur des organes isols (modles ex vivo, par exemple mesure de la rponse contractile sur des artres
isoles).
La courbe dose-rponse forme une courbe asymptotique qui peut tre transforme en une sigmode en
utilisant des coordonnes semi-logarithmiques.
Leffet mesur peut tre exprim en valeur absolue ou en pourcentage de leffet maximum.
DE 50
0
16
50
84
100
Zone de relation linaire dose-rponse
E
f
f
e
t
(
%
)
Log Dose
Dose seuil
Dose partir de laquelle l'effet maximal
est atteint
E max
La courbe dose-rponse permet de dterminer deux paramtres importants :
- la dose seuil : dose partir de laquelle un effet apparat
- la dose partir de laquelle leffet maximal est atteint.
Ces deux doses-limite encadrent les doses efficaces :
A partir de la dose seuil et jusqu la dose donnant leffet maximal, pour toute augmentation de dose,
il y a une augmentation proportionnelle de leffet pharmacologique. La relation est linaire, la pente de
la droite est une caractristique de lactivit de la molcule : plus la pente est forte (raide), plus une
faible augmentation de dose entrane une forte augmentation de leffet ce qui confre une plus ou
moins bonne maniabilit du mdicament.
Pour des doses suprieures la dose qui provoque leffet maximal : le plateau de leffet est atteint :
laugmentation de la dose nentrane pas daugmentation de leffet pharmacologique. Au del de la
dose qui donne leffet maximal, toute augmentation de dose est inutile car leffet pharmacologique ne
sera pas augment, cette augmentation de dose expose la survenue ou laggravation deffets
indsirables
La courbe dose-effet est utilise pour dcrire un effet pharmacologique. En pharmacologie clinique,
elle peut galement servir tablir la relation entre posologie et effet thrapeutique ou entre posologie
et effets indsirables (sils sont dose-dpendants).
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10
0
50
100
Effets Indsirables
Effet Thrapeutique
log Dose
E
f
f
e
t
(
%
)
2.1. Agoniste
Dfinition de la notion dagoniste :
Un mdicament qui, aprs sa liaison un rcepteur spcifique, provoque un effet comparable celui
du mdiateur naturel est un agoniste (on parle aussi deffet mimtique).
La rponse maximale obtenue pour un effet pharmacologique varie dun agoniste un autre, la
rponse maximale tient compte dun facteur propre chaque agoniste : cest lactivit intrinsque de
lagoniste.
Un agoniste entier ou pur (=1) peut produire leffet maximal alors quun agoniste partiel (0<<1) ne
peut pas produire leffet maximal enregistr par les agonistes entiers de ce mme rcepteur.
0
50
100
A = agonist e ent ier
B = agonist e partiel
C = agoniste part iel
Log dose d'agonist e
E
f
f
e
t
%
La courbe dose-action (dose rponse) dun agoniste permet de dfinir :
- Lefficacit : leffet maximal = Emax : cest la hauteur du plateau. Leffet maximal dpend de
lactivit intrinsque de lagoniste.
- La DE
50
(dose efficace 50) : dose dagoniste qui permet dobtenir 50% de son effet maximum.
Cest le paramtre qui permet de quantifier leffet dun agoniste. La DE
50
caractrise la puissance de
lagoniste.
Plus la DE
50
dun agoniste est faible, plus lagoniste est puissant.
Distinction des notions de puissance et defficacit
La comparaison des courbes dose-effet obtenues pour plusieurs agonistes dun mme rcepteur permet
de les classer en comparant leur puissance et leur efficacit.
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Sur les deux figures ci-dessous, A est plus puissant que B et C. La notion de puissance sappuie sur
celle de laffinit : plus laffinit dun agoniste pour un rcepteur est grande plus sa puissance est
leve.
A, B et C sont capables de produire leffet maximal, ils ont la mme efficacit et ce sont des agonistes
entiers.
Les notions de puissance et defficacit peuvent tre illustres laide dun exemple qui compare les
courbes dose-effet obtenues au cours dune exprimentation chez le chien avec deux diurtiques : le
furosmide et le cyclothiazide. Sur la figure A o lactivit natriurtique de ces deux diurtiques est
exprime en valeur absolue (mmol/kg/5h), lexcrtion urinaire du Na
+
provoque par le furosmide est
nettement plus leve que celle induite par le thiazidique. Le furosmide est plus efficace que le
cyclothiazide.
Sur la figure B o la rponse est exprime en pourcentage de leffet maximum respectif de chacune
des substances, on observe que le furosmide a une DE
50
de 60 mg/kg ; par contre, le cyclothiazide a
une DE
50
de 0,05 mg/kg. Le cyclothiazide est plus puissant que le furosmide.
Figure A : Efficacit (exemple)
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Figure B : Puissance (exemple)
2.2 Antagonistes
Dfinition de la notion dantagoniste :
Substance qui se lie un rcepteur spcifique sans provoquer deffet mais qui peut ainsi bloquer
laction du mdiateur endogne en sopposant la liaison du mdiateur son rcepteur.
Deux types dantagonistes sont dcrits : les antagonistes comptitifs, lantagoniste se lie sur le mme
site que le mdiateur endogne et les antagonistes non comptitifs, lantagoniste se lie un autre site
du rcepteur.
Lantagoniste nayant pas deffet propre, pour valuer leffet dun antagoniste il faut raliser des
courbes dose-rponse de lagoniste avec des concentrations croissantes dantagoniste.
Antagonistes comptitifs
Lorsque lantagoniste se lie au niveau du rcepteur sur le mme site que lagoniste, il y a comptition
entre lagoniste et lantagoniste vis vis du mme site daction. En prsence de lantagoniste, il est
ncessaire daugmenter la dose dagoniste pour obtenir la mme rponse quen son absence : les
courbes dose-rponse sont dplaces (vers la droite) vers des concentrations dagoniste plus leves.
Leffet maximal est toujours obtenu mais avec une concentration dagoniste plus leve :
lantagonisme est dit surmontable ou rversible.
Antagonisme comptitif
Le paramtre qui permet de quantifier leffet dun antagoniste comptitif est le pA
2
dont la
dtermination repose sur ltude de leffet de plusieurs concentrations dantagoniste sur une gamme de
Log (concentration dagoniste en mol/l)
-11 -10 -9 -8 -7 -6 -5
50
100
%
E
f
f
e
t
0 1 10 100
[ ant agonist e]
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concentration dagoniste. La courbe dose-rponse de lagoniste est dplace vers la droite par
lantagoniste. Ce dplacement est fonction de laffinit de lantagoniste pour le rcepteur et de la
concentration dantagoniste.
pA
2
=
*
colog de la concentration molaire dantagoniste pour laquelle il faut doubler la concentration
dagoniste pour avoir le mme effet
*
colog = - log = log chang de signe
Plus le pA
2
est lev plus laffinit de lantagoniste pour le rcepteur est grande
En pratique, (- log K
B
)
= log (dose ratio 1) log [B]
avec dose ratio = rapport des doses (ou concentration) dagoniste donnant le mme effet aprs (An) et
avant (A) laddition de B, on a ( log K
B
)est dnomm pA
2
quand log (dose ratio 1) = 0
[B] = concentration molaire dantagoniste correspondant aux diffrentes valeurs de dose ratio
A
1
A
2
Dose ratio
1
=
________
, dose ratio
2
=
_________
A A
Exemple : calcul du pA
2
du propanolol (antagoniste adrnergique) tabli laide des courbes dose-
rponse disoprnaline (agoniste adrnergique)
B = concentration de lantagoniste
A
n
= concentration de lagoniste
Si on reprsente log (dose ratio 1) en fonction du logarithme de la concentration dantagoniste on
obtient une droite dite droite de Schild. Lintersection de la droite avec laxe des abscisses, cest dire
log (dose ratio-1) = 0, soit dose ratio = 2 est le pA
2
. La pente de la droite est gale 1 si cest un
antagoniste comptitif.
Dans cet exemple,
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En labsence de propanolol (courbe 1) pour avoir 50 % deffet maximal de lisoprnaline il faut une
concentration disoprnaline de 10
-9
M
Pour une concentration de propanolol de 10
-8
M (courbe 2) il faut 10
-8
M disoprnaline pour obtenir
50 % deffet maximal
Pour une concentration de propanolol de 10
-7
M (courbe 3) il faut 10
-7
M disoprnaline pour obtenir
50 % deffet maximal
Ainsi pour [propanolol] = 10
-8
M, log (dose ratio-1) = log ( 10
-8
-1) = log 9 = 0,95 (point X sur la
droite) 10
-9
Ainsi pour [propanolol] = 10
-7
M, log (dose ratio-1) = log ( 10
-7
-1) = log 99 = 1,99 (point Y sur la
droite) 10
-9
Ainsi pour [propanolol] = 10
-6
M, log (dose ratio-1) = log ( 10
-6
-1) = log 999 = 2,99 (point Z sur la
droite) 10
-9
A laide de ces 3 points, on construit la droite permettant de calculer le pA
2
10 9 8 7 6 5 4
-2
-1
0
1
2
3
4
pA
2
x
y
z
- log (concentration d'antagoniste)
l
o
g
(
d
o
s
e
r
a
t
i
o
-
1
)
Ainsi dans cet exemple le pA
2
du propanolol est de 8,9
Antagonistes non comptitifs
Lantagoniste se lie au niveau du rcepteur sur un site distinct du site de liaison de lagoniste (site
allostrique) et entrane des modifications conformationnelles du rcepteur avec diminution de
laffinit du rcepteur pour son agoniste ; lassociation de lantagoniste au rcepteur est pratiquement
irrversible. Dans ce cas on observe une diminution de lefficacit de lagoniste : lantagonisme est
insurmontable.
-9 -8 -7 -6
50
100
+ antagoniste
Log (concentration d'agoniste en mol/l)
%
E
f
f
e
t
Antagonisme non comptitif
Notion dagoniste partiel - antagoniste activit intrinsque
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Rappel : Un agoniste partiel pour un rcepteur a un effet maximal infrieur celui dun agoniste
entier.
Un agoniste partiel a une double potentialit dagoniste et dantagoniste.
Lorsque le mdiateur endogne est absent ou prsent en quantit trs faible au niveau du rcepteur,
lagoniste partiel va se lier au rcepteur et exercer son effet dagoniste partiel.
Lorsque le mdiateur endogne (qui a la qualit dagoniste entier) est en concentration plus leve ou
bien lorsquun agoniste entier est aussi prsent, la substance considre va tre en comptition avec le
mdiateur endogne ou lagoniste entier. Si la substance considre a une affinit suffisante pour
dplacer le mdiateur endogne ou lagoniste entier, lagoniste partiel va agir en tant quantagoniste.
Par exemple, la pentazocine (Fortal